高效液相色譜法分離測(cè)定駱駝刺根狀莖中的內(nèi)源激素

1、高效液相色譜法分離測(cè)定駱駝 刺根狀莖中的內(nèi)源激素 答辯人：生科08-1班 趙曼麗1 報(bào) 告 內(nèi) 容 一、研究意義二、研究?jī)?nèi)容 三、研究方法和技術(shù)路線四、研究成果五、前景與展望2研究意義 駱駝刺（Alhagi sparsifolia）屬于豆科駱駝刺屬植物，為多年生草本或半灌木，是重要的固沙植物。駱駝刺的幼嫩枝葉可作為家畜的飼料，同時(shí)也是一類具有開(kāi)發(fā)潛力的蜜源植物和藥用植物資源。駱駝刺是一種根莖型的克隆植物，借以其發(fā)達(dá)的根狀莖上分布的休眠芽產(chǎn)生新個(gè)體而不斷擴(kuò)大種群。3研究對(duì)象 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)在新疆古爾班通古特沙漠南緣以一個(gè)間隔子為單位進(jìn)行駱駝刺根狀莖野外采樣的工作，再采用高效液相色譜法(HPLC)對(duì)樣

2、品進(jìn)行激素的分離和測(cè)定。駱駝刺駱駝刺根狀莖4研究?jī)?nèi)容建立駱駝刺根狀莖樣品提取和純化的方法使用高效液相色(HPLC) 對(duì)駱駝刺根狀莖中的內(nèi)源激素進(jìn)行分離和測(cè)定5三.研究方法駱駝刺的采集和保存：2010年秋季在古爾班通古特沙漠南緣進(jìn)行采樣樣品儲(chǔ)存在液氮罐中并編號(hào)2011年春季及夏季在古爾班通古特沙漠南緣進(jìn)行采樣6 樣品處理研磨醇提抽濾減壓蒸發(fā)石油醚萃取水相醚相棄去水相pH調(diào)至6.4加PVP超聲30 min ,抽濾濾液pH調(diào)至2.9稱取樣品乙酸乙酯萃取減壓蒸發(fā)定容待測(cè)7樣品的測(cè)定篩選色譜條件： 流動(dòng)相的選擇： 本實(shí)驗(yàn)選用甲醇水醋酸混合液為流動(dòng)相，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：加入一定量的醋酸可使分離得到改善；適當(dāng)增加醋

3、酸含量可使內(nèi)源激素在與其它成分分離的前提下峰形尖銳，減少拖尾； 柱溫的選擇： 柱溫對(duì)色譜分析影響不顯著，當(dāng)柱溫為25和30時(shí)，樣品均能得到較好的分離效果。因此選擇柱溫25。 8研究結(jié)果色譜條件色譜柱：Shim-ParkC18VP- ODS；流動(dòng)相：V(甲醇):V(0.75冰乙酸溶液)=45:55 檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm流速：0.7ml/min進(jìn)樣量：20L 柱溫：25分離測(cè)定結(jié)果如下：9標(biāo)準(zhǔn)品的圖譜圖1 HPLC法測(cè)定赤霉素標(biāo)品圖圖2 HPLC法測(cè)定玉米素標(biāo)品圖10標(biāo)準(zhǔn)品的圖譜圖3 HPLC法測(cè)定生長(zhǎng)素標(biāo)品圖11混標(biāo)的圖譜圖4 HPLC法測(cè)定混合標(biāo)準(zhǔn)品圖12春季樣品的圖譜圖5 HPLC法測(cè)定春季

4、樣品圖13夏季樣品的圖譜圖6 HPLC法測(cè)定夏季樣品圖14秋季樣品的圖譜圖7 HPLC法測(cè)定秋季樣品圖15樣品的圖譜圖8 HPLC法測(cè)定樣品圖16回歸方程、相關(guān)系數(shù)及精密度 表1 回歸方程、相關(guān)系數(shù)及精密度激素Hormones 回歸方程 Regression equation相關(guān)系數(shù) r2保留時(shí)間精密度RSD of retention time (%)峰面積精密度RSD of peak area (%)GA3y=1754990.76x-65055.490.990.051.1 ZRy=44822951.30 x-26001.06 0.990.10 2.2IAAy=8303173.69x-5163

5、8.32 0.990.45 13.0Table 1 Regression equation ,coefficient and relative standard deviation17回收率 表2 加標(biāo)回收率 Table 2 Result of standard addition recovery test of hormones*Recovery=( Added -Background)/ Found100%18取得的成果1. 建立駱駝刺根狀莖樣品處理的方法 。2. 通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)得出了駱駝刺根狀莖 內(nèi)源激素分離和測(cè)定的色譜條件。 3. 發(fā)表論文一篇。19參考文獻(xiàn)：許智宏,李家洋.中國(guó)植物激素

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