紫外線水消毒設備劑量測試方法

1、1818紫外線水消毒設備劑量測試方法范圍本標準規(guī)定了紫外線水消毒設備劑量測試的基本要求、微生物選擇和設備要求、生物驗證測試程序、測試數(shù)據分析與報告和測試質量控制。本標準適用于紫外線水消毒設備在各種不同運行條件及水質條件下紫外線劑量的測試和驗定。規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T20001.4-2001標準編寫規(guī)則第4部分：化學分析方法GB/Txxxx-xxxx紫外線消毒技術術語術語和定義GT/Txxxx-xxxx界定的術語和定義適用于本文件。基本要求方

2、法及程序紫外線水消毒設備劑量測試方法及操作程序，應符合GB/T20001.4-2001的要求。測試內容和控制參數(shù)測試內容紫外線水消毒設備應對受試微生物進行滅活測試，其中管式消毒設備應進行全尺寸測試，渠式消毒設備應對消毒設備模塊進行測試。使用紫外線準平行光束儀測試受試微生物劑量-反應曲線。數(shù)據分析和紫外線有效劑量的計算?？刂茀?shù)在測試過程中檢測、控制和記錄的主要參數(shù)應包括流量、流速、燈管布置、紫外線強度、被測試水體的吸光度，紫外燈管和其他重要配件的工作狀態(tài)和損壞情況，紫外線水消毒設備進出水管（渠）的構造等主要參數(shù)。紫外線水消毒設備廠商應提供紫外燈管老化系數(shù)、結垢系數(shù)、紫外線水消毒設備的理論劑量計

3、算結果等信息。測試設備目標劑量要求飲用水紫外線水消毒設備劑量要求驗證劑量范圍應為20mJ/cm280mJ/cm2（MS2劑量）。污水紫外線水消毒設備劑量要求驗證劑量范圍應為5mJ/cm225mJ/cm2（T1劑量）。再生水紫外線水消毒設備劑量要求驗證劑量范圍應為50mJ/cm2100mJ/cm2（MS2劑量）。測試工況選擇紫外線水消毒設備可調整的參數(shù)應包括流量、紫外線穿透率和紫外燈管的輸出功率。紫外線水消毒設備劑量驗證測試應包括3組不同流量和3組不同紫外線穿透率。當紫外燈管的輸出功率可調時，還應包括燈管3組不同的輸出功率。實際工程設備安裝應滿足驗證要求現(xiàn)場條件紫外線穿透率實際運行時的紫外線穿透

4、率不應小于驗證時的紫外線穿透率。流量實際運行時的流量不應大于驗證時的流量。流態(tài)實際運行時的流態(tài)應與驗證時的流態(tài)一致。紫外燈輸出功率實際運行時的紫外燈輸出功率不應小于驗證時的紫外燈輸出功率。設備要求安裝過程中消毒設備的尺寸、燈管型號、鎮(zhèn)流器型號、燈管數(shù)量和燈管布置等應與紫外線水消毒設備驗證時的參數(shù)一致。安裝要求管式消毒設備應保證實際運行的紫外線水消毒設備劑量大于或等于生物驗證劑量。對于管式消毒設備，消毒設備入口前應安裝一段直管，其長度應比驗證時的入口直管增加5倍于管徑的長度。渠式消毒設備應保證實際運行時進入水消毒設備的水力學狀況優(yōu)于劑量驗證時的狀況。微生物選擇和設備要求微生物選擇對于飲用水和再生

5、水消毒設備的劑量驗證，應采用MS2作為受試微生物；對于污水消毒設備的劑量驗證，應采用T1或者糞大腸菌作為受試微生物。T1和糞大腸菌適用的劑量范圍2.5mJ/cm225mJ/cm2,MS2適用的劑量范圍為10mJ/cm2120mJ/cm2。測試設備要求設備布置測試所選擇管路的水力學狀況不應優(yōu)于實際工程的水力學狀況，保證測試劑量不高于實際工程的紫外線水消毒設備劑量。紫外線水消毒設備的劑量測試系統(tǒng)布置如圖1所示。/.W說明：1受試微生物投加口；2紫外線穿透率調節(jié)試劑投加口；3源水；4計量泵；5提升泵；6靜態(tài)混合器；7進水取樣口；8紫外線水消毒設備；9出水取樣口。圖1紫外線水消毒設備劑量測試系統(tǒng)布置取

6、樣口對于管式紫外線水消毒設備，進水取樣口和出水取樣口與消毒設備之間應連接一個1型、1型或者5型彎頭。對于渠式紫外線水消毒設備，進水取樣口和出水取樣口應距離消毒設備5倍于渠道寬度的距離。紫外燈管紫外線水消毒設備驗證用燈管應具有詳細的型號、工作參數(shù)、尺寸、壓力等級、發(fā)射光譜、光電轉化率、生產廠商等信息。驗證用燈管應采用運行時間大于100h以上的燈管，以保證其能夠產生穩(wěn)定的紫外光輻射。采用中壓燈的紫外線水消毒設備應配有過熱安全切斷開關。紫外線光強計對于管式紫外線水消毒設備，除了驗證用傳感器外，還應配有2個校準過的紫外線光強計，在消毒設備傳感器同一安裝位置紫外線光強計讀數(shù)的平均值與驗證用傳感器讀數(shù)的誤

7、差應小于10%。采用中壓燈的紫外線水消毒設備，應安裝有效殺菌光譜紫外線光強計。生物驗證測試程序一般要求生物驗證應在紫外線水消毒設備特定的流量、紫外線穿透率（UVT）、光強的條件下測定水消毒設備對微生物的滅活率曲線。受試微生物對紫外線劑量-滅活率曲線應在實驗室條件下用準平行光束儀來確定。通過對微生物的滅活效果、實驗室的紫外線劑量-滅活率曲線、紫外燈管老化系數(shù)和結垢系數(shù)來確定紫外線水消毒設備的有效劑量。紫外線燈老化系數(shù)的測試應符合附錄A，紫外線燈套管結垢系數(shù)的測試應符合附錄B。實驗開始前和進行過程，可參照附錄C。對源水的檢測用于水消毒設備驗證的源水，不應含有化學消毒劑余量（如余氯），當源水中含有化

8、學消毒劑時，可采用中和試劑（如硫代硫酸鈉）對化學消毒劑進行中和。水體中的中和試劑殘余濃度不應對水體的紫外線穿透率產生影響。系統(tǒng)的調試運行開啟水泵和紫外線水消毒設備，通過調節(jié)入口閥門，出口閥門或水泵的功率，得到水體目標流量。取樣開始和結束時檢測的目標流量誤差不應超過5%。受試微生物的投加和紫外線穿透率的調節(jié)根據投加微生物的原液的濃度、期望的滅活率、水體流量等參數(shù)、計算受試微生物的注射速度和所需的原液體積。同時記錄受試微生物開始投加的時間及投加速度。調節(jié)水質紫外線穿透率的試劑可選擇咖啡，木質素磺酸（LSA）或者腐植酸。根據紫外線穿透率調節(jié)劑的濃度、目標紫外線穿透率、水體自身紫外線穿透率、流量等因素

9、計算其投加量。同時記錄投加開始時間和投加速度。取樣開始和結束時檢測的水質紫外線穿透率誤差不應超過1%。系統(tǒng)運行穩(wěn)定狀態(tài)測試和混合測試穩(wěn)定狀態(tài)測試取樣前應對系統(tǒng)進行穩(wěn)定狀態(tài)測試。首先應根據整個測試系統(tǒng)的水容量和測試的流量，計算系統(tǒng)的水力停留時間（RT），往水中投加紫外線穿透率調節(jié)劑，開始計時為）時刻，每間隔RT在進水取樣口和管路末端取樣測試其紫外線穿透率，計算同一取樣時間兩個取樣點紫外線穿透率的比值，從0時刻到比值趨近于1的時間即為系統(tǒng)達到穩(wěn)定狀態(tài)的時間（ST），對于不同的流量應進行相對應臨T測試。進水口和出水口的混合測試進水取樣口測試過程在受試微生物和紫外線穿透率調節(jié)劑投加口往水體中投加紫外線

10、穿透率調節(jié)劑或者受試微生物（紫外線穿透率和微生物濃度應選擇在驗證的范圍內，紫外燈關閉）。分別調節(jié)流量至測試中選擇流量范圍的最大值和最小值兩種情況，在系統(tǒng)達到穩(wěn)定狀態(tài)后，檢測消毒設備進水口和出水口的紫外線穿透率和受試微生物濃度?；旌蠝y試中兩個檢測點的平均UV254差或微生物濃度誤差應小于5%,且同一點3次取樣誤差應小于5%，表明系統(tǒng)通過混合測試。出水取樣口測試過程在紫外線水消毒設備進水取樣口往水體中投加紫外線穿透率調節(jié)劑或者受試微生物（紫外線穿透率和微生物濃度應選擇在驗證的范圍內,紫外燈關閉）。分別調節(jié)流量至測試中選擇流量范圍的最大值和最小值兩種情況,在系統(tǒng)達到穩(wěn)定狀態(tài)后,檢測消毒設備出水口和排

11、水管末端的紫外線穿透率或受試微生物濃度?；旌蠝y試中兩個檢測點的平均UV254差或者微生物濃度誤差應小于5%，且同一點3次取樣誤差應小于5%,表明系統(tǒng)通過混合測試。加強混合的方式在取樣口前增加靜態(tài)混合器。保證受試微生物和紫外線穿透率調節(jié)劑投加口距離取樣口大于5倍管路直徑。在受試微生物和紫外線穿透率調節(jié)劑投加口與取樣口之間增加彎管，接頭等。取樣取樣時間取樣應在系統(tǒng)達到穩(wěn)定狀態(tài)后進行，取樣過程中應定時檢測和記錄水體的溫度。取樣要求在進水口和出水口取樣點分別取樣。取樣應包括3個10mL20mL的微生物檢測水樣，1個紫外線穿透率檢測水樣，如需做準平行光束儀實驗，則還需在進水口取一個0.5L1.0L的準平

12、行光束儀實驗水樣，記錄取樣開始時間和結束時間。取樣時，測試人員和第三方驗證人員應記錄并檢驗以下數(shù)據：樣品編號、流量、紫外燈功率、紫外燈電流、光強、傳感器位置、取樣時間和水溫。樣品保存及運輸樣品應保存在4左右的環(huán)境中。水樣由測試人員和第三方驗證人員一起送到現(xiàn)場實驗室，進行紫外線穿透率、基本水質指標和準平行光束儀測試等測量。微生物樣品將由測試人員與第三方驗證人員在取樣后24h內送到微生物實驗室進行微生物分析檢測。受試微生物的分析方法應符合附錄D的要求。準平行光測試為確定受試微生物的紫外線劑量-滅活率曲線，應對每一個紫外線穿透率（或者紫外燈輸出功率）的進水水樣進行準平行光測試，測試的具體步驟應符合附

13、錄E的要求。測試數(shù)據分析與報告準平行光束儀實驗數(shù)據分析根據準平行光束儀的實驗結果，得到每一種紫外線穿透率的劑量-滅活率關系曲線，如果紫外燈的輸出功率相同，則在不同紫外線穿透率的情況下，紫外線劑量-滅活率曲線理論上應該一致。圖2是MS2紫外線劑量-滅活率曲線圖。5.004.003.004.003.002.001.000.0020406080紫外線劑量mJ/cm2圖2MS2紫外線劑量一滅活率曲線紫外線水消毒設備滅活實驗數(shù)據分析根據樣品的檢測結果，可得到在不同紫外燈輸出功率和不同紫外線穿透率條件下紫外線水消毒設備流量-滅活率關系。根據準平行光束儀結果和現(xiàn)場實驗結果，做出紫外線水消毒設備的劑量-流量關

14、系圖,如圖3所示，可得到在特定的紫外燈輸出功率、流量、紫外線穿透率的情況下紫外線的生物驗證劑量。準平行光實驗和現(xiàn)場消毒設備滅活實驗應在同一天進行。UVT=95%*UVT=90%UVT=95%*UVT=90%一上一UVT=85%一.UVT=80%0000054321蔣nW劑線外紫57.51012.51517.5流量(m3/h)圖3紫外線水消毒設備的流量劑量曲線有效生物驗證劑量的計算紫外線水消毒設備劑量與水體紫外線穿透率、紫外線光強、流量、燈管數(shù)目等因素有關，式（1）是水消毒設備驗證劑量與上述因素的關系。根據消毒設備劑量測試的實驗數(shù)據和式（1），利用線性回歸的方法，計算出式（1）中的a、b、c、d

15、、e常數(shù)，得到紫外線水消毒設備的特性曲線。丑短“XPXQ百（1）式中：RED紫外線水消毒設備的驗證劑量；A254測試水體的UV254吸光度；P-紫外線水消毒設備的輸出功率；Q-流量;B-紫外線模塊單元數(shù)（只針對渠式消毒設備，管式消毒設備此項為1）；A、b、c、d、e-常數(shù)。計算消毒設備對受試微生物的滅活率時，針對每一個特定的流量，應對3次取樣的數(shù)據進行75%置信區(qū)間的t檢驗分析。對于飲用水消毒系統(tǒng)，取75%下限的置信值作為微生物的滅活率；對于再生水消毒系統(tǒng)，取90%下限的置信值作為微生物的滅活率；對于污水消毒系統(tǒng)，取平均值作為滅活率。根據式（2）計算出紫外線水消毒設備的有效驗證劑量，其中紫外線

16、水消毒設備的老化系數(shù)和結垢系數(shù)應由第三方權威機構提供具體數(shù)據，在第三方權威機構沒有提供數(shù)據時，老化系數(shù)應取0.5為默認值，結垢系數(shù)應取0.8為默認值。D=REDxFFxAF（2）式中：D-紫外線水消毒設備的有效驗證劑量；RED紫外線水消毒設備的驗證劑量；FF-紫外線水消毒設備的結垢系數(shù)；AF-紫外線水消毒設備的老化系數(shù)。7.4測試報告應包括劑量驗證測試報告、紫外線水消毒設備操作手冊、設備參數(shù)文件、劑量測試計劃、原始數(shù)據記錄和其他相關資料。還應包括測試的場地信息、測試系統(tǒng)信息、紫外線水消毒設備的運行參數(shù)和測定工況、測試用水的水質信息、實驗數(shù)據處理和不確定度分析和有效生物驗證劑量的計算等信息。所有

17、的測試報告和原始數(shù)據文件應經實驗人員和第三方驗證人員簽字確認。8質量控制儀器準確性的質量控制所有儀器都應經過校準，且測試時需在校準的有效期內，現(xiàn)場主要儀器的要求如下。流量計：檢測的不確定度應小于5%；紫外線分光光度計：檢測的不確定度應小于5%；電壓：檢測不確定度應小于5%；紫外線傳感器：在消毒設備驗證的過程中，驗證用紫外線傳感器與參照傳感器的誤差應控制在10%以內。方案設計與測試參與人員方案設計應有環(huán)境工程，電氣工程，生物工程相關的專業(yè)背景和具有紫外線水消毒設備劑量驗證經驗的技術人員根據紫外線水消毒設備的使用要求共同確定相關實驗方案，包括：水體目標流量、紫外燈輸出功率、目標水體紫外線穿透率、受

18、試生物投速率等?，F(xiàn)場測試人員參加測試人員應具有相關的專業(yè)知識背景，應佩戴防護眼鏡和穿安全鞋，參加取樣人員應佩戴專用手套，取樣人員不應接觸受試微生物投加罐?，F(xiàn)場實驗參數(shù)的控制及水質指標檢測須由具有相關資質及經驗的人員專門負責。第三方人員不同于購買紫外線水消毒設備的業(yè)主方和紫外線廠商的第三方人員應見證和參與全過程，從方案設計、取樣開始到所有實驗操作結束，記錄所有操作參數(shù)，實驗數(shù)據和監(jiān)督質量控制體系。第三方人員應有紫外線水消毒相關工程經驗和微生物采樣分析背景，并且應對驗證報告進行審核。樣品儲存運輸質量控制取樣后微生物檢測樣品應放入便攜冰箱保存，便攜冰箱內應有足夠的冰塊。樣品應由第三方驗證人員貼上封條

19、。封條只能由微生物實驗室分析人員打開。樣品運輸交接過程中應有交接信息登記，登記表中要明確取樣時間，交接時間，交接人等信息。交接登記信息應由第三方驗證人員保管。微生物樣品應在取樣結束24h內送往實驗室檢測。準平行光實驗和微生物測試的質量控制準平行光實驗應嚴格按照實驗流程操作，每一個水樣根據稀釋的梯度做3個平行樣。取樣瓶應進行高壓滅菌或者使用無菌取樣瓶。微生物檢測嚴格按照檢測程序，保證無菌的工作環(huán)境，防止微生物交叉污染。對于MS2,其Ilog的滅活劑量應在18mJ/cm222mJ/cm2的范圍。對于T1,其Ilog的滅活劑量應在4mJ/cm26mJ/cm2的范圍。數(shù)據分析的質量控制測試結束時第三方

20、驗證人員應復印當天所有的表格紀錄，記錄下當天每個測試的數(shù)據并與當時記錄核對。每個工況點的數(shù)據應做置信度95%的誤差分析。在做線性回歸時，t檢驗的P值應小于0.05。紫外線設備生產商，第三方驗證人員應有權對微生物檢測的原始數(shù)據以及數(shù)據分析過程進行查閱審核。附錄人（規(guī)范性附錄）紫外燈管老化系數(shù)測試方法A.1老化系數(shù)的定義紫外燈管老化系數(shù)是指紫外燈運行壽命終點時的紫外燈輸出功率與新紫外燈（運行100h后）的紫外燈輸出功率之比。紫外燈壽命終點是指運行一段時間后，紫外燈的輸出功率降低到消毒設備要求的最低輸出功率以下的時刻。老化系數(shù)的驗證應由有資質的第三方進行測試。A.2測試步驟A.2.1選取不少于10根

21、測試用新紫外燈管。將紫外燈管置于水中運行。保持與紫外線水消毒設備運行時相同的溫度條件、運行功率和鎮(zhèn)流器控制情況。A.2.2測定新燈管在100h的輸出功率或同一位置的光強；檢測光強測量點距紫外燈管的距離不應超過5cm。紫外線光強通常采用紫外線傳感器測量。對于中壓燈管，應詳細記錄所使用的紫外線傳感器使用參數(shù)和測定結果。A.2.3在小于20%的紫外燈管運行壽命的間隔時間內檢測燈管的輸出功率或者同一位置的光強，例如燈管的壽命是12000h，應間隔2000h測量一次每根燈管的輸出功率或者同一位置的光強，并且確保每次測量時間間隔相同。在每次時間間隔內應對燈管進行不少于1次的開關操作。A.2.4燈管達到其預

22、期使用壽命時刻的輸出功率或者同一位置的光強與100h的時刻數(shù)值的比值即為燈管老化系數(shù)。數(shù)據處理時取所有測試燈管的平均值。在測試中所有相關參數(shù)應詳細記錄（包括燈管的損壞情況）。附錄B（規(guī)范性附錄）紫外線燈套管結垢系數(shù)測試方法結垢系數(shù)定義紫外線水消毒設備使用中的紫外燈套管的紫外線穿透率與潔凈紫外燈套管的紫外線穿透率之比，通常由紫外線廠家委托第三方測定。套管的結垢系數(shù)通常用來衡量消毒設備清洗系統(tǒng)的工作效率。結垢系數(shù)測試步驟選取不少于4根紫外燈套管進行結垢系數(shù)檢測。紫外燈套管放入水體前，要測試紫外燈套管的初始紫外線穿透率，所有測試的紫外燈套管在消毒器內的位置應始終保持不變。對于選取的測試水體進行結垢速

23、率測試，即關閉清洗設備，運行一段時間后檢測套管的紫外線穿透率，該紫外線穿透率與套管初始紫外線穿透率的差值與運行時間的比值即為結垢速率。運行時間的選擇應根據水質狀況和結垢狀況確定。一般結垢速率快則選取的時間相對較短。結垢系數(shù)測試和結垢速率測試應使用相同的水質。根據結垢速率和廠家提供的信息設置清洗系統(tǒng)的啟動時間和頻率，且此項參數(shù)應與劑量驗證和實際應用時的參數(shù)一致。開啟清洗系統(tǒng)，系統(tǒng)應持續(xù)運行不少于6個月。在不超過兩個月的時間間隔后從水體中取出紫外燈套管，測量其紫外線穿透率。該紫外線穿透率與套管初始紫外線穿透率的比值即為結垢系數(shù)。檢測結束后應將紫外燈套管放回水體原位。檢測過程中不允許對套管進行手動清

24、洗。每個測試周期的結垢系數(shù)應取平均值，紫外線水消毒設備驗證所采用的結垢系數(shù)應為其中的最小值。套管的紫外線穿透率測量需按照測試儀器（一般為分光光度計）的標準操作流程進行。附錄（資料性附錄）紫外線設備劑量測試實驗檢驗清單1項目信息1.1項目名稱（驗證設備名稱）1.2項目編號2正式測試前應確認項目狀況簽字測試用水2.1測試水中余氯（不應高于檢出限）2.2測試水中的微生物（T1和MS2）狀況（不應早于48h之前）2.3平行光束儀預實驗，確定2.4測定水體的紫外線穿透率紫外線水消毒設備2.5檢查和記錄消毒設備型號和尺寸，燈管型號數(shù)量和布置，鎮(zhèn)流器型號2.6設備和現(xiàn)場安全檢查，排除測試過程中的安全隱患2.

25、7消毒設備安裝在合適的位置2.8確認紫外燈和套管清潔2.9確認燈管和鎮(zhèn)流器工作正常2.10確認燈管為使用100h的新燈管2.11確認紫外線系統(tǒng)控制面板工作正常2.12檢查渠道是否清潔，沒有雜質碎片（渠式）2.13檢查渠道寬度，包括底部和頂部（渠式）2.14渠道高度是否合適（渠式）2.15模塊支撐架在合適的高度（渠式）2.17檢查紫外燈與燈之間的距離合適并記錄（渠式）2.18檢查紫外燈與渠壁及渠底的距離合適并記錄（渠式）2.19檢查其他的附屬設備是否的尺寸與安裝位置（渠式）2.20水位控制設備安裝在合適的位置和高度（渠式）附屬設備2.21流量計校準且工作正常2.22分光光度計校準且工作正常2.2

26、3電壓表校準且工作正常2.24計量泵校準且工作正常2.25微生物儲存容器正常2.26余氯計校準并工作正常2.27溫度計校準并工作正常2.28米尺（水頭損失測定）2.29受試微生物原液，、咖啡或腐殖質、取樣瓶、便攜冰箱2.30備件是否充足（如套管，燈管等）3生物驗證測試狀況簽字現(xiàn)場測試3.1檢查現(xiàn)場設備布置（取樣口，微生物投加口等）3.2確認沒有死區(qū)（渠式）3.3完成水力停留時間的計算3.4計算微生物和咖啡（或腐植酸）的投加速率3.5完成混合測試，確定取樣點3.6確認測試計劃和時間表3.7確認試驗參與人員，包括第三方人員3.8準備和打印詳細試驗計劃（包括投加速率，達到穩(wěn)態(tài)時間等信息）3.9準備準

27、平行光試驗計算表3.10準備微生物投加容器（混合均勻）3.11完成生物驗證測試3.12完成其他測試（比如水頭損失測試）3.13完成實驗控制測試（投加微生物但是不開啟消毒設備）3.14準備和打印樣品交接信息表附錄D（規(guī)范性附錄）受試微生物的分析方法D.1MS2分析方法D.1.1實驗步驟D.1.1.1于實驗前一天，挑取邁康凱培養(yǎng)基上典型大腸桿菌（E.coliATCC15597）菌落于TYGB培養(yǎng)基中37振蕩培養(yǎng)16h18h,然后取出放置于室溫處，振蕩速度保持在100r/min,以免大腸桿菌鞭毛斷裂。D.1.1.2取1mL大腸桿菌菌液（每mL含108左右濃度的E.coliATCC15597溶液）和0

28、.1mL噬菌體樣品和TYGA培養(yǎng)基（冷卻到45）3秒內鋪平混勻；D.1.1.3倒置于37的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12h16h觀察噬菌斑。D.1.2培養(yǎng)基成分D.1.2.1TYGB基礎培養(yǎng)基胰蛋白胨10g,酵母浸粉1g,NaCl8g,蒸餾水1000mL。熱水中溶解上述成分，調整pH=7.2土0.1,121下滅菌15min。鈣-葡萄糖溶液：10mL水中緩慢加熱融解0.3gCaCl22H2O,1g葡萄糖，冷至室溫，通過0.22um濾膜過濾除菌。無菌條件下將上述兩種溶液充分混合備用。D.1.2.2TYGA基礎培養(yǎng)基胰蛋白胨10g,酵母浸粉1g,NaCl8g,瓊脂18g,蒸餾水1000mL。沸水中溶解上述成分

29、，調整pH7.20.1,121下滅菌15min。鈣-葡萄糖溶液：10mL水中緩慢加熱融解0.3gCaCl22H2O,1g葡萄糖，冷至室溫，通過0.22um濾膜過濾除菌。無菌條件下將上述兩種溶液充分混合備用。D.1.2.3邁康凱瓊脂(McConkeyagar)蛋白胨20g,乳糖10g,膽鹽5g,中性紅75mg,瓊脂12g20g,蒸餾水1000mL。沸水中溶解上述成分，溫度降為25時調整pH值為7.40.1。分裝200mL,121下滅菌15min。冷至4550,倒置平板,凝固后存放于黑暗中,53下保存不應超過半個月。D.2T1分析方法D.2.1實驗步驟D.2.1.1于實驗前一天，挑取邁康凱培養(yǎng)基上典型大腸桿菌(E.ColiCN13)菌落于TYGB基礎培養(yǎng)基中置電熱恒溫培養(yǎng)箱，35培養(yǎng)18h24h。D.2.1.2取1mL大腸桿菌菌液(每mL含108左右濃度的E.ColiCN13溶液)和0.1mL噬菌體樣品和TYGA培養(yǎng)基(冷卻到45)三秒內鋪平混勻；D.2.1.3倒置于35的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18h24h觀察噬菌斑。D.2.2培養(yǎng)基成分培養(yǎng)基成分參見D.1.2。附錄E(規(guī)范性附錄)準平行光檢測方法E.1目的為了準