DB12-T375-2008奶牛乳房炎診斷技術(shù)規(guī)范

1、ICS 65.020.30B41備案號(hào)：DB12DB12/T 3752008奶牛乳房炎診斷技術(shù)規(guī)范2008-04-15 實(shí)施Technical Standard on Diagnosis of Mastitis of Dairy Cows2008-03-13 發(fā)布天津市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB12/T 3752008附錄C均為資料性附錄。完提出。 M畜牧獸醫(yī)研究所。本標(biāo)準(zhǔn)附錄A、附錄B、 本標(biāo)準(zhǔn)由天津市農(nóng)業(yè)科 本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：天津 本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：張國(guó)偉、鄢明華、王建國(guó)、劉蘭蘭。奶牛乳房炎診斷技術(shù)規(guī)范1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)乳房炎實(shí)驗(yàn)室本標(biāo)準(zhǔn)適丁奶牛乳調(diào)炎的診斷。卜列術(shù)語(yǔ)利定義適用丁本標(biāo)準(zhǔn)。定了奶牛乳房

2、炎診斷的術(shù)語(yǔ)和定義、臨床型乳房炎診斷、隱性型乳房炎現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)和隱性型 診斷技術(shù)。2術(shù)語(yǔ)和定義2. 1乳房炎riast i t i s乳腺組織受到物理、化 乳的性狀品質(zhì)發(fā)生異常為特2.22. 3亞臨床型乳房炎subc 乂稱隱性型乳房炎。乳 生改變。2.4體細(xì)胞 somatic ce I III胞利腺上皮細(xì)胞的合稱。乳汁中白纟2. 5體細(xì)胞數(shù)每毫升乳汁中體細(xì)胞的個(gè)數(shù)，簡(jiǎn)稱see。somat i c ceI count3臨床型乳房炎診斷學(xué)、微生物刺激所發(fā)生的以乳腺組織發(fā)生病理變化，乳汁中的體細(xì)胞增多, 征的一種炎性變化。臨床型乳丿壽炎 clincial mast its乳房、乳汁肉眼可見(jiàn)炎癥病理變化，

3、或呈現(xiàn)全身性臨床癥狀。I i nc i a I mast it i s房、乳汁均無(wú)肉眼可見(jiàn)異常變化，乳汁體細(xì)胞數(shù)增加，pH值等理化性質(zhì)發(fā)3. 1根據(jù)炎癥： 性F他性乳房世、乳房膿腫、3. 2主要臨床恃征 臨床型乳房炎的主要臨床特征見(jiàn)表1。過(guò)程的性質(zhì)將臨床型乳房炎分為漿液性乳房炎、卡他性乳房炎、纖維蛋白性乳房炎、膿乳房蜂窩織炎、出血性乳房炎和壞疽性乳房炎。DB12 仃 37520082表1臨床型乳房炎的主要臨床特征類型孚u號(hào)外觀及觸診變化乳汁變化體溫及其他全身癥狀漿液性乳房炎紅、腫、扌 必上淋巴，奴痛明顯；較堅(jiān)硬；乳 吾增大。泌乳量減少，乳汁稀薄，含絮 片。嚴(yán)車時(shí)體溫升高，精神委 頓，食欲廢絕。

4、卡他性乳房炎輸乳管乳池卡4及 也充血、腫J狀的結(jié)節(jié)；（；可感到波動(dòng)或似面團(tuán)最先擠出的乳汁稀薄含絮片， 后擠乳汁不含絮丿M體溫升爲(wèi)，心率加快，精 神沉郁，食欲減退。腺泡卡4ik紅、腫、痛；有局灶性腫塊。稀薄如水樣，含絮片或凝塊同上。纖維蛋口性乳房炎腫大，熱、 呆部時(shí)， 役音；乳.劇痛，堅(jiān)碩；丿玉迫乳池 了纖維蛋口凝塊引起的捻 ；上淋巴結(jié)腫大。病初乳汁中含有絮狀物，2d3d后，只擠出幾滴乳清或帶何 纖維蛋白殘?jiān)狞S口也濃汁。體溫升高至40C41C； 心率加快，精神萎頓，食 欲減退或廢絕。膿性卡 他性乳 房炎急性期紅、腫顯-d- 淋巴結(jié)腫）熱、痛明k；乳房1:、O乳量劇減或全無(wú)，乳汁呈水樣， 含絮丿

5、了，味咸、苫，混有膿汁。體溫升爲(wèi)令41C；精神委 頓，食欲減退或及絕。慢性期紅、腫減早，熱、痛不明顯；乳葉 逐漸萎縮變硬。乳汁稀薄或黏液樣，呈淡黃色 或黃色，甚金無(wú)乳。體溫恢復(fù)正常；全身癥狀 消失。乳房膿腫紅、腫、步 的膿腫塊， 或向外破步 張度增加， 淋巴結(jié)腫決L痛明顯；有大小不等 淺土?xí)r，可-感到波動(dòng)，：；位于深部時(shí)，乳房緊 穿刺流出膿汁。乳房上O乳汁呈粘性膿樣，會(huì)絮片。體溫升爲(wèi)；食欲差或廢絕。乳房蜂窩織炎顯著腫脹， 天后形成 巴結(jié)腫大。發(fā)熱、堅(jiān)碩而疼痛，數(shù) 波動(dòng)的膿腫。乳房上淋乳量劇減，乳汁稀薄，含絮丿體溫升尙；脈搏、呼吸加 快，食欲減退。岀們性乳房炎紅、腫、熬 色或紫紅H 大。、痛；皮

6、肽表面出現(xiàn)紅*點(diǎn)；乳房上淋巴結(jié)腫.-乳汁稀薄，呈淡紅或粉紅色， 混有血液及凝乳或凝血絮狀 物。體溫升高；脈搏、呼吸加 快，食欲丿發(fā)纟也，反停止。壞疳性乳房炎皮狀最初IL 有痛感；幾 黑紅色，曳 形成壞疽忡 整個(gè)患葉M叫紫紅也斑點(diǎn)，發(fā)熱， J、時(shí)后腫大，發(fā)青，呈 ;k,發(fā)碩，痛感消失；J貴瘍，有臭味；嚴(yán)車時(shí) *脫落乳中帶血，或擠出少量黑褐色 有氣泡的稀薄液體，或僅能擠 岀大量腐敗臭味的氣體；后期 從乳頭內(nèi)自動(dòng)流出黃色透明的 液體。體溫突然升也達(dá)41C 41.5C；呼1吸急促，脈搏 數(shù)增加，町視粘膜發(fā)纟LL 食欲不振或廢絕，反停 止，腹瀉。4隱性型乳房夠現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)4. 1試劑和器材4.1.1蘭州乳房

7、4.1.2專用檢驗(yàn)4.2操作4. 2. 1清潔乳頭個(gè)杯中，將檢驗(yàn)舟傾斜60。，使多余的乳汁流出杯外，留在杯內(nèi)的乳汁約2mL。 4.2.2用定堇加；斷液充分混勻，經(jīng)10s30s觀4. 3結(jié)果判定隱性型乳房炎炎試驗(yàn)（LMT,診斷液，1： 3稀釋備用；或犬津乳房炎試驗(yàn)（TMT）診斷液。 盤，2mL5mL,定堇加液器。棄去前2把3把乳汁，直接自奶牛4個(gè)乳室分別擠取適堇乳汁亍專用檢驗(yàn)盤的四夜器向每杯待檢乳樣中各加2mL診斷液，隨即平置檢驗(yàn)盤并做旋轉(zhuǎn)搖動(dòng)，使乳汁與診 察反應(yīng)結(jié)果。現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)判定標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表2。DB12/T 3752008 表2隱性型乳房炎現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)判定標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)描述結(jié)果判定記錄符號(hào)混合物呈液狀，傾斜

8、檢驗(yàn)盤時(shí)，液體移動(dòng)流暢，杯底無(wú)沉淀物。陰性(-)混合物呈液狀，傾斜檢驗(yàn)盤時(shí)，杯底可出現(xiàn)微量沉淀物，搖動(dòng)則消失?？梢?)杯底出現(xiàn)少量稀代粘性沉淀，但 檢驗(yàn)盤時(shí)，有一餌的粘附性。不成膠狀，傾斜檢驗(yàn)盤時(shí)，沉淀物散布于杯底，旋轉(zhuǎn)搖動(dòng)弱陽(yáng)性(+ )杯底沉淀物量較好，也較粘稠，#有少量膠狀物，傾斜檢驗(yàn)盤時(shí)，沉淀物有明顯粘附于杯 底而難以流動(dòng)的*象。旋轉(zhuǎn)搖動(dòng)僉驗(yàn)盤時(shí)，沉淀物有聚中心傾向。陽(yáng)性(+)杯內(nèi)混合物的大申分或全部參與 附于杯底，旋轉(zhuǎn)#動(dòng)檢驗(yàn)盤時(shí)，M成明顯膠狀凝集物，傾斜檢驗(yàn)盤時(shí)，凝集物幾乎完全粘 *集物聚中心呈團(tuán)塊，難以散開(kāi)。強(qiáng)陽(yáng)性( + + + )5隱性型乳房炎實(shí)驗(yàn)室診斷5. 15.25. 35.

9、4房炎實(shí)驗(yàn)室寧斷方法有乳汁體細(xì)胞計(jì)數(shù)法、苛性鈉凝乳試驗(yàn)法、過(guò)氧化氫酶法。 抱計(jì)數(shù)法：見(jiàn)隱性型乳乳汁體細(xì)苛性鈉凝試驗(yàn)法：見(jiàn) 過(guò)氧化氫論法：見(jiàn)附錄附錄Ao 附錄B。 Co附錄A（資料性附錄）我汁體細(xì)胞計(jì)數(shù)法（Little和Plastr idge法）A. 1試劑和器時(shí)A. 1. 1美蘭染單液：美蘭乙摩飽和溶液30mL （美蘭2g, 95%乙醇lOOmL）, 10%氫氧化鈉溶液0. ImL,蒸餡 水lOOmL,將上母溶液混合搖。，過(guò)濾后備用。A. 1.2二甲苯、95%乙醇。A. 1.3顯微鏡、|載玻片、0. QlmL微量加樣器。A. 2操作:清潔乳頭,孑去前2把3把乳汁，用清潔容器采集3mL5mL乳汁

10、。:充分搖勻新曷乳樣，用0. OlmL微量加樣器吸取中部乳汁0. OlrnL,將乳樣滴丁載玻片上,A.2.1乳樣采集A. 2. 2涂片制備仔細(xì)涂布成1cm2積的乳膜；由然干燥后，用二甲苯脫脂5min,再置95%乙醇中固定5 min-lOmin；用inn,美蘭染色液染色5hin,水洗；再用95%乙醇脫色數(shù)分鐘，水洗干燥后鏡檢。A.2.3鏡檢計(jì)數(shù) 在普通顯微莒油鏡下觀察（最好用10X目鏡，其視野直徑耍求為0.016cm）,計(jì)數(shù)100 個(gè)視野內(nèi)的體細(xì)數(shù)量。IA.3結(jié)果計(jì)算按式（A. 1） *算體細(xì)胞數(shù)體細(xì)胞隊(duì)壁翌釁Lx平均每個(gè)視野的體細(xì)胞數(shù) （A.1）r視評(píng)岬A(chǔ). 4判定標(biāo)準(zhǔn)體細(xì)胞數(shù)超過(guò)4乂個(gè)判定、

11、隱性型乳房炎。B. 1試劑和器時(shí)附錄B（資料性附錄）苛性扇凝乳試驗(yàn)法（Whiteside法，又稱改良華氏試驗(yàn)）B. 1.1 4%氫鼻化鈉溶液。B. 1.2黑色玻也板、細(xì)玻棒成牙簽或火柴棒、滴管。B.2操作 3把乳汁，用清潔容器采集3mL5 mL乳汁。 個(gè)大十字，以固定四個(gè)被檢乳室的位置。（每份乳樣用一支滴管）分別取四個(gè)乳室的乳汁各5滴于玻璃板上，然后B.2. 1清潔乳*,棄去前2扌B. 2. 2在潔凈皿玻璃板上劃B. 2.3搖勻新，乳樣后以滴各加4%氫氧化鈉*液2滴，隨即迅速用細(xì)玻棒或牙簽或火柴棒呈同心圓狀均勻攪拌，并擴(kuò)散成2. 0cm2. 5cm的圓形，20s南觀察結(jié)果。B.3結(jié)果判定B.

12、3. 1B. 3.2B. 3. 3B. 3.4B. 3.5肉眼可見(jiàn)變化，判定為陰性（+ ）。 敬轉(zhuǎn)透明，出現(xiàn)細(xì)小的顆粒狀凝集物，判定為可疑（）?；旌衔餆o(wú)混合物略：混合物略卻明，出現(xiàn)較氏凝塊，判定為弱陽(yáng)性（+）?；旌衔锍?，樣透明，出現(xiàn)大凝塊，攪動(dòng)時(shí)，形成絲狀凝集物，判定為陽(yáng)性（+）。 混合物完冬透明，出現(xiàn)乳冃色的大凝塊，有時(shí)全部凝成一大塊，判定為強(qiáng)陽(yáng)性（+）。DB12/T 3752008附錄C（資料性附錄）過(guò)氧化氫酶法（雙氧水玻片法）C. 1試劑和器材配成6%9%也0?試劑?，F(xiàn)配現(xiàn)用。 滴管等。C. 1. 1取雙氧冰（30%賦2）,白色襯墊物、C. 1.2載玻片、0.2操作C. 2. 1清潔乳頭 C. 2.2將潔凈載