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1、專題二 微生物的培養(yǎng)/ 2006-06-02無菌技術(shù) 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵,無菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開。2006-06-02無菌技術(shù)消毒與滅菌的區(qū)別?2006-06-02無菌技術(shù)分類定義方法滅菌法殺滅一切微生物物理法:熱力、輻射、微波、等離子體化學(xué)法:醛類、烷化劑高效消毒法殺滅一切致病微生物紫外線、含氯劑、臭氧、復(fù)配劑等中效消毒法殺滅除芽孢外的致病微生物超聲波、碘類、醇類、酚類低效消毒法殺滅細(xì)菌繁殖體、親脂病毒單鏈季胺鹽、雙胍類、中草藥、金屬離子2006-06-02無菌技術(shù)滅菌的方法:1、灼燒滅菌2、干熱滅菌:160-170 下加熱1-2h。3、高壓蒸氣滅菌:10
2、0kPa、121 下維持15-2006-06-02無菌技術(shù) 最常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌,它可以殺滅所有的生物,包括最耐熱的某些微生物的休眠體,同時可以基本保持培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分不被破壞。 有些玻璃器皿也可采用高溫干熱滅菌。為了防止雜菌,特別是空氣中的雜菌污染,試管及玻璃燒瓶都需采用適宜的塞子塞口,通常采用棉花塞,也可采用各種金屬、塑料及硅膠帽,它們只可讓空氣通過,而空氣中的其他微生物不能通過。 而平皿是由正反兩平面板互扣而成,這種器具是專為防止空氣中微生物的污染而設(shè)計的。 2006-06-021、培養(yǎng)基的配制 人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。 固體培養(yǎng)基液體
3、培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基加富培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基2006-06-021、培養(yǎng)基的配制 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(用于培養(yǎng)細(xì)菌) 2006-06-021、培養(yǎng)基的配制 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(用于培養(yǎng)細(xì)菌)1稱量2溶化3調(diào)pH:pH764過濾:這一步可以省去。5分裝:分裝過程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。6加塞7包扎8滅菌9倒平板10無菌檢查:將滅菌的培養(yǎng)基放入37的溫室中培養(yǎng)2448小時,以檢查滅菌是否徹底。2006-06-022、倒平板技術(shù)2006-06-022、倒平板技術(shù)2006-06-023、微生物的接
4、種技術(shù)2006-06-023、微生物的接種技術(shù)2006-06-024、微生物的恒溫培養(yǎng)2006-06-024、微生物的恒溫培養(yǎng)2006-06-025、菌種的保存1、臨時保藏:接種到固體斜面培養(yǎng)基,菌落長成后置于4冰箱保存。2、長期保存:甘油冷凍管藏法2006-06-02實踐:分離土壤中的細(xì)菌1、由土壤浸出液中提取細(xì)菌。2、有哪些注意事項?3、如何判斷土壤中有哪些種類的細(xì)菌? 菌落的特征?2006-06-02實踐:分離土壤中的細(xì)菌 關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)地等等,都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。 2006-06-02實踐:分離土壤中的細(xì)菌 關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)地等
5、等,都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。 2006-06-02實踐:分離土壤中的細(xì)菌 關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)地等等,都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。 2006-06-02實踐:分離土壤中的細(xì)菌 關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)地等等,都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。 2006-06-02實踐1:分離土壤中的細(xì)菌 關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)地等等,都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。 2006-06-02實踐2:分離土壤中的分解尿素的細(xì)菌1、培養(yǎng)基的選擇?構(gòu)建怎樣的選擇培養(yǎng)基呢?附:鑒別培養(yǎng)基:伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基,可以用來檢測自來水中的大腸桿菌是否超標(biāo),因為大腸桿菌的代謝產(chǎn)物與伊紅美藍(lán)結(jié)合,使菌落呈深紫色并帶有金屬光澤,使大腸桿菌的菌落顯示出來,并沒有促進(jìn)大腸桿菌的生長和抑制其他微生物的生長。2006-06-02實踐3:分離并計算土壤中的分解尿素的細(xì)菌的數(shù)目1、如何對細(xì)菌進(jìn)行計數(shù)?2006-06-02實踐3:分離并計算土壤中的分解尿素的細(xì)菌的數(shù)目1、如何對細(xì)菌進(jìn)行計數(shù)?2006-06-02實踐3
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