生物醫(yī)學(xué)研究中雞胚的應(yīng)用材料

1、生物醫(yī)學(xué)研究中雞胚的應(yīng)用材料生物醫(yī)學(xué)研究中雞胚的應(yīng)用材料背景：近年來應(yīng)用雞胚珩養(yǎng)組織細(xì)胞研究廣泛.且應(yīng)用雞j克培養(yǎng)州經(jīng)細(xì)胞尚無文獻(xiàn)報(bào)道。目的綜述了應(yīng)用雞/！-E過-行組織細(xì)胞培養(yǎng)的研究進(jìn)版，以便找到一種方便價(jià)廉的神經(jīng)細(xì)胞踏養(yǎng)予段。檢索。選擇文章內(nèi)容與雞胚培養(yǎng)模型相關(guān)，同一領(lǐng)域文獻(xiàn)那么邊停J1J：期發(fā)表或發(fā)表在權(quán)威雜志文簾。初檢得到205篇文獻(xiàn)，根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)選擇34r.：r文革進(jìn)展綜述。結(jié)果與結(jié)論：雞Jffit州市的別離、古養(yǎng)、餃耐?iljlJ備.JN熠生物學(xué)機(jī)制和l藥物挑選等方而均有廣泛應(yīng)用。與其他培養(yǎng)方法相比具有價(jià)脹，方便，快i忠等優(yōu)點(diǎn)。充分正確的利用該培養(yǎng)體系II為多領(lǐng)域的研究提供科學(xué)行的

2、方法和l思路。關(guān)鍵詞：偵罰：生物慶學(xué)：神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)0號|言雞胚很早就被用作培養(yǎng)載體，在病毒學(xué)、友育學(xué)、藥理學(xué)、腫瘤學(xué)及非腫瘤性疾病如子宮內(nèi)膜異位癥等研究本文由搜集整理領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。雞胚的絨毛?-囊膜、尿囊腔、羊膜腔、胚體及各器官組織等都可以作為培養(yǎng)載體，同時(shí)雞胚及各組織器官也可在體外培養(yǎng)，擊。雞胚成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)、雞胚背根神經(jīng)節(jié)的體外培養(yǎng)等1J。在諸多應(yīng)用雞胚的實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)用雞胚尿囊膜模型進(jìn)展生物醫(yī)學(xué)研究成為近年來的熱點(diǎn)。雞胚作為一種良好的活體發(fā)育模型，既可以當(dāng)做培養(yǎng)載體，又可以提供用于培養(yǎng)的供體組織細(xì)胞，已經(jīng)建立起了多種不同的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)模型和其它疾病的動物模型。1資料和方法1.1資料

3、來源由第一作者在2021一06進(jìn)展檢索。檢索數(shù)據(jù)庫：Pubed數(shù)據(jù)庫，網(wǎng)址ebryhriallantiebranedel；neurnalulture；中文檢索飼為雞胚絨毛尿囊膜，模型；神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)。1.2選標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)：雞胚培養(yǎng)方法的應(yīng)用。神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)的研究。疾病模型。徘除衍準(zhǔn)：與此文目的無關(guān)。較陳舊的文獻(xiàn)。重復(fù)同類研究。1.3質(zhì)量評值根底研究和疾病模型研究原著163篇，綜述40篇，述評2篇.2結(jié)果2.1納文獻(xiàn)根本情況初檢得到205篇文獻(xiàn)，中文123篇，英文82篇。閱讀標(biāo)題和摘要進(jìn)展初篩，排除因研究目的與此文元關(guān)112篇，內(nèi)容重復(fù)性的研究59篇，共保存34篇中英文文獻(xiàn)做進(jìn)一步分析。文獻(xiàn)1-2J

4、研究了雞胚的組織構(gòu)造特哉，文獻(xiàn)3-30J篇分析了雞胚在腫瘤研究、病毒培養(yǎng)、藥物作用研究領(lǐng)域的應(yīng)用，文獻(xiàn)31-34J篇利用雞胚研究了氧化應(yīng)激模型及子宮內(nèi)膜移位癥雞胚模型。2.2結(jié)果描繪20-21d.雞胚有3個(gè)胚層發(fā)育而成，在發(fā)育的不同階段具有不同的構(gòu)造特點(diǎn).實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用第5-11天的雞胚較多，在該階段雞胚具有胚體、羊膜、絨毛膜、尿囊和卵黃囊等構(gòu)造，外面被覆殼膜和殼.第10天絨毛膜與尿囊合并為絨毛尿囊膜，主要由3層構(gòu)成：外胚層，緊貼殼膜，由一到兩層絨毛膜上皮構(gòu)成；中胚層，富含大量毛細(xì)血管和問質(zhì)細(xì)胞；內(nèi)胚層，面向尿囊腔，是一層扁平的內(nèi)皮。絨毛尿囊膜緊貼多孔的殼，其中的血管網(wǎng)通過尿囊動脈和靜脈與胚體的循

5、環(huán)相連，是雞胚的呼吸器官.該構(gòu)造保證了足夠的氣體和養(yǎng)分交換，也使其可以有效的支持移植物的生長，從而成為多種實(shí)驗(yàn)的良好模型.卵黃囊是雞胚的營養(yǎng)器官，含有豐富的血管網(wǎng)為雞胚提供營養(yǎng)物質(zhì)。雞臟、的免疫系統(tǒng)由T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫和B細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫構(gòu)成。B細(xì)胞在相當(dāng)與哺乳動物骨髓的法氏囊中分化，T細(xì)胞在胸腺分化。至孵育的第10天，雞胚的免疫系統(tǒng)尚未完全建立，孵育的第11天后才能檢測到T細(xì)胞和B細(xì)胞I21，至第18天免疫系統(tǒng)方初步建立.這一特點(diǎn)使雞胚在孵育的早期不對異物產(chǎn)生排異反響，有利于移植物的生長。氣和排泄代謝廢物。假如沒有新生血管形成，原友腫瘤的大小一般不超過2x2x2.對腫瘤血管生成的研究分為

6、促進(jìn)血管生成和抑制血管生成兩個(gè)方面。血管生成的反響表現(xiàn)為圍繞移植物的輻較放射狀血管生成和血管密度增加3l；抑制血管生成的反響為血管減少，密度降低直至消失.Vaa等4用絨毛Jjf.囊膜模型來研究漿細(xì)胞條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)血管生成的才能，友現(xiàn)活動性骨髓瘤患者的條件培養(yǎng)基較非活動性骨髓瘤患者的條件培養(yǎng)基能顯著促進(jìn)血管的生成。他們還進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)多友性骨髓瘤的促血管生成反響和某些內(nèi)源性血管生成抑制因子的缺失有關(guān)5.Ribatti等6通過把不同神經(jīng)母細(xì)胞瘤患者的活檢腫瘤組織移植入絨毛Jjf.囊膜，證實(shí)有癌基因YN擴(kuò)增者比元YN擴(kuò)增者具有史顯著的促血管生成作用.Kern等7應(yīng)用絨毛尿囊膜模型研究發(fā)現(xiàn)明替佐米b民ez

7、ib，蛋白酶體抑制劑有很強(qiáng)的抗血管生成作用，但這一作用可以被GRP-78因子所拮抗。通過構(gòu)建各種腫癮的絨毛尿囊膜模型，雞胚在腫瘤的種植與轉(zhuǎn)移的研究中也有廣泛的應(yīng)用。絨毛尿囊膜模型最早由Knightn等8提出，近年來國內(nèi)外學(xué)者已成功的建立卵巢癌絨毛尿囊膜模型9、胃癌絨毛尿囊膜模型10、前列腺癌絨毛尿囊膜模型I11l，鼻咽癌絨毛尿囊膜模型121，骨肉瘤絨毛尿囊膜模型等13腫瘤組織來源不同構(gòu)建模型所需最正確條件有所區(qū)別，有文獻(xiàn)報(bào)道黑色素癌細(xì)胞株、前列腺癌細(xì)胞株接種細(xì)胞數(shù)在105-106就可以有較好的成瘤效果1114l；膽管癌細(xì)胞須在們106時(shí)才能較好的形成移植瘤l15l；卵巢癌要求更高，需要107-

8、108才形成移植瘤10l；所以在建立不同腫瘤細(xì)胞的絨毛尿囊膜模型時(shí)要首先探索出模型建立的最正確條件。這些模型的建立對研究腫癮的種植與轉(zhuǎn)移提供了很好的在體模型。Taizi等1勺IJ用白血病絨毛Jjf.囊膜模型，通過DNA的定量分析，研究了白血病對各個(gè)臟器的侵襲情況.也有學(xué)者運(yùn)用絨毛Jjf.囊膜模型研究了腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，如癌細(xì)胞通過循環(huán)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到靶器官17li轉(zhuǎn)移的癌細(xì)胞通過血管壁轉(zhuǎn)移到細(xì)胞問質(zhì)和靶器官l18l；腫瘤細(xì)胞在靶器官內(nèi)的增殖等I叫。雞胚的不同部位，如尿囊腔、羊膜腔等；一種是接種在體外培養(yǎng)的雞胚細(xì)胞中，如成纖維細(xì)胞。郭芳等20應(yīng)用雞胚尿囊腔和羊膜腔接種法比擬了流感病毒的雞胚培養(yǎng)和

9、細(xì)胞培養(yǎng)兩種別離方法的異同。發(fā)現(xiàn)雞胚培養(yǎng)法較細(xì)胞培養(yǎng)法具有病毒易復(fù)制，接種部位病毒含量大，對病毒不產(chǎn)生抗體，來源元足，操作簡單等優(yōu)點(diǎn)。ey町等21利用原代雞胚成纖維細(xì)胞雄養(yǎng)修飾的安卡拉在苗病毒，經(jīng)過一系列的傳代得到了安卡拉在苗。萬學(xué)勤等22也利用雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)新城疫病毒來進(jìn)展抗腫瘤新城疫病毒疫苗的研究.富強(qiáng)等23從細(xì)胞病變和抗原滴度兩個(gè)方面比擬了雞胚肝細(xì)胞培養(yǎng)禽腺病毒和SPF雞腎細(xì)胞培養(yǎng)禽腺病毒，兩者并無明顯差異，可以用雞胚肝細(xì)胞培養(yǎng)禽腺病毒來替代傳統(tǒng)的SPF雞腎細(xì)胞培養(yǎng)法，黃杰庭24J利用SPF雞胚進(jìn)展了中國首例甲型燦燦病毒的別離培養(yǎng)和鑒定。目前常用的疫苗中有些是通過病毒接種雞胚培養(yǎng)法消

10、費(fèi)的，但是并非所有世界衛(wèi)生組織公布椎薦的疫苗林在雞胚培養(yǎng)的過程中都具有良好的病毒復(fù)制才能。研究發(fā)如今雞胚中可以良好復(fù)制的流感毒林通常在HA蛋白基因序列上和可以在人群中流行的毒株存在一個(gè)或多個(gè)氨基酸位點(diǎn)差異25J尋找在雞胚中復(fù)制良好的高產(chǎn)林或者通過不同毒林之間的重配未獲得在雞胚上有良好復(fù)制才能的毒株也是目前利用雞胚消費(fèi)疫苗研究的熱點(diǎn).學(xué)者利用黑色素瘤絨毛尿囊膜模型研究了內(nèi)皮抑素和多西J；f-、素對腫瘤血管生成的影響26李穎嘉等27J過骨肉瘤S-732細(xì)胞絨毛尿囊膜棋型研究發(fā)現(xiàn)，血管內(nèi)皮生長因子抗體對骨肉瘤血管生成及腫痕增殖、凋亡狀態(tài)均有顯著影響；血管內(nèi)皮生長因子抗體組腫痕去血管數(shù)目及瘤細(xì)胞數(shù)顯著

11、低于PBS對照組。Ain等28通過城毛尿囊膜模型研究發(fā)現(xiàn)甘氨酸能抑制50%以上的胚胎血管形成，使損傷修復(fù)血管形成中所需要的纖維蛋白的形成減少30%以上。同時(shí)發(fā)現(xiàn)能使乳腺癌的生長減少15%，微血管密度下降20%.提示甘氨酸具有抑制胚胎血管形成，抑制損傷修復(fù)和腫瘤生長的作用.李漢奇等29應(yīng)用絨毛?Y-囊膜棋型用pH梯度法對復(fù)方二黃膠囊抑制腫瘤血管生成的活性部位進(jìn)展了比擬，發(fā)現(xiàn)用乙酸乙酣萃取的酸性部位復(fù)方三黃膠囊具有顯著的抑制雞胚絨毛尿囊Jl莫細(xì)小毛細(xì)血管的作用。董紀(jì)軍等30用雞胚心侵襲實(shí)驗(yàn)法研究了雌二醇對SA83細(xì)胞轉(zhuǎn)移的影響，友現(xiàn)雌二醇對SA83細(xì)胞有明顯的促增殖和轉(zhuǎn)移作用。囊泡及周邊血管形成，

12、可以明顯上調(diào)E在位基質(zhì)細(xì)胞凋亡基因BAD、BAX、ASP8、ASP9和TNFRSF6的表達(dá)，并增強(qiáng)細(xì)胞周期依賴性蛋白激酶抑制因子DKN旭、DKN2A及IFNA1、IFNB1基因表達(dá)；減少癌基因FS、HEK2、SR和和附侵襲基因ITGB5、P91之生長、轉(zhuǎn)錄因子基因PDGFA、NFKBIA表達(dá).為了討論氧化應(yīng)激對胚胎友育的不良影響，研究疾病的友活力制，挑選和坪價(jià)藥物活性，利用各種應(yīng)激原負(fù)荷建立了不同的雞胚氧化應(yīng)激模型33也有學(xué)者利用雞胚背根神經(jīng)節(jié)與前腦細(xì)胞體外培養(yǎng)來研究神經(jīng)損傷修復(fù)與評價(jià)神經(jīng)生長因子的作用和神經(jīng)營養(yǎng)藥物的效采343展望如能元分利用雞胚的培養(yǎng)體系，那么能為多領(lǐng)域的研究提供實(shí)在可行的方法與思路