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文檔簡介
1、實驗動物的若干體能測試教學(xué)目的 1、了解動物應(yīng)激反應(yīng)的定義及動物體能測試的常規(guī)實驗方法 2、了解構(gòu)建抗應(yīng)激模型的方法和研究意義 教學(xué)內(nèi)容通過對小鼠負(fù)重游泳記錄及密閉空間窒息實驗,及測量血清乳酸脫氫酶,學(xué)習(xí)動物體能測試的常規(guī)實驗方法, 探究雌雄小鼠體能是否有差異。實驗準(zhǔn)備動物:小鼠。要求雌雄、年齡比例均衡。器材:鼠籠、電子天平、50cm30cm25cm的玻璃缸、200ml磨口廣口瓶、負(fù)重物、溫度計、秒表、冰箱、恒溫箱。藥品:鈉石灰(或等量的氫氧化鈉和碳酸鈣)、凡士林等。什么是應(yīng)激反應(yīng)?應(yīng)激反應(yīng)是機體受到各種有害刺激后產(chǎn)生的一種非特異性緊張反應(yīng)。長期在應(yīng)激狀態(tài)下生活可導(dǎo)致機體免疫力下降,從而產(chǎn)生各
2、種疾病。引起應(yīng)激反應(yīng)的刺激稱為應(yīng)激原,外界環(huán)境中過度的暴冷或暴熱,內(nèi)因中過度的驚恐、憤怒等情緒刺激均可構(gòu)成應(yīng)激原,使機體處于應(yīng)激狀態(tài)。(一)小鼠游泳實驗根據(jù)游泳時水溫的不同,可分為常溫下游泳,水溫常調(diào)制25291;低溫下游泳,水溫可調(diào)至5151;高溫下游泳,水溫可調(diào)至39451。后兩者是游泳至疲勞,外加應(yīng)激。本實驗以小鼠游泳時間為小鼠的體能的指標(biāo)之一。【方法】玻璃缸內(nèi)加水,水深20cm,水溫保持在200.5,在每只鼠尾部束其體重10%的重物,將小鼠分別放入玻璃缸內(nèi)游泳,開始計時。注意觀察,當(dāng)小鼠頭部沉入水中10秒中不能付出水面者即為體力耗竭,即可計時,為小鼠游泳時間。比較不同組小鼠的抗疲勞能力
3、?!咀⒁狻?.最好小鼠單只游泳,如果2只以上同時游泳,應(yīng)注意觀察,不使小鼠彼此靠近,否則會影響實驗結(jié)果。2.水溫如升高至2830和小鼠負(fù)重物較輕均會使小鼠游泳時間明顯延長。(一)小鼠游泳實驗實驗前準(zhǔn)備動物準(zhǔn)備:小鼠器材準(zhǔn)備:電子天平、玻璃缸、秒表負(fù)重物、溫度計、等實驗用水準(zhǔn)備:溫水、熱水、冷水準(zhǔn)備正式實驗在每只鼠尾部束其體重10%的重物,將小鼠分別放入玻璃缸內(nèi)游泳,開始計時。注意觀察,當(dāng)小鼠頭部沉入水中10秒中不能付出水面者即為體力耗竭,即可計時,為小鼠游泳時間。數(shù)據(jù)分析比較不同組小鼠的抗疲勞能力。體能恢復(fù)實驗上述小鼠休息30分后再次入水(二)小鼠耐缺氧實驗【小鼠耐常壓缺氧能力測試方法】將小鼠
4、放入盛有15g鈉石灰的廣口瓶內(nèi)(每瓶只放1只小鼠),用凡士林涂抹瓶口蓋嚴(yán),使之不漏氣,立即計時。以呼吸停止為標(biāo)準(zhǔn),觀察小鼠因缺氧而死亡的時間。比較各組小鼠耐缺氧的能力。【注意】1.每個廣口瓶最好只放一只小鼠,以防互相擾動影響耐缺氧能力測定。2.廣口瓶一定要密封嚴(yán)格,以防漏氣,否則會影響實驗結(jié)果。3.廣口瓶容積應(yīng)適當(dāng),以小鼠能自由活動為宜。4.具有靜電作用的藥物也能延長缺氧死亡時間。(二)小鼠耐缺氧實驗封口將小鼠放入盛有15g鈉石灰的廣口瓶內(nèi)(每瓶只放1只小鼠),用凡士林涂抹瓶口蓋嚴(yán),使之不漏氣,立即計時。觀察記錄以呼吸停止為標(biāo)準(zhǔn),觀察小鼠因缺氧而死亡的時間。結(jié)果分析比較各組小鼠耐缺氧的能力。(
5、三)小鼠耐低溫和高溫實驗?zāi)偷蜏貙嶒灣⑿∈蠓庞?5以下的低溫水箱內(nèi);耐高溫實驗則將小鼠放于451的恒溫箱內(nèi)。觀察小鼠生存時間,比較不同組小鼠的存活百分率?!拘∈蟮哪秃芰y試方法】各組同時將小鼠放入-51冰箱內(nèi),開始記時,2小時后將小鼠取出,統(tǒng)計各組小鼠存活數(shù)。【注意】1.冰箱內(nèi)溫度必須控制在-5左右。2.小鼠放入冰箱時應(yīng)每個鼠籠只放一只小鼠,以防小鼠互相取暖影響實驗結(jié)果?!拘∈蟮哪透邷啬芰y試方法】各組同時將小鼠放入451的恒溫箱內(nèi),立即計時、并密切觀察。以呼吸停止為指標(biāo),觀察至小鼠半數(shù)死亡,取出恒溫箱內(nèi)全部小鼠,統(tǒng)計各組小鼠存活情況。【注意】1.恒溫箱的溫度應(yīng)恒定在451,否則會影響實驗結(jié)
6、果。2.因要觀測小鼠在恒溫箱內(nèi)半數(shù)死亡時間,故每次放入恒溫箱內(nèi)的小鼠數(shù)不宜過多。(三)小鼠耐低溫和高溫實驗?zāi)秃芰y試方法各組同時將小鼠放入-51冰箱內(nèi),開始記時2小時后將小鼠取出,統(tǒng)計各組小鼠存活數(shù)。耐高溫能力測試方法各組同時將小鼠放入451的恒溫箱內(nèi),立即計時、并密切觀察。以呼吸停止為指標(biāo),觀察至小鼠半數(shù)死亡,取出恒溫箱內(nèi)全部小鼠,統(tǒng)計各組小鼠存活情況實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計匯總實驗室所有小鼠的體能測試的數(shù)據(jù)結(jié)果,將實驗室所有小鼠按照不同特征或?qū)嶒炋幚恚ㄈ绱菩?、年齡、體重、是非給藥等)分組。計算出各組小鼠的平均游泳時間、平均耐缺氧時間,統(tǒng)計出在耐寒和耐高溫情況下,各組小鼠的存活百分率。有興趣的同學(xué)課后可以進行更進一步的統(tǒng)計處理?!局攸c】理解對實驗動物抗應(yīng)激反應(yīng)的體能測試中,干擾性因素的排除?!倦y點】練習(xí)小鼠的正確抓取(做到既對實驗
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