色譜柱的維護與保養(yǎng)在高壓液相色譜中的應(yīng)用

1、色譜柱的維護與調(diào)養(yǎng)在高壓液相色譜中的應(yīng)用摘要：科學(xué)技能的生長，使得色譜技能也得到進一步的生長，不竭有新的聯(lián)用的技能得到應(yīng)用。生物醫(yī)學(xué)的生長，也不竭要求高敏捷和高選擇性的要領(lǐng)對研究的東西舉行定性和定量的研究。關(guān)鍵詞：色譜柱維護與調(diào)養(yǎng)高壓液相色譜應(yīng)用0弁言色譜作為一種分散技能與要領(lǐng)，自本世紀(jì)初起已經(jīng)有100多年的汗青了，如今已經(jīng)成為闡發(fā)化學(xué)學(xué)科中的一個緊張的分支。在人類進入新期間之際，人們面對著在信息科學(xué)、生命科學(xué)、質(zhì)料科學(xué)、環(huán)境科學(xué)等范疇的快速生長的挑釁，在這些范疇人才的需求成為國度高度生長的至關(guān)緊張的因素。而色譜技能是生命科學(xué)、質(zhì)料科學(xué)、環(huán)境科學(xué)必不成少的本領(lǐng)和東西。根據(jù)比來的統(tǒng)計在全天下各種

2、闡發(fā)儀器中景象色譜儀和液相色譜儀的營銷總額占25%-30%?？茖W(xué)技能的生長，使得色譜技能也得到進一步的生長，不竭有新的聯(lián)用的技能得到應(yīng)用。生物醫(yī)學(xué)的生長，也不竭要求高敏捷和高選擇性的要領(lǐng)對研究的東西舉行定性和定量的研究。1色譜柱的相干性子1.1色譜柱的界說：裝填有結(jié)實相用以分散混淆組分的柱管。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等外形。1.2分類：色譜柱可分為添補柱和開管柱兩大類。液相色譜通常均接納添補柱。色譜柱的分散結(jié)果取決于所選擇的結(jié)實相，以及色譜柱的制備和操縱條件。簡樸而言：常見的分派住填料：碳十八柱DS/18)、碳八柱ty了/8、碳六柱Hexyl/6、碳四柱Butyl/4、碳一

3、注ethyl/1、陰離子互換柱SAX)、陽離子互換柱SX、苯基柱Phenyl、氨基柱Ain/NH2、氰基柱yan/N/Nitrile。常見的吸附柱填料：硅膠柱色譜柱的選擇會直接影響混淆物中組分的分散。舉例來講：對付添補柱而言，可選擇的結(jié)實相較多，柱容量較大，但是受柱長的限定，分散本擁有限，重要應(yīng)用于簡樸化合物的分散。2色譜柱的維護與調(diào)養(yǎng)2.1色譜柱的維護。我們在利用新的色譜柱應(yīng)該在我們本身的液相色譜儀上舉行性能測試，縱然用色譜柱附帶的查驗陳訴上測試條件和樣品來測定該色譜柱的柱效。而且，在以后的利用中，應(yīng)時常對色譜柱舉行測試。而且在利用的歷程中經(jīng)常有堵塞的征象，造成這種征象的重要緣故原由是溶劑中

4、的不溶物樣品中的不溶物泵進樣器等中的不溶物柱內(nèi)不溶物的形成等。假設(shè)當(dāng)色譜柱堵塞以后我們可以對色譜柱舉行修復(fù)，起首，利用含鹽緩沖液后如離子對試劑應(yīng)用溶解性強的溶劑如水舉行沖洗。其次，先斷開檢測器，然后用對來自樣品中的物質(zhì)有強溶解性的溶劑舉行沖洗，對付反相色譜柱，可利用甲醇、乙睛、四氫呋喃、氯仿、庚烷等，在此條件下，應(yīng)制止溶劑的pH低于2或高于8。末了假設(shè)顛末上述照舊沒有修復(fù)，色譜柱壓力照舊沒有落落，那么要斷開檢測器，將色譜柱反標(biāo)的目的安排，然后查抄柱壓，假設(shè)壓力不變落落，那么保持色譜柱反標(biāo)的目的毗連，用低于0.5l/in流速沖洗一小時。假設(shè)壓力不落落，那么要看內(nèi)置過濾器是否被堵塞，假設(shè)被堵塞應(yīng)沖

5、洗或調(diào)換，假設(shè)入口端的填料產(chǎn)生堵塞，柱子將不成能被徹底規(guī)復(fù)，只能通已往掉入口端的部分填料，重新添補舉行有限的柱效規(guī)復(fù)。而且修復(fù)的厚度是2-5。2.2色譜柱的調(diào)養(yǎng)。色譜柱在利用前，最好舉行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為以后評價柱性能變革的參考。但要留意：柱性能大概由于所利用的樣品、活動相、柱溫等條件的差異而有所差異；別的，在做柱性能測試時是根據(jù)色譜柱出廠陳訴中的條件舉行(出廠測試所利用的條件是最正確條件)，只有如許，測得的結(jié)果才有可比性。我們在對色譜柱利用前舉行測試以后，我們要根據(jù)差異的環(huán)境對色譜柱舉行調(diào)養(yǎng)：反相色譜柱天天實行后的調(diào)養(yǎng)：利用緩沖液或含鹽的活動相，實行完成后應(yīng)用10%的甲醇/

6、水沖洗30分鐘，洗掉色譜柱中的鹽，再用甲醇沖洗30分鐘。留意：不克不及用純水沖洗柱子，應(yīng)該在水中參加10%的甲醇，防范將填料沖塌陷。恒久保存色譜柱：如色譜柱要長時間保存，必需存于符合的溶劑下。對付反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中，正相柱可以儲存于嚴(yán)酷脫水后的純粹己烷中，離子互換柱可以儲存于水含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞中，并將購置新色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度最好是室溫。歸納綜合起來就是：柱子在任何環(huán)境下不克不及碰撞、彎曲或猛烈震驚；當(dāng)柱子和色譜儀聯(lián)結(jié)時，閥件或管路必然要洗濯干凈；要留意活動相的脫氣；制止利用高粘度的溶劑作為活動相；進樣樣品要提純；嚴(yán)酷操縱進樣量；天天闡發(fā)事情竣事后，要洗濯進樣

7、閥中殘留的樣品；天天闡發(fā)測定竣事后，都要用得當(dāng)?shù)娜軇﹣硐村?；假設(shè)闡發(fā)柱恒久不利用，應(yīng)用得當(dāng)有機溶劑保存并關(guān)閉。3色譜柱的維護與調(diào)養(yǎng)在高壓液相色譜中的應(yīng)用高效液相色譜(HPL)是20世紀(jì)60年代后期生長起來的分散闡發(fā)技能，是當(dāng)代分散測定的緊張本領(lǐng)。問世以來，因其具有分散效能高、闡發(fā)速率快、檢測敏捷度好、能闡發(fā)高沸點但不克不及氣化的熱不不變生理活性物質(zhì)的特點而被普及應(yīng)用于生物化學(xué)、藥物及臨床闡發(fā)。高效液相色譜柱是斲喪品，會隨利用時間或進樣的次數(shù)增長，出現(xiàn)色譜峰上下落，峰寬加大或出現(xiàn)肩峰，柱效落落。必要按期舉行徹底洗濯和再生，差異的色譜柱洗濯要領(lǐng)各不雷同好比：3.1反相柱別離用甲醇:水=90:10

8、，純甲醇HPL級，異丙醇HPL級，二氯甲烷HPL級等溶劑作為活動相，依次沖洗，每種活動相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的色譜柱體積.然后再以相反的序次沖洗。3.2正相柱別離用正己烷HPL級，異丙醇HPL級，二氯甲烷HPL級，甲醇HPL級等溶劑做活動相，按序沖洗，每種活動相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的柱體積(異丙醇粘度大，可低落流速，制止壓力過高).留意利用溶劑的序次不要顛倒，用甲醇沖洗完后，再以相反的序次沖洗至正己烷，全部的活動相必需嚴(yán)酷脫水。3.3離子互換柱長時間在緩沖溶液中利用和進樣，將導(dǎo)致色譜柱離子互換本領(lǐng)落落，用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生，反之，用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。別的，

9、還可以選擇能溶解柱內(nèi)污染物的溶劑為活動相做正標(biāo)的目的和反標(biāo)的目的沖洗。但再生后的色譜柱柱效是不成能規(guī)復(fù)到新柱的程度的.假設(shè)柱子裝反了，可以調(diào)返來，但大概會造成柱內(nèi)擔(dān)體塌陷.在不得已的環(huán)境下只管不要反裝色譜柱。增強色譜柱的維護與調(diào)養(yǎng)對付色譜柱高壓液相色譜中應(yīng)用有著緊張的意義，訂定色譜柱辦理的尺度操縱規(guī)程并嚴(yán)酷實行。每一根新購進的色譜柱必需造冊登記，內(nèi)容包羅：消費公司、品名、型號、規(guī)格、購進時間、啟用時間、單價、柱內(nèi)庇護溶液等。色譜柱分類存放，硅膠柱、化學(xué)鍵合硅膠柱、氰基或氨基柱、離子互換樹脂柱、凝膠柱各用一個色譜柱盒，盒上貼上標(biāo)簽，注明種別。隨柱說明書裝入密實袋附在登記本上。每啟用一根色譜柱，在色譜柱上貼上標(biāo)簽，注明啟用日期。每根柱子每兩個月調(diào)養(yǎng)一次，特殊是對付一些利用頻率少的柱子，由于安排時間長，輕易干柱，每一次做好調(diào)養(yǎng)記載。對付確已失效的柱子，做好停用記載，不克不及隨意拋棄，專門存放，假設(shè)現(xiàn)用的柱子的填料必