實驗四 溫度、激活劑和抑制劑對酶活力的影響

1、實驗四 溫度、激活劑和抑制劑對酶活力的影響 一、實驗?zāi)康?、了解溫度對酶活性的影響，學(xué)會檢測酶最適溫度的方法。 2、了解激活劑和抑制劑對酶活性的影響。 3、學(xué)習(xí)檢測激活劑和抑制劑影響酶促反應(yīng)速度的原理和方法。二、實驗原理（一）溫度對酶活性的影響一方面是溫度升高,酶促反應(yīng)速度加快。另一方面,溫度升高,也將導(dǎo)致酶活性降低甚至喪失。 因此大多數(shù)酶都有一個最適溫度(即 酶促反應(yīng)速度最快時的環(huán)境溫度)酶的最適溫度不是一個常數(shù)，它與作用時間長短有關(guān)。 （二）激活劑對酶反應(yīng)的影響 激活劑大部分是一些無機離子和小分子有機物。這些物質(zhì)可與酶分子上的氨基酸側(cè)鏈基團結(jié)合，可能是酶活性部位的組成部分，也可能作為輔酶或

2、輔基的一個組成部分起作用。 一般情況下，一種激活劑對某種酶是激活劑，而對另一種酶則起抑制作用； 對于同一種酶，不同激活劑濃度會產(chǎn)生不同的作用。（三）抑制劑對酶反應(yīng)的影響 抑制劑能與酶分子上某些必須基團結(jié)合,使酶的活性中心的化學(xué)性質(zhì)發(fā)生改變，導(dǎo)致酶活力下降或喪失。酶的抑制劑一般具備兩個特點： 1、在化學(xué)結(jié)構(gòu)上與被抑制的底物分子的過渡狀態(tài)相似。 2、能夠與酶的活性中心以非共價或共價的方式形成比較穩(wěn)定的 復(fù)合體。劑i三、試劑和器材1、實驗器材： (1)恒溫水浴鍋 (2)試管 (3)燒杯 (4)量筒 (5)玻璃棒 (6)白磁板 (7)鐵三角架 (8)酒精燈 (10 )試管夾 (11)試管架 (12)秒

3、表 2、實驗試劑 (1) 0.2%淀粉的0.3%氯化鈉溶液 (2) KI-I2 (4) 1%NaCl (5) 1%CuSO4 6) 1%Na2SO4 (7) 0.1%淀粉溶 (8) 唾液淀粉酶四、操作步驟（一）溫度對酶活性的影響 取3支試管，編號，按下加入試劑，搖勻后，將1號、3號試管放入37恒溫水浴中，2號試管放入冰水中。10 min后取出，將2號管內(nèi)液體分為兩半，用碘化鉀-碘溶液來檢驗1、2、3管內(nèi)淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。記錄結(jié)果，將2號管剩下的一半溶液故入37水浴中繼續(xù)保溫10 min后，再用碘液實驗，結(jié)果如何?管 號123淀粉溶液（ml）1.51.51.5稀釋唾液（ml）11煮沸的稀釋唾（ml）1(二) 激活劑和抑制劑對酶活性的影響試 劑 管 號12341%NaCl（ml）1.01%CuSO4（ ml ）1.0蒸餾水（ ml ）1.01%Na2SO4（ ml ）1.00.1%淀粉（ ml ）1.51.51.51.5唾液淀粉酶1.01.01.01.0搖勻，置37水浴中10分鐘，取出冷卻。KI-I2（滴）1-2滴1-2滴1-2滴1-2滴記錄結(jié)果五、注意事項 1、本實驗中的保溫時間分別是5min或10min，但不同的唾液淀粉 酶的活性是不同的，如果沒能得到理想的顏色梯度，則需要根據(jù)先前的現(xiàn)象結(jié)果適當(dāng)