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1、離子與藥物對離體蟾蜍心臟活動的影響第1頁,共11頁,2022年,5月20日,10點46分,星期五實驗?zāi)康?Objectives):學(xué)習(xí)Straub法灌流蟾蜍離體心臟的方法。掌握K+、Ca2+離子濃度變化以及腎上腺素、乙酰膽堿等因素對蟾蜍離體心臟的影響。 第2頁,共11頁,2022年,5月20日,10點46分,星期五1. 材料與方法(materials and methods):1.1 實驗動物 蟾蜍1.2 藥品與試劑 任氏液、0.65NaCl、2% CaCl2、1% KCl、1:10000 腎上腺素、 1:10000 乙酰膽堿、0.1% 阿托品、 3%心得安。 任氏液:用于維持離體蛙心長時間搏

2、動的生理鹽溶液,由氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、碳酸氫鈉、磷酸二氫鈉和蒸餾水配置而成,其電解質(zhì)、晶體滲透壓、PH值與蛙的組織液相近。用于蛙類離體組織、器官的營養(yǎng)和濕潤。 第3頁,共11頁,2022年,5月20日,10點46分,星期五1.3 儀器和裝置1.3.1 器材張力換能器RM6240C微機生物信號處理系統(tǒng)第4頁,共11頁,2022年,5月20日,10點46分,星期五1.3 儀器和裝置1.3.1 儀器連接第5頁,共11頁,2022年,5月20日,10點46分,星期五1.4 離體蟾蜍心臟標(biāo)本制備1)蟾蜍毀腦毀脊髓2)仰臥位固定蟾蜍四肢3)打開蟾蜍胸腔,暴露心臟。4)插管:在主動脈根部剪一斜口,將插管

3、插入動脈圓錐, 在心室收縮時將插管插入心室,結(jié)扎固定。第6頁,共11頁,2022年,5月20日,10點46分,星期五1.4 離體蟾蜍心臟標(biāo)本制備 蛙心起搏點的靜脈竇能按一定節(jié)律自動產(chǎn)生興奮。因此,只要將離體失去神經(jīng)支配的蛙心保持在適宜的環(huán)境中,在一定時間內(nèi)仍能產(chǎn)生節(jié)律性興奮和收縮活動。 蛙心臟沒有營養(yǎng)性血管,斯氏蛙心灌流法,插管直接插入心室,心肌的營養(yǎng)是通過心臟內(nèi)膜液體的直接滲透獲得的。第7頁,共11頁,2022年,5月20日,10點46分,星期五2. 觀察項目2.1 觀察正常蛙心搏動曲線,記錄心率、心室收縮的幅度2.2 更換任氏液為0.65NaCl溶液,記錄心率和收縮幅度。沖洗。2.3 滴加

4、2CaCl2 溶液12滴,記錄心率和收縮幅度。沖洗。2.4 滴加1%KCl 溶液12滴,記錄心率和收縮幅度。沖洗。2.5 滴加1:10000腎上腺素溶液12滴,記錄心率和收縮幅度。沖洗。2.6 滴加心得安溶液12滴,觀察心跳變化。滴加1:10000腎上腺素 溶液12滴記錄心率和收縮幅度。沖洗。2.7 滴加1:10000乙酰膽堿溶液12滴,記錄心率和收縮幅度,沖洗。2.8 滴加阿托品溶液12滴,觀察心跳變化。滴加1:10000乙酰膽堿 溶液12滴,記錄心率和收縮幅度。沖洗。第8頁,共11頁,2022年,5月20日,10點46分,星期五2. 觀察項目數(shù)據(jù)測量:舒張期張力、收縮期張力、心率收縮期張力

5、舒張期張力第9頁,共11頁,2022年,5月20日,10點46分,星期五3. 結(jié)果(Result):3.1 正常離體蛙心的舒張期張力為1.1g、收縮期張力為2.5g,心率為34bpm。3.2 用0.65NaCl溶液后灌流,蛙心舒張期張力為1.1g,收縮期張力為1.5g,心率為35bpm.3.2 滴加2CaCl2溶液12滴前蛙心蛙舒張期張力為1.1g,心收縮期張力為2.5g,心率為34bpm,滴加后蛙心舒張期張力和收縮期張力均為3.5g,心率為0bpm。3.3 滴加1%KCl溶液12滴前心靜止張力為1.1g,心發(fā)展張力為1.5g,心率為34bpm,滴加后蛙心舒張期張力和收縮期張力均為1.0g,心率為0bpm。 3.4 第10頁,共11頁,2022年,5月20日,10點46分,星期五表1 離子與藥物對蟾蜍離體心臟活動的影響實驗項目舒張期張力(g)收縮期張力(g)心率(bpm)處理前處理后處理前處理后處理

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