細菌學優(yōu)秀課件衣原體

1、第20章 衣原體chlamydia第一節(jié) 概述第二節(jié) 主要致病性衣原體重點難點熟悉了解掌握衣原體的概念、共同特征、形態(tài)染色與發(fā)育周期、培養(yǎng)特性和對抗生素的敏感性主要致病性衣原體所致的人類疾病及其致病機制衣原體感染的實驗室檢查方法與防治原則概 述summary第一節(jié)衣原體（Chlamydiae）是一類嚴格真核細胞內寄生，具有獨特發(fā)育周期，并能通過細菌濾器的原核細胞型微生物，歸屬于細菌范疇。醫(yī)學微生物（第9版）醫(yī)學微生物（第9版）有細胞壁，革蘭陰性，呈圓形或橢圓形具有獨特的發(fā)育周期，以二分裂方式繁殖有DNA和RNA兩種核酸（有原始的核質，無核膜、核仁）含有核糖體嚴格細胞內寄生具有獨立的酶系統(tǒng)，但不

2、能產生代謝所需的能量，須利用 宿主細胞的三磷酸鹽和中間代謝產物作為能量來源對多種抗生素敏感衣原體的共同特性醫(yī)學微生物（第9版）一、生物學特性基因組環(huán)狀閉合的雙鏈DNA，大小為1.01.24Mb含有約7.5kb大小的質粒，為環(huán)狀閉合的雙鏈DNA，由8個開放閱讀框（ORF）組成并編碼8種蛋白醫(yī)學微生物（第9版）2.發(fā)育周期發(fā)育周期包括兩種形態(tài)：原體（elementary body, EB）小而致密，有核質及細胞壁，位于胞外，為成熟的典型的衣原體，有感染性，無繁殖力。網(wǎng)狀體（reticulate body, RB）大而疏松，無核質及細胞壁，位于胞內，為衣原體的分裂象，無感染性，具有繁殖能力。醫(yī)學微生

3、物（第9版）衣原體的發(fā)育周期圖醫(yī)學微生物（第9版）EB和RB的性狀比較性狀EBRB大?。╩） 0.20.4 0.51.0 細胞壁-代謝活性-胞外穩(wěn)定性強弱感染性強無繁殖能力無強RNA:DNA比 1:13:1醫(yī)學微生物（第9版）包涵體 （inclusion body）：衣原體在宿主細胞內形成的由宿主細胞膜包裹EB和/或RB的空泡狀結構 包涵體經(jīng)Giemsa染色后呈深藍色，碘染色呈褐色。 在發(fā)育周期的不同階段，包涵體形態(tài)大小都有差異。 成熟的包涵體中含有大量的EB。醫(yī)學微生物（第9版）Normal HeLa cells0 hour2 hour40 hour12 hour24 hourLegend:

4、F-actinNucleiInclusion body 衣原體在HeLa細胞中包涵體的變化3. 培養(yǎng)特性 醫(yī)學微生物（第9版）嚴格活細胞寄生可在HeLa、McCoy或HL等敏感細胞中培養(yǎng)可接種雞胚卵黃囊可在小鼠中傳代醫(yī)學微生物（第9版）4. 抗原結構屬特異抗原：細胞壁的LPS，可區(qū)分衣原體不同的屬種特異抗原：位于主要外膜蛋白（MOMP）上 ，可鑒別不同種的衣原體型特異抗原：根據(jù)MOMP可變區(qū)氨基酸序列的不同，可分為不同的血清型或生物型醫(yī)學微生物（第9版）5. 抵抗力耐冷不耐熱；對常用消毒劑敏感；對紅霉素等大環(huán)內酯類抗生素和四環(huán)素類、強力霉素類抗生素敏感。醫(yī)學微生物（第9版）二、致病性和免疫性1

5、. 致病物質 黏附素 肝硫素內毒素樣物質 抑制宿主細胞代謝，直接破壞宿主細胞。 MOMP與吸附、入侵及阻止吞噬體和溶酶體融合有關，有利于衣原體在吞噬體內存活；易突變，可逃避機體的免疫應答。型分泌系統(tǒng)（T3SS） 可分泌效應蛋白與毒力蛋白，與致病有關。醫(yī)學微生物（第9版）2. 所致疾病衣原體血清型感染部位所致疾病沙眼衣原體A，B，Ba，C眼沙眼DK眼包涵體結膜炎、新生兒眼炎DK生殖道（男）尿道炎，附睪炎，前列腺炎DK生殖道（女）尿道炎，宮頸炎，子宮內膜炎，輸卵管炎， 肝周炎，流產，早產兒L1L3生殖道性病淋巴肉芽腫DK呼吸道新生兒肺炎肺炎衣原體呼吸道咽炎，支氣管炎，肺炎鸚鵡熱衣原體（鳥株）呼吸道

6、鸚鵡熱，鳥疫人類致病性衣原體的感染部位與所致疾病醫(yī)學微生物（第9版）二、致病性和免疫性3. 免疫性可產生特異性細胞免疫和體液免疫，以細胞免疫為主免疫力不強且短暫 ，易持續(xù)感染、反復感染可出現(xiàn)免疫病理損傷，由遲發(fā)型超敏反應引起主要致病性衣原體main pathogenic chlamydia第二節(jié)一、沙眼衣原體13-05醫(yī)學微生物（第9版）（一）生物學性狀根據(jù)侵襲力和引起人類疾病部位的不同，沙眼衣原體可分為3個生物型沙眼生物型（Biovar trachoma）生殖生物型（Biovar genital）性病淋巴肉芽腫生物型（Biovar LGV）根據(jù)三個生物型MOMP表位氨基酸序列的差異，將沙眼衣

7、原體分為19個血清型（二）致病性與免疫性醫(yī)學微生物（第9版）沙眼衣原體主要寄生于人類，無動物儲存宿主，主要引起以下疾?。?1. 沙眼 由沙眼生物型A、B、Ba和C血清型引起主要通過眼眼或眼手眼傳播早期癥狀是流淚、有黏性或膿性分泌物、結膜充血及濾泡增生。晚期出現(xiàn)結膜瘢痕、眼瞼內翻、倒睫等；也可引起角膜血管翳，導致角膜損害，影響視力或致盲醫(yī)學微生物（第9版） 2. 包涵體結膜炎 由沙眼生物型B、Ba和生殖生物型D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J、Ja及K血清型引起包括嬰兒結膜炎經(jīng)產道感染，引起急性化膿性結膜炎（包涵體膿漏眼） 成人結膜炎經(jīng)兩性接觸、經(jīng)手至眼或污染的游泳池水感染，引起濾泡性結膜炎

8、， 又稱游泳池結膜炎醫(yī)學微生物（第9版） 3. 泌尿生殖道感染由生殖生物型DK血清型引起經(jīng)性接觸傳播男性多表現(xiàn)為尿道炎、附睪炎、前列腺炎、直腸炎等。 女性表現(xiàn)為尿道炎、宮頸炎、輸卵管炎與盆腔炎、不孕不育等。醫(yī)學微生物（第9版） 4. 嬰幼兒肺炎生殖生物型DK血清型 5. 性病淋巴肉芽腫由沙眼衣原體LGV生物型L1、L2、L2a及L3引起人是LGV的自然宿主，主要通過性接觸傳播侵犯男性腹股溝淋巴結，引起化膿性淋巴結炎和慢性淋巴肉芽腫，常形成瘺管；亦可侵犯女性會陰、肛門、直腸，引起會陰-肛門-直腸組織狹窄。LGV也可引起結膜炎并伴有耳前、頜下及頸部淋巴結腫大13-10（三） 微生物學檢查法醫(yī)學微生

9、物（第9版）標本采集 眼結膜刮片，結膜分泌物 生殖道拭子、尿液 濃液或潰瘍組織直接涂片鏡檢：Giemsa、碘液染色或熒光抗體染色鏡檢，觀察有無衣原體或包涵體13-10醫(yī)學微生物（第9版）分離培養(yǎng)：接種雞胚卵黃囊或傳代細胞系， 35培養(yǎng)4872h。再用IFA或 ELISA檢測培養(yǎng)物中的衣原體衣原體抗原或核酸組分檢測： 應用單克隆抗體通過ELISA檢測臨床標本中沙眼衣原體LPS或MOMP抗原； 以特異性引物通過PCR或鏈接酶鏈反應（LCR）等擴增技術檢測沙眼衣原 體DNA。13-10（四)防治原則醫(yī)學微生物（第9版）注意個人衛(wèi)生，避免直接或間接的接觸感染廣泛開展性傳播疾病防治知識的宣傳，積極治愈病

10、人和帶菌者對高危人群開展普查和監(jiān)控，防止感染的擴散尚無有效的沙眼衣原體疫苗治療藥物可選用多西環(huán)素、羅紅霉素、阿奇霉素、加替沙星等二、肺炎衣原體13-0513-06醫(yī)學微生物（第9版）（一）生物學性狀衣原體的新種，只有一個菌株TWAR原體直徑為0.38m，呈梨形依據(jù)16S rRNA，23S rRNA，ompA基因序列和某些生物學特性比較分析將肺炎衣原體分為三個生物型：即人生物型、考拉生物型和馬生物型肺炎衣原體抗原主要有兩種，即脂多糖（LPS）抗原和蛋白質抗原（二）致病性與免疫性醫(yī)學微生物（第9版）肺炎衣原體人生物型寄生于人類，在人與人之間經(jīng)飛沫或呼吸道分泌物傳播肺炎衣原體是呼吸道疾病的重要病原體

11、，易引起肺炎、支氣管炎、咽炎和鼻竇炎等，表現(xiàn)為咽痛、咳嗽、咳痰、發(fā)熱等，一般癥狀較輕肺炎衣原體與冠心病、動脈粥樣硬化等慢性病的發(fā)生密切相關以細胞免疫為主，體液免疫為輔，但免疫力不持久，可重復感染13-10（三） 微生物學檢查法醫(yī)學微生物（第9版）1、病原體檢測標本采集常取痰標本、鼻咽拭子及支氣管肺泡灌洗液先直接涂片，觀察包涵體；再以熒光或酶標記的種特異性單克隆抗體直接檢測標本中肺炎衣原體抗原特異抗血清做GIT和MIT進一步鑒定可采用組織培養(yǎng)或動物接種進行病原體分離，再通過Giemsa或Macchiavello染色觀察原體或網(wǎng)狀體。13-10醫(yī)學微生物（第9版）2、血清學檢測微量免疫熒光試驗（M

12、IF）MIF可測定血清中的IgM和IgG抗體，有助于區(qū)別近期感染和既往感染，也有利于區(qū)別原發(fā)感染和繼發(fā)感染雙份血清抗體滴度增高4倍或以上，或單份血清IgM抗體滴度116，或IgG抗體滴度1512，可確定為急性感染，IgG116表示為既往感染。3、PCR檢測特異性核酸采用PCR技術檢測特異性16S rRNA基因或MOMP基因三、鸚鵡熱衣原體13-0513-06醫(yī)學微生物（第9版）（一）生物學性狀鸚鵡熱是由鸚鵡熱衣原體引起的一種人獸共患疾病，在鳥類及家禽中傳播，廣泛分布于世界各地，一般呈散發(fā)型，偶有小范圍的暴發(fā)或流行。原體直徑為0.20.5m，呈球形或卵圓形。網(wǎng)狀體直徑為0.61.5m，呈球形或不

13、規(guī)則形態(tài)，原體在細胞空泡中增殖后形成碘染色呈陰性的包涵體依據(jù)血清學分類法，鸚鵡熱衣原體至少可以分為9個血清型，分別為A、B、C、D、E、F、E/B、WC和M56型可用雞胚卵黃囊、敏感細胞培養(yǎng)以及小鼠接種（二）致病性與免疫性醫(yī)學微生物（第9版）主要經(jīng)呼吸道吸入病鳥糞便、分泌物或羽毛的氣霧或塵埃而感染，也可經(jīng)破損皮膚、黏膜或眼結膜感染臨床表現(xiàn)多為非典型性肺炎，以發(fā)熱、頭痛、干咳、間質性肺炎為主要癥狀，偶爾可發(fā)生系統(tǒng)性并發(fā)癥，如心肌炎、腦炎、心內膜炎與肝炎、肝脾腫大等以細胞免疫為主13-10（三） 微生物學檢查法醫(yī)學微生物（第9版）1、病原體檢測標本采集常取患者血、痰標本或咽拭子直接涂片，觀察包涵體

14、可采用組織培養(yǎng)或動物接種進行病原體分離，再通過Giemsa或Macchiavello染色觀察原體或網(wǎng)狀體。13-10醫(yī)學微生物（第9版）2、血清學檢測采用重組鸚鵡熱衣原體抗原進行IFA或ELISA法檢測特異IgM抗體（滴度116）作為早期、特異診斷3、PCR檢測特異性核酸采用PCR技術檢測特異性16S rRNA基因或MOMP基因13-10（四)防治原則醫(yī)學微生物（第9版）嚴格控制傳染源，對飼養(yǎng)的鳥類與禽類加強管理，避免鸚鵡熱衣原體的傳播和流行加強易感人群的防護，對進口的鳥類和禽類應加強檢疫確診后及早使用四環(huán)素類、大環(huán)內酯類或喹諾酮類抗生素徹底治療 本章節(jié)概括了衣原體的基本概念及其共同特征。衣原體具有獨特的發(fā)育周期，可出現(xiàn)2種不同形態(tài)：原體和始體。原體具