普微實(shí)驗(yàn)之一培養(yǎng)基的制備與無菌檢測技術(shù)2012版課件

1、微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的及實(shí)驗(yàn)室的要求普通微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)普通微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)主講：鄭海濤一、微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的1、微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是微生物學(xué)的重要組成部分，也是學(xué)習(xí)微生物學(xué)的一個重要環(huán)節(jié)2、通過實(shí)驗(yàn)操作，可以加深和鞏固對課堂講授內(nèi)容的理解。3、訓(xùn)練學(xué)生掌握最基本的操作技能；了解微生物學(xué)的基本知識；培養(yǎng)學(xué)生觀察、思考、分析解決實(shí)際問題的能力；實(shí)事求是、嚴(yán)肅認(rèn)真的科學(xué)態(tài)度和勤儉節(jié)約、愛護(hù)公物的良好作風(fēng)。 二、微生物實(shí)驗(yàn)室的要求 為了上好微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課，并保證安全，實(shí)驗(yàn)時要注意如下事項：1、為了保證實(shí)驗(yàn)室的整潔和實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行，非必要的物品和書包，不得帶入室內(nèi)，實(shí)驗(yàn)時不得高聲談話和隨意走動2、每次實(shí)驗(yàn)前要對實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

2、進(jìn)行充分預(yù)習(xí)，了解實(shí)驗(yàn)的目的、原理和方法，做到心中有數(shù)，并作合理安排。3、實(shí)驗(yàn)中要認(rèn)真觀察，及時做好實(shí)驗(yàn)記錄。對于當(dāng)時不能得到結(jié)果而需要連續(xù)觀察的實(shí)驗(yàn)，則需記下每次觀察的現(xiàn)象和結(jié)果，以便分析。4、實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行，萬一遇有帶菌物品灑漏、皮膚破傷或菌液吸入口中等意外情況發(fā)生時，應(yīng)立即報告指導(dǎo)教師，及時處理，切勿隱瞞。 微生物實(shí)驗(yàn)要點(diǎn) 干凈利落 膽大心細(xì)實(shí)驗(yàn)一無菌檢測技術(shù)與常用培養(yǎng)基的制備、滅菌普通微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)普通微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、通過本次實(shí)驗(yàn)證明微生物無處不在，并在今后的試驗(yàn)中注意無菌操作。2、了解配制培養(yǎng)基的一般程序，掌握配制、分裝培養(yǎng)基的方法3、掌握高壓蒸汽滅菌的原理及

3、操作技術(shù)（一）環(huán)境中微生物的檢測一、目的和要求 1、微生物在自然界廣泛存在，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)亦不例外。由于其個體小，人們用肉眼看不到。只有通過微生物的大量繁殖形成微生物群體，即菌落，肉眼才能看到它們。2、通過本次實(shí)驗(yàn)證明實(shí)驗(yàn)室內(nèi)有各種微生物的存在，對微生物有初步的認(rèn)識，并在今后的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中注意無菌操作，防止雜菌污染，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。 二、實(shí)驗(yàn)材料 1、牛肉膏蛋白胨（營養(yǎng)瓊脂）培養(yǎng)皿、75%酒精棉球 2、37恒溫箱、酒精燈、剪刀、火柴、鑷子、滅菌棉球、滅菌牙簽、記號筆等四、結(jié)果觀察 1、同組成員共同觀察并記錄結(jié)果，并與對照皿進(jìn)行比較。 2、描述你處理的培養(yǎng)皿中長出的菌落，如形狀、顏色、大小、

4、邊緣等特征（二）培養(yǎng)基的制備與滅菌1、培養(yǎng)基：人工配制、適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的混合基質(zhì)。2、營養(yǎng)要素：碳源、氮源、能源、生長因子、無機(jī)鹽和水3、要 求：應(yīng)具備6大營養(yǎng)要素；物質(zhì)比例合適；必須滅菌。 一、實(shí)驗(yàn)原理消毒與滅菌消毒：消滅病原菌和有害微生物的營養(yǎng)體滅菌：殺滅一切微生物的營養(yǎng)體，芽胞和 孢子。方法：一、物理的方法：加熱、過濾、輻射二、化學(xué)的方法：用化學(xué)試劑抑制或殺滅微生物。主要破壞細(xì)菌代謝機(jī)能。如重金屬離子，磺胺類藥物及抗生素等。 培養(yǎng)基的分類1、物理狀態(tài)分 （1）固體培養(yǎng)基 （2）半固體培養(yǎng)基 （3）液體培養(yǎng)基 (4）脫水培養(yǎng)基（干燥培養(yǎng)基） 2、營養(yǎng)成分分 （1）天然培養(yǎng)

5、基 （2）合成培養(yǎng)基 （3）半合成培養(yǎng)基3、不同功能分 （1）選擇性培養(yǎng)基 （2）鑒別培養(yǎng)基 1%-2%瓊脂0.5%瓊脂不加瓊脂營養(yǎng)瓊脂高氏一號PDA乳酸菌培養(yǎng)基MRSEMB二、實(shí)驗(yàn)材料及儀器(一)藥品 牛肉膏，蛋白胨，葡萄糖，馬鈴薯、NaCl，瓊脂等。(二)試劑 40KOH，l0HCl。(三)其它 電子天平，電爐，硫酸紙，牛皮紙，線繩，棉花，紗布，石棉網(wǎng)、精密pH試紙，標(biāo)簽，燒杯，量簡，玻棒，三角瓶，滅菌鍋等。三、方法步驟 1、培養(yǎng)基的種類很多，配制方法也不完全相同，但其基本程序和要求是大體相同的。一般培養(yǎng)基的配制程序如下 一般培養(yǎng)基的配制程序如下 計算 稱量 溶解定溶調(diào)節(jié)PH值 過濾 加瓊脂并溶解 分裝 滅菌 包扎 加塞 擺斜面 無菌檢查。 分 裝漏 斗乳膠管玻璃管彈簧夾鐵架臺分裝試管 滅菌后，固體培養(yǎng)基如需制成斜面，應(yīng)趁熱將試管上部墊于一根玻棒或木條上，使培養(yǎng)基斜面長度為試管長度的12擺斜面五、實(shí)驗(yàn)報告 簡述你所制備培養(yǎng)基的制備程序。六、思考題 (1)在你制備的培養(yǎng)基中，何為碳源?何為氮源? (2)配制合成培養(yǎng)基加入微量元素時，最好用什么方法加入?天然培養(yǎng)基為什么不需另加微量