探索大鼠AA對(duì)金鐵鎖總皂苷抗炎作用的反應(yīng)性

1、探究大鼠AA對(duì)金鐵鎖總皂苷抗炎作用的反響性【摘要】目的通過(guò)實(shí)驗(yàn)觀察和討論金鐵鎖總皂苷TSPT抗炎作用及其作用機(jī)理。方法建立佐劑性關(guān)節(jié)炎AA動(dòng)物模型，通過(guò)觀察TSPT對(duì)AA大鼠足腫脹及炎性組織液中丙二醛DA程度的影響來(lái)討論其抗炎作用及其作用機(jī)制。結(jié)果TSPT能有效抑制AA大鼠足腫脹，降低炎性組織液中DA的程度。結(jié)論TSPT具有良好的抗炎作用，其作用機(jī)制與降低DA程度有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】金鐵鎖總皂苷佐劑性關(guān)節(jié)炎DA【Abstrat】bjetiveTbservetheanti-inflaatineffetsandpssibleehanisfTtalSapninsfPsasilenetuniids(TSP

2、T).ethdsAfterestablishingAAratsdel，theTSPTsanti-inflaatryeffetsandehanisagainstAAasstudiedthrughbservinghangesftheanklesellingandntentsfDAininflaatry-tissuesakfAArats.ResultsTSPTuldinhibitartiularsellingandeffetivelydereasethententfDAininflaatrytissuesakfAArats.nlusinTSPThasgdanti-inflaatineffetsand

3、theehanisislikelyrelatedtTSPTsdn-regulatinfDA.【Keyrds】TSPTAADA金鐵鎖苗語(yǔ)：Jenbtieegsx系苗族慣用藥材1，首載于?滇南本草?，為石竹科植物金鐵鎖Psasilenetuniides.uet.Y.u的枯燥根。別名：獨(dú)定子、對(duì)葉七、白馬分鬃等，主要含皂苷類成分。具有散瘀定痛、止血、消癰排膿之功，用于跌打損傷，風(fēng)濕痛、胃痛、創(chuàng)傷出血等的治療2。目前尚關(guān)于其抗AA研究的文獻(xiàn)報(bào)道，本文就關(guān)于金鐵鎖總皂苷抗AA作用的研究作一介紹。1材料與方法1.1材料Freunds完全佐劑siga公司產(chǎn)品，由幫定生物技術(shù)公司提供，注射器1.0l，金鐵鎖總

4、皂苷貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院制劑教研室提取，地塞米松注射液批號(hào)：0206101，天津金輝氨基酸提供，風(fēng)濕寧注射液批號(hào)504002，羅浮山藥業(yè)提供，TSPT貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院制劑教研室提取。動(dòng)物：70只雄性istar大鼠，體重：(20030)g，清潔級(jí)二級(jí)動(dòng)物由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心提供。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1分組70只istar雄性大鼠，隨機(jī)分為7個(gè)組。分別為：生理鹽水組NS、模型組A、西藥陽(yáng)性對(duì)照組地塞米松注射液B、中藥陽(yáng)性對(duì)照組風(fēng)濕寧注射液、TSPT大D、中E、小F劑量組。1.2.2造模除NS組外，其余各組于每只大鼠右后足跖皮內(nèi)注射Freunds完全佐劑0.1l致炎。第1天記錄大鼠的體重和兩側(cè)腳踝關(guān)節(jié)的周

5、長(zhǎng)。1.2.3給藥除NS組外，其余均按上述方法造模，于造模后第9天開(kāi)場(chǎng)給藥，連續(xù)給藥12天。每隔3天，記錄各組大鼠體重，及踝關(guān)節(jié)腫脹，末次給藥造模后第21天1h后處死大鼠，觀察藥物對(duì)繼發(fā)性病變的影響。2結(jié)果2.1TSPT對(duì)AA大鼠足腫脹的影響足腫脹的測(cè)量方法：用記號(hào)筆標(biāo)記腫脹踝關(guān)節(jié)周徑，每日以特制軟皮尺測(cè)量踝關(guān)節(jié)周長(zhǎng)軟皮尺無(wú)彈性，最小刻度為0.1。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析：實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，與生理鹽水比擬，造模后第8天藥前各組足均明顯腫脹P0.01，說(shuō)明造模成功。用藥約1周后，TSPT大、中劑量對(duì)足腫脹均顯示出明顯的抑制作用P0.01，作用強(qiáng)度大于中藥陽(yáng)性組風(fēng)濕寧注射液，接近地塞米松組。提示：

6、TSPT能有效抑制AA大鼠踝關(guān)節(jié)的炎癥反響。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.2大鼠致炎足中丙二醛DA生成量的測(cè)定動(dòng)物造模分組給藥同上。鼠致炎21天后處死，在致炎側(cè)關(guān)節(jié)上方0.5處摘取腫脹足爪，縱向切開(kāi)，放入5l生理鹽水的試管中4浸泡過(guò)夜，離心3000r/in取上清液，-20保存待測(cè)。試劑與儀器：DA試劑盒由北京幫定生物技術(shù)公司提供，可見(jiàn)分光光度計(jì)島津：F/UV265由北京武警總醫(yī)院制劑科提供、恒溫水浴鍋、離心機(jī)由北京武警總醫(yī)院檢驗(yàn)科提供。測(cè)定方法及參數(shù)：硫代巴比妥酸結(jié)合法，于532n處測(cè)定，實(shí)驗(yàn)操作方法嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)展。2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法實(shí)驗(yàn)結(jié)果以xs表示，采用t檢驗(yàn)。如表2。表1TSPT對(duì)AA

7、大鼠足腫脹的影響n=10，xs注：與NS組比擬：*P0.01;與模型組A組比擬：P0.05，P0.01；與西陽(yáng)組比擬B：P0.05，P0.01。與中陽(yáng)組比擬：P0.05，P0.01表2TSPT對(duì)AA大鼠炎性組織液中DA的影響(n=6，xs)注：與NS組比擬：*P0.05;*P0.01;與模型組A比擬：P0.05，P0.01;與西陽(yáng)組比擬B：P0.05，P0.01;與中陽(yáng)組比擬：P0.05圖1TSPT對(duì)DA程度的影響圖由圖表統(tǒng)計(jì)分析可知：與NS組比擬，模型組炎性組織液中，DA的含量顯著升高P0.01，這顯示出AA大鼠出現(xiàn)嚴(yán)重的炎性反響。經(jīng)治療后，與模型組比擬，各個(gè)給藥組AA大鼠炎性組織液中DA含

8、量均有不同程度的降低，B西陽(yáng)組、DTSPT大劑量組表現(xiàn)出差異有非常顯著性P0.01。3討論DA通過(guò)酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)產(chǎn)生氧自由基，自由基可引起脂質(zhì)過(guò)氧化，影響一些基因的表達(dá)，在炎癥和免疫過(guò)程中起著中介作用3。因此自由基在生物體系中的作用正受到廣泛重視。在正常情況下，機(jī)體內(nèi)僅產(chǎn)生少量氧自由基，其產(chǎn)生、利用和去除保持一種動(dòng)態(tài)平衡。一旦由于某種原因造成體內(nèi)自由基的堆積，便會(huì)損傷組織細(xì)胞，導(dǎo)致各種病理變化。AA大鼠炎癥反響中，模型對(duì)照組炎性組織液中含量顯著升高與AA大鼠足腫脹呈正相關(guān)，說(shuō)明致炎因子使機(jī)體產(chǎn)生過(guò)量的氧自由基。這些活性氧可直接作用于一些細(xì)胞包括免疫細(xì)胞，與其脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸等發(fā)生反響，引起

9、脂質(zhì)過(guò)氧化，使增多，造成細(xì)胞毒性和功能受損。的增多會(huì)造成自由基連鎖反響加強(qiáng)，使炎癥加重或開(kāi)展。經(jīng)TSPT治療后，大鼠炎性組織中DA的含量降低，說(shuō)明TSPT能抑制或阻斷炎癥時(shí)氧自由基的過(guò)量產(chǎn)生與釋放，減輕氧化應(yīng)激反響與脂質(zhì)過(guò)氧化，使其終產(chǎn)物降低，并接近正常組程度，因此減少了對(duì)細(xì)胞的損傷，糾正體內(nèi)氧自由基代謝失衡或紊亂的作用，調(diào)整機(jī)體內(nèi)環(huán)境，起到消炎、抗氧化和細(xì)胞保護(hù)作用，促進(jìn)了炎癥反響的消退。TSPT抗炎免疫的作用機(jī)理是多方面的，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，TSPT對(duì)AA大鼠炎癥時(shí)氧自由基代謝的調(diào)整作用，可能是其中一個(gè)重要環(huán)節(jié)，對(duì)AA大鼠的抗關(guān)節(jié)炎作用可能與其降低脂質(zhì)過(guò)氧化，恢復(fù)抗氧化酶活性和腹腔分泌功能等有關(guān)。【參