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1、關(guān)于實(shí)驗(yàn)三血清中總膽固醇的測定第1頁,共9頁,2022年,5月20日,22點(diǎn)9分,星期三一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)膽固醇氧化酶法測定血清總膽固醇的原理。掌握血清總膽固醇的測定方法及操作技術(shù)。第2頁,共9頁,2022年,5月20日,22點(diǎn)9分,星期三 (1)(3)H2O2+4-氨基安替吡啉(4-AAP)苯酚游離膽固醇FAA膽固醇酯酶H2O 紅色醌類物質(zhì)過氧化物酶(POD)510nm光吸收法測定相對血清總膽固醇濃度二、實(shí)驗(yàn)原理血清總膽固醇游離膽固醇膽固醇酯膽固醇氧化酶膽甾烯酮+H2O2(2)游離膽固醇第3頁,共9頁,2022年,5月20日,22點(diǎn)9分,星期三三、實(shí)驗(yàn)器材材料:人血清試劑:總膽固醇測定試劑盒用
2、具:分光光度計(jì),微量移液槍,試管,試管架,恒溫水浴鍋第4頁,共9頁,2022年,5月20日,22點(diǎn)9分,星期三(1)取3支試管,按下表加入試劑:四、實(shí)驗(yàn)步驟充分混勻,37 水浴中保溫15min;冷卻至室溫后,510nm處比色比色方法:以空白管調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)管及樣品管光密度值。第5頁,共9頁,2022年,5月20日,22點(diǎn)9分,星期三(2)計(jì)算: 依據(jù)朗伯-比爾定律: A=KLC 標(biāo)準(zhǔn)管膽固醇濃度:5.17mmol/L 樣品管膽固醇濃度(mmol/L)樣品管光密度值 標(biāo)準(zhǔn)管光密度值5.17C樣=A樣A標(biāo)C標(biāo)第6頁,共9頁,2022年,5月20日,22點(diǎn)9分,星期三參考值膽固醇 血清參考值:3.0 5.20mmol/L 危險(xiǎn)閾值:5.20 6.20mmol/L 高膽固醇血癥: 6.20mmol/L 第7頁,共9頁,2022年,5月20日,22點(diǎn)9分,星期三正確使用比色器皿:手拿比色皿的毛面;比色液應(yīng)占比色皿的2/3。測定膽固醇所用的試劑應(yīng)防止被葡萄糖和甘油三酯污染。微量移液槍的正確使用注意事項(xiàng)第8頁,共9頁,2022年,5月20日,22點(diǎn)9
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