復(fù)方降脂合劑中五味子質(zhì)控方法的研究

1、復(fù)方降脂合劑中五味子質(zhì)控方法的研究 ）復(fù)方降脂合劑welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience復(fù)方降脂合劑由五味子、當(dāng)歸、枸杞、白芍、川芎、黨參、黃芪、麥冬、菟絲子等多味中藥經(jīng)水煎煮而成，具有降壓降脂的功效。五味子作為一種常用藥材，在本復(fù)方制劑中五味子投藥量較大，且其中五味子醇甲對(duì)于治療病癥療效較為明顯，為治療病癥的主要成分，但是五味子醇甲的含量較少，所以保證五味子在制劑中的內(nèi)在質(zhì)量及其穩(wěn)定性極為重要。復(fù)方降脂合劑中五味子質(zhì)控方法的研究1、目的2、方法與結(jié)果3、總結(jié)1、目的w

2、elcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience本實(shí)驗(yàn)用高效液相色譜法建立五味子藥材中五味子醇甲的含量測(cè)定及方法學(xué)驗(yàn)證的方法合理性，為有效控制制劑中五味子的內(nèi)在質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。復(fù)方降脂合劑中五味子質(zhì)控方法的研究1、目的2、方法與結(jié)果3、總結(jié)2.1 實(shí)驗(yàn)儀器島津高效色譜儀（包括：shimadzu LC-6A泵，shimadzu SPD-6AV紫外檢測(cè)器，7725i型進(jìn)樣閥，Anastar色譜工作站）；色譜分析柱KromasilC18； Micro Centaur型離心機(jī)（MSE

3、）； YKH-1型液體快速混合器（江西醫(yī)療器械廠）；Model C9860A超聲波清洗器（CBL）；HGC-12A型氮吹儀（天津恒奧科技發(fā)展有限公司）。2.2 實(shí)驗(yàn)試劑五味子醇甲標(biāo)準(zhǔn)品（批號(hào)：110857-201211，中國(guó)食品藥品檢定研究院,）甲醇（天津市康科德科技有限公司，色譜純）、實(shí)驗(yàn)用水為蒸餾水、三氯甲烷（天津市江天化工技術(shù)有限公司，含量：99%，分析純），乙醇（天津市化學(xué)試劑三廠）、乙酸乙酯（天津市化學(xué)試劑三廠）。2.3 色譜條件色譜柱KromasilC18 (250mm4.6mm,5m,天津琛航科學(xué)儀器有限公司)；流動(dòng)相：甲醇水（60:40）；檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm流速：1 mLmi

4、n-1；進(jìn)樣量20 uL。2.4 溶液制備標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取10.0 mg五味子醇甲對(duì)照品，置于10mL容量瓶中，配置成1 mg/mL的溶液，對(duì)照品溶液即得。樣品溶液：充分搖勻本制劑，取本制劑10 mL，加入15 mL氯仿萃取，靜置15 min，取上層；加入10 mL氯仿萃取，靜置15 min，取上層；加入10mL氯仿萃取，靜置，取下層；合并下層溶液，使用氮吹儀吹至無(wú)氯仿味，之后加入甲醇至1 mL，渦旋，放入離心機(jī)12000 rmin-1離心5 min，取出上清液，精密吸取上清液500 L，加入甲醇（1:3）稀釋至2 mL，即得。2.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備將對(duì)照品溶液用甲醇分別稀釋成0.5、1、2

5、、5、10 、25、50 gmL-1的系列溶液，分別進(jìn)樣3次,每次20 L,記錄峰面積。以五味子醇甲的濃度（X）為橫坐標(biāo)，測(cè)得的峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，所得回歸方程為y=20285x-4531.8（r=0.9998）五味子醇甲標(biāo)準(zhǔn)曲線2.6 合理性檢驗(yàn) 2.穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取同一供試品溶液按以上色譜條件分別于2、4、6、8、12、24h進(jìn)樣測(cè)定峰面積，供試品峰面積的RSD為2.51%，測(cè)定五味子醇甲峰面積結(jié)果表明, 供試品溶液在配制后的24h內(nèi)基本無(wú)變化，穩(wěn)定性良好。取已稀釋的樣品600 L分別于標(biāo)低、中、高的三個(gè)1.5 mL離心管中，分別加入其含量的80%、100%、120%的

6、標(biāo)品，標(biāo)品濃度為10 gmL-1,其加入量分別為169 、212 、254 L混勻即可，該樣品溶液的日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.04%，日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.28%，均小于5% 。4.重復(fù)性試驗(yàn) 精密稱取同一批號(hào)樣品6 份，制備供試品溶液，測(cè)定峰面積并計(jì)算五味子醇甲含量，結(jié)果五味子醇甲平均含量3.5 gmL-1，RSD為1.47%，結(jié)果表明樣品的重復(fù)性良好。1 精密度試驗(yàn)3.加樣回收率試驗(yàn) 取已稀釋的樣品600 L分別于標(biāo)低、中、高的三個(gè)1.5 mL離心管中，分別加入其含量的80%、100%、120%的標(biāo)品，標(biāo)品濃度為10 gmL-1,其加入量分別為169、212、254 L混勻即可，按2.1項(xiàng)下色

7、譜條件進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果測(cè)得樣品的平均回收率為97.29%，RSD為0.49% 。2.7 樣品含量測(cè)定 充分搖勻樣品，取本制劑10 mL，加入15 mL氯仿萃取，靜置15 min，取上層；加入10 mL氯仿萃取，靜置15 min，取上層；加入10mL氯仿萃取，靜置，取下層；合并下層溶液，使用氮吹儀吹至無(wú)氯仿味，之后加入甲醇至1 mL，渦旋，放入離心機(jī)12000 rmin-1離心5 min，取出上清液，精密吸取上清液500 L，加入甲醇（1:3）稀釋至2 mL即可，以此方法處理三批樣品，按錢數(shù)色譜條件進(jìn)行試驗(yàn)，每批樣品進(jìn)樣六針，記錄峰面積。測(cè)得五味子醇甲的平均含量為3.535gmL-1。3、總結(jié)本實(shí)

8、驗(yàn)選擇五味醇甲作為含測(cè)指標(biāo)，高效液相色譜法操作較為簡(jiǎn)便、儀器設(shè)備易得，該方法容易普及，并能快速、準(zhǔn)確、有效的測(cè)定五味子醇甲的含量。實(shí)驗(yàn)中采用高效液相色譜法測(cè)定五味子醇甲的濃度水平，進(jìn)而可能建立該制劑的質(zhì)量控制方法。樣品萃取溶劑的選擇三氯甲烷與乙醚極性比較相近，考慮安全因素,故改用氯仿作為本品的萃取溶劑用氯仿萃取對(duì)其提取相對(duì)比較完全, 且雜質(zhì)對(duì)五味子醇甲測(cè)定的影響不大, 適用于同類產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究實(shí)驗(yàn)中五味子醇甲大多分布在油層且含量較少,樣品在萃取前要充分搖勻樣品制劑五味子醇甲的含量作為考察指標(biāo)，結(jié)果表明提取采用三氯甲烷提取3次效果最佳。123薄層色譜法在2010版藥典中應(yīng)用的更加廣泛。近年來(lái)，由于薄層掃描儀的出現(xiàn)以及高質(zhì)量的預(yù)控板、高效薄層板的應(yīng)用以及上樣技術(shù)的改進(jìn)。目前，薄層色譜已進(jìn)入儀器化、高效化、定量化及數(shù)據(jù)處理自動(dòng)化階段，即向儀