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文檔簡介
1、BOLD-fMRI在兔肝纖維化模型中的初步實驗研究研究生:楊 超 導 師:趙建農 教授研究背景金標準!近年來,磁共振各種功能成像技術發(fā)展迅猛本課題組已對肝纖維化的常規(guī)MR成像及DWI、PWI功能成像進行了研究MR血氧水平依賴(BOLD)成像逐漸應用于腹部領域的研究MR血氧水平依賴(BOLD)成像原理第二部分 MRI BOLD成像在兔肝纖維化模型中的應用價值探討 研究內容第一部分 兔肝纖維化模型的建立兔肝纖維化模型的建立第一部分造模方法實驗組:48只,純CCL4腹腔注射1次/周,劑量0.1 ml/kg,輔以5%乙醇作為飲水對照組:8只,生理鹽水腹腔注射1次/周,劑量0.1 ml/kg,飲用清水
2、MR檢查 造模后第6、8、10、12周,分別按編號取實驗12只組和對照組2只行MR掃描。病理學檢查影像檢查結束后經耳緣靜脈注入空氣處死動物將兔肝取出,進行取材取材部位盡量保持與影像學測量區(qū)ROI一致取材大小約2.5mm X 1.5mm X 1.5mm用10%甲醛液固定24小時后,送病理檢查組別只數(shù)存活只數(shù)死亡只數(shù)死亡率肝纖維化分期S0 S1 S2 S3 S4對照組88008 0 0 0 0實驗組48381021%2 6 10 12 8P0.05實驗成模情況統(tǒng)計肝臟組織病理學改變 對照組兔肝鮮紅色,表面光滑,質地柔軟實驗組兔肝體積略增大,被膜腫脹 肝臟匯管區(qū)稍擴大,局限竇周纖維化。A為HE染色、
3、B為Masson染色S1期肝臟匯管區(qū)擴大,匯管區(qū)周圍薄層纖維間隔形成,向小葉內伸入。A為HE染色、B為Masson染色S2期 肝纖維化肝臟,大量纖維增生向小葉內延伸形成不完全的纖維間隔,伴小葉結構紊亂(白箭),無肝硬化. A為HE染色、B為Masson染色S3期 肝臟小葉結構紊亂,大量纖維組織增生形成完整纖維間隔伴假小葉形成。 A為HE染色、B為Masson染色。S4期造模動物物的選擇 討論造模藥物的選擇 CCL4誘導 的肝纖維化模型法:優(yōu)點:缺點:簡便、易行、價廉、重復性較好、有相似 性肝毒性作用劇烈而迅速,死亡率很高用復合因素造模,可以縮短造模時間,提高成功率。小 結使用CCL4建立兔肝纖
4、維化模型是可行的,其病理改變、轉歸及分期與臨床人體肝纖維化相似,并且造模成功率較高,成模時間較短,是一種較理想的肝纖維化動物模型兔肝纖維化模型行MRI BOLD成像掃描第二部分掃描固定將家兔俯臥固定在自制弧形裝置上,再一起固定于線圈上,腹部加壓包扎,將其肝臟位置置于線圈中央。設備及掃描方式GE Signa Excite 1.5T超導型磁共振掃描儀單通道表面線圈(GPFLEX)常規(guī)T1WI 、T2WI 橫斷掃描, BOLD掃描BOLD掃描參數(shù) 序列:常規(guī)GRE(gradient echo)脈沖序列; TR/TE: 125 ms /1.922.3 ms(TE 8個), FA:45,F(xiàn)OV:3838
5、 cm, 層厚:8.0 mm,間距:2.0 mm, 矩陣:128128,NEX:1。圖像后處理及分析 肝臟形態(tài)大小信號變化是否腹腔積液T1WI圖像T2WI圖像常規(guī)掃描成像MRI- BOLD成像MRI-BOLD原始圖像GE ADW 4.1工作站R2*圖肝纖維化R2*圖 病理學檢查 病理結果分期分組A組(無肝纖維化組,S0)C組(重度肝纖維化/肝硬化組,S3/S4)B組(輕/中度肝纖維化組,S1/S2)統(tǒng)計學分析R2*值用均數(shù)標準差表示組間樣本均數(shù)的比較采用單因素方差分析,組間兩兩比較采用最小顯著差法,=0.05數(shù)據處理應用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件常規(guī)MR表現(xiàn) 信號體積各葉比例表面腹腔積液實驗組
6、不均勻逐漸增大后期失調欠光滑后期出現(xiàn)對照組均勻正常正常光滑無結 果T1WIT2WI觀察指標R2*圖及R2*值S1期肝纖維化R2*圖 S2期肝纖維化R2*圖 S3期肝纖維化R2*圖 S4期肝纖維化R2*圖 三組R2*平均值比較只數(shù)R2*平均值A組1032.925.06B組1636.654.90C組2042.356.40F11.066p0.000三組R2*平均值Boxplot圖P值統(tǒng)計學分析A組與B組0.1130.05A組與C組0.0000.05B組與C組0.0020.05三組R2*平均值組間比較討 論肝臟MRI BOLD成像國內外研究現(xiàn)狀 肝臟MRI BOLD成像作為磁共振功能成像的一種,目前研
7、究尚處起步階段。 肝臟MRI BOLD成像運用于肝纖維化、肝硬化 的理論基礎 肝臟纖維化時肝臟微循環(huán)已經發(fā)生障礙 肝臟血流的自身調節(jié)機制以及肝動脈的緩沖功能 纖維化初期,門脈灌注量與肝實質氧分壓變化不大隨著纖維化程度加重,緩沖功能不足以調節(jié)門脈灌注量的降低,導致肝實質血氧分壓降低小 結 MRI BOLD成像雖不能作為診斷早期肝纖維化的敏感指標,也不能準確地對肝纖維化進行分級分期,但它在一定程度上能反映肝纖維化的嚴重程度以及肝臟氧含量的變化,從而指導臨床全文結論本實驗應用CCL4復合因素建立兔肝纖維化模型成功率達到了75%,并且成模時間較短,取得了較好的效果動物模型MRI BOLD成像在一定程度
8、上能反映肝纖維化的嚴重程度以及肝臟氧含量的變化,從而指導臨床致 謝 衷心感謝導師趙建農教授三年來在學習、科研及生活上給予的悉心指導和親切關懷。導師淵博的學識,嚴謹?shù)闹螌W態(tài)度,精益求精的工作作風,永不放棄的人生態(tài)度,誨人不倦的高尚師德,嚴以律己、寬以待人的崇高風范,豁達開朗、笑對人生的樂觀性格對我影響深遠。我要銘記導師的諄諄教誨,在今后的工作中不斷進取、努力工作,不辜負導師的期望。在此,謹向導師致以崇高的敬意和衷心的感謝!在此也要對曾燕教授致以誠摯的感謝,在整個研究及學位論文的撰寫上都給了我無私的指導和幫助。衷心感謝重慶醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院放射科的全體老師和同學,感謝郭大靜老師、余聰老師、李杰老師、謝微波老師、淦偉老師及羅小平老師,對我學習和研究給予的大力支持和幫助。感謝何曉靜師姐、舒健師兄、羅銀燈師兄,吳偉師兄、陳維娟師姐,你們對科研的執(zhí)著追求鼓舞著我前進,也感謝你們在科研方面對我的提示和幫助。感謝技術組的
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