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文檔簡介

1、培養(yǎng)細(xì)胞一代生存期培養(yǎng)細(xì)胞一代生存期 lag phase (12-24H) exponential phase (3-5D) plateau phase細(xì)胞生長過程中的重要現(xiàn)象接觸抑制：由于細(xì)胞的相互接觸而抑制細(xì)胞運(yùn)動(dòng)密度抑制：細(xì)胞因營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響而停止生長 實(shí)驗(yàn)室保存的部分細(xì)胞系HeLa (cervical cancer) HEK 293 (human embryonic kidney) CHO (Chinese hamster ovary)NIH 3T3 (mouse embryonic fibroblast) COS-7 (African Green Monkey Kidney

2、 Cells)DC 2.4 (mouse dendritic cells)Tca8113 (human tongue squamous carcinoma cells )Cal-27 (human tongue squamous carcinoma cells )CCTCC培養(yǎng)細(xì)胞的體外生長環(huán)境無污染環(huán)境基質(zhì)氣體環(huán)境和氫離子濃度液相環(huán)境溫度滲透壓 無污染環(huán)境：高壓蒸汽消毒器電熱干燥箱濾器超凈工作臺(tái)紫外燈 基質(zhì)：玻璃基質(zhì)塑料飼養(yǎng)細(xì)胞，又稱滋養(yǎng)細(xì)胞生物性基質(zhì)處理培養(yǎng)表面金屬 氣體環(huán)境和氫離子濃度 ：5%二氧化碳 95%空氣 pH為7.27.4 溫度維持（36.50.5） 液相環(huán)境：水：新鮮配置的三蒸水或去離子水平衡鹽液 ：Hanks液、PBS、Earle液等天然培養(yǎng)基 合成培養(yǎng)基 無血清培養(yǎng)基 DMEMFBSPBS二、細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法Fundamental methods of cell culture注意無菌操作 (Sterile)對實(shí)驗(yàn)中可能用到的器具及培養(yǎng)用液進(jìn)行嚴(yán)格消毒滅菌 培養(yǎng)室的消毒 ：培養(yǎng)室和超凈臺(tái)要用紫外燈和酒精嚴(yán)格消毒培養(yǎng)過程中要注意無菌操作ABA 超凈工作臺(tái)中的實(shí)驗(yàn)用品要擺放整齊B 實(shí)驗(yàn)前75%酒精噴洗雙手無菌操作

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