調(diào)脂湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血脂及主動(dòng)脈VCAM 1表達(dá)的影響

1、調(diào)脂湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血脂及主動(dòng)脈VCAM 1表達(dá)的影響【摘要】目的：研究調(diào)脂湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血脂及主動(dòng)脈va-1表達(dá)的影響。方法：40只istar大鼠分為4組，正常對(duì)照組、模型組、辛伐他汀組、調(diào)脂湯組血清總膽固醇t、低密度脂蛋白膽固醇ldl-指標(biāo)變化；觀察血清va-1的表達(dá)情況。結(jié)果：灌胃1個(gè)月后，辛伐他汀組和調(diào)脂湯組大鼠血清t、ldl-值較模型組顯著降低p0.05，與灌胃前比較t、ldl-值也顯著降低p0.05，辛伐他汀組較調(diào)脂湯組t、ldl-值稍低；血清va-1的表達(dá)情況：辛伐他汀組沒有改變，而調(diào)脂湯組的表達(dá)程度明顯減少。結(jié)論：調(diào)脂湯能降低動(dòng)脈粥樣硬化大鼠的血脂及主動(dòng)脈va-1的表

2、達(dá)?！娟P(guān)鍵詞】調(diào)脂湯；動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血脂；主動(dòng)脈；va-1近年來，心腦血管疾病已超過腫瘤，成為我國高居發(fā)病率和死亡率第一的疾病，而動(dòng)脈粥樣硬化as是其重要的病理根底，嚴(yán)重危害人類的生命安康。如何有效地防治as是廣闊醫(yī)務(wù)工作者正努力尋求解決的任務(wù)。目前臨床上抗as主要以西藥降脂藥物為主，獲得了一定效果，但也不同程度存在著肝功能損害、肌并胃腸道反響等副作用。1材料和方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與材料。istar大鼠40只，清潔級(jí)，體重180220g，雄性，由黑龍江藥物平安性評(píng)價(jià)中心提供。生理鹽水，石家莊四藥消費(fèi)，批號(hào)：091124801；調(diào)脂湯水煎液由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院制劑室提供；辛伐他汀購自北

3、京諾華制藥；t、ldl-試劑盒購自武漢亞法生物；trizlreagent購自美國znvitrgen公司；反轉(zhuǎn)錄試劑盒購自美國prega公司；taqdna聚合酶購自北京鼎國生物技術(shù)開展公司；淋巴細(xì)胞別離液購自北京鼎國生物技術(shù)開展公司；血管細(xì)胞黏附分子1引物購自上海生工生物工程技術(shù)效勞。1.2實(shí)驗(yàn)方法。n-喂普通飼料；模型組h-喂高脂飼料；辛伐他汀組f-喂高脂飼料；調(diào)脂湯組d-喂高脂飼料。以上4組喂飼周期為1個(gè)月，正常組、模型組灌胃生理鹽水1l/100g.d;調(diào)脂湯組給與調(diào)脂湯水煎液1l/100g.d，辛伐他汀組給與辛伐他汀混懸液0.571g/100g.d，各組喂食飼料不變，各組均灌胃1個(gè)月。t、

4、低密度脂蛋白膽固醇ldl-程度。取大鼠主動(dòng)脈組織標(biāo)本50g，用sp免疫組織化學(xué)法檢測(cè)va-1，trizl一步法提取主動(dòng)脈組織總rna，并進(jìn)展逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒错憆t-pr檢測(cè)。血管細(xì)胞黏附分子引物序列如下：正義，5-ggtatggtaagtgtttg-3；反義，5-agaaataaag-3，預(yù)計(jì)擴(kuò)增產(chǎn)物長度560bp。反響參數(shù)：預(yù)變性，95，2in，變性，95，1in，退火，59，1in，延伸，72，1in。反響進(jìn)展32個(gè)循環(huán)，未延伸72，5in。取10l擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)展2g/l瓊脂糖凝膠電泳，紫外線下掃描記錄電泳結(jié)果。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。數(shù)據(jù)處理以計(jì)量資量用xs表示，多組間比較用方差分析。以p0

5、.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異有顯著意義。2結(jié)果2.1血脂測(cè)定。各組均與灌胃前及灌胃1個(gè)月后尾靜脈采靜脈血檢測(cè)，甘油三酯tg、低密度脂蛋白膽固醇ldl-，觀察血脂變化。灌胃前及灌胃1個(gè)月后血脂變化程度見表1、表2：表1灌胃前各組血脂程度l/l(xs)*與n組比較有顯著差異p0.05灌胃前各組與n組比較，t、ldl-及hdl-均顯著升高p0.05，說明高血脂大鼠模型復(fù)制成功。表2灌胃1個(gè)月后各組血脂程度l/l(xs)*與n組比較有顯著差異p0.05，#與h組、f組比較有顯著差異p0.05。灌胃1個(gè)月后各組與n組比較，t、ldl-及hdl-均顯著升高p0.05；但d組t、ldl-值較h組降低，差異具有顯著意

6、義p0.05，與f組比較略高。2.2用sp免疫組織化學(xué)法檢測(cè)va-1,以逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒错憆t-pr檢測(cè)va-1的表達(dá)。見表3表3各組動(dòng)物單個(gè)核細(xì)胞中va-1的表達(dá)情況*與n組比較，va-1的表達(dá)明顯增高，#與h組比較，va-1的表達(dá)明顯減少p0.05與n組比較，h組va-1的表達(dá)明顯增加p0.05；與h組比較，f組va-1的表達(dá)沒有明顯變化，而d組明顯減少va-1的基因表達(dá)p0.05。3討論關(guān)于as形成的機(jī)制，很多學(xué)者認(rèn)為，食用高膽固醇和飽和脂肪酸飲食后，小的脂蛋白顆粒在動(dòng)脈內(nèi)膜積聚，這些蛋白顆粒修飾動(dòng)脈內(nèi)膜的蛋白多糖，易于形成聚合物，與蛋白多糖結(jié)合的脂蛋白顆粒更容易被氧化和其他的化學(xué)修

7、飾，這是as發(fā)病的重要環(huán)節(jié)。as的另一個(gè)特征是白細(xì)胞黏附聚集也發(fā)生在病變形成的早期。內(nèi)皮細(xì)胞外表表達(dá)的黏附分子參與單核細(xì)胞與t淋巴細(xì)胞向內(nèi)膜的黏附過程。主要有兩大類黏附分子：免疫球蛋白超家族如血管細(xì)胞黏附分子-1va-1，細(xì)胞間黏附分子-1(ia-1)；另一類是選擇素，炎癥是動(dòng)脈血栓形成各階段的特征，是斑塊形成和急性破裂而導(dǎo)致動(dòng)脈閉塞和梗死的關(guān)鍵病理生理學(xué)機(jī)制。高脂血癥引發(fā)血管內(nèi)皮功能障礙，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)多種黏附分子，使其外表呈異常高粘性。細(xì)胞間黏附分子-1ia-1是與動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)的重要黏附分子之一1。而血管細(xì)胞黏附分子-1va-1屬于免疫球蛋白超家族成員，主要表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞、淋巴細(xì)

8、胞、單核細(xì)胞，其能促進(jìn)免疫細(xì)胞浸潤，使單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞粘附于內(nèi)皮，然后移入內(nèi)皮下，單核細(xì)胞分化為巨噬細(xì)胞，表達(dá)識(shí)別x-ldl的清道夫受體，使膽固醇沉積失去限制，形成泡沫細(xì)胞進(jìn)而促進(jìn)as的發(fā)生2。在研究as的形成過程中，內(nèi)皮細(xì)胞超微構(gòu)造及ia-1的表達(dá)發(fā)生了明顯的動(dòng)態(tài)變化3，說明超微構(gòu)造改變與as發(fā)生開展的關(guān)系，他汀干預(yù)as形成中超微構(gòu)造的影響4。黏附分子的表達(dá)受細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)，白細(xì)胞介素-1il-1可激活內(nèi)皮細(xì)胞使黏附分子表達(dá)增加，并可直接損傷內(nèi)皮細(xì)胞，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。有研究顯示，許多單味和復(fù)方中藥可以有效的使細(xì)胞黏附分子的表達(dá)減少，為as的防治開拓了廣闊的前景5。調(diào)脂湯由青半夏、陳皮、云苓、

9、澤瀉、膽星、丹參、瓜蔞、白術(shù)、山楂、甘草、茵陳、郁金、僵蠶、萊菔子組成，具有益氣活血、祛郁化痰、利水滲濕之成效。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，調(diào)脂湯可降低高血脂大鼠的血清t和ldl-的程度，延緩as斑塊的形成；可降低血清細(xì)胞黏附分子的程度，減少va-1的表達(dá)，更好的抑制單核細(xì)胞的浸潤和免疫黏附，從而預(yù)防as的發(fā)生。參考文獻(xiàn)1孔林霍清萍細(xì)胞間黏附分子-1在動(dòng)脈粥樣硬化中的表達(dá)及中醫(yī)藥防治進(jìn)展中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志202112胡俊沈中晨翁新楚三七毛根總皂甙對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血脂及主動(dòng)脈血管細(xì)胞黏附分子-1rna表達(dá)的影響第九屆全國中藥和天然藥物學(xué)術(shù)研討會(huì)大會(huì)報(bào)告及論文集20223劉惠亮楊躍進(jìn)何玉輝紀(jì)小龍動(dòng)脈粥樣硬化形