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文檔簡介

1、ET-NiV G:NiV F重組載體的誘導(dǎo)表達(dá)與NiV G和NiV F蛋白的純化Inducing vector pET-NiV G:NiV F to express and purification of target proteins NiV G and NiV F 報告人： 導(dǎo) 師：研究背景目的及意義實驗方法實驗結(jié)果討論與結(jié)論致謝研究背景尼帕病毒腦炎是一種高度烈性人畜共患傳染病。目前我國雖然沒有該病爆發(fā)，但其已經(jīng)對我國構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。目的及意義 以大腸桿菌O BL21表達(dá)重組載體（pET-NiV G:NiV F重組載體），以IPTG作為誘導(dǎo)引物誘導(dǎo)目蛋白的表達(dá)，之后對目的蛋白（尼帕病毒粘附

2、蛋白G和融合蛋白F) ，進(jìn)行分離及純化。實驗方法 pET-NiV G:NiV F重組載體轉(zhuǎn)入感 受態(tài)工程菌BL21目的基因的誘導(dǎo)表達(dá)目的蛋白的提取目的蛋白的鑒定三、目的蛋白的提取 用超聲處理法破碎細(xì)胞，并用尿素反復(fù) 溶解可溶性的雜質(zhì)蛋白，以獲取較純凈的目的蛋白，并在各個階段提取純化樣品。四、目的蛋白的鑒定 對蛋白樣品進(jìn)行SDS電泳和 Western-blot鑒定。 實驗結(jié)果一、誘導(dǎo)表達(dá)NiV F蛋白及純化結(jié)果目的蛋白表達(dá)并且通過處理后獲取較純凈的蛋白實驗討論與結(jié)論 實驗討論：實驗獲取的目的蛋白依然含有較多的雜質(zhì)，如果對純化后的產(chǎn)物進(jìn)行過柱處理，特異性的保留目的蛋白，可獲取更為純凈的目的蛋白。 實驗結(jié)論：本實驗成功的獲取了較純凈的目的蛋白，并可用于免疫

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