低鉀加重大鼠心肌細(xì)胞再灌注損傷的機(jī)制

1、低鉀加龐大鼠心肌細(xì)胞再灌注損傷的機(jī)制韋耿澤王波，金振曉，武峰，胡玉珍，周京軍【關(guān)鍵詞】低鉀；鈉ehanisflK+bufferaggravatingreperfusininjuryinratventriularyytes【Abstrat】AI:TstudytherlefaliusillatinsinrexygenatininjuryinduedbyperfusinithalK+bufferinislatedratventriularyytes.ETHDS:Theellserefirstlysubjetedtetabliinhibitinandanxiafr25in,thenreperfused

2、ithnralK+(5.4l/L)rlK+(3.0l/L)TyrdeslutinintheabsenerpresenefKBR7943,aseletiveinhibitrfthereversedeNa+/a2+exhanger(NX).Thehangesfa2+iereeasuredithspetrfluretry,usingFura2asa2+indiatr.Thehangesinelllengtherenitredandexpressedasareveryratefelllengththrughthefrula(endreperfusinlength-endisheialength)/(i

3、nitiallength-endisheialength)100%,refletingthereperfusininjury.RESULTS:paredithnralK+reperfusingrup,reperfusiniththelK+TyrdeslutinsuppressedthereveryfelllengthP0.01,lK+:(24.306.01)%vsnralK+:(54.506.56)%,n=6andinreasedthettalnuberfa2+sillatinsP0.01,lK+:(138.809.54)vsnralK+:82.308.16,n=6.Hever,theseef

4、fetsinduedbylK+reperfusineresignifiantlyattenuatedinthepresenef10l/LKBR7943P0.01vslK+ithutKBR7943,n=6;a2+sillatins:27.406.76,reveryfelllength:(58.907.30)%,respetively.NLUSIN:ReperfusinithlK+bufferinreasesreversedeNXativities,hihresultsinaninreasedaliusillatins,thusaggravatingardiainjury.【Keyrds】ptas

5、siudefiieny;NX;ventriularyyte;aliu/etablis【摘要】目的：不雅察低鉀灌流液對大鼠心肌細(xì)胞再灌注時鈣震蕩的影響并探究其作用機(jī)制.要領(lǐng)：a2+熒光指示劑Fura2標(biāo)識表記標(biāo)幟心肌細(xì)胞，在代謝按捺并低氧25in后，改用低鉀臺氏液K+=3.0l/L灌流，記載細(xì)胞鈣震蕩的變革.以再灌注末期細(xì)胞長度缺血末期細(xì)胞長度缺血前細(xì)胞長度缺血末期細(xì)胞長度100%反響再灌注后細(xì)胞長度的規(guī)復(fù)狀態(tài).效果：與含正常鉀濃度的灌流液比擬組K+=5.4l/L比擬，在再灌注10in內(nèi)，低鉀灌流液組出現(xiàn)鈣震蕩的次數(shù)明顯增長(P0.01，低K+組：138.809.54vs比擬組：82.308.1

6、6，n=6)，心肌細(xì)胞長度的規(guī)復(fù)明顯被按捺P0.01，低K+組：(24.306.01)%vs比擬組：(54.506.56)%，n=6；再灌注期間賜與鈉鈣互換體反向互換形式按捺劑KBR7943，可明顯按捺低鉀溶液對鈣震蕩和細(xì)胞長度的影響P0.01vs低K+組，n=6；鈣震蕩：27.406.76和細(xì)胞長度規(guī)復(fù)：(58.907.30)%.結(jié)論：低鉀再灌注液通過加強(qiáng)反向鈉鈣互換體活性加重鈣震蕩，進(jìn)而引發(fā)心肌損傷.【關(guān)鍵詞】低鉀；鈉鈣互換體；鈣震蕩；心肌細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)鈣a2+i超載是缺血心肌在再灌注歷程中細(xì)胞凋亡、壞死、以及心成效低落的緊張緣故原由1.鈉鈣互換體sdiualiuexhanger，NX是到場維

7、持心肌鈣穩(wěn)態(tài)的緊張轉(zhuǎn)運(yùn)體.研究創(chuàng)造，在缺血再灌注早期激活NX反向互換形式a2+進(jìn)入細(xì)胞，將促發(fā)心肌a2+i超載，導(dǎo)致心肌損傷2-3.如今，Zhang等4接納膜片鉗技能不雅察到，K+升高可按捺NX反向互換電流，而K+低落那么起促進(jìn)作用.假設(shè)再灌注早期K+低落K+喪失，大概會通過促發(fā)NX反向互換引起心肌a2+i超載，從而加重心肌損傷.本實(shí)行接納雙引發(fā)熒光光電倍增體系檢測細(xì)胞a2+i的要領(lǐng)，不雅察低鉀灌流液對缺血后再灌注早期心肌a2+i震蕩的影響，旨在探究其大概的機(jī)制.1質(zhì)料和要領(lǐng)1.2要領(lǐng)2效果2.2低K+臺氏液再灌注后心肌細(xì)胞長度規(guī)復(fù)的變革以及反向NX按捺劑的影響代謝按捺和無氧處置懲罰末期，桿狀

8、心肌細(xì)胞長度較缺血前收縮(403)%.在低K+臺氏液再灌注后，細(xì)胞長度的規(guī)復(fù)明顯低于比擬組，兩組的長度規(guī)復(fù)別離為(54.506.56)%和(24.306.01)%P0.01，n=6，圖2.再灌注時參加10l/L反向NX按捺劑KBR7943后，低K+臺氏液對細(xì)胞長度的影響明顯削弱，細(xì)胞長度規(guī)復(fù)58.97.3%P0.01vs低K+組；n=6，圖2.3討論本實(shí)行初次不雅察到：缺血后應(yīng)用低K+液灌流，細(xì)胞產(chǎn)生鈣震蕩的頻率明顯增長，與細(xì)胞長度規(guī)復(fù)呈反相干系；參加反向NX按捺劑后，低K+灌流液對細(xì)胞鈣震蕩和細(xì)胞長度的影響顯著受到按捺.上述效果表白，缺血后低K+灌流液通過激活反向NX活性，加劇a2+i超載，

9、從而加重心肌損傷.實(shí)行表現(xiàn)，改變灌流液中鉀離子濃度將影響細(xì)胞鈣震蕩的頻率.由于NX是到場鈣震蕩形成的緊張分子，上述效果提示細(xì)胞外鉀離子濃度K+大概通過調(diào)治NX的互換活性影響鈣震蕩的形成.實(shí)行中我們應(yīng)用反向NX按捺劑KBR7943，創(chuàng)造低K+對鈣震蕩的加強(qiáng)作用顯著削弱，表白改變K+能影響NX的活性.這與Zhang等4人的研究效果相符合.如今以為，再灌注早期鈣震蕩的形成是由于此時舒張期a2+i顯著升高，大量a2+在胞質(zhì)和肌漿網(wǎng)之間循環(huán)造成的.已經(jīng)證明，通過按捺NX反向互換形式淘汰a2+進(jìn)入細(xì)胞將淘汰產(chǎn)生鈣震蕩的產(chǎn)生，從而庇護(hù)心肌細(xì)胞2.本實(shí)行創(chuàng)造，低K+明顯增長大鼠左心室肌細(xì)胞鈣震蕩的頻率，按捺心

10、肌細(xì)胞長度的規(guī)復(fù)，加重心肌的損傷，而NX反向互換形式按捺劑KBR7943可以顯著削弱K+的損傷作用，說明K+的損傷作用與加強(qiáng)NX反向互換活性有關(guān).然而K+的這種作用是通過何種機(jī)制如今仍不明晰.NX互換標(biāo)的目的取決于膜兩側(cè)Na+和a2+電化學(xué)梯度以及細(xì)胞膜電位7-9.改變K+將有大概通過影響上述因素而間接影響NX的互換形式.因此低K+再灌液是直接照舊間接調(diào)控NX另有待進(jìn)一步研究.【參考文獻(xiàn)】1Tani,NeelyJR.ehanissfreduedreperfusininjurybyla2+and/rhighK+J.AJPhysil，1990,258(4Pt2):H1025-1031.2Shafe

11、r,LadilvY,InserteJ,etal.RlefthereversedeftheNa+/a2+exhangerinrexygenatininduedardiyyteinjuryJ.ardivasRes，2001,51(2):241-250.3EigelBN,HadleyR.AntisenseinhibitinfNa+/a2+exhangeduringanxia/rexygenatininventriularyytesJ.AJPhysilHeartirPhysil，2001,281(5):H2184-2190.4ZhangYH,HanxJ.Evidenefradulatryeffetfe

12、xternalptassiuinsniniurrentediatedbytheardiaNa+a2+exhangerJ.ellaliu，2022,33(1):49-58.5張博,岑嶺,張海鋒，等.胰島素促進(jìn)模擬缺血/再灌注心肌細(xì)胞緊縮成效規(guī)復(fù):Akt的關(guān)鍵作用J.科學(xué)轉(zhuǎn)達(dá)，2022,48(10):1045-1049.6NiuJ,HuQ,ZhangB.Freea2+easureentinulturedardiaellsbyiaginetehniqueithFura2/AJ.hinJPhysed，1997,19(2):92-94.7BlausteinP,LedererJ.Sdiu/aliuexhange:ItsphysilgialipliatinsJ.PhysilRev，1999,79(3):763-854.8BazkI,GilesR,LightPE.Restingebraneptentialregul