PCR實驗室管理制度

1、時間：二 O 二一年七月二十九日PCR 實驗管理制之巴公開創(chuàng)作1.0時間：二 二年七月二十九日 目建立 PCR 實室工規(guī)范確分診斷室正常工作.3.04.05.05.15.25.2.15.2.25.2.3范圍PCR 實室包試準(zhǔn)間、標(biāo)本制備間、擴(kuò)增間的使用 及管理職責(zé)PCR 實室工人必需遵守本文件的規(guī)定內(nèi)容在進(jìn)入實驗室前在離戴好頭套口罩穿鞋與實驗 服試劑準(zhǔn)備間配電房先翻開風(fēng)機(jī)（先開風(fēng)機(jī),再排風(fēng)機(jī)）再把空 調(diào)系統(tǒng)翻開關(guān)時順序相反其它室的用品不得帶入本.從 PCR 實室 1 號入口進(jìn)入實驗室達(dá)試劑準(zhǔn)備間時間：二 O 二一年七月二十九日5.2.45.2.55.2.65.2.75.2.85.35.3.1時

2、間：二 O 二一年七月二十九日的緩沖間,脫下白色工服掛在緩沖間的左側(cè),在緩沖間的右側(cè)更換試劑準(zhǔn)備間專用工作服（藍(lán)色）進(jìn)入試劑準(zhǔn)備間實中戴一次性手套手常換翻開已滅菌的超凈臺通風(fēng)一段時,走臭氧.取出當(dāng)次實驗需配制和使用的試,其試劑要立即收好放回 冰箱內(nèi)把持應(yīng)在冰上進(jìn)行Taq 酶盡量在配液的最后一步加入.應(yīng)減少 dNTP 反凍融的.每次實驗后將槍調(diào)至最年夜量程加板翻開廢缸蓋加完模板后務(wù)必蓋上廢 液缸的蓋子實驗作業(yè)完成時應(yīng)及時理工作,做實掛號應(yīng)使用本室專用的記錄本和,翻超凈臺的紫外燈旋鈕到 20 分處使過的離管、吸頭須置于 3%的 HCl 溶 液中浸泡、消毒后方可棄.翻開傳遞窗門墊一性手套將好試劑放到

3、傳遞 窗里,關(guān)上傳遞窗門在試劑緩沖間脫下工作服穿上白色工作服.標(biāo)本制備間在標(biāo)本制備間的緩沖間脫下白色工作,換標(biāo)制備時間：二 O 二一年七月二十九日5.3.25.3.35.3.45.3.55.3.65.3.75.45.4.15.4.2時間：二 O 二一年七月二十九日間專用的工作服（粉紅色,進(jìn)標(biāo)本制備.翻開傳遞窗的門取出配的試劑,使用本區(qū)專用的加樣 器和帶濾芯槍頭實驗作業(yè)完成時應(yīng)及時理工作,使過離心管、帶濾芯槍頭須置于 3%的 HCl 溶中浸泡、消毒后方可棄 之做好實驗掛號應(yīng)用室專用的記錄本和筆翻超凈 臺的紫外燈旋鈕到 20 分.翻開傳遞窗門墊一性手套將好試劑放到傳遞 窗里,關(guān)上傳遞窗門提取基因組

4、模板提取過中拋棄的槍頭、離心管和廢液請拋棄在此垃圾袋并于驗結(jié)束后立即將垃圾袋扎口拋棄.提取質(zhì)?？上忍崛∩唾|(zhì)粒再提取突變型質(zhì). 每次提取工作完成后擦拭.在試劑緩沖間脫下工作服穿上白色工作服.擴(kuò)增間在擴(kuò)增間的緩沖間脫白色工作,上擴(kuò)增間專用工 作服（綠色）翻開傳遞窗門取配的試劑關(guān)傳窗門時間：二 O 二一年七月二十九日5.4.35.4.45.4.55.4.65.4.75.4.85.55.5.15.65.6.1時間：二 O 二一年七月二十九日翻開 PCR 儀預(yù)熱 20min.將反應(yīng)管放入 PCR 儀中,關(guān).脫失落手套設(shè)法式,并命.結(jié)束后需待儀器冷卻后方取出 PCR 儀的試劑取出時用鑷子將試劑條夾出注意

5、勿要使管蓋翻,用個 PE手套包好方可棄之機(jī)上不允許寄存 PCR 增產(chǎn)物,每 次實驗后請自行及時清理 PCR 擴(kuò)產(chǎn).結(jié)束實驗后到電先把空調(diào)系統(tǒng)關(guān)失,再失排 風(fēng)機(jī),之后關(guān)失落送風(fēng)機(jī)文件的處置：當(dāng)天所做的驗結(jié)果當(dāng)拷到部份電腦上處置復(fù)一將文件改為記錄本上的命名可將試 驗結(jié)果導(dǎo)到 PPT 上并識記標(biāo).傳遞窗的使用傳遞窗每天早上滅菌 20 分一.當(dāng)使可不用再次滅菌.將試劑放到傳遞窗,在下上一層手套. 壓力監(jiān)控每天早上空調(diào)運(yùn)行半小時,記各 PCR 實驗的力差：試劑準(zhǔn)備間：10標(biāo)本制備間： -5-10；擴(kuò) 增間：-10. 各沖的壓力+5.時間：二 O 二一年七月二十九日實 驗試槍 頭盒 槍頭盒放 置標(biāo)的離心時

6、間實 驗試槍 頭盒 槍頭盒放 置標(biāo)的離心5.75.8超凈臺的擺放經(jīng)常使的 實驗室衛(wèi)生管理移液槍消 毒液5.8.15.8.25.8.35.8.45.8.55.8.6禁止非工作人員進(jìn)入實驗；觀賞實驗室等特殊情況須在 實驗室管理員協(xié)助下進(jìn)行實驗室內(nèi)各工作人員應(yīng)有人防護(hù)意識 ,進(jìn)入實驗室時 液缸更換工作服和鞋子 ,穿整潔 ,不長指甲 ,不佩戴首飾長發(fā)應(yīng)束于腦后；禁止在工區(qū)飲食、吸煙、處置隱形眼鏡、化妝及貯存食物；禁將個人物品帶入實驗室；實驗室內(nèi)應(yīng)防止手口手眼手鼻接,以止接感染實驗結(jié)束后仍需保管使用物質(zhì) ,應(yīng)入具塞的容器中 ,并做好標(biāo)識標(biāo)簽 , 并清名稱、濃度、配制日期、貯存溫度、有效期和配制人 ,并放

7、于相應(yīng)保管條件下；勿置室 溫過夜每天配制使用濃度的消毒 放于固定地址,用于污染時消 毒用,應(yīng)按期更換消毒液種.每天上班 8 點(diǎn) 45 分關(guān)實驗室紫外燈然后開啟風(fēng)扇翻開實驗室走廊窗戶每天 點(diǎn)每間負(fù)責(zé)人填寫冰箱 溫濕度記錄表下午 4 點(diǎn) 45 分每負(fù)人填寫實驗室及冰箱溫濕度記時間：二 O 二一年七月二十九日5.8.75.8.85.8.95.8.105.8.115.8.125.8.13時間：二 O 二一年七月二十九日錄表,清理實驗室衛(wèi)生,檢實驗室垃圾及廢液缸槍尖生物垃圾放置于生物平安圾桶內(nèi)通專門的垃圾轉(zhuǎn)運(yùn)車進(jìn)行清除在物安垃圾桶周邊噴灑 84 消液 （按 1:9 或者 1:10 比例配制.每日衛(wèi)生清掃

8、完后在驗室內(nèi)噴灑 84 消液,噴灑完,待 20 分過后,對驗儀器概況及實驗臺面要用干布擦拭一遍,再用清水清一遍,止儀器被腐蝕.儀器反應(yīng)孔用 75%酒精棉擦,擦拭完后用清水擦拭關(guān)閉風(fēng)扇,開啟紫外燈過夜關(guān)閉實驗室走廊窗戶噴 84 消液第一、二間實驗室的 3%鹽酸在實驗室內(nèi)配,由周 日人員負(fù)責(zé)實驗服的清洗時間為每月 、2、3、15、17日1、15 日洗一間實,2 日洗第二間實驗 服3、17 日洗三間實,遇假日順.每周對回風(fēng)口過濾網(wǎng)進(jìn)行由當(dāng)周值日人員負(fù)責(zé)如遇加班,以上由加班員負(fù)責(zé)；若有請,請人需 與其他人員協(xié)商調(diào)整否則視為未執(zhí).以上執(zhí)行情況每天都應(yīng)填記錄表并專人檢查確認(rèn)時間：二 O 二一年七月二十九日6.1.16.1.26.1.36.1.46.1.56.1.6時間：二 O 二一年七月二十九日簽字.注意事項PCR 實室室用進(jìn)入及單一流向制度,請位技術(shù)員不要貪方便嚴(yán)依規(guī)程把,免