蔬菜中維生素c的測定

1、蔬菜中維生素的測定制作人：薛欽時間：年月日一、實驗背景維生素又叫抗壞血酸，是一種水溶性維生素。食物中的維生素被人體小腸上段吸收。一旦吸收，就分布到體內(nèi)所有的水溶性結(jié)構(gòu)中，正常成人體內(nèi)的維生素代謝活性池中約有維生素，最高儲存峰值為維生素C正常情況下，維生素絕大部分在體內(nèi)經(jīng)代謝分解成草酸或與硫酸結(jié)合生成抗壞血酸硫酸由尿排出；另一部分可直接由尿排出體外。維生素的作用：1促進骨膠原的生物合成。利于組織創(chuàng)傷口的更快愈合。2促進氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代謝，延長肌體壽命。3改善鐵、鈣和葉酸的利用。4改善脂肪和類脂特別是膽固醇的代謝，預(yù)防心血管病。、促進牙齒和骨骼的生長，防止牙床出血，防止關(guān)節(jié)痛、腰腿痛。、

2、增強肌體對外界環(huán)境的抗應(yīng)激能力和免疫力。7水溶性強抗氧化劑，主要作用在體內(nèi)水溶液中。二、實驗?zāi)康娜祟悹I養(yǎng)中最重要的維生素之一。缺乏時引起壞血病。維生素含量可作為植物抗衰老和抗逆境的重要生理指標(biāo)，也可作為果品質(zhì)量、選育良種的鑒別指標(biāo)。水果、蔬菜保鮮貯藏必須測定維生素含量，了解果蔬品質(zhì)量的高低。了解和掌握二氯酚靛酚測定維生素含量的原理和方法。三、實驗原理2-二氯靛酚是一種染料，其顏色反應(yīng)表現(xiàn)為兩種特性。一是取決于氧化還原狀態(tài)，氧化態(tài)為深藍(lán)色，還原態(tài)為無色；二是受其介質(zhì)酸度的影響，在堿性介質(zhì)中呈深藍(lán)色，在酸性溶液介質(zhì)中呈淺紅色。用藍(lán)色的堿性染料標(biāo)準(zhǔn)液，滴定含的酸性浸出液，染料被還原為無色，到達(dá)終點時

3、，微過量的、一二氯靛酚染料在酸性溶液中呈淺紅色即為終點。從染料消耗量即可計算出試樣中還原型抗壞血酸量。二氯酚靛酚滴定法維生素強的還原性將染料還原成無色的二氯酚靛酚二氯酚靛酚強的氧化性中性堿性藍(lán)色酸性紅色維生素CHOHOClO=NO-ICl氧化型二氯酚靛酚（紅色）ClO=NOICl氧化型二氯酚靛酚（藍(lán)色）ClTOC o 1-5 h zHNOIIClH還原型二氯酚靛酚（無色）四、不同的測定方法、目前研究維生素測定方法的報道較多有關(guān)維生素的測定方法。熒光法。2二氯靛酚滴定法。2二硝基苯肼法。分光光度分析法。碘量法。熒光法原理樣品中還原型抗壞血酸經(jīng)活性炭氧化成脫氫型抗壞血酸后，與鄰苯二胺反應(yīng)生成具有熒

4、光的喹喔啉其熒光強度與脫氫抗壞血酸的濃度在一定條件下成正比，以此測定食物中抗壞血酸和脫氫抗壞血酸的總量。脫氫抗壞血酸與硼酸可形成復(fù)合物而不與鄰苯二胺反應(yīng)，以此排除樣品中熒光雜質(zhì)所產(chǎn)生的干擾。本方法的最小檢出限為。本方法適用于蔬菜、水果及其制品中總抗壞血酸的測定。2二硝基苯肼法原理總抗壞血酸包括還原型、脫氫型和二酮古樂糖酸。樣品中還原型抗壞血酸經(jīng)活性炭氧化為脫氫抗壞血酸，再與2二硝基苯肼作用生成紅色脎，脎的含量與總抗壞血酸含量成正比，進行比色測定。本方法適用于蔬菜、水果及其制品中總抗壞血酸的測定。碘量法原理維生素包括氧化型、還原型和二酮古樂糖酸三種。當(dāng)用碘滴定維生素時，所滴定的碘被維生素還原為碘

5、離子。隨著滴定過程中維生素全被氧化，所滴入的碘將以碘分子形式出現(xiàn)。碘分子可以使含指示劑（淀粉）的溶液產(chǎn)生藍(lán)色，即為滴定終點。由于維生素分子中的烯二醇基有極強的還原性，能被碘氧化，用碘滴定C分光光度分析法原理：維生素在空氣中尤其在堿性介質(zhì)中極易被氧化成脫氫抗壞血酸。通過吸收光譜曲線法確定維生素的水溶液的最大吸收波長為7進而通過工作曲線法快速測定蔬菜水果中維生素的含量。本方法與常規(guī)方法比較，具有準(zhǔn)確、快速、穩(wěn)定、試劑易得等優(yōu)點。五、儀器試劑與樣品新鮮生菜滴定管、三角瓶、研缽、量筒、移液管離心機草酸溶液：稱取草酸，加水至0碘化鉀溶液。標(biāo)準(zhǔn)溶液。2二氯酚靛酚溶液?？箟难針?biāo)準(zhǔn)溶液。六、實驗步驟2二氯酚

6、靛酚標(biāo)準(zhǔn)液的標(biāo)定吸取抗壞血酸溶液置于錐形瓶中，加草酸，搖勻，用2二氯酚靛酚滴定至溶液呈淡紅色。在不消失為終點。計算出染料相當(dāng)于多少毫克抗壞血酸（取草酸作空白對照）計算滴定度T1=匕/T每mL2,6二氯靛酚溶液相當(dāng)于維生素C的毫克數(shù)；C建生素C標(biāo)準(zhǔn)使用液的濃度，mg/niL：V標(biāo)定時吸取維生素C標(biāo)準(zhǔn)性用液的體積，mL；Vi一滴定抗壞血酸溶液消耗2,6二氯靛酚的溶液的體積，niLo近一滴定空白所用2,6二氯靛酚溶液的體積，mL口維生素的提取和測定1稱取新鮮生菜樣品，置研缽中，分次加草酸，研成勻漿，用的草酸定容。通過紗布過濾后取放于離心機中離心吸取上清使用。、吸取濾液，放入三角瓶中，立即用已標(biāo)定的2

7、二氯酚靛酚溶液滴定至出現(xiàn)明顯的粉紅色在內(nèi)不消失為止。記錄所用滴定液體積。另取草酸作空白對照實驗。七、結(jié)果計算維生素C含量（V）XTCmg/100g）=viX100滴定空白所用染料溶液的體積，滴定樣品所用染料溶液的體積，二氯酚靛染料溶液的滴定度樣品的質(zhì)量，一二氯靛酚溶液的標(biāo)定IIIIII平均值滴定樣液時消耗染料溶液的體積，mL滴定空白時消耗染料溶液的體積，mL稱我勻漿相當(dāng)二原樣品的質(zhì)量，g樣品中維生素含量的測定I11III平均值滴定標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸使用溶液消耗26二氯靛酚的溶液的體積，mL清定空白所月2、6二氯靛酚溶液的體積，吼標(biāo)定酎吸取維生素C標(biāo)準(zhǔn)使用液的體積，ml維生素C標(biāo)準(zhǔn)使用液的濃度，tug

8、/mL每此2,6二氯靛酚溶液相當(dāng)于維生素C的毫T_cxV_克數(shù)一可7r滴定空白所用染料溶液的體積，滴定樣品所用染料溶液的體積，吸取維生素標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，八、注意事項、本法測定的結(jié)果為食品中的還原型抗壞血酸含量，而非維生素總量。此法是測定還原型抗壞血酸最簡便的方法，適合于大批果蔬，但對紅色果蔬不太適宜。、維生素在酸性條件下較穩(wěn)定，故樣品處理或浸提都應(yīng)在弱酸性環(huán)境中進行。浸提劑以偏磷酸穩(wěn)定維生素效果最好，但價格較貴。一般可采用草酸代替偏磷酸，價廉且效果也較好。、不穩(wěn)定，在空氣中易被氧化，研磨時，盡可能要快，以減少的氧化。4樣品處理過程中加入等量的草酸，目的是抑制抗壞血酸氧化酶，避免維生素氧化損失，

9、也可用偏磷酸代替。5某些水果、蔬菜（如橘子、西紅柿等）漿狀物在容量瓶中泡沫太多，可加入戊醇滴消除之。6同法作空白實驗，消除系統(tǒng)誤差。操作要迅速，防止還原型維生素被空氣中的氧化。滴定過程一般不超過。滴定所用的染料不應(yīng)小于或多于，如果樣品含維生素太高或太低時，可酌情增減樣液用量或改變提取液稀釋度。干擾滴定因素有:1色素若提取液中色素很多時，滴定不易看出顏色變化，可用白陶土脫色，或加氯仿，到達(dá)終點時，氯仿層呈現(xiàn)淡紅色。2可還原二氯酚靛酚。對含有大量的樣品可用乙酸溶液代替草酸溶液提取，此時不會很快與染料起作用。3維生素提取時要避光、避免與銅鐵接觸，以免氧化。九、實驗結(jié)果與討論1為什么在測定維生素的同時要進行溶液的標(biāo)定？2為了保