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文檔簡介

1、蟾蜍坐骨神經干電生理實驗陳明健 計彩紅 嚴旭婷(浙江大學臨床醫(yī)學系09級 1C班第八組 3090103840 )【摘要】目的 測定蟾蜍坐骨神經干復合動作電位(compound action potential ,CAP) ,研究蟾蜍坐骨神經干的電生理特性、雙相動作電位形成機制及神經損傷、藥物對神經興奮傳導的影響。 方法 應用微機生物信號采集處理系統(tǒng)通過電生理的方法來測定蛙類坐骨神經干的單相、雙相動作電位的振幅、時程和其中類纖維沖動的傳導速度,并通過夾傷神經和加藥物的方法來觀察對坐骨神經干的影響。結果 刺激電壓1.0V,刺激波寬0.1ms時,中樞端引導的動作電位正相波和負相波振幅分別為3.990

2、.64mV和2.430.66mV,正相波振幅A1chp 大于負相波振幅A1chn ,兩者有高度顯著性差異(P0.01);動作電位正相時程1.410.18mV顯著短于負相時程2.650.45mV,兩者有高度顯著性差異(P0.01),末梢端引導的動作電位正相波振幅3.131.55mV大于負相波振幅1.430.46mV, 兩者有顯著性差異(P0.01);動作電位正相波時程2.020.28ms顯著短于負相波時程3.140.93ms,兩者有顯著性差異(P0.01)。刺激電壓1.0V,刺激波寬0.1ms,引導電極間距等于10mm、20mm和30mm時,末梢端引導的動作電位正相振幅分別A10p為9.052.

3、28 mV、A20p為11.993.44 mV、A30p為12.193.52 mV,A30p、A20p大于A10p ,有高度顯著性差異( P0.05), A30n于A10n比有顯著性差異(P0.05)。用鑷子夾傷第1對引導電極間的神經干,刺激電壓1.0V時,測得單相動作電位振幅10.553.00mV大于雙相動作電位正相波振幅9.021.8mV,兩者有高度顯著性差異(P0.05);單相動作時程2.220.49顯著長于雙相動作電位正相1.230.11ms,兩者有高度顯著性差異(P0.05);3mol/L KCl處理前負相波振幅AKn為1.430.49mV,處理后2min負相波振幅AKn為0.650

4、.51mV,兩者相比有顯著性差異;3mol/L KCl 處理前正相波時程DKp為2.360.31ms,處理后2min DKp為2.410.38ms,兩者相比沒有顯著性差異(P0.05)3mol/L KCl處理前負相波時程DKn3.322.38,處理2min后負相波時程為3.150.94,兩者相比沒有顯著性差異(P0.05)。刺激電壓1.0V,4procaine處理前正相波振幅App為9.101.67mV,處理后5min App為10.021.76mV,兩者相比有顯著性差異(P0.05);4procaine處理前負相波振幅Apn為5.171.11mV,處理后5min 負相波振幅Apn為3.061

5、.14mV,兩者相比有高度顯著性差異;4procaine處理前正相波時程Dpp為1.240.14ms,處理后5min Dpp為1.290.15ms,兩者相比沒有顯著性差異;4procaine處理前負相波時程Dpn為2.710.52ms,處理后5min Dpn為3.310.93ms,兩者相比沒有高度顯著性差異。結論 在一定范圍內神經干動作電位振幅與刺激強度呈正相關,神經損傷、3mol/L KCl、procaine 阻斷神經的興奮傳導,興奮可在神經纖維上雙向傳導, 引導電極間距小于動作電位波長時,正相波和負相波疊加形成雙相動作電位?!娟P鍵詞】雙相動作電位,單相動作電位,KCl,procaine1.

6、材料和方法(Materials and methods)1.1實驗動物(laboratory animal) 蟾蜍(中華蟾蜍指名亞種,Zhuoshan Toad)1.2藥品(drug) 任氏液、4%普魯卡因、3mol/L 氯化鉀1.3 器材(Experimental apparatus) RM6240微機生物信號處理系統(tǒng)(RM6240 biolgical signal collecting system )(成都儀器廠)、神經干標本盒( nerve chamber )。1.4坐骨神經干制備( preparation of sciatic nerve trunk ) 蟾蜍毀腦脊髓,去上肢和內臟,

7、下肢剝皮浸于任氏液中。蟾蜍下肢背面向上置于蛙板上,剪去尾椎;標本腹面向上,用玻璃分針分離脊柱兩側神經叢,用線在近脊柱處結扎,剪斷神經;將神經干從腹面移向背面。標本背面向上固定,從大腿至跟腱分離坐骨神經。坐骨神經標本置任氏液中備用。1.5儀器連接和參數(Apparatus junction and parameter) 神經干標本盒兩對引導電極分別接微機生物信號處理系統(tǒng)1、2通道。 儀器參數:1、2通道時間常數0.02s、濾波頻率3KHz、靈敏度5mV,采樣頻率100KHz,掃描速度0.2ms/div。單刺激激方式,刺激幅度1.0V,刺激波寬0.1ms,延遲1ms,同步觸發(fā)。1.6 記錄動作電位

8、( Record action potential) 神經干標本置于標本盒的電極上,神經與電極接觸良好,調節(jié)刺激電壓,記錄動作電位。2.觀察項目(observations)2.1 測定中樞端引導的雙相動作電位(biphasic action potential, BAP) 用1.0V電壓,波寬0.1ms的單個方波激刺激神經干末梢端,觀察中樞端BAP正、負向振幅(amplitude,A)和時程(duration,D)2.2 測定末梢端引導的雙相動作電位 用1.0V電壓,波寬0.1ms的單個方波激刺激神經干中樞端,測定末梢端BAP正、負相振幅和時程。2.3興奮傳導速度的測定 用1.0V電壓,波寬0

9、.1ms的單個方波激刺激神經干中樞端,測定第1和第2對引導電極引導CAP起點的時間差t ,根據 S R1- R2- / t 計算出AP的傳導速度。2.4 引導電極間距離與動作電位振幅和時程的關系 用1.0V電壓,波寬0.1ms的單個方波激刺激神經干中樞端,測定第1對引導電極間距為10、20、30mm時的BAP正相振幅和時程。2.5 測定單相動作電位(monophasic action potential,MAP) 用鑷子夾傷對1對引導電極間的神經干,然后用1.0V電壓,波寬0.1ms的單個方波激刺激神經干中樞端,測定末梢端MAP振幅和時程。2.6 觀察刺激強度(U)與動作電位振幅的關系 刺激波

10、寬0.1ms,刺激電壓從0.1V開始, 按步長0.01V增加,刺激電壓每增加一次刺激神經干一次,并記錄刺激電壓和MAP振幅。2.7 測定KCl處理前后MAP振幅 刺激電壓1.0V,刺激波寬0.1ms,記錄 3 mol/L KCl 處理前,處理后2min時MAP的振幅。2.8 測定 procaine 處理前后BAP振幅 刺激電壓1.0V,刺激波寬0.1ms,記錄4 procain處理前,處理后5min時BAP的振幅。3.結果 (results)3.1 刺激電壓1.0V,刺激波寬0.1ms時,中樞端引導的動作電位正相波和負相波振幅分別為3.990.64mV和2.430.66mV,正相波振幅A1ch

11、p 大于負相波振幅A1chn ,兩者有高度顯著性差異(P0.01);動作電位正相時程1.410.18mV顯著短于負相時程2.650.45mV,兩者有高度顯著性差異(P0.01),末梢端引導的動作電位正相波振幅3.131.55mV大于負相波振幅1.430.46mV, 兩者有顯著性差異(P0.01);動作電位正相波時程2.020.28ms顯著短于負相波時程3.140.93ms,兩者有顯著性差異(P0.01)。見表1表1蟾蜍坐骨神經干中樞引導的復合動作電位sampleA1chp(mV)A1chn( mV)D1chp(ms )D1chn(ms )A2chp(mV)A2chn( mV)D2chp(ms

12、)D2chn(ms )14.86 2.93 1.13 2.03 6.39 1.746 1.88 2.63 25.13 3.68 1.32 2.63 3.86 1.04 2.22 2.40 33.54 1.34 1.36 2.11 1.70 0.81 1.61 3.42 43.85 2.41 1.32 2.94 4.03 1.47 2.27 3.32 54.24 2.60 1.20 2.96 5.07 2.30 2.01 5.32 63.22 2.14 1.59 2.25 1.95 1.44 1.63 2.27 73.48 2.65 1.71 3.25 1.86 1.03 2.35 3.27 8

13、4.25 2.59 1.50 2.94 2.87 1.66 1.92 3.04 94.70 1.75 1.17 1.92 5.52 1.81 1.87 2.29 103.52 2.74 1.51 2.86 1.31 1.31 2.29 2.91 x3.99 2.43 1.41 2.65 3.13 1.43 2.02 3.14 S0.64 0.66 0.18 0.45 1.55 0.46 0.28 0.93 xs3.990.642.430.661.410.182.650.453.131.551.430.462.020.283.140.930.00003 5.93134E-060.0025360.

14、0042120.1721 0.0021673.2 刺激電壓1.0V,刺激波寬0.1ms,引導電極間距等于10mm、20mm和30mm時,末梢端引導的動作電位正相振幅分別A10p為9.052.28 mV、A20p為11.993.44 mV、A30p為12.193.52 mV,A30p、A20p大于A10p ,有高度顯著性差異( P0.05), A30n于A10n比有顯著性差異(P0.05)。見表2.1、2.2表2.1引導電極間距離對坐骨神經干動作電位振幅的影響(mV)sampleA10pA10nA20pA20nA30pA30n18.65 3.70 13.89 8.18 14.45 4.26 27

15、.06 4.96 8.56 4.37 8.78 3.33 313.14 6.36 14.41 5.21 14.94 2.67 48.05 4.52 11.82 6.36 11.85 4.30 511.77 6.50 18.37 10.34 18.39 7.09 65.393.876.142.675.892.21710.58 5.94 14.18 6.31 14.24 3.19 89.53 4.89 11.82 5.74 12.04 3.44 98.35 3.21 10.55 5.96 10.72 2.91 108.00 5.86 10.11 4.37 10.56 3.37 x9.0524.98

16、111.9855.95112.1863.677S2.2804961.1611443.4418962.1313973.5211491.359698xs9.052.284.981.1611.993.445.952.1312.193.523.681.363.29093E-052.46186E-064.02925E-060.0007520.1919180.000524表2.2引導電極間距離對坐骨神經干動作電位時程的影響(ms)D10pD10nD20pD20nD30pD30n1.26 2.27 1.46 2.48 1.74 3.25 1.22 2.69 1.43 3.25 1.63 4.03 1.36

17、2.06 1.63 2.67 2.64 2.78 1.32 2.59 1.55 3.06 1.78 3.66 1.20 2.98 1.56 4.30 1.62 4.61 1.492.761.653.762.054.341.362.621.673.081.834.281.52 3.43 1.83 3.85 2.07 4.34 1.22 1.76 1.47 2.07 1.62 2.46 1.46 2.60 1.69 3.30 2.14 4.12 1.3412.5761.5943.1821.9123.7870.1179880.4675990.1240250.6721080.3214140.72888

18、11.340.122.580.471.590.123.180.671.910.323.790.737.46163E-060.0004618.10692E-060.0056693.3 用鑷子夾傷第1對引導電極間的神經干,刺激電壓1.0V時,測得單相動作電位振幅10.553.00mV大于雙相動作電位正相波振幅9.021.8mV,兩者有高度顯著性差異(P0.05);單相動作時程2.220.49顯著長于雙相動作電位正相1.230.11ms,兩者有高度顯著性差異(P0.05);3mol/L KCl處理前負相波振幅AKn為1.430.49mV,處理后2min負相波振幅AKn為0.650.51mV,兩者相比

19、有顯著性差異;3mol/L KCl 處理前正相波時程DKp為2.360.31ms,處理后2min DKp為2.410.38ms,兩者相比沒有顯著性差異(P0.05)3mol/L KCl處理前負相波時程DKn3.322.38,處理2min后負相波時程為3.150.94,兩者相比沒有顯著性差異(P0.05)。見表6表63mol KCl 對坐骨神經干動作電位振幅和時程的影響sampleAKp(mV)AKn(mV )DKp(ms)DKn(ms )control2mincontrol2mincontrol2mincontrol2min11.9052.031.1350.3421.921.962.193.0

20、522.813.72.081.042.222.432.62.9735.455.41.5271.7953.011.81043.163.291.280.552.42.492.943.1651.8932.271.1240.2442.32.762.8662.322.721.710.9772.132.142.581.9872.553.351.4780.5982.583.142.8185.853.60.940.4032.472.471.954.692.92.730.7470.5762.082.42.06103.712.262.2702.442.483.16x3.25483.1351.42910.65252

21、.3552.4073.3153.152S1.3800540.9892220.486250.5089620.3052960.3827112.3821380.937267xs3.251.383.140.991.430.490.650.51 2.360.312.410.38 3.322.383.150.940.7108270.0044890.7425330.2654853.7 刺激電壓1.0V,4procaine處理前正相波振幅App為9.101.67mV,處理后5min App為10.021.76mV,兩者相比有顯著性差異(P0.05);4procaine處理前負相波振幅Apn為5.171.11m

22、V,處理后5min 負相波振幅Apn為3.061.14mV,兩者相比有高度顯著性差異;4procaine處理前正相波時程Dpp為1.240.14ms,處理后5min Dpp為1.290.15ms,兩者相比沒有顯著性差異;4procaine處理前負相波時程Dpn為2.710.52ms,處理后5min Dpn為3.310.93ms,兩者相比沒有高度顯著性差異。見表7表74% procaine 對坐骨神經干動作電位振幅和時程的影響sampleApp(mV)Apn(mV )Dpp(ms)Dpn(ms )control5mincontrol5mincontrol5mincontrol5min17.968

23、.44.72.8911.062.772.6928.249.453.513.381.361.242.242.39315.7811.719.93.291.371.252.044.1949.929.476.055.071.221.153.234.7557.968.934.052.71.171.222.144.0367.959.035.782.811.391.252.472.7478.1610.145.252.031.321.563.463.44812.3614.297.254.471.21.282.242.23911.2410.995.231.3431.091.412.47108.099.514.7

24、32.821.381.433.44.17x9.76610.1925.6463.08031.251.2852.6463.403333S2.6380011.7457431.8259011.0784230.1357280.1452390.5377360.919687xs9.772.6410.191.755.651.833.081.081.250.141.290.152.650.543.400.920.467950.0015550.493120.0372964、討論4.1動作電位的傳導是細胞膜不斷產生新的動作電位的過程。在動作電位的發(fā)生部位,細胞膜的電位較前方靜息部位膜外側的電位為負,而膜內則相對較正

25、;由于這種電位差的存在,在動作電位的發(fā)生部位和鄰接的靜息部位之間便產生局部電流。這個局部電流將依據膜的被動電學性質在動作電位前方的靜息部位首先形成電緊張電位,電緊張電位進一步引發(fā)去極化的局部反應,并在局部反應達到閾電位時引起動作電位的發(fā)生。如此,動作電位便通過局部電流沿細胞膜傳導。4.2 神經干由許多神經纖維組成,故神經干動作電位與單根神經纖維的動作電位不同,神經干動作電位是由許多不同直徑和類型的神經纖維動作電位疊加而成的綜合性電位變化,稱復合動作電位。神經干動作電位幅度在一定范圍那可隨刺激強度的變化而變化。刺激電壓從Uth增加至Umax,神經干動作電位振幅隨刺激電壓增加而增高。4.3 動作電

26、位在神經干上傳導有一定的速度。不同類型的神經纖維傳導興奮的速度差別很大,這與神經纖維直徑的大小、有無髓鞘、髓鞘的厚度以及溫度的高低等因素有關。4.4 雙相動作電位是神經沖動先后通過兩個引導電極形成的,沖動通過第1個電極,形成動作電位的正相波,沖動通過第2個電極,形成動作電位的負相波。4.5 由于神經干由許多不同直徑和類型的神經纖維組成,各種纖維上動作電位的傳導速度有所不同,而神經干動作電位是由許多不同直徑和類型的神經纖維動作電位疊加而成的綜合性電位變化,因此神經干的動作電位傳導屬“衰竭性”傳導:越遠離刺激端,各種神經纖維的動作電位差異越大,產生的復合電位幅度越小。從而解釋了實驗中通道二中正相電

27、位幅度顯著小于通道一的現象。4.6 神經干的生理特性: 興奮性、雙向傳導性、非“全或無”性。 雙向傳導性可以由表1中樞端引導的BAP看出,雖然刺激電極在坐骨神經干末梢,但在中樞端也能測到AP,坐骨神經干是一條長長的軸突,軸突上的興奮可以向兩邊傳導,這不同于化學突觸的單向傳導性。 非“全或無”性可以由圖 U-A曲線得出,隨著刺激強度的增大,CAP振幅逐漸增大,當刺激電極達到最大刺激電位時,CAP振幅不再增大。這是因為不同的神經纖維興奮性不同,在閾刺激水平,只有興奮性最高的神經纖維發(fā)生AP;隨著刺激強度的增大,越來越多的神經纖維發(fā)生AP,故CAP幅度逐漸增大;當達到最大刺激水平時,所有的神經纖維都

28、發(fā)生AP,CAP幅度達到最大,此時即使再增大刺激強度,CAP幅度都不會再增大。這與單個神經纖維AP“全或無”的特性并不矛盾。4.7 BAP正相波和負相波振幅、時程: 根據表1結果,正相波振幅顯著大于負相波(p0.05)、時程顯著小于負相波(p0.05)。其可能的原因有三種:神經纖維的多寡、神經纖維傳導速度的不同、正相波及負相波的疊加。4.7.1 神經纖維的多寡造成正相波振幅顯著大于負相波、時程顯著小于負相波,該假設可以用表1結果推翻。中樞引導的BAP,在引導電極1處的神經纖維比引導電極2處少,但引導電極1的正相波卻比引導電極2處振幅大。故該原因并非正相波振幅顯著大于負相波、時程顯著小于負相波的

29、主要影響因素。4.7.2 神經纖維AP傳導速度的不同造成正相波振幅顯著大于負相波、時程顯著小于負相波。首先解釋這一假設。由于所測AP為CAP,由許多神經纖維AP疊加而成,而不同神經纖維的AP傳導速度不同,隨著傳導距離拉長,AP同步性降低,導致疊加而成的CAP峰值變小。該假設可以用表2結果推翻。根據表2,兩電極相距20mm時的負相波顯著大于兩電極相距10mm時的負相波(p0.05)。而按照該假設,傳播距離越遠,各條神經纖維AP越離散,CAP振幅越小,與實驗結果不符。故該假設并非主要影響因素。4.7.3 正相波及負相波的疊加造成正相波振幅顯著大于負相波、時程顯著小于負相波,該假設可以用表2結果證明

30、。根據表2,兩電極相距20mm時的正相波顯著大于兩電極相距10mm時的正相波(p0.05),正是由于兩電極距離的拉遠,正相波和負相波重疊抵消的部分減小,故正相波振幅增大。該假設是主要影響因素。 若疊加發(fā)生在正相波去極后期,正相波波峰減小,時程縮短,當神經沖動傳導被阻斷使負相波消失,正相波被疊加的部分顯示出來,正相波的波幅和時程均增大。若疊加發(fā)生在正相波復極期,正相波波峰不減小,但時程縮短,當神經沖動傳導被阻斷使負相波消失,正相波被疊加的復極化部分顯示出來,正相波時程延長。雙相動作電位負相波的去極期完全與正相波疊加,其波幅減小程度大于正相波。負相波的復極后期,正相波已復極完畢,沒有疊加發(fā)生,動作

31、電位復極后期的時程較長,負相波時程縮短的程度比正相波小。4.8 細胞膜的靜息電位是由細胞內的高K+濃度和細胞外的低K+濃度形成的,有3mol/ml 氯化鉀處理神經干的表面使細胞外的低K+濃度被破壞,靜息電位由負變正,當神經沖動傳到該處時,不能產生動作電位,使傳導阻斷。4.9 procaine為局部麻醉藥,神經纖維受其作用而喪失了完整性,局部電流不能很好的通過麻醉區(qū)而發(fā)生傳導阻滯,1使得負相波振幅減小時程變短甚至使得負相波消失,由于雙相波是正負相波的疊加且負相波是在正相波去極化期與其疊加,從而使得正相波振幅增加,時程變長。5.參考文獻1 陸源,夏強,生理科學實驗教程,浙江大學出版社,2004.8

32、:2112 陳主初,病理生理學,人民衛(wèi)生出版社,2005.7 :88注意格式規(guī)范。注意縮寫規(guī)范。結果用處理因素、處理強度、結果的統(tǒng)計描述和統(tǒng)計結果表述。動作電位波長是什么,結果、討論中有嗎?原始數據表放附錄。統(tǒng)計結果標注?注意圖表規(guī)范。不要單純的拷貝資料,要從自己的實驗結果中求解。注意論述依據。論述的邏輯順序是:結果-機制-結論。討論要完整。文獻引用標注要規(guī)范。假設是課題提出時的問題,用實驗設計解決假設問題,實驗結果回答了假設問題,討論只需闡明結果機制即回答假設,討論中沒有必要列出假設問題。7.5分2012-5-11體液分布改變在家兔急性失血中的代償作用【摘要】目的:本實驗采用動脈血壓的直接測

33、量方法,觀察體液因素對動脈血壓的調節(jié)作用,了解家兔急性失血模型的建立方法,觀察家兔急性失血期間及停止后其動脈血壓的變化及血紅蛋白濃度的變化。方法:通過股動脈插管旁的三通閥,進行放血。觀察家兔急性失血期間及停止后其動脈血壓及血紅蛋白濃度的變化。 結果:家兔急性失血期間,動脈血壓降低明顯,由正常的90mmHg變?yōu)?6.3mmHg,失血停止后10min,20min,30min時血壓分別為69.7mmHg,82mmHg,77.3mmHg,血壓有了較大的恢復。血紅蛋白濃度在急性失血期間與失血前相同,為123g/L;在急性失血停止后的0min、10min,20min,30min時分別為116、109、10

34、7、105 g/L。 結論:家兔急性失血后,血容量和動脈血壓下降,首先引起交感神經系統(tǒng)興奮,通過壓力感受器和化學感受性反射,引起了體內血流的重分布,保證了心、腦、腎等組織的血液供應。同時全身毛細血管前后阻力的比值增大,毛細血管壓下降,組織液的重吸收多于生成,使血漿量有所恢復,血液被稀釋,血紅蛋白濃度減小。另外腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng),皮質激素等活動增強,有利于血容量的恢復。1. 實驗材料1.1 實驗動物:家兔,體重3Kg1.2 藥品:200g/L氨基甲酸乙酯,肝素(1000u/ml)。1.3 器材:RM6240生物信號處理系統(tǒng),兔手術臺,哺乳類動物手術器械一套(包括手術刀、粗剪、組織剪、眼

35、科剪、止血鉗),動脈夾,動脈插管,血壓換能器,水銀檢壓計,雙凹夾,鐵支架,保護電極,玻璃分針,有色絲線,注射器(50ml、20ml、2ml、1ml各一副),小燒杯,干燥小試管,放血瓶,血紅蛋白比色計全套。1.4 儀器連接和參數 儀器連接和參數:將血壓換能器固定于鐵支架上,其位置應與心臟在同一平面。壓力換能器輸出線接微機生物信號處理系統(tǒng)1通道。壓力換能器輸入通道模式為血壓,時間常數直流、濾波頻率100Hz,靈敏度12kPa,采樣頻率800Hz,掃描速度:500ms/div。連續(xù)單刺激方式,刺激強度為510V,刺激波寬2ms,刺激頻率30Hz。1.5 血壓的測量和血紅蛋白濃度的測量 頸動脈插管用R

36、M6240生物信號處理系統(tǒng)記錄血壓,取頸靜脈血0.5ml用稀釋標準管對照的方法測定血紅蛋白的濃度。2. 實驗方法2.1動脈插管與放血瓶相連,瓶內盛60ml生理鹽水并放入肝素0.5ml ,排出放血管道內空氣。記下瓶內液體量,調節(jié)放血瓶高度,使瓶內液平面距離頸心臟水平約65cm。血壓換能器固定于鐵支柱上,置與心臟在同一平面,壓力換能器輸出線接微機生物信號處理系統(tǒng)第1通道,儀器參數設置如上所示。2.2 手術準備:家兔稱重后,按1g/kg體重劑量于耳緣靜脈注射20%氨基甲酸乙酯麻醉。注意麻醉劑不能過量,注射速度不宜過快。動物背位(仰臥)固定縛于手術臺上,用棉繩鉤住兔門齒,將繩拉緊并縛于兔臺鐵柱上,后固

37、定四肢。注意前肢須交叉固定。暴露頸部氣管、頸總動脈、頸靜脈、迷走神經和減壓神經。用玻璃分針仔細分離右側上述神經,各穿以不同顏色的細絲線以供識別。分離兩側頸總動脈和兩側頸靜脈,各穿一線備用。給動物靜脈注射肝素,劑量為1000u/kg體重。等1分鐘后再進行下一步驟,以使肝素在體內血液中混合均勻。頸總動脈遠心端結扎,近心端用動脈夾夾住,并在動脈下面預先穿一絲線備用。用眼科剪在靠近結扎處動脈壁剪一字形切口,將動脈套管向心方向插入頸總動脈內,扎緊固定。沿股腹面正中線從腹股溝下緣向膝部切開皮膚45cm。分離皮下組織和肌肉。分離股動脈23cm,穿線,結扎遠心端的血管,近心端用動脈夾夾閉血管。靠近遠心端血管結

38、扎線,用眼科角剪開血管直徑的1/3,插入血管導管24cm,在近心端結扎血管導管。3. 觀察項目3.1 觀察一段正常的動脈血壓曲線,記錄其動脈血壓。從頸靜脈里取血0.5ml,測定血紅蛋白的濃度并記錄血壓。3.2 待血壓穩(wěn)定后,打開放學裝置的三通閥,使動脈血放入放血瓶,持續(xù)失血3min后關閉三通閥,終止失血。記錄其放血過程中的血壓變化,于失血停止后10,20,30min分別采血,測定其血紅蛋白濃度并記錄血壓。4. 實驗結果家兔正常正常平均動脈壓為90mmHg,正常脈壓下Hb濃度為123g/L;停止失血后0min、10min、20min、30min,平均動脈壓分別為56.3、69.7、82、77.3 mmHg;Hb濃度分別為116、109、107、105(g/L)。見表1。表

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