微生物發(fā)酵中藥研究進(jìn)展

1、微生物發(fā)酵中藥研究進(jìn)展一、微生物發(fā)酵中藥的應(yīng)用歷史 二、微生物發(fā)酵中藥的研究現(xiàn)狀 三、微生物發(fā)酵中藥的研究展望 2020/11/32一、微生物發(fā)酵中藥的應(yīng)用歷史 1、微生物發(fā)酵中藥中所應(yīng)用到的很多微生物是藥用真菌或者含有真菌的混合菌群，其中藥用真菌很多本身作為中藥來應(yīng)用。因此一定意義上講，中藥與微生物，特別是與一些藥用真菌具有密切的聯(lián)系。 早在東漢年間神龍本草經(jīng)中，就有靈芝、茯苓、豬苓、雷丸等藥用真菌分別列項論述，這些藥物至今沿用不衰。 2020/11/33一、微生物發(fā)酵中藥的應(yīng)用歷史 2、微生物發(fā)酵中藥應(yīng)用歷史悠久，也是傳統(tǒng)中藥加工炮制的重要方法之一，一般主要是起到中藥復(fù)合炮制的作用，而且很

2、多發(fā)酵之后的藥物在臨床應(yīng)用上取得了較好效果。 微生物發(fā)酵中藥在中醫(yī)藥應(yīng)用中得到了很大的體現(xiàn)。如片仔癀的主要成分是三七的微生物發(fā)酵物；神曲由面粉、赤小豆、苦杏仁、鮮青蒿、鮮蒼耳、鮮辣蓼按一定比例混勻后經(jīng)發(fā)酵而成的曲劑。 由牛黃、三七、蛇膽、麝香等制成的錠劑，氣微香，味苦、微甘。具有消炎、清涼解毒、消腫止痛等作用，對急性肝炎、眼炎、耳炎、癰疽疔瘡、無名腫毒、跌打損傷及一切炎癥引起的疼痛、發(fā)熱等癥均有療效；并能抑制消化系統(tǒng)癌細(xì)胞的生長。2020/11/34一、微生物發(fā)酵中藥的應(yīng)用歷史 3、某些傳統(tǒng)的微生物制劑一直使用至今，其中以不同中藥作為輔料，采用微生物處理后自身成為發(fā)酵物組成的一部分，如半夏炮制

3、，神曲制備等。同時隨著歷史的發(fā)展，微生物發(fā)酵中藥的應(yīng)用也在不斷變化。半夏，又名：三葉半夏；半月蓮；三步跳；地八豆；守田；水玉；羊眼。該物種為中國植物圖譜數(shù)據(jù)庫收錄的有毒植物，其毒性為全株有毒，塊莖毒性較大，生食0.11.8g即可引起中毒。對口腔、喉頭、消化道粘膜均可引起強烈刺激；服少量可使口舌麻木，多量則燒痛腫脹、不能發(fā)聲、流涎、嘔吐、全身麻木、呼吸遲緩而不整、痙攣、呼吸困難，最后麻痹而死。但其具燥濕化痰，和胃止嘔，主治痰濕水飲，嘔吐，咳喘等癥。 2020/11/35二、微生物發(fā)酵中藥的研究現(xiàn)狀1、利用中藥為培養(yǎng)基的組成部分，構(gòu)建藥性菌質(zhì)，比較發(fā)酵前后中藥相關(guān)成分的變化，為中藥與藥用真菌的結(jié)合

4、尋找突破點，并開發(fā)具有良好功效的藥物。A、固體發(fā)酵：以黃芪為藥性基質(zhì)，黃芪占培養(yǎng)基組成10-20%，加入其他營養(yǎng)物質(zhì)，研究動態(tài)過程中多糖、皂苷、蛋白質(zhì)的變化，結(jié)果表明靈芝和黃芪發(fā)酵組合是可行的。 B、液體發(fā)酵：三株口服液（采用生物工程技術(shù)經(jīng)水、大豆胚芽、白砂糖、玉米芽、燕麥芽、低聚木糖、兩雙歧桿菌、短雙歧桿菌、乳桿菌聯(lián)合發(fā)酵制成）等。2020/11/36二、微生物發(fā)酵中藥的研究現(xiàn)狀2、利用微生物轉(zhuǎn)化中藥活性成分 微生物轉(zhuǎn)化的本質(zhì)是利用微生物生長代謝過程中產(chǎn)生的酶對特定底物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾的化學(xué)反應(yīng)，與化學(xué)反應(yīng)相比，它具有區(qū)域和立體選擇性強、反應(yīng)條件溫和、操作簡單、成本較低、公害少等優(yōu)點，同時能完成

5、一些化學(xué)方法難以實現(xiàn)的反應(yīng)。同時由于微生物種類繁多，繁殖快等特點，所以微生物轉(zhuǎn)化常被用來對天然產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，從而獲得一些結(jié)構(gòu)更合理或活性更好的先導(dǎo)化合物。另外，微生物在代謝過程中可分泌蛋白酶、纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶、淀粉酶等幾十種胞外酶進(jìn)入培養(yǎng)基，這些酶有的可以將藥物成分分解轉(zhuǎn)化，形成新的化合物。 2020/11/37二、微生物發(fā)酵中藥的研究現(xiàn)狀3、發(fā)酵產(chǎn)物與天然產(chǎn)物成分以及藥效的研究，其中主要包括藥用真菌深層發(fā)酵提取物的藥理實驗研究。 3.1 發(fā)酵產(chǎn)物與天然產(chǎn)物成分以及藥效的研究 發(fā)酵蟲草與天然蟲草沒有明顯差異，表明利用蟲草菌絲體來代替蟲草是可行的。雷丸菌發(fā)酵方法所獲得的雷丸蛋白

6、酶與天然雷丸蛋白酶之間沒有明顯差別。分光光度法對野生蛹蟲草與培植蛹蟲草清除OH自由基的作用進(jìn)行對比。結(jié)果表明植蛹蟲草完全可以取代野生蛹蟲草在抗衰老領(lǐng)域發(fā)揮作用，更應(yīng)當(dāng)成為發(fā)展的重點。2020/11/38二、微生物發(fā)酵中藥的研究現(xiàn)狀3、發(fā)酵產(chǎn)物與天然產(chǎn)物成分以及藥效的研究，其中主要包括藥用真菌深層發(fā)酵提取物的藥理實驗研究。 3.2 藥用真菌深層發(fā)酵提取物的藥理實驗研究竹黃菌的深層發(fā)酵提取物抗菌實驗。竹黃菌發(fā)酵液中具有天然抗菌活性物質(zhì)，且杭菌作用明顯，有較廣的抗菌譜。中藥對靈芝菌液體發(fā)酵過程中生物量的影響以及其發(fā)酵液對慢性支氣管炎的療效。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，單純靈芝發(fā)酵液就具有止咳、祛痰作用，對慢性支氣管炎

7、有較好的療效。2020/11/39二、微生物發(fā)酵中藥的研究現(xiàn)狀4、中藥提取液對微生物特別是藥用真菌生長的影響 目前研究了一些中藥對靈芝菌絲體的生長影響。 主要指標(biāo)是：（生物量）及代謝產(chǎn)物（胞外多糖）的影響2020/11/3102020/11/311二、微生物發(fā)酵中藥的研究現(xiàn)狀5、腸道菌群對中藥的影響 傳統(tǒng)中草藥的使用，絕大多數(shù)以口服吸收而發(fā)揮作用，藥物中的有效成分在進(jìn)入腸道之后不可避免地與腸道菌群發(fā)生關(guān)聯(lián)，某些成分經(jīng)相應(yīng)細(xì)菌的作用發(fā)生代謝轉(zhuǎn)化后被吸收，較小部分的成分則以原形物直接被吸收。在肝臟解毒后經(jīng)膽汁排泄，與腸道菌群接觸發(fā)生結(jié)合、裂解等代謝轉(zhuǎn)化再次被吸收。體內(nèi)環(huán)境中腸道菌群是完成中藥有效成

8、分代謝的重要因素之一，它的作用與肝臟差不多：腸道菌群對中藥有效成分的代謝處置主要是以水解和還原反應(yīng)為主。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多種中藥有效成分被腸道菌群代謝后，發(fā)生轉(zhuǎn)化，產(chǎn)生出具有較強藥理活性的代謝產(chǎn)物。2020/11/312二、微生物發(fā)酵中藥的研究現(xiàn)狀6、利用微生物進(jìn)行中藥提取研究 中藥材有效成分往往包裹在細(xì)胞壁內(nèi)，植物細(xì)胞壁是由纖維素、半纖維素、果膠質(zhì)、木質(zhì)素等物質(zhì)構(gòu)成的致密結(jié)構(gòu)。在中藥有效成分提取過程中，當(dāng)存在于細(xì)胞原生質(zhì)體中的有效成分向提取介質(zhì)擴散時，必須克服細(xì)胞壁及細(xì)胞間質(zhì)的雙重阻力。2020/11/313二、微生物發(fā)酵中藥的研究現(xiàn)狀6、利用微生物進(jìn)行中藥提取研究 微生物在代謝過程中可分泌蛋

9、白酶、纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶、淀粉酶等幾十種胞外酶進(jìn)入培養(yǎng)基，這些酶有的可以將藥物成分分解轉(zhuǎn)化，形成新的化合物，有的可水解植物細(xì)胞壁的纖維素、半纖維素、果膠質(zhì)等，使細(xì)胞破裂，利于有效成分溶出。特別是采用一些酶作用于藥用植物材料，使細(xì)胞壁及細(xì)胞間質(zhì)中的纖維素、半纖維素等物質(zhì)降解，使細(xì)胞破裂，細(xì)胞間隙增加，減小細(xì)胞壁、細(xì)胞間質(zhì)等傳質(zhì)屏障對有效成分從胞內(nèi)向提取介質(zhì)擴散的傳質(zhì)阻力，可促進(jìn)有效成分提取率提高。 2020/11/314二、微生物發(fā)酵中藥的研究現(xiàn)狀7、利用微生物用于中藥的炮制，特別是有毒中藥的炮制微生物由于自身存在豐富的酶系而有著在溫和條件下分解轉(zhuǎn)化物質(zhì)的能力。 利用藥用真菌對于這些毒

10、性物質(zhì)的降解和轉(zhuǎn)化作用，最終可以達(dá)到降低毒性、增強功效的目的。王和英根據(jù)臨床酶學(xué)的有關(guān)理論，采用含有根霉菌和L-賴氨酸等物質(zhì)的酵曲發(fā)酵五倍子。由于根霉菌能促進(jìn)L-賴氨酸的生成，能促進(jìn)胃腸道粘膜吸收食物中的蛋白質(zhì)，有效地避免五倍子所含鞣酸在胃腸道內(nèi)的競爭性消耗，降低了五倍子鞣酸與腸道內(nèi)食物中的結(jié)合，從而提高了五倍子的收斂作用?！就鹾陀ⅲ何灞蹲拥陌l(fā)酵炮制】2020/11/315二、微生物發(fā)酵中藥的研究現(xiàn)狀8、微生物充分利用中藥為組成部分的培養(yǎng)基的營養(yǎng)，對藥性基質(zhì)進(jìn)行了相應(yīng)的提取與藥效及制劑研究 馮志華等研究了地衣芽孢桿菌C2-13發(fā)酵炮制對紅花抗氧化活性的影響。結(jié)果紅花經(jīng)C2-13的發(fā)酵炮制其抗氧

11、化功效顯著提高。HPLC分析還觀察到紅花中一些成分發(fā)生了改變。結(jié)論紅花中一些有效成分可能是經(jīng)C2-13的生物轉(zhuǎn)化提高了其抗氧化功效?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1何晨 , 金 釗, 馮志華, 等. 芽孢桿菌發(fā)酵炮制中藥紅花增強溶血栓藥效研究J. 中國中藥雜志, 2005, 30（5）: 340-343.2馮志華 , 孫啟玲, 米坤, 等. 微生物發(fā)酵炮制對紅花抗氧化活性的影響J. 中草藥, 2004, 35（6）: 630-633.3馮志華 , 孫啟玲, 米坤, 等. 中藥紅花與產(chǎn)纖溶酶菌株相互影響的研究J. 四川大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版）, 2004, 41（2）: 395-398.2020/11/316二、微

12、生物發(fā)酵中藥的研究現(xiàn)狀9、中藥廢棄物的二次利用 由于中藥按照傳統(tǒng)的煎煮和現(xiàn)代的提取方法后，剩下的主要是含有纖維素、半纖維素等的藥渣，同時也包括沒有提取完全的一些有效成分及一些無機元素等。由于一些微生物具有降解纖維素、半纖維素的功能，因此采用微生物作由于中藥藥渣，或擴大該中藥的適應(yīng)癥，或產(chǎn)生具有保健作用的功能性食品。 2020/11/317二、微生物發(fā)酵中藥的研究現(xiàn)狀10、微生物發(fā)酵中藥復(fù)合體系的建立將具有一定功效的微生物發(fā)酵中藥，獲得一個具有一定功效的發(fā)酵物，也是以后研究的方向之一。由于微生物中很多藥用真菌具有良好的治療作用，借鑒中醫(yī)藥組方思想，將一些具有類似或協(xié)同作用的中藥進(jìn)行發(fā)酵，從而產(chǎn)生

13、具有兩者功效或者降低單一藥物不良作用的復(fù)合體系。 2020/11/318三、微生物發(fā)酵中藥的研究展望A、優(yōu)點保護(hù)中藥活性成分免遭破壞；提高中藥藥性，降低藥物的毒副作用；為中藥活性成分結(jié)構(gòu)修飾提供新途徑；開發(fā)新藥，產(chǎn)生新藥效物質(zhì)；節(jié)省藥源，保護(hù)環(huán)境。B、問題如中藥自身體系的模糊，微生物生長特性的多樣性等。2020/11/319三、微生物發(fā)酵中藥的研究展望幾點展望：1、微生物發(fā)酵中藥的機理還需更深入研究 目前微生物發(fā)酵中藥的機理主要存在于以下幾點基礎(chǔ)和推斷：微生物以中藥中的有效物質(zhì)或一些非有效物質(zhì)為前體，經(jīng)微生物的代謝形成新的化合物；微生物在生長過程中還能產(chǎn)生豐富的初生或次生代謝產(chǎn)物，有些代謝產(chǎn)物

14、自身就是功能良好的藥物；微生物的初生、次生代謝產(chǎn)物和中藥中的有些物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)形成新的化合物；由于中藥的某些物質(zhì)可能對微生物的生長代謝及活性成分的產(chǎn)生有促進(jìn)或抑制作用，微生物在中藥的特殊環(huán)境中也有可能改變自身的代謝途徑，從而形成新的活性成分或改變各活性成分的相互關(guān)系；因為微生物的分解轉(zhuǎn)化作用，故其有可能多中藥中的有毒物質(zhì)進(jìn)行分解，降低毒副作用。 2020/11/320三、微生物發(fā)酵中藥的研究展望幾點展望：2、選育優(yōu)良發(fā)酵菌種，使微生物能夠最大限度于作用于中藥 如華中科技大學(xué)張曉昱教授實驗室主要研究白腐菌，在應(yīng)用白腐菌發(fā)酵降解一些藥用植物的木質(zhì)素變化過程中，發(fā)現(xiàn)不同的菌種具有非常明顯的降解差異性，

15、這就表明菌種的影響很大。因此應(yīng)該加大發(fā)酵菌種的篩選和評價工作，從而為微生物發(fā)酵中藥研究找到比較便于深入研究的菌種。 2020/11/321三、微生物發(fā)酵中藥的研究展望幾點展望：3、加大中藥廢棄物的二次開發(fā)利用目前隨著中醫(yī)藥現(xiàn)代化的發(fā)展，中藥材需求量也越來越大，因此有些中藥資源顯得尤為緊缺。一方面應(yīng)該加強道地藥材的GAP種植、藥材基因以及細(xì)胞培養(yǎng)等研究；另一方面還需要強化藥材的合理利用-合理使用藥材，組方更科學(xué)實用，同時藥材首次利用后藥渣的二次開發(fā)，微生物在這方面具有很好優(yōu)勢。 藥渣廢棄物主要含有纖維素、半纖維素等成分，同時也包括沒有提取完全的一些有效成分及一些無機元素等；一些微生物具有降解纖維

16、素、半纖維素的功能，將微生物作由于中藥藥渣，既可以起到降低中藥生產(chǎn)后處理的成本，同時也可以節(jié)約原料，擴大中藥適應(yīng)癥。 2020/11/322三、微生物發(fā)酵中藥的研究展望幾點展望：4、加大培養(yǎng)基對發(fā)酵中藥影響的研究，中藥的植物學(xué)基礎(chǔ)研究也須跟上 由于不同中藥材的物理結(jié)構(gòu)以及化學(xué)結(jié)構(gòu)均不同，結(jié)果導(dǎo)致微生物發(fā)酵行為以及結(jié)果差異很大，主要表現(xiàn)在不同中藥含有不同量的木質(zhì)素、纖維素、半纖維素，這些不同的含量導(dǎo)致降解情況不一樣，引起這些變化不同的原因在哪里，不同結(jié)構(gòu)和含量與降解以及成分變化的相關(guān)性有哪些，從而讓菌種最大限度的利用以中藥材為主要組成部分的培養(yǎng)基獲取目標(biāo)物，也是以后值得研究的一個方向。 2020

17、/11/323三、微生物發(fā)酵中藥的研究展望幾點展望：5、菌種混合發(fā)酵研究 自然界微生物的多樣性決定了微生物的群居性，如何借鑒微生物的自然生長環(huán)境，獲取我們需要的材料，更好的將微生物與中藥結(jié)合，也是值得研究的一個問題?？v觀歷代微生物發(fā)酵中藥的研究，其中很多時候是好幾種菌種混合產(chǎn)生的作用效果，因此也值得借鑒。 2020/11/324三、微生物發(fā)酵中藥的研究展望幾點展望：6、發(fā)酵產(chǎn)物綜合研究分離、純化等條件的優(yōu)化首先，應(yīng)該對微生物的發(fā)酵和培養(yǎng)等進(jìn)行系統(tǒng)的研究，并進(jìn)行成分的分離、鑒定和相關(guān)藥理實驗的證明，更加明確微生物的性質(zhì)以及變化過程。其次，對中藥也應(yīng)該進(jìn)行成分與藥理作用的全面研究，深入研究中藥多靶

18、點作用的機理，并用相應(yīng)模型進(jìn)行科學(xué)的闡述，進(jìn)而建立中藥多靶點作用的模式。 2020/11/325三、微生物發(fā)酵中藥的研究展望幾點展望：7、設(shè)計新型發(fā)酵罐 對于微生物發(fā)酵中藥的研究而言，自古至今，應(yīng)用較多的還是固體發(fā)酵。對于固體發(fā)酵來說，其中生物量的測定、發(fā)酵過程中濕度、通氣、營養(yǎng)、均勻性以及發(fā)酵的工業(yè)化都值得深入探討。新型發(fā)酵罐，需要綜合考慮眾多因素，從而方便發(fā)酵控制、量化指標(biāo)。 2020/11/326三、微生物發(fā)酵中藥的研究展望幾點展望：8、發(fā)酵產(chǎn)物與天然產(chǎn)物的對比研究 通過對發(fā)酵產(chǎn)物與天然產(chǎn)物的成分、藥理藥效及毒理對比，尋找目前比較緊缺天然產(chǎn)物的替代品。 2020/11/327三、微生物發(fā)

19、酵中藥的研究展望幾點展望：9、相關(guān)測試設(shè)備的研究 中藥由于自身成份的復(fù)雜性，需要分析能力更加強大的測試設(shè)備，只有這樣，才能更好去闡述微生物發(fā)酵中藥體系的作用特點與機理。2020/11/328 中藥現(xiàn)代化研究已經(jīng)是一個醫(yī)藥、生物等眾多學(xué)科關(guān)心的課題，因此也得到更多的關(guān)注。隨著多學(xué)科的交叉發(fā)展，微生物發(fā)酵中藥的研究必將取得一個長足的發(fā)展，微生物發(fā)酵中藥也必將在中藥現(xiàn)代化進(jìn)程中表現(xiàn)出強大的生命力。 2020/11/329冬蟲夏草的發(fā)酵生產(chǎn) 2020/11/330一、簡介冬蟲夏草又稱夏草冬蟲、蟲草等，是一種名貴的滋補中藥，有治“諸虛百損”之說，為麥角菌科冬蟲夏草菌寄生在蝙蝠蛾科幼蟲上的子座及幼蟲尸體的

20、復(fù)合體（寄主為鱗翅目、鞘翅目等昆蟲幼蟲）。主產(chǎn)于青海、西藏、四川等地。2020/11/331一、簡介其有效成分包括：蟲草酸及蟲草素、蛋白質(zhì)和氨基酸、多糖及糖類衍生物、固醇類、核酸、腺苷類、脂肪酸及其它有機酸、維生素、無機元素等。2020/11/332一、簡介研究及實踐證明，它具有以下功能：調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能直接抗腫瘤作用 提高細(xì)胞能量、抗疲勞 調(diào)節(jié)心臟功能 調(diào)節(jié)肝臟功能 調(diào)節(jié)呼吸系統(tǒng)功能 調(diào)節(jié)腎臟功能 調(diào)節(jié)造血功能 調(diào)節(jié)血脂 其它2020/11/333一、簡介生活史：夏天，蝙蝠蛾產(chǎn)卵于花草上卵長成小蟲鉆入土壤繼續(xù)生長蟲草真菌的子囊孢子侵入到幼蟲中蟲體死亡,只剩下空殼夏天,菌絲生長，長成蟲草202

21、0/11/3342020/11/3352020/11/3362020/11/3372020/11/3382020/11/339一、簡介人工培養(yǎng)：人工栽培半人工栽培發(fā)酵生產(chǎn)菌絲體2020/11/340二、液體深層發(fā)酵高產(chǎn)蟲菌素工藝的優(yōu)化基本步驟：保藏菌種斜面培養(yǎng)基種子培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)基蟲菌素產(chǎn)量測定2020/11/341二、液體深層發(fā)酵高產(chǎn)蟲菌素工藝的優(yōu)化單因素實驗：高產(chǎn)菌株的篩選2020/11/342二、液體深層發(fā)酵高產(chǎn)蟲菌素工藝的優(yōu)化單因素實驗：培養(yǎng)基對發(fā)酵液蟲草素含量的影響 2020/11/343二、液體深層發(fā)酵高產(chǎn)蟲菌素工藝的優(yōu)化單因素實驗：不同添加物對蟲草素產(chǎn)量的影響2020/11/34

22、4二、液體深層發(fā)酵高產(chǎn)蟲菌素工藝的優(yōu)化單因素實驗：腺嘌呤對蟲草素合成時間的影響2020/11/345二、液體深層發(fā)酵高產(chǎn)蟲菌素工藝的優(yōu)化單因素實驗：腺嘌呤不同培養(yǎng)方式對蟲草素含量的影響2020/11/346二、液體深層發(fā)酵高產(chǎn)蟲菌素工藝的優(yōu)化實驗結(jié)論： 本實驗發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵液蟲草素含量最高的菌株是21號；最適培養(yǎng)基配方為：蔗糖40g/L、蛋白胨15g/L、MgSO47H2O 0.5g/L、KH2PO4 0.5g/L、K2HPO43H2O 0.5g/L、pH自然；在此培養(yǎng)基中加入0.5g/L的腺嘌呤進(jìn)行培養(yǎng)可使蟲草素產(chǎn)量提高30%，同時腺嘌呤的添加也可以加快蟲草素的合成；純靜置培養(yǎng)有利于蟲草素的產(chǎn)生

23、和積累，靜置培養(yǎng)28d，所得發(fā)酵液中蟲草素含量達(dá)2.05g/L，比優(yōu)化前提高2倍。2020/11/347二、液體深層發(fā)酵高產(chǎn)蟲菌素工藝的優(yōu)化討論：蟲草素的生物合成途徑目前尚不清楚，本研究發(fā)現(xiàn)，向培養(yǎng)基中加入腺嘌呤和腺苷可明顯提高蟲草素的含量，因此推測蟲草素生物合成途徑與腺苷有一定的聯(lián)系。本實驗發(fā)現(xiàn)靜置培養(yǎng)蟲草素含量最高，因此推測菌絲體通氧條件差，有利于蟲草素的積累。2020/11/348三、展望 運用深層發(fā)酵法對冬蟲夏草菌絲體進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)，既加快了生產(chǎn)速度，又提高了冬蟲夏草的產(chǎn)量，對于冬蟲夏草的生產(chǎn)具有重大的意義。目前，冬蟲夏草已經(jīng)從名貴中藥的圣壇走入大眾化藥品領(lǐng)域，我們期待隨著科技的進(jìn)步，冬

24、蟲夏草這一醫(yī)學(xué)寶藏能為人類健康發(fā)揮更大的作用。2020/11/349真菌活性多糖的制備工藝2020/11/350原料有兩種來源 子實體子實體多糖 液體深層發(fā)酵法 菌絲體 菌絲體多糖 （胞內(nèi)多糖） 發(fā)酵液 發(fā)酵液多糖 （胞外多糖） 2020/11/351一、真菌多糖深層發(fā)酵法 1原理2設(shè)備 3工藝流程 2020/11/352一、真菌多糖深層發(fā)酵法 4工藝說明（1）菌種： 菌種培育斜面或沙土管孢子低溫保藏復(fù)壯分離純化 （2）培養(yǎng)基 ： 孢子培養(yǎng)基：提供菌體的生長繁殖，形成孢子。 斜面/液體種子培養(yǎng)基：供孢子發(fā)芽、生長和繁殖菌絲體， 并使菌體長得粗壯，成為活力強的“種子”。 發(fā)酵培養(yǎng)基：供菌種生長、

25、繁殖和合成產(chǎn)物（3）種子制備（種子擴大培養(yǎng)） 斜面活化：使保藏的生產(chǎn)菌種恢復(fù)活力 搖瓶培養(yǎng)：種齡要控制在對數(shù)期 種子罐擴大培養(yǎng)：一般不要超過三級 （4）發(fā)酵罐：通風(fēng)式發(fā)酵罐 2020/11/353一、真菌多糖深層發(fā)酵法 5發(fā)酵過程工藝控制溫度、pH控制： 最適生長溫度和pH并非一定是最適產(chǎn)物形成溫度和pH 壓力控制：正壓發(fā)酵 ，保證純種的培養(yǎng) 溶解氧控制：通過通氣和攪拌實現(xiàn)。攪拌轉(zhuǎn)速，通氣量 發(fā)酵前期小、中期大、后期小。 泡沫控制：食用級消泡劑 如泡敵 中間補料：真菌多糖的形成一般在減速期和穩(wěn)定期， 故在此時期內(nèi)可連續(xù)或多次補料(一般為碳源)。 染菌控制：無菌操作 ，設(shè)備密封性能 檢查，染菌檢

26、查 2020/11/354一、真菌多糖深層發(fā)酵法 6發(fā)酵終點判斷何時放罐要根據(jù)發(fā)酵目的、經(jīng)濟等因素綜合考慮 。以菌絲形態(tài)、數(shù)量以及養(yǎng)分的消耗和代謝的變化作為指標(biāo)。 2020/11/355二、真菌多糖提取純化工藝 1原理：熱水或極性溶劑浸提 分離純化 胞內(nèi)外多糖產(chǎn)品 2設(shè)備 3工藝流程 2020/11/356 4工藝說明二、真菌多糖提取純化工藝 （1）原料及預(yù)處理： （2）提取溶劑及浸提條件的選擇：水或0.5mol/L NaOH溶液。 浸提溫度不宜過高，以免多糖降解或結(jié)構(gòu)發(fā)生變化。（3）浸提液固液分離： 若用熱堿浸提，則浸提液用HCl中和至中性。 （4）濃縮上清液：熱濃縮、超濾濃縮 （5）醇析：

27、4冷乙醇至終濃度70，充分沉淀活性多糖 （6）脫脂、除蛋白： 用無水乙醇、丙酮脫脂，再用Sevag法脫除雜蛋白。 2020/11/357常見的藥用真菌2020/11/358 藥用真菌（medicinal fungi）概述 藥用真菌是指有藥用價值的大型真菌和小型真菌。本文主要敘述有藥用價值的大型真菌，尤指有食療價值的肉質(zhì)菌（傘菌、多孔菌）。據(jù)真菌分類學(xué)家卯曉嵐先生估計，我國的藥用真菌有近500種，其中不少種類是著名的食用菌。在神農(nóng)本草經(jīng)等古代經(jīng)典著作中記載的藥用菌，主要有茯苓、馬勃、天麻（含蜜環(huán)菌）、豬苓、雷丸、靈芝、香菇、銀耳、木耳等。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，各國藥學(xué)工作者對部分傳統(tǒng)的或民間的

28、藥用真菌作了大量的開發(fā)研究，并提取了有效成分。2020/11/359 藥用真菌（medicinal fungi）概述 概括起來，藥用真菌有如下醫(yī)療保健作用：降低膽固醇和抑制血壓升高作用：據(jù)日本科學(xué)工作者的研究發(fā)現(xiàn)，從香菇中分離的香菇嘌呤，用小鼠作動物試驗，具有顯著降低小鼠血液中膽固醇含量的作用，發(fā)現(xiàn)蘑菇、香菇、金針菇、木耳、毛木耳、銀耳和滑菇等真菌的子實體均具有降低膽固醇的作用。2020/11/360 藥用真菌（medicinal fungi）概述 概括起來，藥用真菌有如下醫(yī)療保健作用：增強免疫功能作用：人體免疫功能是人體具有的一種免除疾病的能力，他是通過人體具有免疫系統(tǒng)正常的生理功能而實現(xiàn)的

29、。多種真菌菌絲體和子實體中含有的高分子多糖類生理活性物質(zhì)具有增強機體免疫功能的作用。中國食品發(fā)酵工業(yè)研究所應(yīng)用生物技術(shù)，開展了香菇、猴頭和靈芝的液體深層培養(yǎng)及其營養(yǎng)保健功能的研究，結(jié)果表明：從菌絲體分離提取的靈芝多糖對實驗小鼠的T淋巴細(xì)胞功能有明顯增強作用，香菇多糖和猴頭多糖對實驗小鼠的B淋巴細(xì)胞功能有明顯增強作用，3種多糖對實驗小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬異物功能，均有明顯的增強作用。2020/11/361 藥用真菌（medicinal fungi）概述 概括起來，藥用真菌有如下醫(yī)療保健作用：抑制腫瘤作用：真菌菌絲體和子實體中含有的高分子多糖類生理活性物質(zhì)還具有抑制腫瘤生長的作用。日本學(xué)者千原等研究香

30、菇多糖具有明顯抑制腫瘤作用；山東師范大學(xué)生物系徐朝暉等研究雙孢蘑菇多糖不僅能抑制小鼠S-180實體腫瘤的生長，而且能干擾體外培養(yǎng)的人肝癌細(xì)胞的增殖，具有較好的抗腫瘤活性；上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所研究靈芝多糖對接種于實驗小鼠的肺癌和結(jié)腸癌細(xì)胞的生長，具有明顯的抑制作用；中國食品發(fā)酵工業(yè)研究所研究表明靈芝多糖精粉與環(huán)磷酰胺合有時，對小鼠Lewis肺癌和H22肝癌有明顯的增效作用。2020/11/362 藥用真菌（medicinal fungi）概述 概括起來，藥用真菌有如下醫(yī)療保健作用：減少尿糖和改善糖尿病癥作用：日本武庫川女子大學(xué)人類環(huán)境科學(xué)學(xué)院大鶴勝等報道將貝葉多孔菌對糖尿病大鼠口服投與，

31、可顯著地改善其耐糖能力，減少尿糖和尿量等，使糖尿病的諸癥狀得以改善。2020/11/363 藥用真菌（medicinal fungi）概述 概括起來，藥用真菌有如下醫(yī)療保健作用：抗衰老作用 銀耳多糖能明顯降低果蠅脂褐質(zhì)含量，延長果蠅平均壽命；對超氧陰離子自由基（O-2），對紅細(xì)胞膜的過氧化損傷具有保護(hù)作用，能減少膜蛋白交聯(lián)，膜流動性趨于正常，紅細(xì)胞溶雪率降低，具有明顯的抗自由基作用。同時還證明銀耳能提高小鼠腦和肝臟組織中SOD的活力，對單胺氧化酶-B（MAO-B）活性有明顯抑制作用。木耳多糖可使小鼠心肌組織褐脂質(zhì)含量下降，使腦和肝中超氧化物歧化酶活力增加，對小鼠離體腦B型單氨氧化酶（MAO-B

32、）活性起抑制作用，提示木耳多糖具有抗衰老活性。靈芝、金針菇等真菌均具有抗衰老作用，這里不一一介紹。2020/11/364常見的藥用蘑菇冬蟲夏草茯苓 靈芝云芝竹黃古尼蟲草鱗皮扇菇樹舌靈芝尖頂?shù)匦屈S裙竹蓀裂 褶 菌灰 包 菇頭狀禿馬勃大禿馬勃梨形馬勃白鱗馬勃糞生黑蛋巢菌2020/11/3651、冬蟲夏草冬蟲夏草 Cordyceps sinensis (Berk. )Sacc. 又稱蟲草、冬蟲草、雅扎貢布（語藏，即長角的蟲子）。子座棒狀，生于鱗翅目幼蟲體上，一般只長一個子座，少數(shù)2-3個，從寄主頭部、胸部生出至地面。長3-12cm，基部粗約1.5cm，頭部圓柱形，褐色，中空。子囊殼橢圓形，基部埋于子

33、座中，03-0.5 0.1-0.2cm。自然分布在海拔3000-5000米之間的高山草甸和高山灌木叢帶，寄生于蟲草蝙蝠蛾(Hepialus armoricanus )的幼蟲體上。每年5-7月份出現(xiàn)。也有的在11月份開始出現(xiàn)子座，但不發(fā)育。我國冬蟲夏草幾乎都集中分布于青藏高原，已記載產(chǎn)區(qū)有青海、西藏、甘肅、四川、云南、貴州、新疆等地區(qū)。冬蟲夏草為名貴中藥，性溫、味甘，后微辛、補精益髓、保肺、益腎、止血化痢、止血化痢，止癆嗽。其中含有特有成分蟲草菌素，是一種有抗生作用或抑制細(xì)胞分裂作用的核酸類物質(zhì)。關(guān)于冬蟲夏草的人工栽培研究進(jìn)展較快，可以利用深層發(fā)酵培養(yǎng)菌絲體，其培養(yǎng)物用干保健品和制藥。2020/

34、11/3662、茯苓茯苓 子實體生于菌核表面，呈平伏狀，厚0.3-1cm,初期白色，老后或干后變?yōu)闇\褐色，管孔多角形或不規(guī)則形，菌管長2-8mm，偶有雙層，厚可達(dá) 1-3cm，孔徑0.5-2mm，壁薄，孔口邊緣老后呈齒狀。菌核呈球形、橢圓形、或不規(guī)則塊狀，直徑10-30cm，重量可達(dá)數(shù)十至近百斤。新鮮時梢軟有彈性，干后堅硬，表面粗糙多皺或成瘤狀，淺棕黃色至褐色，后變黑褐色。內(nèi)部白色或帶淺紅色，干后梢硬。生于多種松樹的根際。偶見于其它針葉樹及闊葉樹的根部，適宜生長于沙質(zhì)土。分部于我國安徽、福建、云南、湖北、浙江、四川等地?？伤幱?，性溫?zé)帷⑸蛑箍?、退熱安胎、寧心益氣、降血糖。抑制腫瘤，對小白鼠肉

35、瘤180的抑制率達(dá)96.88%?？勺餮a品。 2020/11/3673、靈芝靈芝 Ganoderma lucidum (Leyss.)Karst. 又稱赤芝、紅芝。子實體中等至大型。菌蓋半圓形，腎形或近圓形，木栓質(zhì)，人工栽培是子實體寬5-15cm，厚0.8-1cm，紅褐色并有油漆光澤，菌蓋上具有環(huán)狀棱紋和輻射狀皺紋，邊緣薄，往往內(nèi)卷。菌肉白色至淡褐色，管孔面初期白色，后期變淺褐色，褐色，平均每毫米35個，柄側(cè)生，與菌蓋近垂直，少數(shù)偏生呈扇狀，長寬8-15cm，粗1-3cm，紫褐色，有光澤，生于闊葉樹伐木樁旁。分布于我國河北、山西、 山東、江蘇、安徽、浙江、江西、福建、臺灣、廣東、香港、廣西、四川

36、、河南、湖南、湖北、陜西、甘肅、貴州、云南、西藏等地。從古代以來即有藥用記載。可治療神經(jīng)衰弱、頭昏、失眠、肝炎、支氣管哮喘等，還可治積年胃病和用做蘑菇中毒的解毒劑。對小白鼠肉瘤180和艾氏癌的抑制率分別為7080%。此菌可利用菌絲體進(jìn)行深層發(fā)酵培養(yǎng)。目前用它做原料加工生產(chǎn)多種保健品或藥用產(chǎn)品。2020/11/3684、云芝云芝 Coriolus versicolor (L.:Fr.)Qul. 又稱彩絨革蓋菌、雜色云芝、彩絨菌、瓦菌。子實體一般小，無柄、平伏面反卷，或扇形，貝殼狀，往往相互邊接在一起，呈覆瓦狀排列。菌蓋寬1-8cm，厚 0.1-0.3cm ，革質(zhì)表面有細(xì)長絨毛和多種顏色組成的狹窄

37、的同心環(huán)帶，絨毛常有絲絹光彩，邊緣薄，波浪狀。菌肉白色。管孔面白色，淡黃色，每毫米3-5個。分布于我國黑龍江、吉林、遼寧、河北、河南、山東、山西、河南、河北、陜西、青海、甘肅、新疆、西藏、廣東、廣西、貴州、江西、江蘇、臺灣、浙江、福建、安徽、四川、內(nèi)蒙古等地區(qū)。該菌主要為藥用，有去濕化痰效果，可治療肺病和慢性支氣管炎、遷延性或慢性肝炎，還可作為肝癌患者的免疫治療藥物。從云芝菌絲體和發(fā)酵液中提取的多糖均具有極強烈的抑制癌細(xì)胞活性。云芝菌絲體多糖是含蛋白質(zhì)的葡聚糖，而從發(fā)酵液提取的多糖不含蛋白質(zhì)。該提取物對小白鼠肉瘤180和艾氏癌的抑制率分別為80%和100%。云芝是分布極其廣泛的一種木腐菌，可侵

38、害近80種闊葉林樹木，被侵害樹木的木質(zhì)部形成白色腐朽。常常導(dǎo)致枕木、電桿、楞木、橋梁等木用建材腐朽。該菌含有蛋白酶、過氧化酶、淀粉酶、蟲漆酶及革酶等，有廣泛的經(jīng)濟用途。另外，在段木栽培木耳和香菇時常有該菌生長，被視為有害“雜菌”。2020/11/3695、竹黃竹黃 （Shiraia bambusicola P.Henn.） 一種生長在竹子上的子囊菌，子座小，長1-4.5cm ，寬1-2.5cm，形狀不規(guī)則，多呈瘤狀。初期色淡，后期粉紅色，龜裂。內(nèi)部粉紅色，肉質(zhì)，后成木拴質(zhì)。比較廣泛分布在南方竹林區(qū)。我國民間作為藥用，治療虛寒胃疼、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、坐骨神經(jīng)痛、跌打損傷和筋骨酸痛等。2020/11/

39、3706、古尼蟲草古尼蟲草 Cordyceps gunnii (Berk.)Berk. 子座從寄主頭部生出，柄白色，長10-90mm，粗5-6mm，頂部一般灰色至灰黑色，長卵圓形至柱狀，單生，二叉分枝或成簇著生，一般8-22mm 5-8mm，成熟時與柄的界限分明，無不孕頂端。子囊殼擬卵形或安瓿瓶形，0.70.9mm 0.2-0.3mm，埋生，成熟時孔口外露。寄生于土中蝙蝠蛾科(Hepiaidae)昆蟲的幼蟲上。分布于貴州等地。古尼蟲草曾被誤當(dāng)冬蟲夏草使用。不過也有人認(rèn)為此種蟲草與亞香棒蟲草相同。目前在貴州已作為藥物研究利用。2020/11/3717、鱗皮扇菇鱗皮扇菇 Panellus styp

40、ticus(Bull.:Fr.)Karst 子實體較小。菌蓋扇形，淺土黃色，菌蓋直徑1-3cm，表面有麥皮狀小鱗片。菌肉薄，味辛辣。菌褶窄而密。菌柄很短，生在菌蓋的一側(cè)。此菌成群地生在闊葉樹腐木上或樹樁上。晚上可發(fā)光，但有的因地區(qū)差異而不發(fā)光。分布極廣。分布于黑龍江、吉林、河北、山西、內(nèi)蒙古、福建、廣東、廣西、香港、臺灣、湖南、貴州、云南、青海、西藏、陜西等。此菌子實體質(zhì)地較韌，干后潮濕時能恢復(fù)原狀，多記載有毒，不宜采食?？伤幱?，有調(diào)節(jié)機體、增進(jìn)健康、抵抗疾病的作用。其子實體內(nèi)含有齒孔菌酸(eburicoicacid)，可用以合成甾體藥物，這種甾體藥物可對機體起重要的調(diào)節(jié)作用。此菌有收斂作用。

41、將子實體制干研成粉末，敷于傷處治外傷出血。另外，對小白鼠肉瘤180的抑制率為80，對艾氏癌的抑制率為70。本菌導(dǎo)致樹木木質(zhì)腐朽。2020/11/3728、樹舌靈芝樹舌靈芝 Ganoderm applanatum (Pers.)Pat 又稱樹舌扁靈芝、老母菌、楓樹菌。子實體大型或特大型。無柄或幾乎無柄。菌蓋半圓形，扁半球形或扁平，基部常下延，寬5-3510-50cm，厚1-12cm，表面灰色，漸變褐色，有同心環(huán)紋棱，有時有瘤，皮殼膠角質(zhì)，邊緣較薄。菌肉淺栗色，有時近皮殼處后變暗褐色，菌孔圓形，每毫米4-5個。生于楊、樺、柳、櫟等闊葉樹的枯立木、倒木和伐樁上。多年生，高齡者可達(dá)20余年。分布于我國

42、河北、山西、山東、黑龍江、吉林、江蘇、內(nèi)蒙古、陜西、甘肅、青海、新疆、西藏、四川、云南、河南、湖南、湖北、貴州、浙江、福建、臺灣、廣西、廣東、海南、香港等地區(qū)。是重要的木腐菌之一。導(dǎo)致木材木質(zhì)部形成白色腐朽?？伤幱?。在我國和日本民間作為抗癌藥物。還可以治聞風(fēng)濕性肺結(jié)核，有止痛、清熱、化積、止血、化痰之功效。該菌子實體熱水提取物對小白鼠肉瘤180的抑制率為64.9%。此菌還產(chǎn)生草酸和纖維素酶，可應(yīng)用于輕工、食品工業(yè)等。2020/11/3739、尖頂?shù)匦羌忭數(shù)匦?Geastrum triplex(Jungh.) Fisch. 子實體較小。初期扁球形，外包被基部淺袋形，上半部分裂為5-8瓣，裂片反卷

43、，外表光滑，蛋殼色，內(nèi)層肉質(zhì)，干后變薄，粟褐色，往往中部分離并部分脫落，僅保留基部，內(nèi)包被無柄，球形，球形，粉灰色至煙灰色，直徑1.7-3cm,嘴部顯著，寬圓錐形。在林地上或苔蘚間單生或散生。分布于我國河北、山西、吉林、甘肅、寧夏、青海、新疆、四川、云南、西藏等地區(qū)?？伤幱茫鈧[、解毒、止血。2020/11/37410、黃裙竹蓀黃裙竹蓀 （Dictyophora mulicolor Bork.et Br.） 又稱黃網(wǎng)竹蓀、仙人傘。子實體中等至較大，高8-18cm。菌蓋鐘形，具網(wǎng)格，其上有暗青褐色或青褐色粘性孢體，頂平，有一孔口。菌幕檸檬黃色至桔黃色，似裙子，具菌托，苞狀，從菌該邊沿下垂長6

44、.5-11cm，下緣直徑8-13cm，網(wǎng)眼多角形，眼孔直徑約2-5 mm，菌柄白色或淺黃色，海綿狀，中空，長7-15cm，粗 1.6-3cm。夏季在竹林、闊葉林地上散生。分布于我國江蘇、湖南、安徽、云南、廣東、臺灣、香港、海南、西藏等地區(qū)。此種多有毒，不宜采食，可供藥用。將子實體浸泡于濃度為70%的酒精中，作為外涂藥用，可治療腳癬。2020/11/37511、裂褶菌裂褶菌 （Schizphylhls commne Fr.） 又稱白參（云南）、樹花（陜西）。子實體小型。菌蓋直徑0.6-4.2cm,白色至灰白色，上有絨毛或粗毛，扇形或腎形，具多數(shù)裂瓣，菌肉薄，白色，菌褶窄，從基部輻射而出，白色或灰

45、白色，有時淡紫色，沿邊緣縱裂而反卷，柄短或無。春至秋生于闊葉樹及針葉樹的枯枝及腐木上。分布于我國河北、山西、黑龍江、吉林、遼寧、山東、江蘇、內(nèi)蒙古、安徽、浙江、江西、福建、臺灣、河南、湖南、廣東、廣西、海南、甘肅、西藏、四川、貴州、去南等地區(qū)?？墒秤?，此菌含裂褶菌多糖，對動物腫瘤有抑制作用，對小白鼠肉瘤180和艾氏癌的抑制率為70%。對大白鼠吉田瘤和小白鼠肉瘤37的抑制率為70-100%，我國云南民間常把此菌與雞蛋燉熟服用對治療白帶有效。云南產(chǎn)裂褶菌氣香味鮮，稱之為“白參”，有滋補強身作用。裂褶菌是段木栽培香菇、木耳或毛木耳或銀耳時的“雜菌”，其繁殖生長快，數(shù)量多，影響比較大，還可使木質(zhì)部產(chǎn)生白色腐朽。該菌含有較強活性的纖維素酶，并能產(chǎn)生蘋果酸，菌絲深層發(fā)酵時可產(chǎn)生大量有機酸，還可產(chǎn)生促生素吲哚乙酸。本菌在食品工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生、生物化學(xué)等方面應(yīng)用廣泛。2020/11/37612、灰包菇灰包菇 Secotium agaricoides (Czern.) Hollos 子實體較小。卵形到扁球形，直徑3-4cm。柄短而明顯，倒圓錐形，粗1-1.5cm，向上伸長至包皮頂端，形成中軸。包被淺黃色，單層，厚1-2mm ，先期光滑，后期出現(xiàn)鱗片，沿基部與柄連接，外開裂；內(nèi)部淺黃