羅氏試劑盒說(shuō)明書 Anti-Tg

1、05572312001V1Anti-Tg甲狀腺球蛋白抗體（anti-Tg） 2009-05, V 1 中文 6/6 Elecsys 和 cobas e 分析儀04738578 191 100測(cè)試本試劑盒適用的分析儀Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601注意：Anti-Tg的檢測(cè)結(jié)果與檢測(cè)方法密切相關(guān)。因此實(shí)驗(yàn)室結(jié)果報(bào)告應(yīng)注明檢測(cè)方法。不同檢測(cè)方法間的結(jié)果不能直接比較，以免引起臨床解釋的錯(cuò)誤。在療效觀察過(guò)程中，如果檢測(cè)方法變動(dòng)，必須使用兩種檢測(cè)方法進(jìn)行平行測(cè)定。主要用途用于體外定量檢測(cè)人血清和血漿中

2、的甲狀腺球蛋白抗體。臨床可應(yīng)用于自身免疫性甲狀腺疾病的輔助診斷。Elecsys和cobas e 免疫分析儀的工作原理是電化學(xué)發(fā)光免疫分析“ECLIA”。臨床應(yīng)用甲狀腺球蛋白（Tg）由甲狀腺產(chǎn)生，是甲狀腺濾泡腔的主要成分。在甲狀腺過(guò)氧化物酶（TPO）的協(xié)同作用下，Tg在L-酪氨酸的碘化；甲狀腺激素T4和T3的合成方面具有重要作用。Tg和TPO都是潛在的自身抗原。血清甲狀腺球蛋白抗體（Tg自身抗體）濃度升高常見(jiàn)于一些自身免疫性疾病引起的甲狀腺炎。高濃度的anti-Tg和anti-TPO預(yù)示有慢性淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)性甲狀腺炎（橋本氏甲狀腺炎）。在自身免疫性甲狀腺炎(包括橋本氏甲狀腺炎)受試者中，甲狀腺球蛋

3、白抗體的陽(yáng)性率約70-80%，在Graves病患者中，甲狀腺球蛋白抗體的陽(yáng)性率約30%。1 anti-Tg檢測(cè)對(duì)于橋本氏甲狀腺炎的病程監(jiān)測(cè)2和鑒別診斷（不明原因的anti-TPO檢測(cè)結(jié)果陰性的疑似自身免疫性甲狀腺炎3，無(wú)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)的Graves病2，甲狀腺球蛋白檢測(cè)中排除甲狀腺球蛋白自身抗體的干擾2,4,5）非常重要。雖然同時(shí)檢測(cè)其它甲狀腺抗體（anti-TPO、TSH受體抗體-TRAb）可以增加敏感性，但是anti-Tg陰性結(jié)果不能排除自身免疫性疾病的可能性?？贵w滴度與疾病的臨床活動(dòng)性無(wú)關(guān)。在疾病的緩解期或經(jīng)過(guò)漫長(zhǎng)的病程之后原先升高的抗體滴度可能轉(zhuǎn)為陰性，如果抗體在緩解之后再次出現(xiàn)，那么可

4、能是復(fù)發(fā)。Elecsys Anti-Tg試劑盒使用人抗原和單克隆的人anti-Tg抗體。6檢測(cè)原理競(jìng)爭(zhēng)法，總檢測(cè)時(shí)間：18分鐘第一次孵育：10l樣本和生物素化的Tg一起孵育，樣本中的抗體和Tg結(jié)合。第二次孵育：添加釕復(fù)合物a標(biāo)記的anti-Tg抗體和包被鏈霉親和素的磁珠微粒，通過(guò)生物素和鏈霉素的相互作用形成的免疫復(fù)合物結(jié)合于固相載體。將反應(yīng)液吸入測(cè)量池中，通過(guò)電磁作用將磁珠微粒吸附在電極表面。未與磁珠微粒結(jié)合的物質(zhì)通過(guò)ProCell被去除。給電極加以一定的電壓，使復(fù)合體化學(xué)發(fā)光，并通過(guò)光電倍增器測(cè)量發(fā)光強(qiáng)度。儀器通過(guò)2點(diǎn)定標(biāo)校正試劑條形碼包含的廠商定標(biāo)曲線，自動(dòng)計(jì)算得到檢測(cè)結(jié)果。a)Tris(

5、2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三聯(lián)吡啶釕試劑工作溶液M包被鏈霉親和素的磁珠微粒（透明瓶蓋），1瓶12mL：包被鏈霉親和素的磁珠微粒，0.72mg/mL；防腐劑。R1 生物素標(biāo)記的Tg（灰蓋），1瓶，10mL：生物素化的Tg（人），濃度0.200mg/L，TRIS緩沖液100mmol/L，pH 7.0；防腐劑。R2 釕復(fù)合物標(biāo)記的anti-Tg抗體（黑蓋），1瓶，10mL：釕復(fù)合物標(biāo)記的單克隆anti-Tg抗體（人），濃度0.620mg/L，TRIS緩沖液100mmol/L，pH7.0；防腐劑。Cal1 Anti-Tg定標(biāo)液1（白蓋），1

6、瓶（凍干品），1.5mL：人血清基質(zhì)的anti-Tg抗體（人）約40IU/mL;防腐劑。Cal2 Anti-Tg定標(biāo)液2（黑蓋），1瓶（凍干品），1.5mL：人血清基質(zhì)的anti-Tg抗體（羊）約3250IU/mL;防腐劑。定標(biāo)液：試劑條形碼內(nèi)包含批特異性定標(biāo)液的精確定值信息。警告和注意事項(xiàng)僅用于體外診斷。在使用本試劑盒時(shí)必需遵循所有實(shí)驗(yàn)室試劑操作的注意事項(xiàng)。所有廢棄物必需按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)進(jìn)行處置。專業(yè)人員可要求獲得安全數(shù)據(jù)報(bào)告。所有人源性物質(zhì)必須視為有潛在感染性。來(lái)源于人血液的所有產(chǎn)品由獻(xiàn)血員提供，經(jīng)特殊制備而成，經(jīng)檢測(cè)HBSAg、HCV抗體、HIV抗體，均為陰性。含有人甲狀腺球蛋白的原始甲狀腺

7、組織提取物經(jīng)HBSAg、HCV抗體、HIV抗體檢測(cè)，均為陰性。所應(yīng)用的檢測(cè)方法經(jīng)FDA認(rèn)可或符合歐洲法令98/79/EC附件II列表A。但由于任何實(shí)驗(yàn)方法都不能絕對(duì)地排除潛在感染的危險(xiǎn)，故該產(chǎn)品仍需視作病人樣本一樣仔細(xì)處理。接觸者必須遵循健康專業(yè)機(jī)構(gòu)相應(yīng)的法規(guī)7.8。避免試劑和樣本（樣本、定標(biāo)液和質(zhì)控品）產(chǎn)生氣泡。試劑處理試劑盒(除定標(biāo)液Cal1和Cal2外)為即用型，專用于配套系統(tǒng)。Elecsys Tg定標(biāo)液Cal1和Cal2：每瓶定標(biāo)液中準(zhǔn)確加入1.5mL蒸餾水復(fù)溶，密閉放置15分鐘。仔細(xì)混勻，避免產(chǎn)生氣泡。將復(fù)溶的定標(biāo)液轉(zhuǎn)移入有標(biāo)簽的小空瓶中（試劑盒提供）。Elecsys 1010/20

8、10和cobas e 411分析儀：復(fù)溶的定標(biāo)液Cal 1和Cal 2使用前必須室溫平衡(20-25C)。定標(biāo)吸樣結(jié)束后，應(yīng)立即蓋好瓶蓋，2-8C儲(chǔ)存。確保定標(biāo)液瓶蓋不粘有定標(biāo)液?？紤]蒸發(fā)因素，每瓶定標(biāo)液定標(biāo)次數(shù)不宜超過(guò)5次。MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀:不要把整瓶定標(biāo)液放在分析儀上進(jìn)行定標(biāo)，可使用專用小空瓶分裝定標(biāo)液，并貼上標(biāo)簽，2-8C下儲(chǔ)存，分裝的每瓶定標(biāo)液僅使用一次。試劑相關(guān)信息可以通過(guò)試劑條形碼閱讀獲取。儲(chǔ)存及穩(wěn)定性存放于28。請(qǐng)垂直擺放Elecsys Anti-Tg 試劑盒(M,R1,R2)，確保儀器的自動(dòng)攪拌器能夠完全混勻磁珠微粒。穩(wěn)

9、定性：未開(kāi)封試劑，28有效期內(nèi)均可使用開(kāi)封試劑，286周放置分析儀MODULAR ANALYTICS E170 和cobas e 601上6周放置分析儀Elecsys 2010 和 cobas e 411上6周放置分析儀Elecsys 1010上6周（試劑交替放置于冰箱和20-25的分析儀中，持續(xù)開(kāi)蓋的情況下至多20小時(shí)）凍干定標(biāo)液有效期內(nèi)均可使用復(fù)溶后定標(biāo)液28可保存6周2025，在Elecsys 2010和cobas e 411分析儀上最長(zhǎng)可保存5小時(shí)MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601 分析儀只可使用一次定標(biāo)液要垂直保存!確保定標(biāo)液沒(méi)有附著在瓶蓋上。樣本的

10、采集和準(zhǔn)備只有以下類型的標(biāo)本且標(biāo)本量滿足要求才可進(jìn)行檢測(cè)。血清樣本須用標(biāo)準(zhǔn)試管或有分離膠的真空管收集。肝素鈉、K2-EDTA、K3-EDTA抗凝的血漿。標(biāo)準(zhǔn)：血清值回收率為85115或斜率0.85-1.15，截距小于2分析靈敏度（最低檢出限），相關(guān)系數(shù)0.95。不要使用肝素鋰或枸櫞酸鈉抗凝血漿。穩(wěn)定性：2-8可保存3天；-20可保存1個(gè)月,僅可凍融一次。9選擇合適的試管進(jìn)行不同類型樣本的采集，不是所有的試管均可用于檢測(cè)。不同廠商的樣本采集系統(tǒng)可能含有不同的物質(zhì)，某些情況下會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。如果使用原始管進(jìn)行檢測(cè)（樣本前處理系統(tǒng)）時(shí)，應(yīng)遵循生產(chǎn)商所提供的指導(dǎo)。有沉淀的樣本檢測(cè)前必須先作離心處理。避

11、免使用熱滅活的樣本。添加疊氮化合物的樣本和質(zhì)控品均不能使用。檢測(cè)前，樣本、定標(biāo)液及質(zhì)控品須室溫平衡(20-25)。由于蒸發(fā)因素的影響，樣本、定標(biāo)液及質(zhì)控品在分析儀上的檢測(cè)必須2小時(shí)內(nèi)完成。提供的物品參閱“試劑工作溶液”章節(jié)。26 小瓶標(biāo)簽4個(gè)貼有標(biāo)簽的有蓋小空瓶需要的物品（未提供）貨號(hào)05042666191, PreciControl ThyroAB, 規(guī)格2x2 ml, 各含PreciControl ThyroAB 1和2貨號(hào)11776576322, CalSet小瓶，2x56有蓋小空瓶實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)備Elecsys 1010/2010 、MODULAR ANALYTICS E170或coba

12、s e分析儀蒸餾水或去離子水Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析儀所需材料：貨號(hào)11662988122, ProCell, 6 x 380 mL ,系統(tǒng)緩沖液貨號(hào)11662970122, CleanCell, 6x380 mL,測(cè)量池洗液 貨號(hào)11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL 附加洗液貨號(hào)11933159001, SysClean 適配器 貨號(hào)11706829001, Elecsys 1010分析杯, 12 x 32反應(yīng)管或者貨號(hào)11706802001, Elecsys 2010 分析杯, 60 x 60 反應(yīng)管貨號(hào)11

13、706799001, Elecsys 2010 分析吸頭, 30 x 120移液管吸頭MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀所需材料：貨號(hào)04880340190,ProCell M, 2 x 2 L系統(tǒng)緩沖液貨號(hào)04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L測(cè)量池洗液 貨號(hào)03023141001, PC/CC杯 12個(gè)，用于在檢測(cè)前預(yù)熱Procell M及Cleancell M。貨號(hào)03005712190,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在檢測(cè)完畢后或更換試劑時(shí)清洗試劑針。貨號(hào)12102137001,反應(yīng)杯/吸

14、頭 組合裝84反應(yīng)杯/吸頭 組合裝48盒,廢物袋 貨號(hào)03023150001, WasteLiner,廢物袋 貨號(hào)03027651001,系統(tǒng)清潔適配器 M所有分析儀需要：貨號(hào)11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系統(tǒng)清洗液 檢測(cè)要優(yōu)化檢測(cè)性能，請(qǐng)遵照本說(shuō)明書中有關(guān)分析儀的相關(guān)指導(dǎo)，并參照分析儀操作手冊(cè)。試劑使用前分析儀自動(dòng)攪拌磁珠微粒，使其處于懸浮狀態(tài)。試劑相關(guān)信息可通過(guò)條形碼自動(dòng)讀取，在特殊情況下，分析儀無(wú)法自動(dòng)讀取條碼信息時(shí)，請(qǐng)輸入條碼標(biāo)簽上的15位數(shù)字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e

15、分析儀：將冷藏試劑（M,R1,R2）室溫平衡至20C左右，放置分析儀的試劑盤（20C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。分析儀能自動(dòng)調(diào)節(jié)試劑溫度和開(kāi)、關(guān)各試劑盒瓶蓋。Elecsys 1010 分析儀: 將冷藏試劑(M,R1, R2）室溫平衡至20-25C左右，放置分析儀的試劑盤（室溫20- 25C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。使用前后手動(dòng)開(kāi)關(guān)試劑盒瓶蓋。使用后保存于2-8C冰箱。將復(fù)溶的定標(biāo)液Cal1和Cal2 放在分析儀的樣本架上。只在定標(biāo)時(shí)打開(kāi)瓶蓋。定標(biāo)相關(guān)信息可通過(guò)定標(biāo)液瓶上條形碼閱讀自動(dòng)獲取。定標(biāo)完成后，將定標(biāo)液Cal1和Cal2 放回28保存或者丟棄(MODULAR ANALYTICS E170和cobas

16、e 601分析儀)定標(biāo)溯源性：該檢測(cè)方法可溯源至NIBSC 65/93標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。每套Elecsys Anti-Tg試劑的條碼標(biāo)簽上均含有其批特異的定標(biāo)信息。使用Elecsys Anti-Tg定標(biāo)液1和2可調(diào)整預(yù)設(shè)置的定標(biāo)曲線。定校頻率：新批號(hào)試劑必須進(jìn)行定標(biāo)（新試劑盒在分析儀上放置不能超過(guò)24小時(shí)）。以下情況建議重新進(jìn)行定標(biāo)：MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 和cobas e 分析儀:使用同一批號(hào)試劑，1月后（28天）7天后（同一試劑盒在分析儀上使用）Elecsys 1010 分析儀：每個(gè)試劑盒7天后（室溫20-25）3天后（室溫25-32）所有分析儀：

17、根據(jù)需要：如質(zhì)控超限。質(zhì)控可使用Elecsys PreciControl ThyroAB 1和2進(jìn)行質(zhì)量控制。其他合適的質(zhì)控品也適用。各濃度質(zhì)控至少每24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)一次，每次更換試劑盒或定標(biāo)后也須進(jìn)行質(zhì)控。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)各自的情況設(shè)定合適的控制限和質(zhì)控周期。質(zhì)控值必須處于規(guī)定的控制限內(nèi)。若失控每個(gè)試驗(yàn)室必須采取相應(yīng)的糾正措施。請(qǐng)遵循政府法規(guī)和當(dāng)?shù)匦袠I(yè)導(dǎo)則進(jìn)行質(zhì)量控制。計(jì)算儀器會(huì)自動(dòng)計(jì)算每個(gè)樣本中的分析物濃度，單位是IU/mL或kIU/L。干擾因素檢測(cè)結(jié)果不受黃疸（膽紅素1129mol/L或66mg/dL）, 溶血（血紅蛋白1.05mmol/L或 1.69g/dL）, 脂血(脂肪乳劑2000m

18、g/dL)和生物素246nmol/L或 5mg/天），必須在末次生物素治療8小時(shí)后采集樣本。濃度300 IU/ml的類風(fēng)濕因子對(duì)檢測(cè)結(jié)果不影響。體外對(duì)24種常用藥物進(jìn)行試驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。極少數(shù)病例由于存在高濃度的抗分析物特異性抗體、抗鏈霉素或釕的抗體會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。試驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)已將這些影響降低到最小化。作為診斷指標(biāo)，必須結(jié)合患者病史，臨床檢查和其他臨床資料來(lái)綜合評(píng)估檢測(cè)結(jié)果。檢測(cè)范圍10-4000IU/mL（通過(guò)最低檢出限和廠商定標(biāo)曲線的最高值確定）。低于檢出限的值報(bào)告4000IU/mL。稀釋樣本不可稀釋。自身抗體屬異質(zhì)性，會(huì)產(chǎn)生非線性稀釋現(xiàn)象。約有5%病理性樣本的濃度4000IU/mL

19、。期望值使用Elecsys Anti-Tg試劑盒（MCE Elecsys Anti-Tg 試劑盒，2001年10月）在5個(gè)臨床中心392位健康受試者對(duì)目前使用的臨界值115 IU/mL進(jìn)行了驗(yàn)證，其對(duì)應(yīng)于第94百分位點(diǎn)。兒童、青少年和孕婦的參考范圍可以參考“兒童和成人參考范圍”（英文貨號(hào): 04640292, 德文貨號(hào): 04625889）手冊(cè)也包括了成人參考范圍研究得到的甲狀腺激素影響因素的詳細(xì)研究結(jié)果。不同的入選和排除標(biāo)準(zhǔn)均遵循NACB導(dǎo)則關(guān)于甲狀腺超聲檢查（甲狀腺體積和密度）的結(jié)果。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定參考范圍的適用性，必要時(shí)建立本實(shí)驗(yàn)室的參考范圍。特殊的性能指標(biāo)試劑在分析儀上的性能

20、試驗(yàn)數(shù)據(jù)如下。各實(shí)驗(yàn)室由于具體情況不同，所得出的數(shù)據(jù)可能會(huì)稍有差異。精密度應(yīng)用Elecsys試劑盒、人混合血清樣本和質(zhì)控品驗(yàn)證重復(fù)性，按照NCCLS的EP5-A進(jìn)行操作：每天5次或6次，共10天（n=59或60）；批內(nèi)精密度在MODULAR ANALYTICS E170分析儀上測(cè)定： n=21。結(jié)果如下：分析靈敏度（最低檢出限）10IU/mL最低檢出限指區(qū)別于零濃度的分析物最低檢測(cè)濃度。方法學(xué)比較使用高于或低于Elecsys Anti-Tg臨界值（115 IU/mL）的樣本進(jìn)行比較。Enzymun-Test Anti-Tg方法的臨界值是115 IU/mL，另外兩種商售Anti-Tg試劑盒的臨界

21、值分別是60IU/mL和40IU/mL。經(jīng)Elecsys Anti-Tg試劑盒檢測(cè)，樣本的濃度范圍在104000IU/mL之間。a）臨床常規(guī)樣本使用臨床常規(guī)樣本比較Elecsys Anti-Tg和Enzymun-Test Anti-Tg方法檢測(cè)的結(jié)果：使用臨床常規(guī)樣本比較Elecsys Anti-Tg和一種商售的Anti-Tg方法檢測(cè)的結(jié)果：使用臨床常規(guī)樣本比較Elecsys Anti-Tg和第二種商售的Anti-Tg試劑檢測(cè)的結(jié)果：b）患者樣本使用Graves?。╪=39）和橋本氏甲狀腺炎（n=43）患者的樣本比較Elecsys Anti-Tg和Enzymun-Test Anti-Tg方法檢

22、測(cè)的結(jié)果：使用Graves?。╪=39）和橋本氏甲狀腺炎（n=43）患者的樣本比較Elecsys Anti-Tg和一種商售Anti-Tg試劑檢測(cè)的結(jié)果：使用Graves?。╪=39）和橋本氏甲狀腺炎（n=43）患者的樣本比較Elecsys Anti-Tg和另一種商售Anti-Tg試劑檢測(cè)的結(jié)果：分析特異性大約含有1400IU/mL anti-TPO（Elecsys Anti-TPO試劑盒檢測(cè)）的樣本可檢測(cè)到anti-Tg的最大值為51IU/mL。參考文獻(xiàn)1. Hrmann R. Schilddrsenkrankheiten, Hyperthyreose,Untersuchungsschema/

23、Labormethoden Blackwell Wissenschafts-Verlag 2. Thomas L. Thyriod function. Thyroglobulin antibodies. In: Thomas L (ed.).Deutsch: Labor und Diagnose. TH-Books, Frankfurt. 5th edition 1998:1043. English: Clinical Laboratory Diagnosis. 1st edition 1998:1021.3. Feldt-Rasmussen U. Analytical and clinica

24、l performance goals for testing autoantibodies to thyroperoxidase, thyroglobulin, and thyrotropin receptor. Clin Chem 1996;42(1):160-163.4. Spencer CA, Takeuchi M, Kazarosyan M Wang CC, Guttler RB, Singer PA, et al. Serum Thyroglobulin Antibodies: Prevalence, Influence on Serum Thyroglobulin Measurement, and Prognostic Significance in Patients with Differentiated Thyroid Carcinoma. J Clin Endocrin Metabol 1998;83(