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文檔簡介
糖類研究方法
糖的研究方法第1頁一、多糖提取二、多糖分離純化三、多糖結(jié)構(gòu)分析糖的研究方法第2頁
多糖提取
提取
濃縮
沉淀
洗滌
干燥原材料
多糖提取液
多糖提取物熱水浸提法堿提法甲醇乙醇依次用95%乙醇、無水乙醇、無水乙醚吸干,快速轉(zhuǎn)入真空干燥器中減壓真空干燥(含P2O5或NaOH)直接冷凍干燥糖的研究方法第3頁一、多糖提取二、多糖分離純化三、多糖結(jié)構(gòu)分析糖的研究方法第4頁多糖分離純化
純度判定及
重復(fù)沉淀除蛋白質(zhì)脫色
層析分離分子質(zhì)量測定多糖提取物
均一級份多糖乙醇或丙酮,除部分極性小雜質(zhì)結(jié)合蛋白:蛋白酶降解或稀堿液游離蛋白:氯仿:乙醇5:1(4:1)形成凝膠物,離心除去
活性炭吸附法離子交換法:來自植物,酚性化合物顏色深,負(fù)性離子氧化脫色:色素與糖結(jié)合時(shí),,易被纖維素吸附。濃氨水(氫氧化鈉液)調(diào)PH8.0左右,50攝氏度以下加H2O2至淺黃色,保溫兩小時(shí)按分子質(zhì)量大小分級:分子篩層析按分子極性分級:離子交換層析電泳:單一條帶高效液相色譜HPLC:單一色譜峰紫外光下:無吸收峰糖的研究方法第5頁一、多糖提取二、多糖分離純化三、多糖結(jié)構(gòu)分析糖的研究方法第6頁多糖結(jié)構(gòu)分析
主要是對其一級結(jié)構(gòu)進(jìn)行測定,包含:多糖相對分子質(zhì)量范圍、單糖組成和百分比、單糖連接次序和連接點(diǎn)類型、
糖苷鍵構(gòu)型,糖鏈有沒有分支、分支位置及長短,
是否有羧基、氨基以及硫酸基取代及重復(fù)單元等。結(jié)構(gòu)分析方法普通來說能夠分為:傳統(tǒng)化學(xué)方法
儀器分析法
酶法1.部分水解法1.分光光度法2.完全水解法2.紅外光譜法3.甲醇解和乙酰解3.核磁共振法4.高碘酸氧化法
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