醫(yī)院檢驗中心隱血試驗操作規(guī)程

醫(yī)院檢驗中心隱血試驗操作規(guī)程上消化道有少量出血時，紅細胞被消化而分解破壞，由于顯微鏡下不能發(fā)現(xiàn)，故稱為隱血。1）免疫學檢測法[原理]大便隱血的免疫一步檢驗法是一個高靈敏度的夾心式酶聯(lián)免疫測定法。該法采用抗人血紅蛋白的單克隆抗體和多克隆抗體，特異地針對糞便樣品中的人血紅蛋白。因此，本試驗不受動物血紅蛋白的干擾， 試驗前不須禁食肉類。[操作]取一片潔凈干燥的載玻片，滴加 2—3滴蒸餾水，取糞便小許，調成均勻混懸液。取便隱血試紙條，按說明書操作，將試紙條的反應端浸濕。在 5min內觀察結果。若反應線(T)和質控線(C)同時呈藍色色帶即為陽性； 若只有C線呈色為陰性；若丁線與 C線均不顯色，說明試驗無效。[附注]1．敏感性和特異性敏感性：樣品中血紅蛋白濃度超過 0．2μg／m1，就可得到陽性結果。特異性：便潛血免疫一步檢驗法是特異對人體血紅蛋白的檢驗，樣品中若含有如下干擾物，實驗結果不會受影響：雞血紅蛋白 500μg／ml牛血紅蛋白 500μg／m1馬血紅蛋白 500μg／ml豬血紅蛋白 500μg／m1羊血紅蛋白 500μg／m1兔血紅蛋白 500μg／m1辣根過氧化酶 200μg／m12．試驗局限性本法可以幫助醫(yī)生早期發(fā)現(xiàn)胃腸道病變，然而，由于家族性息肉或直腸癌可能不出血，或間斷性出血，或出血在糞便中分布不均勻，都可造成陰性結果。本法對正常人檢驗有時也會得到陽性結果，這是由于某種刺激胃腸道的藥物造成便潛血所至。本檢驗法只能作為篩選或輔助診斷用，不能替代胃鏡、直腸鏡、內窺鏡和X光檢查。[臨床意義]1．消化道出血時(如潰瘍病、惡性腫瘤、腸結核、傷寒、鉤蟲病等)本試驗可陽性。2．消化道惡性腫瘤時，糞便隱血可持續(xù)陽性，潰瘍病時呈間斷性陽性。3．本法可作為消化道惡性腫瘤普查初篩試驗。（2）試帶法國內外生產(chǎn)以四甲基聯(lián)苯胺為顯色基質的隱血試驗試帶，使用方便，患者也可自留標本檢測。3）鄰甲聯(lián)苯胺法[原理]血紅蛋白中的亞鐵血紅素有類似過氧化物酶的活性，能催化過氧化氫，放出新生態(tài)氧，將受體鄰甲苯胺氧化成鄰甲偶氮苯而顯藍色。[試劑]1．10g／L

鄰甲聯(lián)苯胺

(o-tolidine)

溶液：取鄰甲聯(lián)苯胺 18，溶于冰醋酸及無水乙醇各 50m1的混合液中，置棕色瓶中，保存于 4℃冰箱中，可用8—12周，若變?yōu)榘瞪?，應重新配制?．3％過氧化氫液[操作]1．用竹簽挑取少量糞便，涂在消毒棉簽上或白瓷板上。2．墑加0．15L/L鄰甲苯胺冰乙酸溶液 2—3滴于糞便上。3．滴加3％過氧化氫 2—3滴。4．立即觀察結果，在 2min內顯藍色為陽性。[結果判斷]陰性：加入試劑 2min后仍不顯色。十，加入試劑 10s后，由淺藍色漸變藍色。2十：加入試劑后初顯淺藍褐色， 逐漸呈明顯藍褐色。十：加入試劑后立即呈現(xiàn)藍褐色。十：加入試劑后立即呈現(xiàn)藍黑褐色。[附注]1．O—tolidine[3 ，3’-Dimethyl-(1 ，1’-biphenyl) —4，4’-Diamine，Cl4Hl6N2,MW212．3]，中文名稱鄰甲聯(lián)苯胺， 亦稱鄰聯(lián)甲苯胺。另有，O—toluidine(2-Aminot01uene ，C7H9N，MWl07。，中文名稱鄰甲苯胺，可用于血糖測定，兩者應予區(qū)別。2．糞便標本必須及時檢查，以免靈敏度降低。3．3％過氧化氫必須有效，應進行陽性對照試驗，將過氧化氫滴血片上，產(chǎn)生泡沫，或滴加于重鉻酸鉀硫酸液，顯褐色示有效。4．強調實驗前三天內禁食動物血、肉、肝臟及富含葉