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文檔簡介
白血病/淋巴瘤免疫(miǎnyì)分型臨檢(línjiǎn)血液蔣能剛第一頁,共三十五頁。應用目的:確定淋巴系病變的起源和分化程度;鑒別反應性與克隆性淋巴細胞增生性疾??;確定髓系白血病各亞型;對形態(tài)學分類(fēnlèi)不明細胞進行定性;診斷急性未分化型白血??;診斷急性混合細胞白血??;診斷微小殘留白血病或白血病浸潤;判斷白血病/淋巴瘤預后。第二頁,共三十五頁。流式細胞術(FlowCytometry):對高速流過檢測區(qū)的單個細胞或生物顆粒進行多參數(shù)、快速分析(或分選)的一種(yīzhǒnɡ)技術。第三頁,共三十五頁。第四頁,共三十五頁。數(shù)據(jù)(shùjù)顯示方式:單參數(shù)直方圖雙參數(shù)二維點圖等高圖二維密度圖三維圖第五頁,共三十五頁。單參數(shù)(cānshù)直方圖雙參數(shù)(cānshù)點圖第六頁,共三十五頁。熒光(yíngguāng)素FITC(異硫氰酸熒光(yíngguāng)素):530nm(綠)PE(藻紅蛋白):575nm(橙黃)PI(碘化丙啶):620nm(橙紅)PerCP(多甲藻黃素葉綠素蛋白):675nm(深紅)APC(別藻蘭蛋白):660nm(紅)第七頁,共三十五頁。檢測物:細胞(xìbāo)表面、胞漿或胞核抗原性物質第八頁,共三十五頁。CD(clusterofdifferentiation):1982年起將識別同一分化抗原的來自不同(bùtónɡ)實驗室的單克隆抗體歸為一個分化群,并進行流水編號。一個CD相關抗體可包含多個克隆號。其他非CD系列抗原:如TCR、HLA等第九頁,共三十五頁。正常血細胞中的抗原(kàngyuán)表達特點1.系列保守(bǎoshǒu)性2.時序性3.抗原表達量的模式化第十頁,共三十五頁。干細胞嗜堿性(jiǎnxìnɡ)細胞嗜酸性(suānxìnɡ)細胞定向(dìnɡxiànɡ)髓系干細胞紅系巨核系粒單核系粒系單核系CD36CD71CD235aCD41CD42a/bCD61CD4CD11bCD14CD64HLA-DRCD36CD15CD71CD16(TDTCD7)CD34CD117CD13CD33CD38MPOCD34CD13CD33CD117MPO第十一頁,共三十五頁??乖碳じ杉毎缜?zǎoqián)B前B靜止(jìngzhǐ)期BPro-BALLPre-BALLCommon-BALLCLL/SLL免疫(miǎnyì)母細胞漿細胞樣淋巴細胞大B細胞淋巴瘤淋巴漿細胞淋巴瘤外套細胞濾泡區(qū)母細胞中心母細胞中心細胞邊緣帶細胞漿細胞套細胞淋巴瘤伯基特淋巴瘤大B細胞淋巴瘤濾泡淋巴瘤邊緣帶淋巴瘤骨髓瘤TDT+CD34+cCD79a+CD19+CD10±cμ-TDT+CD34+cCD79a+CD19+CD20±CD10+cμ-TDT+CD34±cCD79a+CD19+CD20+CD10±cμ+CD5+CD19+CD20CD22+CD23+sIg+FMC7-CD38CD138CD56cIgCD19-CD45-CD22+CD5-CD10-CD23-CD22+CD10+FMC7+CD23±bcl-2+CD5-CD19+CD20+CD22+CD38+IgM++sIg++CD22+CD10+sIg+CD34-TDT-CD5+CD22+sIg+FMC7+CyclinD1+CD23-CD22+bcl-6+CD10±CD5±CD30±第十二頁,共三十五頁。干細胞胸腺Ⅱ期胸腺Ⅰ期TDT+CD34+CD2cCD3CD7CD71TDT+CD34±CD1aCD2cCD3CD7CD4CD8胸腺Ⅲ期TDT+CD2CD3CD5CD7CD4/CD8TCRPrecursor-TALL成熟(chéngshú)T細胞各分化群第十三頁,共三十五頁。造血細胞在其分化、發(fā)育過程中,細胞膜、細胞漿或胞核抗原的有無、表達強弱與血細胞的分化發(fā)育階段密切相關,表現(xiàn)出與細胞系列(xìliè)及其分化程度相關的特性。第十四頁,共三十五頁。白血病細胞中的抗原(kàngyuán)表達特點表達模式基本與相應階段正常細胞相似,還具有以下(yǐxià)特點:1.跨系表達2.時相混亂3.抗原表達量的改變第十五頁,共三十五頁。免疫(miǎnyì)分型四種急性白血病單表型急性白血病表達(biǎodá)某一個系列抗原為主的急性白血病雙表型/雙克隆急性白血病未分化型急性白血病第十六頁,共三十五頁。各系急性白血病重要抗原(kàngyuán)指標1.急性(jíxìng)淋巴細胞白血病(AL)敏感性特異性B-ALL:CD19100%非特異cCD79a99%特異T-ALL:CD7100%非特異cCD3100%特異第十七頁,共三十五頁。2.急性髓細胞(xìbāo)白血病(AML)表達率特異性CD1370%非特異CD3370%非特異CD11770%特異cMPO70%特異第十八頁,共三十五頁。錯譯表達(Ly+AML,My+ALL):白血病細胞表達非本系細胞抗原標志物,具有(jùyǒu)預后意義。第十九頁,共三十五頁。ALLCD13,CD33 t(9;22)AMLCD2+,DR- M3 t(15;17),或RAR+, t(11;17)CD2+,DR+ M4Eo inv(16)或t(16;16)
CD19+ M0 t(9:22)多見M2 t(8;21)
TdT+,CD7+ 見于(jiànyú)M0CD56+ M5/M4第二十頁,共三十五頁。雙表型急性白血病記分(jìfēn)系統(tǒng)分值B系T系髓系2cCD79acCD3cMPOCD22TCRαβcIgMTCRγδ1CD19CD2CD117CD10CD5CD13CD20CD8CD330.5TdTTdTCD14CD24CD7CD15CD64第二十一頁,共三十五頁。部分(bùfen)慢性B淋巴細胞增殖性疾病的免疫表型
CD5CD10CD19CD22CD23HLA-DRFMC7SIgCD11cCLL+-++/-++-++/-PLL--++-+++-MCL+-/+++-+++-HCL--++-++++FCL-+++-/+++/-+-MZL--++-++++/-LPL--++-/++-/+注:HCLCD103+CD25+第二十二頁,共三十五頁。部分慢性T淋巴細胞增殖性疾病(jíbìng)的免疫表型CD2CD3CD5CD7CD4CD8CD25CD56CD57T-CLL/PLL+++++/--/+-T-LGL+++/-+/--+--/++NK-LGL+---+/--+-ATL+++-++肝脾γδT細胞(xìbāo)淋巴瘤:CD2+CD3+CD7+TCRγδ+CD16+/-CD56+/-CD8-/+
CD4-TCRαβ-第二十三頁,共三十五頁。標本(biāoběn)種類:懷疑含有病變細胞的組織或體液,如外周血、骨髓、胸腹水、腦脊液、淋巴結等。標本要求:細胞有活性,最好不要超過48h。第二十四頁,共三十五頁。光散射特征與細胞形態(tài)(xíngtài)的關系第二十五頁,共三十五頁。淋巴(línbā)單核粒細胞CD45CD45M4/M5M3正常(zhèngcháng)白血病L1~3,M0~2M6,M7TSSCSSCMM非造血(zàoxuè)來源細胞CD45在免疫分型中的應用意義原始嗜堿嗜酸第二十六頁,共三十五頁。正常(zhèngcháng)骨髓第二十七頁,共三十五頁。AML-M1AML-M2AML-M3AML-M4/M5第二十八頁,共三十五頁。AML-M6非造血(zàoxuè)細胞非特異性染色(rǎnsè)(死亡細胞)ALL第二十九頁,共三十五頁。分類(fēnlèi)不明細胞第三十頁,共三十五頁。B細胞(xìbāo)克隆性第三十一頁,共三十五頁。結果(jiēguǒ)報告第三十二頁,共三十五頁。白血病免疫(miǎnyì)分型其他方法:酶-底物顯色熒光顯微鏡
第三十三頁,共三十五頁
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