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僅供個(gè)人參考BCA蛋白濃度測(cè)定?BCAProteinKit(試劑盒室溫保存)1.準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品按Table1配制一系列的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品原液(stock):取出一個(gè)內(nèi)含2mg/mL白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品(此量足夠3個(gè)replication)2.備作液(Reagent,WR)(1)公式計(jì)總工液量(標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)+待測(cè)樣品數(shù))*(復(fù)制數(shù))*(每個(gè)工作液的量)=總的需要的工作液的量例子:3個(gè)待測(cè)樣品,每個(gè)樣品2個(gè)復(fù)制所需的工作液量(9個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品+3個(gè)待測(cè)樣品)*(2個(gè)復(fù)制數(shù))*(2ml)=48ml工作液Note:試管法:每個(gè)試管需工作液微孔板:每個(gè)孔需工作液(例子中需共4.8ml)(2)BCA試A:B=50:1配制適量工作液,充分混勻。對(duì)于上面的例子,試管法需要50mlBCAA液1mlBCAB液微孔板法需A液和1mlB液.B液加到A液中時(shí)迅速渾濁,但是通過(guò)混勻立即變成清澈綠色的工作液.工作液在密閉室溫下可以保存數(shù)天.3.孔板步驟品與工液比例=1:8)(1).準(zhǔn)液和樣品加入微板中Note:若樣品有限,可各加10ul(樣品與工作液比例1:20)(2).孔加200ul的工液并且分震蕩30s(3).37孵育樣30min,或室2h(4).卻至室溫。(5).酶標(biāo)儀中測(cè)562nm時(shí)的吸光不得用于商業(yè)用途
僅供個(gè)人參考(6).制標(biāo)準(zhǔn)曲線再用標(biāo)曲線判斷出品的蛋濃度。Note:540-590nm的波長(zhǎng)均可Figure1:TypicalcolorresponsecurvesforBSAandBGGusingStandardTestTubeProtocol(37°C/30-minuteincubation).不得用于商業(yè)用途
僅供個(gè)人參考僅供個(gè)用學(xué)習(xí)、究不得用商業(yè)用。Forpersonaluseonlyinstudyandresearch;notforcommercialuse.Nurfürdenpers?nlichenfürStudien,Forschung,zukommerziellenZweckenverwendetwerden.Pourl'étudeetlarechercheàdesfinspersonnelles;pasàdesfinscommerciales.толькдлялюдей,которыеиспользуютсядляобучения,исследований
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