肌酸激酶MB同工酶試劑盒企業(yè)標準

醫(yī)療器械產(chǎn)品企業(yè)標準（建議稿）肌酸激酶MB同工酶試劑盒CREATINEKINASEMBISOENZYMEREAGENTKIT2005-02-27發(fā)布 深圳市德朝電子技術(shù)有限公司發(fā)布前言肌酸激酶MB同工酶試劑盒目前無國家標準和行業(yè)標準，本公司制定本標準作為組織生產(chǎn)、質(zhì)量檢定和營銷活動的依據(jù)。本標準的編寫格式按照GB/T1.1-2000《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則》、GB/T1.2-2002《標準化工作導(dǎo)則第2部分：標準中規(guī)范性技術(shù)要素內(nèi)容的確定方法》。本標準自2005年本標準由深圳市德朝電子技術(shù)有限公司質(zhì)量部提出并起草。本標準起草單位：深圳市德朝電子技術(shù)有限公司。本標準主要起草人：

肌酸激酶MB同工酶試劑盒1、范圍本標準規(guī)定了肌酸激酶MB同工酶試劑盒的要求、試驗方法、檢驗規(guī)則、標志、標簽、使用說明書、包裝、運輸及貯存等要求。本標準適用于體外定量檢測人血清中肌酸激酶MB同工酶的活力。本產(chǎn)品適用于各種類型的半自動、全自動臨床生化分析儀。2、規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。GB191-2000 包裝儲運圖示標志GB9969.1-1998 工業(yè)產(chǎn)品使用說明書總則3、試劑組成組成組分包裝規(guī)格R1咪唑緩沖液R160mL， R215mLN-乙酰半胱氨酸R180mL， R220mL乙酸鎂R12×50mL， R225mL二磷酸腺苷R12×80mL， R240mL二腺苷五磷酸R14×50mL， R250mLD-葡萄糖R14×70mL， R22×35mL氧化型輔酶ⅡR14×80mL， R22×40mL己糖激酶葡萄糖-6-磷酸脫氫酶抗人CK-M抗體R2咪唑緩沖液磷酸肌酸4、方法原理樣本中肌酸激酶MM同工酶（CK-MM）和50%肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）的活性被試劑中CK-M多克隆抗體抑制，未被抑制的50%CK-MB催化磷酸肌酸與二磷酸腺苷（ADP）反應(yīng)產(chǎn)生三磷酸腺苷（ATP）和肌酸，在偶聯(lián)的己糖激酶（HK）和葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PDH）的催化作用下，三磷酸腺苷與葡萄糖作用產(chǎn)生葡萄糖-6-磷酸，并被氧化為6-磷酸葡萄糖內(nèi)脂，同時試劑中的NADP+被還原為NADPH，引起340nm處的光吸收值升高，通過監(jiān)測340nm處光吸收值上升的速率，可以測定肌酸激酶MB同工酶的活力。本方法中CK-BB同工酶的活性忽略不計。磷酸肌酸+ADP肌酸+ATPATP+葡萄糖葡萄糖-6-磷酸+ADP葡萄糖-6-磷酸+NADP+6-磷酸葡萄糖內(nèi)脂+NADPH5、技術(shù)要求5.1、外觀液體雙試劑試劑1為無色澄清液體，試劑2為無色澄清液體。5.2、空白吸光度值肌酸激酶MB同工酶試劑在37℃、測定波長為340nm、比色光徑為1.0cm時，試劑1與試劑2按4:1比例混合成的工作試劑空白吸光度值A(chǔ)應(yīng)≤0.700。5.3、試劑空白變化率肌酸激酶MB同工酶試劑在37℃、測定波長為340nm、比色光徑為1.0cm時，液體雙試劑工作試劑的空白吸光度變化率︱A︱≤0.010/5min5.4、線性范圍采用6.2測定參數(shù)，試劑盒測定線性范圍為0~500U/L，測定結(jié)果r值應(yīng)≥0.980。5.5、準確度肌酸激酶MB同工酶試劑盒在適用機型上測定兩個已知濃度的血清基質(zhì)控品時，其測定結(jié)果應(yīng)在靶值范圍之內(nèi)。5.6、精密度5.6.1、批內(nèi)精密度：CV≤8.0%(n=10)5.6.2、批間精密度（批間差）：CV≤10.0%5.7、裝量肌酸激酶MB同工酶試劑盒裝量應(yīng)不低于標示量的95%。5.8、穩(wěn)定性：試劑1和試劑2分別在4℃放置12個月，各項檢測結(jié)果應(yīng)符合5.1~5.76、試驗方法6.1、試驗環(huán)境6.1.1、測定器材：各類適用的自動生化分析儀或具有測試波長的分光光度計、恒溫設(shè)備、定時器、移液器或加樣器。6.1.2、按定值質(zhì)控血清說明書規(guī)定溶解稀釋定值質(zhì)控血清。6.1.3、試劑配制：液體試劑可直接使用。6.1.4、線性測定時可采用線性質(zhì)控品或?qū)⒏咧笛灏?%、20%、40%、60%、80%、100%比例稀釋備用。6.2、基本參數(shù)：表1：基本測定參數(shù)參數(shù)名稱要求參數(shù)名稱要求測定溫度37試劑1用量200l主波長340nm樣本用量10l吸光度范圍0~2A試劑2用量50l比色杯光徑1.0cm延遲時間120秒測定模式速率法測定時間60秒?yún)?shù)設(shè)定應(yīng)根據(jù)不同的測定儀器進行調(diào)整，參照儀器說明書。6.3、外觀檢測在自然光下目測肌酸激酶MB同工酶試劑盒，試劑溶液外觀應(yīng)符合5.1條的規(guī)定。6.4、空白吸光度測定試劑1與試劑2按4:1比例混合成工作試劑，在37℃預(yù)溫10分鐘后，在測定波長為340nm、比色光徑為1.0cm時，以純水為空白管，所測試劑空白吸光度值A(chǔ)應(yīng)符合5.26.5、試劑空白變化率試劑1與試劑2按4:1比例混合成工作試劑，在37℃預(yù)溫10分鐘后，在測定波長為340nm、比色光徑為1.0cm時，以純水為空白管，連續(xù)監(jiān)測試劑空白吸光度值5分鐘，計算5分鐘試劑空白變化的差值，結(jié)果A應(yīng)符合5.36.6、線性范圍取R1，R2試劑各1瓶，采用線性質(zhì)控品或?qū)⒏咧笛灏?%、20%、40%、60%、80%、100%比例稀釋后進行測定，以樣本管的濃度為X值，以每樣本管相對應(yīng)的理論值為Y值，按下式求出回歸系數(shù)r值，其結(jié)果應(yīng)符合5.4條的要求：式中： Xi為樣本管的濃度 Yi為與樣本管相對應(yīng)的吸光度測定值 n為測定樣本數(shù)6.7、準確度測定用待檢試劑2管平行測定兩個已知濃度的血清基質(zhì)質(zhì)控品，計算樣本測定結(jié)果均值（），其結(jié)果應(yīng)在靶值范圍之內(nèi)。6.8、精密度測定6.8.1、批內(nèi)精密度測定：取R1，R2試劑各3瓶，測定同一份異常質(zhì)控血清樣本10次，計算3瓶測定結(jié)果的變異系數(shù)CV(%)，其結(jié)果應(yīng)符合5.6.1的要求。6.8.2、批間精密度測定：取3個批號試劑，每個批號取R1，R2各1瓶；分別測定同一份異常質(zhì)控血清樣本各10次，計算3批試劑測定總均值（）和總標準差ST，按下式計算出變異系數(shù)CV(%)，其結(jié)果應(yīng)符合5.6.2的要求。6.9、最低裝量檢測肌酸激酶MB同工酶試劑盒用適用的量具稱量或量取應(yīng)符合5.7條的規(guī)定。6.10、穩(wěn)定性測定肌酸激酶MB同工酶試劑1和試劑2分別在4℃放置12個月，各項測定結(jié)果應(yīng)符合5.1~6.96.11、操作步驟管號1234567在340nm處，分光光度計用純水調(diào)“0”試劑1（L）200200200200200200200生理鹽水（L）10－－－－－－20%高值血清（L）－10－－－－－40%高值血清（L）－－10－－－－60%高值血清（L）－－－10－－－80%高值血清（L）－－－－10－－100%高值血清（L）－－－－－10－質(zhì)控品（L）－－－－－－10混勻，37℃孵育5試劑2（L）50505050505050混勻，孵育120秒后，連續(xù)監(jiān)測各管吸光度值（A），確定線性反應(yīng)時間。根據(jù)不同測定儀器，可以調(diào)整試劑與樣本比例7、檢驗規(guī)則7.1、檢驗分為出廠檢驗和型式檢驗。7.2、出廠檢驗7.2.1、出廠檢驗由公司質(zhì)量部檢驗，檢驗合格后方可銷售。7.2.2、抽樣在本標準規(guī)定的限度內(nèi)具有同一性質(zhì)和質(zhì)量，并在同一連續(xù)生產(chǎn)周期中生產(chǎn)出來的一定數(shù)量的試劑盒為一批。每批試劑盒均應(yīng)編制唯一的生產(chǎn)批號。根據(jù)批生產(chǎn)數(shù)量，設(shè)每批產(chǎn)品的成品數(shù)為n，當n≤300時，按取樣數(shù)隨機取樣（不少于一個包裝）；當n＞300時，按取樣數(shù)隨機取樣。7.2.3、檢驗判定出廠檢驗項目為5.1~5.7（不包含5.6.2批間精密度），只有按全部出廠檢驗項目對全部抽樣樣本的判斷是合格的，才能最終判斷合格，否則就判斷不合格。7.3、型式試驗7.3.1、在下列情況下，應(yīng)進行型式檢驗：a)新產(chǎn)品投產(chǎn)前；b)正式生產(chǎn)后，如生產(chǎn)工藝發(fā)生較大改變，可能影響產(chǎn)品性能時；c)停產(chǎn)超過6個月，恢復(fù)生產(chǎn)時；d)主要原料改變時；e)國家監(jiān)督管理部門進行質(zhì)量抽查時。7.3.2、型式試驗抽樣型式試驗的樣本從生產(chǎn)廠檢驗合格的成批產(chǎn)品中，隨機抽取，抽取方法同7.2.3。其中產(chǎn)品注冊為送樣。7.3.3、檢驗判定按5.1-5.7條項目測定，只有按全部出廠檢驗項目對全部抽樣樣本的判斷是合格的，才能最終判斷合格，否則就判斷不合格。7.4、留樣檢驗7.4.1、每一生產(chǎn)批次均應(yīng)留樣，用作留樣檢驗或穩(wěn)定性檢驗。留樣數(shù)量不低于出廠檢驗抽樣數(shù)量的三分之一（不少于一個包裝）。7.4.2、留樣檢驗適用于產(chǎn)品有效期內(nèi)的質(zhì)量跟蹤或驗證，檢驗項目與出廠檢驗相同，只有全部被檢抽樣樣本的檢驗項目是合格的，才能判斷合格，否則就判斷不合格。7.4.3、穩(wěn)定性檢驗按5.8條項目測定，只有對全部抽樣樣本的判斷是合格的，才能最終判斷合格，否則就判斷不合格。8、標志、標簽、說明書8.1、標志標志應(yīng)符合GB191-2000標準的規(guī)定。8.1.1、單個包裝盒上應(yīng)有下列標志：a) 生產(chǎn)單位名稱、地址、郵政編碼、電話、商標；b) 產(chǎn)品名稱、規(guī)格；c) 生產(chǎn)批號、有效期；d) 產(chǎn)品注冊號；e) 執(zhí)行的產(chǎn)品標準號；f) 貯藏條件；g) 合格封簽；h) 注意事項。8.2、說明書上應(yīng)有下列標志:a) 生產(chǎn)單位名稱，地址，郵政編碼，電話；b) 產(chǎn)品名稱，規(guī)格；c) 產(chǎn)品注冊號；d) 執(zhí)行的產(chǎn)品標準號；e) 有效期、貯藏條件；f) 用途；g) 測定原理和技術(shù)要求；h) 試劑主要成分、量、濃度或比例；i) 適用儀器；j) 樣本要求；k) 測定步驟；l) 計算（并附舉例說明）；m) 線性范圍；n) 靈敏度；o) 注意事項；p) 參考值范圍。8.3、試劑瓶包裝標簽應(yīng)有下列標志：a) 生產(chǎn)單位名稱、地址和商標；b) 試劑名稱、規(guī)格；c) 生產(chǎn)批號、失效日期；d) 儲存條件；e) 注意事項。8.4、外包裝箱上應(yīng)有下列標志：a) 生產(chǎn)者名稱、地址、郵政編碼；b) 產(chǎn)品名稱；c)毛重、凈重；d)體積（長×寬×高）；e) 出廠日期；f) 貯運條件；g) 數(shù)量。9、包裝、運輸、貯存9.1、包裝規(guī)格9.1.1、試劑盒包裝規(guī)格分為7種。9.1.2、各包裝規(guī)格試劑盒上加貼標簽。9.1.3、1號包裝規(guī)格為R160mL，R215mL，9.1.4、2號包裝規(guī)格為R180mL，R220mL，9.1.5、3號包裝規(guī)格為R12×50mL，R225mL，試劑盒