藥監(jiān)系統(tǒng)官方培訓(xùn) 人單核苷酸多態(tài)性（SNP）檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn) 培訓(xùn)宣貫

YY/T1731-2020人單核苷酸多態(tài)性（SNP）檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)張利剛2020-09-29YY/T1731-2020主要內(nèi)容項目背景修訂過程主要技術(shù)指標(biāo)YY/T1731-2020項目背景近年來在臨床治療中，病人對相同的藥物反應(yīng)不完全相同，研究表明，這些差異是由于藥物相關(guān)基因變異，即單核苷酸多態(tài)性（SNP）引起的。由于SNP改變了個體對藥物的代謝及藥物結(jié)合的受體蛋白的特性，因而決定某種藥物是否對個體有效，是否會引起不良反應(yīng)，這對于臨床醫(yī)生按個體化用藥具有重要的意義。YY/T1731-2020藥物對篩選的患者達最佳療效-

必須依靠分子檢測指導(dǎo)用藥基因基因位點蛋白藥物藥物CYP2C9基因C-A氨基酸Ile被Leu取代是否適合藥物華法林VKORC1基因ALDH2基因CYP2C19基因MTHFR基因G-AG-AG-A華法林藥物量維生素K環(huán)氧化物還原酶氨基酸Glu被Lys硝酸甘油細胞色素P450酶類氯吡格雷、伏立康唑c.677C-Tc.1298A>C葉酸代謝過程中的關(guān)鍵酶/到目前為止，不完全統(tǒng)計，目前獲證的產(chǎn)品有60多個，涉及十多個廠商。市面上檢測的試劑盒主要是ALDH2、CYP2C19、CYP2C9

等相關(guān)基因，涉及的方法主要是熒光PCR法，還有基因芯片法，基因芯片法等。方法學(xué)產(chǎn)品數(shù)目CYP2C19基因、VKORC1基因、ALDH2基因熒光PCR探針法38CYP2C19基因、VKORC1基因、ALDH2基因/MTHFR基因熒光PCR熔融曲線法PCR-基因芯法98IL28B基因、CYP2C19基因、VKORC1基因、ALDH2基因CYP2C19基因、ALDH2基因、MTHFR基因PCR-電泳521PCR-金磁微粒層析法測序法（一代）MTHFRC677T

基因CYP2C19基因YY/T1731-2020修訂過程?

項目來源：SAC/TC136，CFDA醫(yī)療器械標(biāo)準(zhǔn)管理中心的國械標(biāo)管【2017】94號文，編號I2017004-T-BJ

；?

起草單位：北京市醫(yī)療器械檢驗所;

中國食品藥品檢定研究院;

中山大學(xué)達安基因股份有限公司;

山東省醫(yī)療器械產(chǎn)品質(zhì)量檢驗中心YY/T1731-2020修訂過程會議時間主要審查內(nèi)容

形成文件標(biāo)準(zhǔn)啟動會

2017年4月

/標(biāo)準(zhǔn)草案討論稿第一次審查會

2017年6月標(biāo)準(zhǔn)草案第二次審查會

2017年9月

征求意見稿送審稿?

四家企業(yè)生產(chǎn)商參與標(biāo)準(zhǔn)驗證?

標(biāo)準(zhǔn)號YY/T1731-2020?

2020年06月30日發(fā)布，2021年06月1日實施。YY/T1731-2020主要技術(shù)指標(biāo)范圍本標(biāo)準(zhǔn)適用于人基因單核苷酸多態(tài)性（SNP）檢測試劑（盒）的質(zhì)量控制。試劑盒方法學(xué)包含實時熒光PCR法、基因芯片法、PCR電泳法、PCR毛細電泳分析法、PCR高分辨熔解曲線法、流式熒光雜交法、飛行時間質(zhì)譜法、焦磷酸測序法、Sanger測序法等。術(shù)語和定義單核苷酸多態(tài)性

SingleNucleotidePolymorphisms，SNP在正常個體基因組水平上單個堿基序列的差異，包括堿基的轉(zhuǎn)換、顛換。YY/T1731-2020主要技術(shù)指標(biāo)4.1

外觀試劑盒各組分應(yīng)齊全、完整，液體無滲漏，標(biāo)志和標(biāo)簽應(yīng)清晰。方法：在自然光下以正常視力或矯正視力目視檢查，應(yīng)符合4.1的要求。YY/T1731-2020主要技術(shù)指標(biāo)4.2參考品符合性檢測試劑盒范圍內(nèi)國家參考品和/或經(jīng)標(biāo)化的企業(yè)參考品，檢測結(jié)果應(yīng)與已知基因型別相符合。參考品的設(shè)置應(yīng)遵循以下原則：?

試劑盒范圍內(nèi)可檢測的所有的基因型；?

參考品中常見基因型別應(yīng)采用臨床樣本或細胞系提取的基因組DNA；?

所使用的參考品組成中，所有基因型參考品的基質(zhì)應(yīng)與實際檢測樣本基質(zhì)相同或相近。方法：使用國家參考品和/或企業(yè)參考品加入檢測體系中檢測一次，檢測結(jié)果應(yīng)符合4.2的要求。YY/T1731-2020主要技術(shù)指標(biāo)4.3分析特異性檢測特異性國家參考品和/或經(jīng)標(biāo)化的企業(yè)參考品，檢測結(jié)果應(yīng)為陰性。分析特異性參考品的設(shè)置應(yīng)遵循以下原則：?

應(yīng)包含一定數(shù)量的非人類基因組樣本：常見的微生物樣本；?

應(yīng)包含一定數(shù)量與目標(biāo)基因密切相關(guān)的、試劑盒設(shè)計范圍外的基因型或基因突變樣本。方法：使用特異性國家參考品和/或企業(yè)參考品加入檢測體系中檢測一次，檢測結(jié)果應(yīng)符合4.3的要求YY/T1731-2020主要技術(shù)指標(biāo)4.4檢測限檢測試劑盒范圍內(nèi)國家參考品和/或經(jīng)標(biāo)化的企業(yè)參考品，檢測結(jié)果應(yīng)與已知基因型別相符合。檢測限參考品的設(shè)置應(yīng)遵循以下原則：?

檢測限參考品應(yīng)包括試劑盒檢測范圍內(nèi)所有的基因型；?

制造商應(yīng)規(guī)定最低檢測量；?

檢測限參考品中常見基因型別應(yīng)采用臨床樣本或細胞系提取的基因組DNA；?

所使用的參考品組成中，所有基因型參考品的基質(zhì)應(yīng)與實際檢測樣本基質(zhì)相同或相近。?

注：最低檢測量指反應(yīng)體系中加入的DNA總量。YY/T1731-2020主要技術(shù)指標(biāo)4.4檢測限方法：使用檢測限國家參考品和/或企業(yè)參考品加入檢測體系中至少檢測三次，檢測結(jié)果應(yīng)符合4.4的要求。YY/T1731-2020主要技術(shù)指標(biāo)4.5重復(fù)性（精密度）?

4.5.1采用熒光PCR法原理且通過Ct值進行判讀的試劑盒，檢測試劑盒范圍內(nèi)國家參考品和/或經(jīng)標(biāo)化的企業(yè)參考品，檢測結(jié)果應(yīng)一致且與已知基因型別相符合且Ct值的變異系數(shù)（CV，%）不大于5.0%。?

4.5.2采用基因芯片法、PCR電泳法、PCR毛細電泳分析法、PCR高分辨熔解曲線法、流式熒光雜交法、飛行時間質(zhì)譜法等試劑盒以及采用熒光PCR法原理但不直接采用Ct值進行結(jié)果解釋的試劑盒，檢測試劑盒范圍內(nèi)國家參考品和/或經(jīng)標(biāo)化的企業(yè)參考品，檢測結(jié)果應(yīng)一致且與已