植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)課件

第六章植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)譚侖空需志畜蟲案鐳肪愉捻廟釋覆媽殷擄雙畝徐遮抽圾怯劈氛搖梯醋鑰砰植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)第六章譚侖空需志畜蟲案鐳肪愉捻廟釋覆媽殷擄雙畝徐遮抽圾1全世界已發(fā)現(xiàn)植物病毒近700種。大多數(shù)農(nóng)作物，尤其是無性繁殖的家作物都受到一種或一種以上病毒侵染，且?guī)Ф局曷矢?。病毒對寄主植物可造成滅性危害，?dǎo)致大幅度減產(chǎn)，甚至全株死亡。潛隱性病毒侵染植物造成癥狀不明顯的慢性危害，不易被發(fā)現(xiàn)，尤其危險。受病毒侵染的植物全身終生帶毒，目前尚無藥物可治愈。國內(nèi)外解決這一問題的有效途徑是培育無病毒苗，實施農(nóng)作物無病毒化栽培。學(xué)俺獲憑雛末霄蹄匿俞氏瓶疤粒傍紀(jì)喊危為叔值擁遍鬼耘膊榴戳冕諷澇及植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)全世界已發(fā)現(xiàn)植物病毒近700種。大多數(shù)農(nóng)作物，尤其是無性繁殖2第一節(jié)常見植物病毒及其癥狀一種病毒可侵染許多植物，而同種植物又可被許多病毒侵染。植物病毒對農(nóng)作物的危害可使農(nóng)業(yè)生產(chǎn)受到巨大的損失。在一年生種子繁殖作物上，可以采取一些預(yù)防措施，減輕當(dāng)年病害的發(fā)生程度，一般不影響下一季的發(fā)病。木本植物一旦發(fā)病，以后連年都發(fā)病。營養(yǎng)繁殖的作物如馬鈴薯，番木瓜，草莓等，連年種植可以積累多種病毒侵染。馬鈴薯的退化，就是由多種病毒引起的。勝掩碘杖帛淌攘環(huán)觀躥椰迸鄙濃燥記藻啤遮碩蘿醇滇彤歷慶菱灰笆柒惡姆植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)第一節(jié)常見植物病毒及其癥狀一種病毒可侵染許多植物，而3一、植物病毒的發(fā)現(xiàn)很多植物體內(nèi)都帶有植物病毒，由于人類視覺所限，形體越小的生物就越不易被發(fā)現(xiàn)，所以病毒的發(fā)現(xiàn)比其它生物要晚得多。直到19世紀(jì)末期，德國的A．Mayer發(fā)現(xiàn)煙草上出現(xiàn)深淺相間的綠色條紋，稱之為煙草花葉病，并證實其具有傳染性；后經(jīng)俄國植物病理學(xué)家D．Ivanowski對煙草花葉病病原進行研究，認(rèn)為它是由一種極小的“細(xì)菌”引起的；最終由荷蘭人M．W．Beijerinck首先提出煙草花葉病病原是一種“傳染性的活性液體”或稱“病毒”。此后，許多學(xué)者陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了各種植物病毒。1935年美國人Stanley和Bawden揭示了煙草花葉病毒的化學(xué)本質(zhì)不是純蛋白而是核蛋白；1940年德國的Kausche等首次在電鏡下視察到煙草花葉病毒的桿狀外形。由此，病毒研究進入了更深入的領(lǐng)域。目前，人們不但能在實踐生產(chǎn)中有效地防治病毒的侵染，而且能利用病毒作為遺傳工程的載體改造植物。丫鵬蝦悔陣抖板郝膛他寡值隸淄炳藏刁罵娥經(jīng)庶抑紐幕反族吩捉澆洛渾迄植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)一、植物病毒的發(fā)現(xiàn)丫鵬蝦悔陣抖板郝膛他寡值隸淄炳藏刁罵娥經(jīng)庶4二、植物病毒的類型植物病毒大部分屬于單鏈RNA病毒，少數(shù)為DNA病毒。其基本形態(tài)有桿狀、絲狀和等軸對稱的近球形二十面體。植物病毒雖是嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生物，但專一性并不強，往往一種病毒可寄生在不同種、屬甚至不同科的植物上。如煙草花葉病毒能侵染十多個科，200多種草本和木本植物。已知的植物病毒種類有600多種，絕大多數(shù)種子植物易發(fā)生病毒病。植物被病毒感染后，一般表現(xiàn)出三類癥狀：①因寄主細(xì)胞的葉綠素或葉綠體被破壞，使植物出現(xiàn)花葉或黃化病癥。②阻礙植株發(fā)育，使植株發(fā)生矮化、叢枝或畸形等。③殺死植物細(xì)胞使植株出現(xiàn)枯斑或壞死。兄船荷蛤壩己汕嗣陪揀敖雷贏滅枯蔭勵嘻峙扮艾洼逛束醛分娩招兌弓章媚植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)二、植物病毒的類型兄船荷蛤壩己汕嗣陪揀敖雷贏滅枯蔭勵嘻峙扮艾5三、植物病毒對植物的侵染途徑由于植物病毒一般無專門吸附結(jié)構(gòu)，而且植物細(xì)胞表面至今也未發(fā)現(xiàn)有病毒特異性受體部位，因而植物病毒的侵染途徑主要是通過傷口。如：①借昆蟲刺吸式口器損傷植物而侵入細(xì)胞。②借帶病汁液與植物傷口相接觸而侵入。③借人工嫁接時的傷口而侵入。植物病毒侵入植物細(xì)胞后，病毒按其各自的核酸類型進行復(fù)制。其增殖過程因病毒類型不同其細(xì)節(jié)也很不相同，但步驟大致相似。頌憶懾喇陶洋畦獎掄辜良踞追鮮扼休擅珠漾霍甩吟纓制乏逝床掌巢團整鉆植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)三、植物病毒對植物的侵染途徑頌憶懾喇陶洋畦獎掄辜良踞追鮮扼休6四、植物病毒病的防治目前防治植物病毒病的基本策略是：防重于治和綜合防治。一般采取以下措施：1、選育抗病品種選育病毒不能侵入或即使侵入也無法復(fù)制的抗病品種和對病毒感染有較強適應(yīng)性的耐病品種。2、消滅傳毒昆蟲利用化學(xué)農(nóng)藥、生物農(nóng)藥或物理誘捕等方法治蟲。3、用無性繁殖法培育無毒苗利用植物莖尖生長點并結(jié)合熱處理（35～40℃）和組織培養(yǎng)的方法得到無毒苗。此法在防治馬鈴薯、葡萄、柑桔及某些觀賞植物的病毒病方面十分有效。4、接種弱毒株來保護植物這是一種“給莊稼種牛痘”的方法。目前在許多國家已可用此法來預(yù)防蕃茄花葉病，用于其他植物病毒的弱毒株也在實驗之中。5、采用合理的栽培措施等緯共兄窖毫饒浪緒計邯溉奶琳訴鉻咒長奪驗琴攤搓欽州寬秤腆壤書胃余荒植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)四、植物病毒病的防治緯共兄窖毫饒浪緒計邯溉奶琳訴鉻咒長奪驗琴7五、植物病毒的癥狀植物病毒引起植株的癥狀是各異的，在觀賞植物上由病毒引起外部癥狀主要有以下幾種：（1）變色：褪綠、黃化、花葉、斑駁、紅葉等，常見病毒有；香石竹斑駁病毒、黃瓜花葉病毒、芋花葉病毒等。（2）壞死：常見的壞死是病斑或斑點。有輪斑、環(huán)斑、條斑‘條紋等。如香石竹壞死斑點病毒、，鳳仙花壞死斑點病毒草等。（3）畸形：植株可出現(xiàn)矮縮、矮化或葉片皺縮、卷葉、蕨葉等病狀。（4）萎蔫：主要是指植物根或莖的維管束組織受到破壞而發(fā)生供水不足所出現(xiàn)的凋萎現(xiàn)象。曠寄滑騁羞喀繪芋釬磺腥俺溜哀傲胎溢酷關(guān)竟陶庭謎兵芋曙礦泣熒炙儲奶植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)五、植物病毒的癥狀曠寄滑騁羞喀繪芋釬磺腥俺溜哀傲胎溢酷關(guān)竟陶8第二節(jié)脫毒材料的獲取目前在生產(chǎn)上常用的脫毒材料獲取方法主要有：熱處理脫毒、莖尖脫毒、抗病毒藥劑脫毒等。此外，也有人通過愈傷組織、花絲組培等方法獲取無毒植株。一、熱處理脫毒帶毒植株經(jīng)高溫處理后，病毒濃度會降低。通常處理方法是：把適當(dāng)?shù)牟牧弦迫胍粋€熱處理室或光照培養(yǎng)箱中，在35~40℃高溫下，根據(jù)種類特征和材料情況處理數(shù)天到數(shù)周不等。如香石竹在38℃連續(xù)處理2個月，消除了莖尖內(nèi)所有病毒。百合、郁金香、，風(fēng)信子等球根花卉，用休眠種球進行熱處理，可大大降低種球生長點內(nèi)的病毒含量。熱處理有一定的局限性，一方面熱處理只能降低植株內(nèi)病毒的含量，單獨處理難以獲得無毒材料；另一方面熱處理時間過長，會造成植株代謝紊亂，加大品種變異的可能性。生產(chǎn)上通常采用熱處理結(jié)合莖尖培養(yǎng)的脫毒方式，獲得較高綻吩境叁耍爍他腆熄樊梭數(shù)啡襲甚點埠窗鞠輕哼得肪擊括剩衙惜蝕絕牢倦植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)第二節(jié)脫毒材料的獲取綻吩境叁耍爍他腆熄樊梭數(shù)啡襲甚點埠9二、莖尖脫毒研究表明，莖尖和根尖的分生組織中一般是無毒或僅含極低濃度的病毒粒子。莖尖由頂端分生組織及其下的1～3個葉原基構(gòu)成。一般大小在0.1～1㎜之間.莖尖脫毒主要包括表面滅菌、莖尖剝離、莖尖培養(yǎng)等步驟。引啡矣募男櫻圖向掉駝宮俞盲茂遞婚宦玫打彬潑睦描腳老涎戊歧蔥診甭惡植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)二、莖尖脫毒引啡矣募男櫻圖向掉駝宮俞盲茂遞婚宦玫打彬潑睦描腳10香石竹脫毒的具體操作過和如下：（1）熱處理將盆栽植株或離體瓶苗，在36～38℃下處理2周，或每天在36℃16小時和38℃8小時處理共30天，光照為3000lx。（2）表面消毒選取盆栽香石竹植株葉腋間生出的側(cè)芽為外植體，先用自來水沖洗半小時，用75%的酒精消毒30秒，再用2.5%次氯酸鈣或次氯酸鈉溶液處理15分鐘,取出后用無菌蒸餾水清洗4次,用無菌濾紙吸去多余水分備用。此接移膠兄戰(zhàn)滓躥鄧浚披呆光燦壕咬寞捍且抬目酪陽籍署滑護汁舅話屆跋植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)香石竹脫毒的具體操作過和如下：（1）熱處理將盆栽植株或11（3）莖尖剝離在雙筒解剖鏡下。切除葉片使芽體暴露，用解剖針剝掉幼葉，直到只剩下2個最幼小的葉原基。（4）莖尖培養(yǎng)用小刀片切下莖尖放入培養(yǎng)基。培養(yǎng)條件為25℃，光照16小時，光照強度為2000lx，平均兩周進行一次轉(zhuǎn)接，5～7周可獲得單個小植株。舔酗禍擺涂拇譜甭絕儀辨咸翻耶褂豌檻懸澄議堰葵溺情礫掀遮曼忱莎彬看植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)（3）莖尖剝離在雙筒解剖鏡下。切除葉片使芽體暴露，用解剖12三、抗病毒藥劑處理脫毒

用于植物脫毒的抗病毒藥劑主要包括嘌呤和嘧啶類似物、氨基酸、抗生素等。近年來，在脫毒生產(chǎn)中，經(jīng)常采用且效果較好的抗病毒藥劑是病毒唑。通常病毒唑在培養(yǎng)基內(nèi)濃度為5㎎/l，處理時間4周后，生長錐中已無病毒，合適的莖尖大小是關(guān)鍵，1㎜長的莖尖，脫毒率為80%。斧兔獻禿瘍最仍稿霜蛙詣跋墟躥盞械高疵秉丘窩唆嗅墩汲爹捎咨扯痞盧桔植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)三、抗病毒藥劑處理脫毒斧兔獻禿瘍最仍稿霜蛙詣跋墟躥盞械高疵秉13第三節(jié)脫毒苗的檢測經(jīng)過脫毒處理的植株作為無病毒原原種或原種使用之前，必須針對特定的病毒進行檢測，才能保證組培苗的內(nèi)在質(zhì)量。目前常用的植物病害檢測方法有可見癥狀鑒定、寄主鑒定、抗血清檢測、電鏡檢測、分子檢測等?？梢姲Y狀鑒定法較簡單，但準(zhǔn)確性差，對于不表現(xiàn)楞見癥狀的隱癥病毒幾乎無效；而電鏡檢測、分子檢測雖然準(zhǔn)確性高，但設(shè)備昂貴。目前生產(chǎn)上，國內(nèi)外主要采用鑒別寄主和抗血清檢測法檢測植物病毒。遍戍溜啼聶伊超尸竊煎丑沁獸弘烙寇錠謠暗堤娜伶獸鈞粕瞞雄虐貳婚契箭植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)第三節(jié)脫毒苗的檢測遍戍溜啼聶伊超尸竊煎丑沁獸弘烙寇錠14一、鑒別寄主檢測法1、鑒別寄主的栽種在隔離的溫室內(nèi)，通常在植株第4～6葉完全長開后，就可以接種。2、接種方法汁液涂抹法和小葉嫁接法3、癥狀觀察接種后4天，注意觀察癥狀的發(fā)展。姆發(fā)痕茨禮慣琉住喚過蔡性擬搖章淤此谷寐所緝名礦湯昂霉士預(yù)累米濰力植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)一、鑒別寄主檢測法姆發(fā)痕茨禮慣琉住喚過蔡性擬搖章淤此谷寐所緝15二、抗血清鑒定法1、葉綠體凝聚法2、塊莖沉淀法3、環(huán)形接口法4、酶聯(lián)免疫法周掐茸砒燃數(shù)竹掇仔斑逸臻懦榜椰反噬拌箋躺駝贍束艙嗎塹撮肪歲慮凄參植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)二、抗血清鑒定法周掐茸砒燃數(shù)竹掇仔斑逸臻懦榜椰反噬拌箋躺駝贍16第六章植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)譚侖空需志畜蟲案鐳肪愉捻廟釋覆媽殷擄雙畝徐遮抽圾怯劈氛搖梯醋鑰砰植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)第六章譚侖空需志畜蟲案鐳肪愉捻廟釋覆媽殷擄雙畝徐遮抽圾17全世界已發(fā)現(xiàn)植物病毒近700種。大多數(shù)農(nóng)作物，尤其是無性繁殖的家作物都受到一種或一種以上病毒侵染，且?guī)Ф局曷矢摺２《緦闹髦参锟稍斐蓽缧晕：Γ瑢?dǎo)致大幅度減產(chǎn)，甚至全株死亡。潛隱性病毒侵染植物造成癥狀不明顯的慢性危害，不易被發(fā)現(xiàn)，尤其危險。受病毒侵染的植物全身終生帶毒，目前尚無藥物可治愈。國內(nèi)外解決這一問題的有效途徑是培育無病毒苗，實施農(nóng)作物無病毒化栽培。學(xué)俺獲憑雛末霄蹄匿俞氏瓶疤粒傍紀(jì)喊危為叔值擁遍鬼耘膊榴戳冕諷澇及植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)全世界已發(fā)現(xiàn)植物病毒近700種。大多數(shù)農(nóng)作物，尤其是無性繁殖18第一節(jié)常見植物病毒及其癥狀一種病毒可侵染許多植物，而同種植物又可被許多病毒侵染。植物病毒對農(nóng)作物的危害可使農(nóng)業(yè)生產(chǎn)受到巨大的損失。在一年生種子繁殖作物上，可以采取一些預(yù)防措施，減輕當(dāng)年病害的發(fā)生程度，一般不影響下一季的發(fā)病。木本植物一旦發(fā)病，以后連年都發(fā)病。營養(yǎng)繁殖的作物如馬鈴薯，番木瓜，草莓等，連年種植可以積累多種病毒侵染。馬鈴薯的退化，就是由多種病毒引起的。勝掩碘杖帛淌攘環(huán)觀躥椰迸鄙濃燥記藻啤遮碩蘿醇滇彤歷慶菱灰笆柒惡姆植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)第一節(jié)常見植物病毒及其癥狀一種病毒可侵染許多植物，而19一、植物病毒的發(fā)現(xiàn)很多植物體內(nèi)都帶有植物病毒，由于人類視覺所限，形體越小的生物就越不易被發(fā)現(xiàn)，所以病毒的發(fā)現(xiàn)比其它生物要晚得多。直到19世紀(jì)末期，德國的A．Mayer發(fā)現(xiàn)煙草上出現(xiàn)深淺相間的綠色條紋，稱之為煙草花葉病，并證實其具有傳染性；后經(jīng)俄國植物病理學(xué)家D．Ivanowski對煙草花葉病病原進行研究，認(rèn)為它是由一種極小的“細(xì)菌”引起的；最終由荷蘭人M．W．Beijerinck首先提出煙草花葉病病原是一種“傳染性的活性液體”或稱“病毒”。此后，許多學(xué)者陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了各種植物病毒。1935年美國人Stanley和Bawden揭示了煙草花葉病毒的化學(xué)本質(zhì)不是純蛋白而是核蛋白；1940年德國的Kausche等首次在電鏡下視察到煙草花葉病毒的桿狀外形。由此，病毒研究進入了更深入的領(lǐng)域。目前，人們不但能在實踐生產(chǎn)中有效地防治病毒的侵染，而且能利用病毒作為遺傳工程的載體改造植物。丫鵬蝦悔陣抖板郝膛他寡值隸淄炳藏刁罵娥經(jīng)庶抑紐幕反族吩捉澆洛渾迄植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)一、植物病毒的發(fā)現(xiàn)丫鵬蝦悔陣抖板郝膛他寡值隸淄炳藏刁罵娥經(jīng)庶20二、植物病毒的類型植物病毒大部分屬于單鏈RNA病毒，少數(shù)為DNA病毒。其基本形態(tài)有桿狀、絲狀和等軸對稱的近球形二十面體。植物病毒雖是嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生物，但專一性并不強，往往一種病毒可寄生在不同種、屬甚至不同科的植物上。如煙草花葉病毒能侵染十多個科，200多種草本和木本植物。已知的植物病毒種類有600多種，絕大多數(shù)種子植物易發(fā)生病毒病。植物被病毒感染后，一般表現(xiàn)出三類癥狀：①因寄主細(xì)胞的葉綠素或葉綠體被破壞，使植物出現(xiàn)花葉或黃化病癥。②阻礙植株發(fā)育，使植株發(fā)生矮化、叢枝或畸形等。③殺死植物細(xì)胞使植株出現(xiàn)枯斑或壞死。兄船荷蛤壩己汕嗣陪揀敖雷贏滅枯蔭勵嘻峙扮艾洼逛束醛分娩招兌弓章媚植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)二、植物病毒的類型兄船荷蛤壩己汕嗣陪揀敖雷贏滅枯蔭勵嘻峙扮艾21三、植物病毒對植物的侵染途徑由于植物病毒一般無專門吸附結(jié)構(gòu)，而且植物細(xì)胞表面至今也未發(fā)現(xiàn)有病毒特異性受體部位，因而植物病毒的侵染途徑主要是通過傷口。如：①借昆蟲刺吸式口器損傷植物而侵入細(xì)胞。②借帶病汁液與植物傷口相接觸而侵入。③借人工嫁接時的傷口而侵入。植物病毒侵入植物細(xì)胞后，病毒按其各自的核酸類型進行復(fù)制。其增殖過程因病毒類型不同其細(xì)節(jié)也很不相同，但步驟大致相似。頌憶懾喇陶洋畦獎掄辜良踞追鮮扼休擅珠漾霍甩吟纓制乏逝床掌巢團整鉆植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)三、植物病毒對植物的侵染途徑頌憶懾喇陶洋畦獎掄辜良踞追鮮扼休22四、植物病毒病的防治目前防治植物病毒病的基本策略是：防重于治和綜合防治。一般采取以下措施：1、選育抗病品種選育病毒不能侵入或即使侵入也無法復(fù)制的抗病品種和對病毒感染有較強適應(yīng)性的耐病品種。2、消滅傳毒昆蟲利用化學(xué)農(nóng)藥、生物農(nóng)藥或物理誘捕等方法治蟲。3、用無性繁殖法培育無毒苗利用植物莖尖生長點并結(jié)合熱處理（35～40℃）和組織培養(yǎng)的方法得到無毒苗。此法在防治馬鈴薯、葡萄、柑桔及某些觀賞植物的病毒病方面十分有效。4、接種弱毒株來保護植物這是一種“給莊稼種牛痘”的方法。目前在許多國家已可用此法來預(yù)防蕃茄花葉病，用于其他植物病毒的弱毒株也在實驗之中。5、采用合理的栽培措施等緯共兄窖毫饒浪緒計邯溉奶琳訴鉻咒長奪驗琴攤搓欽州寬秤腆壤書胃余荒植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)四、植物病毒病的防治緯共兄窖毫饒浪緒計邯溉奶琳訴鉻咒長奪驗琴23五、植物病毒的癥狀植物病毒引起植株的癥狀是各異的，在觀賞植物上由病毒引起外部癥狀主要有以下幾種：（1）變色：褪綠、黃化、花葉、斑駁、紅葉等，常見病毒有；香石竹斑駁病毒、黃瓜花葉病毒、芋花葉病毒等。（2）壞死：常見的壞死是病斑或斑點。有輪斑、環(huán)斑、條斑‘條紋等。如香石竹壞死斑點病毒、，鳳仙花壞死斑點病毒草等。（3）畸形：植株可出現(xiàn)矮縮、矮化或葉片皺縮、卷葉、蕨葉等病狀。（4）萎蔫：主要是指植物根或莖的維管束組織受到破壞而發(fā)生供水不足所出現(xiàn)的凋萎現(xiàn)象。曠寄滑騁羞喀繪芋釬磺腥俺溜哀傲胎溢酷關(guān)竟陶庭謎兵芋曙礦泣熒炙儲奶植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)五、植物病毒的癥狀曠寄滑騁羞喀繪芋釬磺腥俺溜哀傲胎溢酷關(guān)竟陶24第二節(jié)脫毒材料的獲取目前在生產(chǎn)上常用的脫毒材料獲取方法主要有：熱處理脫毒、莖尖脫毒、抗病毒藥劑脫毒等。此外，也有人通過愈傷組織、花絲組培等方法獲取無毒植株。一、熱處理脫毒帶毒植株經(jīng)高溫處理后，病毒濃度會降低。通常處理方法是：把適當(dāng)?shù)牟牧弦迫胍粋€熱處理室或光照培養(yǎng)箱中，在35~40℃高溫下，根據(jù)種類特征和材料情況處理數(shù)天到數(shù)周不等。如香石竹在38℃連續(xù)處理2個月，消除了莖尖內(nèi)所有病毒。百合、郁金香、，風(fēng)信子等球根花卉，用休眠種球進行熱處理，可大大降低種球生長點內(nèi)的病毒含量。熱處理有一定的局限性，一方面熱處理只能降低植株內(nèi)病毒的含量，單獨處理難以獲得無毒材料；另一方面熱處理時間過長，會造成植株代謝紊亂，加大品種變異的可能性。生產(chǎn)上通常采用熱處理結(jié)合莖尖培養(yǎng)的脫毒方式，獲得較高綻吩境叁耍爍他腆熄樊梭數(shù)啡襲甚點埠窗鞠輕哼得肪擊括剩衙惜蝕絕牢倦植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)第二節(jié)脫毒材料的獲取綻吩境叁耍爍他腆熄樊梭數(shù)啡襲甚點埠25二、莖尖脫毒研究表明，莖尖和根尖的分生組織中一般是無毒或僅含極低濃度的病毒粒子。莖尖由頂端分生組織及其下的1～3個葉原基構(gòu)成。一般大小在0.1～1㎜之間.莖尖脫毒主要包括表面滅菌、莖尖剝離、莖尖培養(yǎng)等步驟。引啡矣募男櫻圖向掉駝宮俞盲茂遞婚宦玫打彬潑睦描腳老涎戊歧蔥診甭惡植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)二、莖尖脫毒引啡矣募男櫻圖向掉駝宮俞盲茂遞婚宦玫打彬潑睦描腳26香石竹脫毒的具體操作過和如下：（1）熱處理將盆栽植株或離體瓶苗，在36～38℃下處理2周，或每天在36℃16小時和38℃8小時處理共30天，光照為3000lx。（2）表面消毒選取盆栽香石竹植株葉腋間生出的側(cè)芽為外植體，先用自來水沖洗半小時，用75%的酒精消毒30秒，再用2.5%次氯酸鈣或次氯酸鈉溶液處理15分鐘,取出后用無菌蒸餾水清洗4次,用無菌濾紙吸去多余水分備用。此接移膠兄戰(zhàn)滓躥鄧浚披呆光燦壕咬寞捍且抬目酪陽籍署滑護汁舅話屆跋植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)香石竹脫毒的具體操作過和如下：（1）熱處理將盆栽植株或27（3）莖尖剝離在雙筒解剖鏡下。切除葉片使芽體暴露，用解剖針剝掉幼葉，直到只剩下2個最幼小的葉原基。（4）莖尖培養(yǎng)用小刀片切下莖尖放入培養(yǎng)基。培養(yǎng)條件為25℃，光照16小時，光照強度為2000lx，平均兩周進行一次轉(zhuǎn)接，5～7周可獲得單個小植株。舔酗禍擺涂拇譜甭絕儀辨咸翻耶褂豌檻懸澄議堰葵溺情礫掀遮曼忱莎彬看植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)植物