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PAGEPAGE16七、答案和提示(一)旁欄思考題為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶?答:酸奶的制作依靠的是乳酸菌的發(fā)酵作用??股啬軌驓⑺阑蛞种迫樗峋纳L(zhǎng),因此含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶。質(zhì)的蔬菜?答:有些蔬菜,如小白菜和蘿卜等,含有豐富的硝酸鹽。當(dāng)這些蔬菜放置過(guò)久發(fā)生變質(zhì)(發(fā)黃、腐爛)或者煮熟后存放太久時(shí),蔬菜中的硝酸鹽會(huì)被微生物還原成亞硝酸鹽,危害人體健康。形成的?答:形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物,泡菜發(fā)酵液營(yíng)養(yǎng)豐富,其表面氧氣含量也很豐富,適合酵母菌繁殖。(二)練習(xí)2.答:果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精發(fā)酵,果醋的制作利用的是醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬拇x,腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶類(lèi),泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸發(fā)酵。傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)都巧妙地利用了天然菌種,都為特定的菌種提供了良好的生存條件,最終的發(fā)酵產(chǎn)物不是單一的組分,而是成分復(fù)雜的混合物。七、答案和提示(一)旁欄思考題染外,還有什么目的?答:無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。請(qǐng)選擇合適的方法。培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿玻棒、試管、燒瓶和吸管實(shí)驗(yàn)操作者的雙手答:(1)、(2)需要滅菌;(3)需要消毒。(二)倒平板操作的討論50你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了。為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰?答:通過(guò)灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。平板冷凝后,為什么要將平板倒置?答:平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。間的部位,這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎?為什么?答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。(三)平板劃線(xiàn)操作的討論在劃線(xiàn)操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)?答:劃線(xiàn)后,線(xiàn)條末端細(xì)菌的數(shù)目比線(xiàn)條起始處要少,每次從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。(四)涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線(xiàn)與系列稀釋的無(wú)菌操作要求,想一想,第2步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌操作?提示:應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周?chē)?;等等。(五)練?xí)提示:可以從微生物生長(zhǎng)需要哪些條件的角度來(lái)思考。例保持干燥、真空的條件,以及冷藏等方法來(lái)阻止微生物的生長(zhǎng)。提示:可以從這三種培養(yǎng)技術(shù)的原理、操作步驟等方面分別種技術(shù)都要求嚴(yán)格的無(wú)菌條件。提示:這是一道開(kāi)放性的問(wèn)題,答案并不惟一,重點(diǎn)在于鼓微生物不是自發(fā)產(chǎn)生的,微生物學(xué)才可能發(fā)展成為一門(mén)獨(dú)立的學(xué)出現(xiàn),而這一滅菌原理也適用于食品的保存等。七、答案和提示(一)旁欄思考題數(shù)?3算。為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度?測(cè)定土壤中圍相同嗎?答:這是因?yàn)橥寥乐懈黝?lèi)微生物的數(shù)量(/kg)的,例如在干旱土壤中的上層樣本中:好氧及兼性厭氧細(xì)菌數(shù)約為218547723.1得不同類(lèi)型的微生物,就需要按不同的稀釋度進(jìn)行分離,同時(shí)還應(yīng)當(dāng)有針對(duì)性地提供選擇培養(yǎng)的條件。(二)練習(xí)2.提示:反芻動(dòng)物的瘤胃中含有大量的微生物,其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多為厭氧菌,接觸空氣后會(huì)死亡,因此分離其中能分解尿素的微生物除了需要準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基外,還應(yīng)參照厭氧菌的培養(yǎng)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。七、答案和提示(一)旁欄思考題222后,再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟基本一致。為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌?答:由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境生物的幾率要高于普通環(huán)境。深?答:將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)聚集,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中。種方法?提示:參看本課題參考資料的內(nèi)容。為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物?答:在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用。(二)練習(xí)2.答:流程圖表示如下。土壤取樣→選擇培養(yǎng)(此步是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來(lái)確定)→梯度稀釋→將菌懸液涂布到有特定選擇作用的培養(yǎng)基上→挑選單菌落→發(fā)酵培養(yǎng)七、答案和提示(一)旁欄思考題2答:微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無(wú)機(jī)鹽;蔗糖提供碳源,同時(shí)能夠維持細(xì)胞的滲透壓;甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿(mǎn)足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同,MS物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類(lèi)。你打算做幾組重復(fù)?你打算設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)嗎?答:教師可以安排學(xué)生分組,做不同的材料或配方,最后分別匯報(bào)成果。但每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過(guò)滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng),用以說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格,沒(méi)有被雜菌污染。(二)練習(xí)答:植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差,對(duì)培一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況好,容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。七、答案和提示(一)旁欄思考題為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來(lái)困難?答:花瓣松動(dòng)后,微生物就可能侵入到花藥,給材料的消毒帶來(lái)困難。(二)練習(xí)答:F2AasusuAAsusu。如果運(yùn)用常規(guī)育種方法,將F2代中的紫色甜玉米與白色甜玉米(aasusu)進(jìn)行測(cè)交,可以選擇出基因型為AAsusu純種紫色甜玉米。但這種方法比較繁瑣,耗時(shí)也較長(zhǎng),需要至少三年的選種和育種時(shí)間。如果利用花藥培養(yǎng)的技術(shù),在F1有Asu答:植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的相同之處是:培養(yǎng)對(duì)培養(yǎng)基配方的要求更為嚴(yán)格。這些都使花藥培養(yǎng)的難度大為增加。七、答案和提示(一)旁欄思考題在不同的試管中恒溫處理?提示:將果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫處理,可以保證底物和酶在混合時(shí)的溫度是相同的,避免了果泥和果膠酶混合時(shí)影響混合物的溫度,從而影響果膠酶活性的問(wèn)題。在探究溫度或pH要,又應(yīng)該如何設(shè)置?為什么?提示:需要設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn),不同的溫度梯度之間或不同的pH梯度之間就可以作為對(duì)照,這種對(duì)照稱(chēng)為相互對(duì)照。3.A同學(xué)將哪個(gè)因素作為變量,控制哪些因素不變?為什么要作這樣的處理?B同學(xué)呢?提示:ApHB應(yīng)該與A斷果膠酶活性的高低?提示:果膠酶將果膠分解為小分子物質(zhì),小分子物質(zhì)可以通過(guò)濾紙,因此蘋(píng)果汁的體積大小反應(yīng)了果膠酶的催化分解果膠的能力。在不同的溫度和pH大。因素應(yīng)該保持不變?提示:溫度是變量,應(yīng)控制果泥量、果膠酶的濃度和用量、水浴時(shí)間和混合物的pH等所有其他條件不變。只有這樣才能保證只有溫度一個(gè)變量對(duì)果膠酶的活性產(chǎn)生影響。(二)練習(xí)答:大規(guī)模生產(chǎn)與實(shí)驗(yàn)室制備的主要不同點(diǎn)是:有兩次瞬間高溫滅菌;酶處理的時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng);七、答案和提示(一)旁欄思考題查閱資料,看看普通洗衣粉中包含哪些化學(xué)成分?提示:普通洗衣粉中通常包含有:表面活性劑、水軟化劑、堿劑、漂白劑等成分,有的洗衣粉中還含有增白劑、香精和色素,以及填充劑等。在本課題中你打算使用什么方法和標(biāo)準(zhǔn)判斷洗滌效果?淺、面積縮小等,最好能進(jìn)行定量的比較。(二)練習(xí)答:列表比較如下。普通洗衣粉普通洗衣粉加酶洗衣粉相同點(diǎn)不同點(diǎn)表面活性劑可以產(chǎn)生泡沫,可以將油脂分子分散開(kāi);水軟化劑可以分散污垢;等等。酶可以將大分子有機(jī)物分解為小分子有機(jī)物,小分子有機(jī)物易于溶于水,從而與纖維分開(kāi)。衣粉中的蛋白酶分解,損壞衣物。練習(xí)1.表所示。類(lèi) 優(yōu)點(diǎn) 不型對(duì)環(huán)境條件非常敏感,直 容易失活;溶液中的接催化效率高,低很難回收,不能被再使耗能、低污染利用,提高了生產(chǎn)成用等。 本;反應(yīng)后酶會(huì)混在酶 物中,可能影響產(chǎn)品量。酶既能與反應(yīng)物固接觸,又能與產(chǎn)化固定在載體上的酶酶還可以被反復(fù)才能得到的。利用。固定成本低,操作更固定后的酶或細(xì)胞與反化容易。

應(yīng)物不容易接近,可能細(xì) 導(dǎo)致反應(yīng)效果下降等。胞3.提示:可以從酶的結(jié)構(gòu)的多樣性,對(duì)理化條件的敏感程度等角度思考。(一)旁欄思考題1.為什么加入蒸餾水能使雞血細(xì)胞破裂?答:蒸餾水對(duì)于雞血細(xì)胞來(lái)說(shuō)是一種低滲液體,水分可以大量進(jìn)入血細(xì)胞內(nèi),使血細(xì)胞脹裂,再加上攪拌的機(jī)械作用,就加速了雞血細(xì)胞的破裂(細(xì)胞膜和核膜的破裂),從而釋放出DNA。加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?答:洗滌劑是一些離子去污劑,能溶解細(xì)胞膜,有利于DNA釋放;食鹽的主要成分是NaCl,有利于DNA如果研磨不充分,會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生怎樣的影響?答:研磨不充分會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)的DNA釋放不完全,提取的DNA量變少,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍(lán)色等。此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細(xì)胞成分?答:可能含有核蛋白、多糖和RNA等雜質(zhì)。5.為什么反復(fù)地溶解與析出DNA答:用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過(guò)反復(fù)溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。6.方案二與方案三的原理有什么不同?答:方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNADNA從而使蛋白質(zhì)變性,與DNA(二)練習(xí)答:提取DNADNADNADNADNA的純化,即根據(jù)DNA性,最大限度地將DNADNA答:提取蛋白質(zhì)比提取DNADNApH并且蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)多種多樣,理化性質(zhì)各不相同,使得蛋白質(zhì)的提取沒(méi)有一種統(tǒng)一的方法,只能根據(jù)特定蛋白質(zhì)的特性摸索提取的條件,設(shè)計(jì)特定的方法。七、答案和提示練習(xí)5-9PCR2nnDNA3010(2n=230=1073741824)。提示:PCRDNA的。引物的設(shè)計(jì)需要豐富的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn),感興趣的學(xué)生可以參考《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》(見(jiàn)本專(zhuān)題參考書(shū)目),書(shū)中有詳盡的論述。七、答案和提示(一)旁欄思考題你能從凝膠色譜的分離原理分析為什么凝膠的裝填要緊密、均勻嗎?答:凝膠實(shí)際上是一些微小的多孔球體,小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道。相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)先流出,相對(duì)分子質(zhì)量中等的分子后流出,相對(duì)分子質(zhì)量最小的分子最后流出,從而使各種相對(duì)分子質(zhì)量不同的分子得以分離。如果凝膠裝填得不夠緊密、均勻,就會(huì)在色譜柱內(nèi)形成無(wú)效的空隙,使本該進(jìn)入凝膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過(guò),攪亂洗脫液的流動(dòng)次序,影響分離的效果。(二)練習(xí)的方法之一。所用的凝膠實(shí)際上是一些微小的多孔球體,這些小球體大多數(shù)是由多糖類(lèi)化合物構(gòu)成,小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道,當(dāng)一個(gè)含有各種分子的樣品溶液緩慢流經(jīng)時(shí),各分子在色譜柱內(nèi)進(jìn)行兩種不同的運(yùn)動(dòng),即垂直向下的運(yùn)動(dòng)和無(wú)規(guī)則的擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)。相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部,只能分布在顆粒之間,通過(guò)的路程較短,移動(dòng)速度較快;相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子比較容易進(jìn)入凝膠內(nèi)的通道,通過(guò)的路程較樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出,相對(duì)分子質(zhì)量中等的分子后流出,相對(duì)分子質(zhì)量最小的分子最具有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),相對(duì)分子質(zhì)量大的分子通過(guò)這種網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)上的空隙時(shí)阻力大,而相對(duì)分子質(zhì)量小的分子通過(guò)時(shí)阻力小,因此不同分子量的蛋白質(zhì)分子可以獲得分離。答:在一定范圍內(nèi),能對(duì)抗外來(lái)少量強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或稍加稀釋不引起溶液pH溶液叫做緩沖溶液。緩沖溶液通常是由一或兩種化合物(緩沖劑)溶解于水中制得,調(diào)節(jié)緩沖劑的配比就可制得不同pH緩沖溶液的作用是維持反應(yīng)體系的pH不變。在生物體內(nèi)進(jìn)行的各種生物化學(xué)過(guò)程都是在精確的pH下進(jìn)行的,受到氫離子濃度的嚴(yán)格調(diào)控。為了在實(shí)驗(yàn)室條件下準(zhǔn)確地模擬生物體內(nèi)的天然環(huán)境,就必須保持體外生物化學(xué)反應(yīng)過(guò)程有與體內(nèi)過(guò)程完全相同的pH。答:電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程。許多重要的生物大分子,如氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、核苷酸、核酸等都具有可解離基團(tuán),它們?cè)谀硞€(gè)特定的pH電場(chǎng)的作用下,這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極方向移動(dòng)。電泳技術(shù)就是在電場(chǎng)的作用下,利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小、形狀等性質(zhì)的差異,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而達(dá)到對(duì)樣品進(jìn)行分離、鑒定或提純的目的。處理、粗分離、純化和純度鑒定。首先通過(guò)洗滌紅細(xì)胞、血紅蛋白的釋放、離心等操作收集到血紅蛋白溶液,即樣品的處理;再經(jīng)過(guò)透析去除分子量較小的雜質(zhì),即樣品的粗分離;然后通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去,即樣品的純化;最后經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。觀察顏色來(lái)判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集洗脫液。這使血紅蛋白的分離過(guò)程非常直觀,大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。七、答案和提示練習(xí)2~3其中的基底油常取自植物的種子或果實(shí),比如胡桃油、甜杏油?;子团c其他芳香油調(diào)配在一起,能夠加強(qiáng)功效。從玫瑰花中提取出的玫瑰油稱(chēng)為“液體黃金”,是世界香料工業(yè)不可取代的原料,多用于制造高級(jí)香水等化妝品。提取出的玫瑰油不含有任何添加劑或化學(xué)原料,是純天然的護(hù)膚品,具有極好的抗衰老和止癢作用,能夠促進(jìn)細(xì)胞再生、防止肌膚老化、平撫肌膚細(xì)紋,還具有使人放松、愉悅心情的功效。杏仁油富含礦物質(zhì)和維生素,是一種質(zhì)地輕柔、高滲透性的保濕劑。熏衣草精油取自熏衣草花,具有怡神、助睡眠、舒緩壓力的作用,此外它還具有降壓、止痛、促進(jìn)細(xì)胞再生的功能,可以用于治療燙傷和蚊蟲(chóng)叮咬、預(yù)防和改善脫發(fā)。檸檬精油取自檸檬果皮,具有消除緊張、焦慮、振奮精神的作用,可用于治

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