高二生物【8】土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)

土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)高二年級生物學(xué)學(xué)習(xí)目標(biāo)1分析選擇培養(yǎng)基分離出土壤中分解尿素細(xì)菌的原理，體會生物結(jié)構(gòu)與功能觀，認(rèn)識生物的多樣性2對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，鍛煉批判性思維3設(shè)計(jì)并完成實(shí)驗(yàn)，在實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行觀察、提問以及小組間的合作探究，從知識到方法到方案提升科學(xué)探究能力1設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)、分析數(shù)據(jù)，鍛煉科學(xué)思維2基于問題進(jìn)行小組間的合作探究，從知識到方法到方案提升科學(xué)探究能力學(xué)習(xí)重點(diǎn)和難點(diǎn)一課題背景二研究思路三實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與過程四實(shí)驗(yàn)方案展示五反饋與評價六課后作業(yè)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)課題背景一尿素分子立體結(jié)構(gòu)設(shè)置對照排除實(shí)驗(yàn)組中非測試因素（無關(guān)變量）對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度篩選菌株人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長——選擇培養(yǎng)基研究思路美國黃石國家公園的一個熱泉方法一：活菌計(jì)數(shù)法(稀釋涂布平板法)方法二：顯微鏡直接計(jì)數(shù)（血球計(jì)數(shù)板）統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目學(xué)生在對平板上的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)提出問題基礎(chǔ)知識設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)操作提示結(jié)果分析實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與過程三提出問題基礎(chǔ)知識土壤中含有能分解尿素的細(xì)菌，我們?nèi)绾畏蛛x它們？每克土壤樣品含有多少這樣的細(xì)菌？利用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，可以從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌，該選擇培養(yǎng)基的配方見右表。組成成分含量KH2PO414gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15.0gH2O定容至1000mL實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1土壤取樣樣品的稀釋2微生物的培養(yǎng)與觀察3實(shí)驗(yàn)方案實(shí)驗(yàn)方案實(shí)驗(yàn)方案視頻網(wǎng)址鏈接：/s?__biz=MzU5MzQwMjI2Ng==&mid=2247483855&idx=1&sn=dbd2c875a624a23939ee5b72abe1a358&chksm=fe10413ac967c82c656fe8c62dfe6f255ce8d61251e9d3691949e9df1f4e5e5bbf07d3405601&token=75886540&lang=zh_CN#rd操作提示010304無菌操作0205取樣用小鐵鏟和信封提前滅菌火焰旁稀釋土壤樣液做好標(biāo)記制定計(jì)劃火焰旁取樣結(jié)果分析1、當(dāng)樣品稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面會形成單個菌落，每一個菌落，都來源于樣品稀釋液中的一個活菌2、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板計(jì)數(shù)3、統(tǒng)計(jì)某一稀釋度平板的菌落數(shù)，一般統(tǒng)計(jì)3個平板，算出平均值后，按照下面的公式進(jìn)行計(jì)算：

每克樣品中的菌株數(shù)=（C/V）ｘMC：某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)

V：涂布時所用稀釋液的體積（mL）M：稀釋倍數(shù)問題思考：為什么要選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)？保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

若菌落數(shù)太少，數(shù)據(jù)之間的誤差通過乘以稀釋倍數(shù)放大就會造成更大的誤差。若菌落數(shù)過多，菌落會互相連成一片，難以計(jì)數(shù)，而且菌落之間競爭養(yǎng)分，影響細(xì)胞的生長和增殖，也會極大的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。實(shí)驗(yàn)方案展示四反饋與評價四C不同微生物生長繁殖所需的最適pH不同不能培養(yǎng)基A缺少氮源，尿素分解菌無法生長繁殖培養(yǎng)基B