熟悉IgE在I型超敏反應(yīng)中的作用和臨床意義

第七單元

超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)一血清IgE的檢測(cè)一、血清總IgE的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握ELISA雙抗體夾心法測(cè)定血清總IgE的方法。2.熟悉IgE在I型超敏反應(yīng)中的作用和臨床意義。EEEE洗滌待測(cè)抗原包被抗體酶標(biāo)抗體實(shí)驗(yàn)原理ELISA雙抗體夾心法實(shí)驗(yàn)材料1.羊抗人IgE抗體、HRP標(biāo)記的羊抗人IgE抗體、IgE校準(zhǔn)品、TMB（四甲基聯(lián)苯胺）。2.標(biāo)本：待測(cè)血清。3.包被緩沖液、洗滌緩沖液、反應(yīng)終止液（2mol/LH2SO4）等。4.酶標(biāo)板、微量加樣器、酶標(biāo)儀、溫箱等。1.包被羊抗人IgE抗體

（4℃過(guò)夜，洗滌）

2.封閉（0.5%的小牛血清或牛血清清蛋白）3.加樣（梯度稀釋的IgE校準(zhǔn)品、待測(cè)血清、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、空白對(duì)照

）

4.37℃溫育2h，洗滌5.加入工作濃度的HRP標(biāo)記的羊抗人IgE

6.37℃溫育2h，洗滌

EEEE操作步驟8.加入終止液，終止反應(yīng)

9.492nm波長(zhǎng)測(cè)各孔吸光度值（A值）7.加入底物，37℃溫育15分鐘注意事項(xiàng)1.包被抗體量、酶標(biāo)抗體的加入量等可影響測(cè)定結(jié)果，需預(yù)先摸索最佳條件。2.洗滌要徹底，必要時(shí)可加大洗滌液的濃度。3.結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。4.IgE含量與吸光度值在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，如果樣品的測(cè)定結(jié)果超出此范圍，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂?，使樣品中IgE的濃度在線性范圍內(nèi)再行測(cè)定。結(jié)果分析

以IgE校準(zhǔn)品的參考含量（IU/ml）為橫坐標(biāo)，以對(duì)應(yīng)A值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)待測(cè)樣品的A值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線中查出稀釋后樣品中IgE的濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為原樣品中IgE的濃度。1IU=2.4ng。臨床意義

血清總IgE水平一般用國(guó)際單位（IU）或ng表示，1IU＝2.4ng，相當(dāng)于WHO標(biāo)準(zhǔn)凍干血清制劑0.00928mg內(nèi)所含的IgE量。正常人群IgE水平受環(huán)境、種族、遺傳、年齡、檢測(cè)方法及取樣標(biāo)準(zhǔn)等因素的影響，以致各家報(bào)道的正常值相差甚遠(yuǎn)。嬰兒臍帶血IgE水平小于0.5IU/ml，出生后隨年齡增長(zhǎng)而逐漸升高，12歲時(shí)達(dá)成人水平。成人血清IgE水平約在20～200IU/ml之間，一般認(rèn)為大于333IU/ml（800ng/ml）時(shí)為異常升高。IgE升高相關(guān)的常見(jiàn)疾病有：過(guò)敏性哮喘、季節(jié)性過(guò)敏性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、藥物性間質(zhì)性肺炎、支氣管肺曲菌病、麻風(fēng)、類天皰瘡及某些寄生蟲(chóng)感染等。上述疾病時(shí)IgE升高的程度并不一致，在過(guò)敏性支氣管肺曲菌病時(shí)最為顯著，其值可達(dá)5000～20000ng/ml，除了此病和特應(yīng)性皮炎以及在花粉季節(jié)之外，任何血清總IgE水平大于5000ng/ml的患者均應(yīng)考慮寄生蟲(chóng)感染的可能性。

思考題1.ELISA雙抗體夾心法定量測(cè)定血清總IgE的原理及應(yīng)注意的問(wèn)題有哪些？2.測(cè)定血清總IgE的臨床意義？二、血清特異性IgE的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握斑點(diǎn)酶免疫印跡法檢測(cè)sIgE的原理和方法。2.熟悉sIgE在I型超敏反應(yīng)中的作用和臨床意義。

實(shí)驗(yàn)原理

斑點(diǎn)酶免疫印跡法：用NC膜作為固相支持物，檢測(cè)區(qū)的不同區(qū)域包被有特異性的過(guò)敏原，質(zhì)控區(qū)包被有兔抗鼠Ig抗體。檢測(cè)時(shí)將稀釋的病人血清加入反應(yīng)槽內(nèi)，血清中的sIgE與NC膜上的相應(yīng)過(guò)敏原結(jié)合。通過(guò)洗滌去掉未結(jié)合的游離物質(zhì)，再加入酶標(biāo)記的抗人IgE抗體，此抗體會(huì)與檢測(cè)區(qū)NC膜上的sIgE結(jié)合，同時(shí)會(huì)與質(zhì)控區(qū)上的兔抗鼠Ig抗體結(jié)合。如標(biāo)本中無(wú)sIgE，酶標(biāo)抗體不能結(jié)合在檢測(cè)區(qū)相應(yīng)過(guò)敏原區(qū)帶上。通過(guò)洗滌去掉未結(jié)合的標(biāo)記物，然后加入底物顯色。通過(guò)顯色區(qū)帶確定血清中含有哪種sIgE，進(jìn)而判斷待檢者對(duì)哪種過(guò)敏原過(guò)敏。實(shí)驗(yàn)材料1.檢測(cè)條包被有特異性過(guò)敏原的NC膜2.堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgE3.標(biāo)本稀釋液4.堿性磷酸酶底物5.濃縮洗液（10X）洗液按照1:10倍稀釋6.標(biāo)本待測(cè)血清用標(biāo)本稀釋液按照1:10倍稀釋。稀釋好的洗液將檢測(cè)條要充分浸透，放在搖床上搖10分鐘倒掉洗液，加入稀釋好的測(cè)試者血清，放于搖床室溫反應(yīng)1.5小時(shí)倒掉小槽中的血清，依次加入洗液，震蕩10分鐘，重復(fù)三次

每槽加入堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgE，放于搖床上室溫反應(yīng)30分鐘將堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgE倒掉，用洗液洗三次，每次10分鐘

加入堿性磷酸酶底物，放于搖床，避光反應(yīng)約10分鐘去掉底物溶液，用純水洗三次，每次5分鐘操作步驟將檢測(cè)條放在干燥紙上，等檢測(cè)條完全干燥后判定檢測(cè)結(jié)果

注意事項(xiàng)1.不同批次的組分不可混用，且只能在效期內(nèi)使用。2.檢測(cè)標(biāo)本只限于人血清、血漿。3.如果樣本在3天內(nèi)檢測(cè)，可以保存在2~8℃，否則應(yīng)冷凍保存，避免反復(fù)凍溶。4.如果標(biāo)本含有不溶物，離心去除。溶血、渾濁或含有疊氮鈉的標(biāo)本不可用。5.加樣器槍頭不可混用，避免交叉污染。結(jié)果分析通過(guò)顯色區(qū)帶確定血清中含有哪種sIgE，進(jìn)而判斷待檢者對(duì)哪種過(guò)敏原過(guò)敏。臨床意義

slgE測(cè)定是體外檢測(cè)變應(yīng)原的重要手段，主要用于Ⅰ型超敏反應(yīng)的診斷。該檢測(cè)條包被有多種特異性過(guò)敏原，通過(guò)檢測(cè)血漿（血清）中過(guò)敏原slgE，篩查待檢者對(duì)何種過(guò)敏原過(guò)敏，為臨床進(jìn)行脫敏治療奠定基礎(chǔ)。小結(jié)和討論1.人類I型超敏反應(yīng)可表現(xiàn)為全身性超敏反應(yīng)和局部性超敏反應(yīng)兩種。

2.在5類免疫球蛋白中，IgE是血清中含量最低，半衰期最短，分解率最高，對(duì)熱最不穩(wěn)定的Ig。而在I型超敏反應(yīng)患者體內(nèi)，IgE含量顯著增高。

3.血清總IgE的含量是由各種抗原IgE的總和決定。正常人血清IgE含量極微，約0.1～0.9mg/L水平。臨床上一般采用敏感性較高、穩(wěn)定性較好的化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法、酶聯(lián)免疫測(cè)定法進(jìn)行檢測(cè)。

思考題1.測(cè)定血清sIgE的方法有哪些？各有何優(yōu)缺點(diǎn)？2.測(cè)定血清sIgE的臨床意義？實(shí)驗(yàn)二紅細(xì)胞表面不完全抗體的檢測(cè)一、直接Coombs試驗(yàn)（試管法

）

實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握直接Coombs試驗(yàn)的原理和操作方法。2.熟悉Coombs試驗(yàn)的臨床意義。＋患者紅細(xì)胞Coombs試劑檢測(cè)紅細(xì)胞上不完全抗體實(shí)驗(yàn)原理

實(shí)驗(yàn)材料1.診斷試劑抗球蛋白試劑；2.待測(cè)患者紅細(xì)胞；3.生理鹽水、小試管、吸管、離心機(jī)等。操作步驟用生理鹽水配5%紅細(xì)胞懸液取潔凈小試管2支，1管加1滴5%紅細(xì)胞懸液，另一管加生理鹽水作對(duì)照

在生理鹽水和5%紅細(xì)胞懸液中分別加入診斷試劑一滴，使其混勻，室溫稍待片刻1000r離心1min或3000r離心15s。

取出試管先以肉眼觀察有無(wú)溶血，再輕輕搖動(dòng)試管，如有凝集，則為陽(yáng)性結(jié)果；如無(wú)凝集，應(yīng)在室溫延長(zhǎng)15~30min的反應(yīng)時(shí)間，再離心看結(jié)果。注意事項(xiàng)1.每次試驗(yàn)均須設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照，如陰性對(duì)照發(fā)生自凝，實(shí)驗(yàn)無(wú)效。2.受檢血標(biāo)本必須新鮮。3.洗滌后的紅細(xì)胞和器材都不能殘留有血漿蛋白，以免出現(xiàn)假陰性。4.操作過(guò)程中動(dòng)作輕柔，特別是觀察反應(yīng)結(jié)果時(shí)，應(yīng)輕輕搖動(dòng)試管，不可用力過(guò)大。5.判定結(jié)果時(shí)，溶血與凝集有同樣意義。6.試驗(yàn)后應(yīng)將玻片即時(shí)放入消毒缸內(nèi)。結(jié)果分析

生理鹽水對(duì)照不應(yīng)發(fā)生凝集，為均勻渾濁的乳狀液。在紅細(xì)胞懸液中，如紅細(xì)胞凝集成片狀，邊緣皺褶如花邊狀或邊緣松散為陽(yáng)性。如與對(duì)照相同，為陰性。

臨床意義

直接Coombs試驗(yàn)用于檢測(cè)患者紅細(xì)胞上不完全抗體，Coombs試驗(yàn)陽(yáng)性可見(jiàn)于自身免疫性溶血性貧血、冷凝集素綜合征、藥物誘發(fā)的免疫性溶血性貧血、新生兒同種免疫性溶血病、某些高球蛋白血癥患者，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕、惡性腫瘤等。

思考題

直接Coombs試驗(yàn)的原理及臨床意義？二、間接Coombs試驗(yàn)（微柱凝膠法

）

實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握間接Coombs試驗(yàn)的原理和操作方法。2.熟悉Coombs試驗(yàn)的臨床意義。患者血清靶紅細(xì)胞致敏紅細(xì)胞Coombs試劑檢測(cè)血清中的抗紅細(xì)胞抗體實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)材料1.微柱凝膠卡內(nèi)含抗球蛋白試劑；2.篩選紅細(xì)胞一般由2~3人份O型紅細(xì)胞組成一套試劑3.待測(cè)患者血清；4.生理鹽水、小試管、吸管、試管架、離心機(jī)、溫箱等。操作步驟撕開(kāi)微柱凝膠卡密封紙，標(biāo)記加1%篩選紅細(xì)胞50μl及受檢者血清25μl37℃孵育15min離心機(jī)離心10min，1000r/min

觀察結(jié)果，如紅細(xì)胞懸浮在反應(yīng)管頂部或凝膠中，則為陽(yáng)性結(jié)果；反之，如紅細(xì)胞沉于凝膠底部（管底尖部），則為陰性結(jié)果。

注意事項(xiàng)1.反應(yīng)卡封口有損壞，管中干涸或有氣泡時(shí)，不可使用。使用前必須清楚標(biāo)記試劑卡,一定要空離心一次后備用。2.不要將試劑卡長(zhǎng)期保存4℃，在此溫度下，試劑卡中液體蒸發(fā)凝集于封口鋁箔下，膠易干涸，應(yīng)將試劑卡保存在18~22℃。3.細(xì)胞濃度為0.8%~1%，濃度過(guò)高或過(guò)低，均可減弱凝集強(qiáng)度。4.纖維蛋白可吸附部分紅細(xì)胞，導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。5.細(xì)菌污染、不適宜儲(chǔ)存或過(guò)期都能使試劑失效。6.須設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照。7.微柱凝膠管中出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，特別提示為紅細(xì)胞抗原抗體陽(yáng)性反應(yīng)，也不排除其它原因所致溶血，對(duì)此標(biāo)本一定要認(rèn)真分析。結(jié)果分析

-100%的紅細(xì)胞沉在微管的底部+/-100%的紅細(xì)胞沉在微管的下端1/3之內(nèi)1+80%的紅細(xì)胞沉在微管的下端2/3之內(nèi)2+80%的紅細(xì)胞沉在微管的上端2/3之內(nèi)3+80%的紅細(xì)胞沉在微管的上端1/3之內(nèi)4+凝集的細(xì)胞全部處于微管的頂部d.p.雙群Hemo.溶血反應(yīng)格局及判斷標(biāo)準(zhǔn)

臨床意義

間接Coombs試驗(yàn)用于檢測(cè)患者游離血清中的不完全抗體。此實(shí)驗(yàn)多用于檢測(cè)母體Rh（D）抗體，以便及早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血癥的發(fā)生，亦可對(duì)紅細(xì)胞不相容的輸血所產(chǎn)生的血型抗體進(jìn)行檢測(cè)。小結(jié)和討論1.檢測(cè)抗紅細(xì)胞不完全抗體的常用方法為抗球蛋白試驗(yàn)，又稱為Coombs試驗(yàn)，直接Coombs試驗(yàn)用于檢測(cè)患者紅細(xì)胞上不完全抗體；間接Coombs試驗(yàn)用于檢測(cè)患者游離血清中的不完全抗體。2.Coombs試驗(yàn)陽(yáng)性可見(jiàn)于自身免疫性溶血性貧血、冷凝集素綜合征、藥物誘發(fā)的免疫性溶血性貧血、新生兒同種免疫性溶血病、某些高球蛋白血癥患者，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕、惡性腫瘤等。

思考題

1.新生兒溶血癥發(fā)生的機(jī)制是什么？

2.微柱凝膠免疫試驗(yàn)可能出現(xiàn)的結(jié)果有哪些，試分析原因？實(shí)驗(yàn)三循環(huán)免疫復(fù)合物的檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握PEG比濁法檢測(cè)循環(huán)免疫復(fù)合物的原理和方法。2.熟悉循環(huán)免疫復(fù)合物檢測(cè)的臨床意義。

實(shí)驗(yàn)原理

本試驗(yàn)是檢測(cè)抗原非特異性循環(huán)免疫復(fù)合物的一種方法。PEG是環(huán)氧乙烷和水的多聚物，為一種不帶電荷的直鏈大分子多糖。終濃度為3%～4%的PEG能相對(duì)選擇性地沉淀CIC。用分光光度計(jì)測(cè)定濁度，反應(yīng)沉淀物含量。

實(shí)驗(yàn)材料1.pH8.40.1mol/L硼酸鹽緩沖液（BB）硼砂4.29g、硼酸3.40g，蒸餾水加至1000ml，溶解后用G3或G4號(hào)玻璃濾器過(guò)濾；2.PEG-NaF稀釋液PEG600040.0g、NaF10.0g、BB加至1000ml，溶解后用G3或G4號(hào)玻璃濾器過(guò)濾；3.待檢血清、微量加樣器、試管、吸管及橡皮滴頭等；4.分光光度計(jì)。加入物測(cè)試管對(duì)照管BB（ml）—2.0PEG-NaF稀釋液（ml）2.0—待檢血清（ml）0.20.237℃水浴60min分光光度計(jì)測(cè)A495nm值

操作步驟

注意事項(xiàng)1.4%PEG能沉淀較小的CIC，2%PEG只能沉淀較大的CIC，但濃度大于5%，PEG選擇性沉淀CIC的特性即行消失，導(dǎo)致假陽(yáng)性的出現(xiàn)。2.應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)溫度變化對(duì)結(jié)果的影響，離心速度與時(shí)間也應(yīng)嚴(yán)格掌握。3.低密度脂蛋白可引起濁度增加，故應(yīng)空腹采血。4.高γ球蛋白血癥以及血清標(biāo)本反復(fù)凍融，均易造成假陽(yáng)性。

結(jié)果分析待檢血清濁度值=（測(cè)定管吸光度-對(duì)照管吸光度）×100，以大于正常人濁度值均值加2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差為CIC陽(yáng)性。參考值：正常人血清CIC的A值為4.3±2.0，以≥8.3為免疫復(fù)合物陽(yáng)性。

臨床意義

循環(huán)免疫復(fù)合物（Circulationimmunecomplex，CIC）又稱可溶性免疫復(fù)合物，分子量為50萬(wàn)～100萬(wàn)，沉降系數(shù)8.8～19S，它不易被吞噬細(xì)胞吞噬，又不能經(jīng)腎小球排出，可較長(zhǎng)時(shí)間在血液中循環(huán)，一旦大量循環(huán)免疫復(fù)合物沉積于組織中，則引起組織損傷及相關(guān)的免疫復(fù)合物病。CIC陽(yáng)性常見(jiàn)于：1.部分自身免疫性疾病，如SLE，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等；2.膜增殖性腎炎，鏈球菌感染后腎炎；3.傳染病，如慢性乙型肝炎，瘧疾，麻風(fēng)等；4.惡性腫瘤。小結(jié)和討論1.循環(huán)免疫復(fù)合物的檢測(cè)有助于輔助診斷某些免疫復(fù)合物疾病，如血清病、SLE、慢性活動(dòng)性肝炎時(shí)，CIC往往較高；此外，對(duì)CIC的動(dòng)態(tài)檢測(cè)有助于監(jiān)視某些疾病的發(fā)展，協(xié)助判斷療效和預(yù)后；有助于探討研究III型變態(tài)反應(yīng)疾病的發(fā)病機(jī)制。2.此法快速簡(jiǎn)便，但特異性較差，僅適于篩選。CIC檢測(cè)方法較多，原理各不相同，結(jié)果也不盡一樣，因此最好采用多種方法同時(shí)進(jìn)行，以提高陽(yáng)性檢出率。由于在病理狀態(tài)下往往是單一種類抗原抗體復(fù)合物增高，這種增高只有達(dá)到影響總CIC水平才能被檢出，所以有時(shí)檢測(cè)抗原特異性CIC更為重要。思考題

循環(huán)免疫復(fù)合物檢測(cè)的臨床意義？病案討論超敏反應(yīng)性疾病實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

通過(guò)病案討論、提出問(wèn)題、應(yīng)用免疫學(xué)技術(shù)檢測(cè)有關(guān)免疫學(xué)指標(biāo)，將免疫學(xué)技術(shù)應(yīng)用于臨床實(shí)踐，對(duì)臨床疾病做出診斷或醫(yī)療建議，進(jìn)而對(duì)有關(guān)問(wèn)題產(chǎn)生深入研究的學(xué)習(xí)動(dòng)機(jī)。病案討論一

患者王X，女28歲。因上呼吸道感染前來(lái)我院就診。按醫(yī)囑作青霉素皮試陰性，給靜滴青霉素800萬(wàn)U加5%GNS250ml。患者上午9點(diǎn)左右開(kāi)始輸液，約1點(diǎn)40分左右輸液畢，無(wú)任何不適反應(yīng)，下午3點(diǎn)左右患者感覺(jué)全身不適，似有好多蟲(chóng)子、螞蟻在身上爬，全身緊困，隨即出現(xiàn)心慌等不適前來(lái)復(fù)診。一般尚可，痛苦面容，測(cè)BP100/70mmHg、P128次/分、心電監(jiān)護(hù)提示頻繁室早、R30次/分、明顯缺氧癥。遵醫(yī)囑給肌注腎上腺素1ml，5%GNS250ml，地塞米松10mg靜滴；第二組10%GNS250ml，利多卡因100mg，給氧等處理后癥狀仍無(wú)明顯改善轉(zhuǎn)入入院治療，入院后給抗過(guò)敏、抗心律失常治療，一周后病人自覺(jué)癥狀消失，痊愈出院。

問(wèn)題：1.該患者有可能屬于哪型超敏反應(yīng)？2.如何進(jìn)行免疫學(xué)診斷？病案討論二

第一胎足月兒，順產(chǎn)無(wú)窒息，體重3200克，生后母乳喂養(yǎng)。第2天出現(xiàn)黃疸，第3天加重，測(cè)總膽紅素18mg/dl，患兒精神較差，有貧血貌。體查：除黃疸外，無(wú)其他陽(yáng)性體征。母親為Rh陰性血型，胎兒為Rh陽(yáng)性血型。問(wèn)題：1.如何進(jìn)行診斷和鑒別診斷？

2.還須做哪些實(shí)驗(yàn)室檢查？

病案討論三

患者何X，女，19歲，自3年前有間斷關(guān)節(jié)疼痛，曾服用解熱止痛的西藥無(wú)明顯好轉(zhuǎn)，半年前出現(xiàn)面部紅斑，發(fā)熱，關(guān)節(jié)疼痛加重，診斷為“系統(tǒng)性紅斑狼瘡”，應(yīng)用強(qiáng)的松及環(huán)磷酰胺等藥物治療，半年來(lái)面部紅斑時(shí)輕時(shí)重，就診時(shí)口服強(qiáng)的松每日15mg，面部蝶形紅斑呈暗紅色，雙手紅斑色鮮，自覺(jué)發(fā)熱，五心煩熱，體溫正常，口干咽燥，失眠盜汗，口腔潰瘍，脫發(fā)，疲乏，多關(guān)節(jié)疼痛，下肢皮下見(jiàn)數(shù)個(gè)紫斑，刷牙時(shí)偶有牙齦出血，腰部有酸痛感，飲食及二便正常，月經(jīng)量少，色淡，舌淡紅，苔薄黃，脈弦細(xì)，心肺無(wú)明顯陽(yáng)性體征。初步判斷為III型超敏反應(yīng)?；?yàn)血紅蛋白103g/L，血白細(xì)胞5.0×109/L，血小板60×109/L，尿蛋白+++，24小時(shí)尿蛋白定量3.0g，尿中紅細(xì)胞+，血沉34mm/h，肝腎功能正常，抗核抗體陽(yáng)性，滴度為1:160，抗Sm抗體陽(yáng)性，血免疫球蛋白系在正常范圍，補(bǔ)體C3稍低于正常。問(wèn)題：試分析還須做哪些實(shí)驗(yàn)室檢查以進(jìn)一步明確診斷？病案討論四

女性，59歲，間斷咳嗽、咳痰5年，加重伴咯血2個(gè)月?；颊?年前受涼后低熱、咳嗽、咳白色粘痰，給予抗生素及祛痰治療，1個(gè)月后癥狀不見(jiàn)好轉(zhuǎn)，體重逐漸下降，后拍胸片診為“浸潤(rùn)型肺結(jié)核”，肌注鏈霉素1個(gè)月，口服利福平、雷米封3個(gè)月，癥狀逐漸減輕，遂自行停藥，此后一直咳嗽，少量白痰，未再?gòu)?fù)查胸片。2個(gè)月前勞累后咳嗽加重，少量咯血伴低熱、盜汗、胸悶、乏力又來(lái)診。體查：兩上肺呼吸音稍減低，并聞及少量濕羅音，心叩不大，心率94次/分，律齊，無(wú)雜音。結(jié)核菌素皮試陽(yáng)性。問(wèn)題：1、該患者屬于哪一型超敏反應(yīng)？2、還須做哪些實(shí)驗(yàn)室檢查？病案討論提示病案討論一：1.該患者屬于I型超敏反應(yīng)。2.免疫學(xué)診斷分為體內(nèi)檢測(cè)（如皮膚試驗(yàn)）和體外IgE測(cè)定，詳見(jiàn)實(shí)驗(yàn)一和臨床見(jiàn)習(xí)。病案討論二：1.診斷和鑒別診斷（1）生理性黃疸：生后2~3d出現(xiàn)，4~5d達(dá)到高峰，總膽紅素值12.9mg/dl，7~10d消退。本例特點(diǎn)：總膽紅素18mg/dl，超過(guò)峰值。（2）感染性黃疸：先天感染：查血“TORCH”

后天感染：有沒(méi)有感染病灶本例無(wú)癥狀、無(wú)感染病灶、母親無(wú)感染史，可排除感染性黃疸。因胎兒總膽紅素18mg/dl，精神較差，有貧血貌，母親為Rh陰性血型，胎兒為Rh陽(yáng)性血型。是否為血型不合引起的新生兒溶血？2.實(shí)驗(yàn)室檢查（1）血常規(guī)（2）Rh抗體檢測(cè)（3）直接Coombs試驗(yàn)和間接Coombs試驗(yàn)（須檢測(cè)母親血清中IgG抗體效價(jià)）病案討論三：實(shí)驗(yàn)室檢查：1.血常規(guī)2.尿常規(guī)3.肝、腎功能、腹部B超4.ANA譜及其他免疫抗體檢查5.血清免疫球蛋白，補(bǔ)體C3、C4檢查6.循環(huán)免疫復(fù)合物檢測(cè)并結(jié)合局部免疫復(fù)合物的免疫組化檢測(cè)結(jié)果以明確病變是否與III型超敏