人感染H7N9禽流感病毒病原學(xué)特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)室檢測要求課件

人感染H7N9禽流感病毒病原學(xué)特點(diǎn)

及實(shí)驗(yàn)室檢測要求

河南省疾病預(yù)防控制中心2013年4月3日人感染H7N9禽流感病毒病原學(xué)特點(diǎn)

及實(shí)驗(yàn)室檢測要求

河南省病例1病例2病例3病例1病例2病例3既往禽H7Nx病毒簡介既往禽H7Nx病毒簡介HPAIH7N7、H7N3、H7N1LPAIH7Nx、H7N2、H7N3、H7N1、H7N9HPAIH7N7、H7N3、H7N4HPAIH7N3（Pakistan）

HPAIH7N3LPAIH7N9HPAIH7N3LPAIH7N9禽中暴發(fā)的H72006年前暴發(fā)的均為HPAIH7歐洲：意大利、英國、德國、比利時(shí)、荷蘭、丹麥、挪威、

捷克、西班牙、瑞典LPAIH7N8、H7N9（Korea）LPAIH7N9HPAIH7N7、H7N3、H7N1HPAIH7N病毒亞型病原來源時(shí)間/國家病例數(shù)/臨床表現(xiàn)A/H7N7鷗1980/美國3/結(jié)膜炎A/H7N7鴨1996/英國1/結(jié)膜炎A/H5N1禽1997/香港18/ILI，肺炎A/H9N2雞1998/中國廣東5/ILI，肺炎A/H9N2禽1999/香港

2/ILIA/H7N2禽2002/北美（Virginia）1/ILI，血清學(xué)診斷A/H9N2禽2003/香港

1/ILIA/H5N1禽2003/香港2/ILI，肺炎A/H7N7禽2003/荷蘭89/結(jié)膜炎、ILI、肺炎;1名死亡病例A/H5N1禽2003至今,15個(gè)國家602/ILI,肺炎A/H7N2(NY/107)來源不清2003/北美(NewYork)，

1/肺炎A/H7N3禽2004/加拿大2/結(jié)膜炎、ILI;1名LPAI；1名HPAIA/H5N2禽2005/日本(Ibaraki)13/無臨床癥狀，血清學(xué)診斷A/H7N2禽2007/英國(Wales)1/結(jié)膜炎、ILIA/H9N2來源不清2007/香港1/ILIA/H10N7鴨2004/埃及(Ismaillia)2/ILIA/H10N7來源于疫區(qū)的鳥2010/悉尼(NewSouthWales)7/上呼吸道感染癥狀、結(jié)膜炎近年來人感染禽流感病毒病例血清學(xué)證據(jù)：人感染H4,H5,H6,H7,H9,H10,H11AIVs.病毒亞型病原來源時(shí)間/國家病例數(shù)/臨床表現(xiàn)A/H7N7鷗19H7感染人（>100人）美國、英國、意大利、荷蘭、加拿大HPAILPAI19591/USAH7N719771/USAH7N71979-19804/USAH7N719961/EnglandH7N720021/USAH7N220031/USAH7N27/ItalyH7N389/NetherlandsH7N71died20041/CanadaH7N31/CanadaH7N320061/NorfolkH7N320074/WalesH7N22/MexicoH7N3H7感染人（>100人）HPAILPAI19591/USAH7N9病毒共25株均為LPAI無感染人病例亞洲：7株均來自野禽5株—韓國2株—蒙古H7N9病毒共25株亞洲：7株H7N9的致病力和傳播力LPAIH7N9Nose(whitebars),lung(blackbars)LPAIH7N9不需經(jīng)過適應(yīng)便可在小鼠體內(nèi)有效復(fù)制，且能在雪貂上下呼吸道有效復(fù)制。HPAIH7N3LPAIH7N9LPAIH7N9HPAIH7N3LPAIH7N9在雪貂模型中不傳播。H7N9的致病力和傳播力LPAIH7N9Nose(whi中國地區(qū)H7AIVA/Baer'spochard/HuNan/414/2010(H7N1)A/chicken/Hebei/1/2002(H7N2)A/duck/Guangdong/1/1996(H7N3)A/duck/Hubei/126/1985(H7N8)A/duck/Jiangxi/1742/03(H7N7)A/duck/Jiangxi/1760/03(H7N7)A/duck/Jiangxi/1786/03(H7N7)A/duck/Jiangxi/1814/03(H7N7)A/duck/Nanchang/1904/1992(H7N1)A/duck/Nanchang/1944/92(H7N1)A/duck/Zhejiang/10/2011(H7N3)A/duck/Zhejiang/12/2011(H7N3)A/duck/Zhejiang/2/2011(H7N3)A/magpie-robin/China/28710/93(H7)亞型：H7N1,H7N2,H7N3,H7N7,H7N8野禽居多LPAI中國地區(qū)H7AIVA/Baer'spochard/HuN人感染H7N9禽流感病毒特點(diǎn)人感染H7N9禽流感病毒特點(diǎn)核酸檢測核酸檢測從3個(gè)病例中分離到3株病毒A/Shanghai/1/2013(H7N9)A/Shanghai/2/2013(H7N9)A/Anhui/1/2013(H7N9)病毒分離從3個(gè)病例中分離到3株病毒A/Shanghai/1/2013三株H7N9病毒為同一基因類型PB2PB1HANPNAMPNSPA2個(gè)片段來源于H7N96個(gè)片段來源于H9N2序列測定三株H7N9病毒為同一基因類型PB2PB1HANPNAMPN序列特點(diǎn)耐藥性分析

對烷胺類藥物是耐藥的，即M2蛋白25-42位氨基酸發(fā)生S31N突變。HA連接肽分析

HA蛋白339位連接肽由單個(gè)（PKGRGLFG）堿性氨基酸組成，根據(jù)既往研究，具有這種序列特點(diǎn)的病毒對禽類呈低致病性。受體結(jié)合位點(diǎn)及其它重要位點(diǎn)分析

Shanghai/1/2013的HA蛋白226-228位氨基酸屬于禽源受體結(jié)合位點(diǎn)（為QSG）。Shanghai/2/2013和Anhui/1/2013的HA蛋白226-228位氨基酸受體結(jié)合位點(diǎn)（為LSG）PB2蛋白627位氨基酸為K，提示致病性增強(qiáng)。NS1蛋白92位氨基酸為D，與禽流感病毒一致，而與人流感病毒不同。序列特點(diǎn)耐藥性分析人感染H7N9禽流感病毒實(shí)驗(yàn)室檢測要求人感染H7N9禽流感病毒

標(biāo)本采集、保存、運(yùn)送與實(shí)驗(yàn)室檢測做好人員安排以及試劑、耗材準(zhǔn)備；參照近期將下發(fā)的《全國不明原因肺炎病例監(jiān)測、排查和管理方案（2013年）》和《人感染H7N9禽流感標(biāo)本采集及實(shí)驗(yàn)室檢測策略》進(jìn)行。依托市級、省級流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室，開展核酸檢測和病毒分離工作。

標(biāo)本采集、保存、運(yùn)送與實(shí)驗(yàn)室檢測做好人員安排以及試劑、耗材標(biāo)本采集病例：采集鼻咽拭子、下呼吸道標(biāo)本（如氣管分泌物、氣管吸取物）和血清標(biāo)本等；密切接觸者：采集雙份血清標(biāo)本（開始實(shí)施醫(yī)學(xué)觀察時(shí)和間隔三周后）；出現(xiàn)急性呼吸道感染的密切接觸者：采集咽拭子標(biāo)本；標(biāo)本采集病例：采集鼻咽拭子、下呼吸道標(biāo)本（如氣管分泌物、氣管檢測試劑和方法2010年及之前下發(fā)的H7引物不再用于檢測。2013年4月2日，國家流感中心下發(fā)新的H7和N9檢測引物（real-timePCR）。H7N9核酸檢測方法與《甲型H1N1流感病毒實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)方案》相同。檢測試劑和方法2010年及之前下發(fā)的H7引物不再用于檢測。

人感染H7N9禽流感標(biāo)本實(shí)驗(yàn)室檢測策略(1)地市級流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室：收到標(biāo)本后，將原始標(biāo)本分為3管；24小時(shí)內(nèi)立即開展甲、乙型流感病毒通用引物、季節(jié)性流感病毒亞型分型的檢測。

人感染H7N9禽流感標(biāo)本實(shí)驗(yàn)室檢測策略(1)地市級流感監(jiān)測檢測結(jié)果情況一：乙型流感通用引物陽性、或甲型流感通用引物陽性且季節(jié)性流感亞型分型陽性市級網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室參照《全國流感監(jiān)測方案（2010年版）》，開展后續(xù)實(shí)驗(yàn)室病毒分離和鑒定工作。人感染H7N9禽流感標(biāo)本實(shí)驗(yàn)室檢測策略(2)檢測結(jié)果情況一：乙型流感通用引物陽性、或甲型流感通用引物陽性人感染H7N9禽流感標(biāo)本實(shí)驗(yàn)室檢測策略(3)

檢測結(jié)果情況二：甲型流感通用引物陽性，但季節(jié)性流感病毒亞型分型陰性或無法分型（A未分型）應(yīng)立即將兩管呼吸道原始標(biāo)本送省級流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；省級流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室立即開展季節(jié)性流感的復(fù)核與分型，如季節(jié)性流感病毒亞型分型陰性或無法分型，則進(jìn)一步開展禽流感H5／H7／H9核酸檢測；人感染H7N9禽流感標(biāo)本實(shí)驗(yàn)室檢測策略(3)

檢測結(jié)果情況二人感染H7N9禽流感標(biāo)本實(shí)驗(yàn)室檢測策略(4)

檢測結(jié)果情況三：甲型流感和乙型流感通用引物均陰性應(yīng)立即將2兩管原始呼吸道標(biāo)本送省級流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；省級實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)本后，立即進(jìn)行流感病毒、SARS和新型冠狀病毒等相關(guān)病原體的檢測。人感染H7N9禽流感標(biāo)本實(shí)驗(yàn)室檢測策略(4)

檢測結(jié)果情況三人感染H7N9禽流感標(biāo)本采集及實(shí)驗(yàn)室檢測策略(5）地市級流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室不檢測血清標(biāo)本，直接將原始標(biāo)本送省級流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室。人感染H7N9禽流感標(biāo)本采集及實(shí)驗(yàn)室檢測策略(5）地市級流感檢測時(shí)限要求（1）不明原因肺炎病例收到標(biāo)本后，要在24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行標(biāo)本處理和核酸檢測；檢測結(jié)果如果為A未分型或陰性，應(yīng)立即將原始標(biāo)本送省CDC。檢測時(shí)限要求（1）不明原因肺炎病例檢測時(shí)限要求（2）流感樣病例暴發(fā)疫情按照《流感樣病例暴發(fā)疫情處置指南》要求，在24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行標(biāo)本處理和核酸檢測，檢測結(jié)果如果為A未分型，應(yīng)24小時(shí)內(nèi)將原始標(biāo)本送省CDC。流感樣病例監(jiān)測按照《全國流感監(jiān)測方案》開展。ILI病例檢測結(jié)果為A未分型的標(biāo)本需復(fù)檢，確認(rèn)為A未分型后24小時(shí)內(nèi)送省CDC。檢測時(shí)限要求（2）流感樣病例暴發(fā)疫情

謝謝！2626人感染H7N9禽流感病毒病原學(xué)特點(diǎn)

及實(shí)驗(yàn)室檢測要求

河南省疾病預(yù)防控制中心2013年4月3日人感染H7N9禽流感病毒病原學(xué)特點(diǎn)

及實(shí)驗(yàn)室檢測要求

河南省病例1病例2病例3病例1病例2病例3既往禽H7Nx病毒簡介既往禽H7Nx病毒簡介HPAIH7N7、H7N3、H7N1LPAIH7Nx、H7N2、H7N3、H7N1、H7N9HPAIH7N7、H7N3、H7N4HPAIH7N3（Pakistan）

HPAIH7N3LPAIH7N9HPAIH7N3LPAIH7N9禽中暴發(fā)的H72006年前暴發(fā)的均為HPAIH7歐洲：意大利、英國、德國、比利時(shí)、荷蘭、丹麥、挪威、

捷克、西班牙、瑞典LPAIH7N8、H7N9（Korea）LPAIH7N9HPAIH7N7、H7N3、H7N1HPAIH7N病毒亞型病原來源時(shí)間/國家病例數(shù)/臨床表現(xiàn)A/H7N7鷗1980/美國3/結(jié)膜炎A/H7N7鴨1996/英國1/結(jié)膜炎A/H5N1禽1997/香港18/ILI，肺炎A/H9N2雞1998/中國廣東5/ILI，肺炎A/H9N2禽1999/香港

2/ILIA/H7N2禽2002/北美（Virginia）1/ILI，血清學(xué)診斷A/H9N2禽2003/香港

1/ILIA/H5N1禽2003/香港2/ILI，肺炎A/H7N7禽2003/荷蘭89/結(jié)膜炎、ILI、肺炎;1名死亡病例A/H5N1禽2003至今,15個(gè)國家602/ILI,肺炎A/H7N2(NY/107)來源不清2003/北美(NewYork)，

1/肺炎A/H7N3禽2004/加拿大2/結(jié)膜炎、ILI;1名LPAI；1名HPAIA/H5N2禽2005/日本(Ibaraki)13/無臨床癥狀，血清學(xué)診斷A/H7N2禽2007/英國(Wales)1/結(jié)膜炎、ILIA/H9N2來源不清2007/香港1/ILIA/H10N7鴨2004/埃及(Ismaillia)2/ILIA/H10N7來源于疫區(qū)的鳥2010/悉尼(NewSouthWales)7/上呼吸道感染癥狀、結(jié)膜炎近年來人感染禽流感病毒病例血清學(xué)證據(jù)：人感染H4,H5,H6,H7,H9,H10,H11AIVs.病毒亞型病原來源時(shí)間/國家病例數(shù)/臨床表現(xiàn)A/H7N7鷗19H7感染人（>100人）美國、英國、意大利、荷蘭、加拿大HPAILPAI19591/USAH7N719771/USAH7N71979-19804/USAH7N719961/EnglandH7N720021/USAH7N220031/USAH7N27/ItalyH7N389/NetherlandsH7N71died20041/CanadaH7N31/CanadaH7N320061/NorfolkH7N320074/WalesH7N22/MexicoH7N3H7感染人（>100人）HPAILPAI19591/USAH7N9病毒共25株均為LPAI無感染人病例亞洲：7株均來自野禽5株—韓國2株—蒙古H7N9病毒共25株亞洲：7株H7N9的致病力和傳播力LPAIH7N9Nose(whitebars),lung(blackbars)LPAIH7N9不需經(jīng)過適應(yīng)便可在小鼠體內(nèi)有效復(fù)制，且能在雪貂上下呼吸道有效復(fù)制。HPAIH7N3LPAIH7N9LPAIH7N9HPAIH7N3LPAIH7N9在雪貂模型中不傳播。H7N9的致病力和傳播力LPAIH7N9Nose(whi中國地區(qū)H7AIVA/Baer'spochard/HuNan/414/2010(H7N1)A/chicken/Hebei/1/2002(H7N2)A/duck/Guangdong/1/1996(H7N3)A/duck/Hubei/126/1985(H7N8)A/duck/Jiangxi/1742/03(H7N7)A/duck/Jiangxi/1760/03(H7N7)A/duck/Jiangxi/1786/03(H7N7)A/duck/Jiangxi/1814/03(H7N7)A/duck/Nanchang/1904/1992(H7N1)A/duck/Nanchang/1944/92(H7N1)A/duck/Zhejiang/10/2011(H7N3)A/duck/Zhejiang/12/2011(H7N3)A/duck/Zhejiang/2/2011(H7N3)A/magpie-robin/China/28710/93(H7)亞型：H7N1,H7N2,H7N3,H7N7,H7N8野禽居多LPAI中國地區(qū)H7AIVA/Baer'spochard/HuN人感染H7N9禽流感病毒特點(diǎn)人感染H7N9禽流感病毒特點(diǎn)核酸檢測核酸檢測從3個(gè)病例中分離到3株病毒A/Shanghai/1/2013(H7N9)A/Shanghai/2/2013(H7N9)A/Anhui/1/2013(H7N9)病毒分離從3個(gè)病例中分離到3株病毒A/Shanghai/1/2013三株H7N9病毒為同一基因類型PB2PB1HANPNAMPNSPA2個(gè)片段來源于H7N96個(gè)片段來源于H9N2序列測定三株H7N9病毒為同一基因類型PB2PB1HANPNAMPN序列特點(diǎn)耐藥性分析

對烷胺類藥物是耐藥的，即M2蛋白25-42位氨基酸發(fā)生S31N突變。HA連接肽分析

HA蛋白339位連接肽由單個(gè)（PKGRGLFG）堿性氨基酸組成，根據(jù)既往研究，具有這種序列特點(diǎn)的病毒對禽類呈低致病性。受體結(jié)合位點(diǎn)及其它重要位點(diǎn)分析

Shanghai/1/2013的HA蛋白226-228位氨基酸屬于禽源受體結(jié)合位點(diǎn)（為QSG）。Shanghai/2/2013和Anhui/1/2013的HA蛋白226-228位氨基酸受體結(jié)合位點(diǎn)（為LSG）PB2蛋白627位氨基酸為K，提示致病性增強(qiáng)。NS1蛋白92位氨基酸為D，與禽流感病毒一致，而與人流感病毒不同。序列特點(diǎn)耐藥性分析人感染H7N9禽流感病毒實(shí)驗(yàn)室檢測要求人感染H7N9禽流感病毒

標(biāo)本采集、保存、運(yùn)送與實(shí)驗(yàn)室檢測做好人員安排以及試劑、耗材準(zhǔn)備；參照近期將下發(fā)的《全國不明原因肺炎病例監(jiān)測、排查和管理方案（2013年）》和《人感染H7N9禽流感標(biāo)本采集及實(shí)驗(yàn)室檢測策略》進(jìn)行。依托市級、省級流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室，開展核酸檢測和病毒分離工作。

標(biāo)本采集、保存、運(yùn)送與實(shí)驗(yàn)室檢測做好人員安排以及試劑、耗材標(biāo)本采集病例：采集鼻咽拭子、下呼吸道標(biāo)本（如氣管分泌物、氣管吸取物）和血清標(biāo)本等；密切接觸者：采集雙份血清標(biāo)本（開始實(shí)施醫(yī)學(xué)觀察時(shí)和間隔三周后）；出現(xiàn)急性呼吸道感染的密切接觸者：采集咽拭子標(biāo)本；標(biāo)本采集病例：采集鼻咽拭子、下呼吸道標(biāo)本（如氣管分泌物、氣管檢測試劑和方法2010年及之前下發(fā)的H7引物不再用于檢測。2013年4月2日，國家流感中心下發(fā)新的H7和N9檢測引物（real-timePCR）。H7N9核酸檢測方法與《甲型H1N1流感病毒實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)方案》相同。檢測試劑和方法2010年及之前下發(fā)的H7引物不再用于檢測。

人感染H7N9禽流感標(biāo)本實(shí)驗(yàn)室檢測策略(1)地市級流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室：收到標(biāo)本后，將原始標(biāo)本分為3管；24小時(shí)內(nèi)立即開展甲、乙型流感病毒通用引物、季節(jié)性流感病毒亞型分型的檢測。

人感染H7N9禽流感標(biāo)本實(shí)驗(yàn)室檢測策略(1)地市級流感監(jiān)測檢測結(jié)果情況一：乙型流感通用引物陽性、或甲型流感通用引物陽性且季節(jié)性流感亞型分型陽性市級網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室參照《全國流感監(jiān)測方案