齊魯醫(yī)學試驗-腦脊液檢驗

腦脊液檢驗試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第1頁!實驗一腦脊液理學檢查（目的）掌握腦脊液理學檢查的內容，方法。（標本）新鮮腦脊液。（操作）1．觀察顏色肉眼觀察腦脊液顏色變化，分別以無色，乳白色，紅色，棕色，或黑色，綠色等文字如實描述報告。試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第2頁!2．觀察透明度肉眼觀察腦脊液透明度變化。正常腦脊液清晰透明，病理情況下可出現不同程度渾濁，可分別以“清晰透明”?！拔啞?，“渾濁”等如實報告。3．觀察凝塊或薄膜輕輕傾斜試管，肉眼仔細觀察有無凝塊或薄膜。正常腦脊液無凝塊或薄膜，腦膜炎時可形成凝塊或薄膜，分別以“無凝塊”，“有凝塊”，“有薄膜”等如實報告。試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第3頁!實驗二腦脊液顯微鏡檢查（目的）掌握腦脊液顯微鏡檢查的內容，方法。（器材）顯微鏡，改良牛鮑計數板，微量吸管?？潭任埽≡嚬?。（試劑）生理鹽水或紅細胞稀釋液，冰乙酸，白細胞稀釋液，瑞氏染液或瑞—吉染液。（標本）新鮮腦脊液。試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第4頁!稀釋計數法（適用于渾濁的腦脊液）稀釋：如標本細胞過多，可根據標本內細胞多少，用生理鹽水或紅細胞稀釋液對標本進行一定倍數稀釋。充池：用微量吸管吸取混勻后的稀釋腦脊液充入1個計數池。計數：靜置2~3后，低倍鏡計數1個計數池內四角和中央大方格共5個大方格內的細胞數。計算：根據5個大方格內細胞總數及稀釋倍數，計算每升腦脊液的細胞總數。試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第5頁!稀釋計數法（渾濁腦脊液）稀釋破壞紅細胞：根據標本內白細胞多少情況，用白細胞稀釋液對標本進行一定倍數的稀釋，混勻，放置數分鐘，破壞紅細胞。充池：用微量吸管吸取混勻稀釋后的腦脊液充入1個計數池。計數：靜置2~3min后，低倍鏡計數1個計數池內的四角和中央大方格內的白細胞數。計算：根據5個大方格內的白細胞總數和稀釋倍數，計算每升腦脊液的白細胞總數試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第6頁!涂片染色分類法

若直接分類不易區(qū)別細胞時，可將腦脊液以1000r/min離心5min，取沉淀物，制成均勻薄片，置于室溫或37℃恒溫箱內盡快干燥，瑞氏或瑞—吉染色后，油鏡下進行分類計數，結果報告與血液白細胞分類計數報告方式相同。若見激活型單核細胞（比普通單核細胞大，胞質邊緣趁、呈花邊狀，胞質內有空泡），轉化型淋巴細胞（形態(tài)似異型淋巴細胞）及室管膜細胞（形態(tài)似大淋巴細胞）應計入分類的百分比中試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第7頁!細胞涂片時，為了使細胞容易粘在玻片上，可取沉淀的細胞懸液2滴，加血清1滴，混勻后涂片。涂片染色分類時，如見內皮細胞或異常細胞，則另行描述報告，必要時用巴氏或HE染色查找腫瘤細胞。實驗結束后，血細胞計數板用0.75％（V/V）乙醇浸泡消毒60min，忌用酚浸泡，以免損壞計數板。試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第8頁!血液分析儀也可進行腦脊液細胞計數和白細胞分類，此法簡單，快速，但標本尤其是病理性，陳舊性標本中的組織，細胞的碎片以及細胞變形等都可以影響細胞分類和計數，故結果重復性，可靠性有待進一步探討。另外，蛋白質含量高，尤其有凝塊的腦脊液標本容易使儀器堵孔，故不推薦使用試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第9頁!白細胞計數直接法的試管或吸管中的冰乙酸要盡量去盡，否則結果偏低。若標本陳舊，細胞變形時，白細胞直接分類法誤差大，推薦用涂片染色分類法分類計數。涂片染色分類計數時，離心速度不能太快，否則細胞形態(tài)受影響，有條件的單位可用玻片離心沉淀法，細胞室沉淀法等收集細胞。涂片固定時間不能太長，更不能高溫固定，以免細胞皺縮。試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第10頁!實驗三腦脊液蛋白質定性檢查目的）掌握腦脊液蛋白質定性試驗（潘迪試驗）的方法。（原理）腦脊液中球蛋白與苯酚結合，形成不溶性蛋白鹽而產生白色渾濁或沉淀。（器材）小試管，刻度吸管，尖滴管。（試劑）飽和苯酚溶液：取苯酚10ml（有結晶時，先放入56℃水浴箱中加熱助溶），加蒸餾水至100ml，充分混勻，置入37℃溫箱中數小時，見底層有苯酚析出，取上層飽和苯酚溶液于棕色瓶中避光保存。（標本）新鮮腦脊液。試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第11頁!（3）灰白色云霧狀為（+）。（4）白色渾濁或白色薄云狀沉淀為（++）。（5）白色絮狀沉淀或白色濃云塊狀為（+++）。（6）立即形成白色凝塊為（++++）。試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第12頁!質量控制標本因穿刺出血，有血清蛋白混入可引起假陽性。實驗中所用試管和滴管必須潔凈，否則易出現假陽性。苯酚不純可引起假陽性。室溫低于10℃，苯酚飽和度降低可引起加陰性。人工配置含球蛋白的溶液作陽性對照，可在正常腦脊液或配置與正常腦脊液基本成分相似的基礎液中加不同量的球蛋白。（參考值）陰性或弱陽性。試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第13頁!化學檢查李凡它試驗試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第14頁!（注意事項）

當標本顏色或透明度改變不明顯時，應在燈光下以白色或黑色為背景仔細觀察，同時觀察有無凝塊。

懷疑為結核性腦膜炎時，標本應在2~4℃環(huán)境中靜置12~24h再觀察腦脊液表面有無薄膜形成。參考值：無色，清晰透明，放置后無凝塊或薄膜形成。試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第15頁!（操作）

細胞總數計數直接計數法（適用于清晰透明或微渾腦脊液）充池：微量吸管吸取混勻的腦脊液，充入血細胞計數板的上下2個計數池。計數：靜置2~3min，低倍鏡下計數2個計數池內四角和中央大方格共10個大方格內的細胞數。計算：10個大方格內的細胞總數即為每微升腦脊液細胞總數，再換算試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第16頁!白細胞計數直接計數法（非血性清晰透明或微渾腦脊液）除去紅細胞：在小試管內加入冰乙酸1~2滴，轉動試管，使內壁粘附少許冰乙酸后傾去，滴加混勻的腦脊液3~4滴，混勻，放置數分鐘，使紅細胞破壞。充池：計數：計算：試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第17頁!白細胞分類計數直接分類法

白細胞計數后，轉換高倍鏡，根據細胞的形態(tài)和細胞核形態(tài)進行直接分類，共計數100個白細胞（包括內皮細胞），分別計數單（個）核細胞（包括淋巴細胞，單核細胞，內皮細胞）和多（個）核細胞（粒細胞系）的數量，結果以單核細胞百分比和多核細胞百分比報告。如白細胞不足100個，可直接寫出單核細胞和多核細胞具體數，若白細胞數不足30個，可不做直接計數而改用涂片染色分類計數試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第18頁!（注意事項）直接白細胞計數時，也可用微量吸管吸取冰乙酸后盡可能全部吹出，僅使吸管內壁粘附少許冰乙酸，再吸取少量混勻的腦脊液于吸管中，數分鐘后吸管內紅細胞溶解，然后再充池計數。細胞計數時，如發(fā)現較多紅細胞有皺縮或腫脹等異?，F象，應如實報告，以協助臨床醫(yī)生鑒別是陳舊性出血或新鮮出血。血性腦脊液中的白細胞必須校正后才有價值白細胞校正數=腦脊液白細胞未校正數—腦脊液紅細胞數×血液白細胞數/血液內紅細胞數試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第19頁!方法學評價腦脊液細胞計數和分類目前一般任用手工顯微鏡法。白細胞直接分類法簡單，快速，但屬粗略分類，其準確性差，且細胞較小，初學者難把握，尤其是陳舊性標本的細胞變形，分類更困難，誤差較大。涂片染色分類法分類詳細，結果準確可靠，尤其是可以發(fā)現異常細胞如腫瘤細胞。該法被推薦使用，但其操作較復雜，費時。試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第20頁!質量控制標本采集后應在1h內進行細胞計數，若放置太久，細胞可能凝集成團或破壞，影響計數結果。標本必須混勻方可充池，否則影響計數結果因穿刺損傷血管，引起血性腦脊液，白細胞計數結果必須校正，以剔除因出血而帶來的白細胞。細胞計數時應注意新型隱球菌與白細胞，紅細胞區(qū)別試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第21頁!參考值①腦脊液細胞總數：成人（0~10）×106/L,兒童（0~15）×106/L.②無紅細胞，僅有少數白細胞，以單個核細胞為主，幾乎完全為淋巴細胞，偶爾內皮細胞。試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第22頁!（操作）1．加試劑取試劑2ml于小試管中。2．加標本用尖滴管垂直滴加腦脊液標本1—2滴。3．觀察結果在黑暗背景下立即用肉眼觀察結果。4．判斷結果（1）清晰透明，不呈現云霧狀為（一）。（2）呈微白霧狀，對光不易看見，黑色背景下才能見到為（+—）試驗-腦脊液檢驗共26頁，您現在瀏覽的是第23頁!注意事項當室溫在10℃以下時，應將試劑保存在37℃溫箱中，否則飽和度