中藥化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)-實(shí)驗(yàn)一 大黃中游離蒽醌的提取分離與檢識(shí)

實(shí)驗(yàn)一大黃中游離蒽醌的提取分離與檢識(shí)（一）目的要求學(xué)習(xí)羥基蒽醌類化合物的提取分離和檢識(shí)，通過實(shí)驗(yàn)要求：掌握從大黃中提取和分離游離蒽醌的方法。pH梯度萃取法分離不同酸性的羥基蒽醌類化合物。掌握蒽醌類化合物的主要檢識(shí)方法。熟悉蒽醌類化合物的色譜檢識(shí)方法。了解用柱色譜法分離蒽醌類成分。（二）主要化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)RheumpalmatumL.、唐古特大黃RheumtanguticumMaxim.exReg.RheumofficinaleBaill.3％～5％。大黃酸(rhein)C15H8O6284.21狀結(jié)晶（升華法，mp.321～322℃，330℃分解。能溶于堿水、吡啶，略溶于乙醇、苯、氯仿、乙醚和石油醚，幾不溶于水。大黃素(emodin)C15H10O5270.23。橙色針狀結(jié)晶(乙醇)，mp.256～257微溶于乙醚、氯仿，幾不溶于水。蘆薈大黃素(aloe-emodin) 分子式C16H10O5，分子量270.2。橙色針狀結(jié)晶（甲苯mp.223～22可溶于乙醚和苯，并呈黃色；溶于堿液呈紅色；氨水及硫酸中呈緋紅色。大黃酚(chrysophanol)C15H10O4254.23。（乙醇或苯mp.196～197易溶于沸乙醇，可溶于丙酮、氯仿、苯、乙醚和冰醋酸，極微溶于石油醚、冷乙醇，幾不溶于水。大黃素甲醚(physcion) 分子式分子量284.26。磚紅色單斜針狀結(jié)晶，mp.203～207℃，溶于苯、氯仿、吡啶及甲苯，微溶于醋酸及醋酸乙酯不溶于甲醇乙醇、乙醚和丙酮OHOOH大黃酚R1=CH3R2=H大黃素R1=CH3R2=OH大黃酸R1=COOH R2大黃酸R1=COOH R2=H大黃素甲醚R1=CH3 R2=OCH3O（三）實(shí)驗(yàn)原理本實(shí)驗(yàn)是根據(jù)大黃中的羥基蒽醌苷經(jīng)酸水解成游離羥基蒽pH梯度萃取法將其分離。pH梯度萃取法難（四）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容見書。2．檢識(shí)1ml10醋酸鎂試驗(yàn)分別取各蒽醌化合物結(jié)晶少許，置試管1ml0.5變化，羥基蒽醌應(yīng)顯橙、紅、紫等顏色。薄層色譜檢識(shí)薄層板：硅膠G-CMC-Na試 樣：自制大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素的氯仿溶對(duì)照品：上述各成分對(duì)照品乙醇溶液展開劑：石油醚（30～60℃）-醋酸乙酯-甲酸（15∶5∶1）上層溶液顯 色：在可見光下觀察，記錄黃色斑點(diǎn)的位置。然后再濃氨水熏蒸或噴霧5％醋酸鎂甲醇溶液，斑點(diǎn)應(yīng)顯紅色。（五）實(shí)驗(yàn)說明及注意事項(xiàng)季節(jié)、炮制方法及貯存時(shí)間均有關(guān)系，實(shí)驗(yàn)用藥材應(yīng)注意。pH8緩沖液為檸檬酸-緩沖液為碳酸氫鈉-碳酸鈉緩沖液。配制好的緩沖液要測(cè)pHpH7～8范圍的，萃取大黃素用pH9.5～11范圍的。黃酸，故直接由大黃素開始分離。（8∶2）混合溶劑繼續(xù)洗脫，10ml為一份，按順序編號(hào)，直至色譜柱的第-CMC-Na(8∶2)展開，用大黃酚和大黃素甲醚作對(duì)照，合并斑點(diǎn)相同流分，分別濃縮、放置