第一節(jié)工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生

優(yōu)選第一節(jié)工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生第一頁(yè)，共十九頁(yè)。第一章基因工程廣義的“遺傳工程”包括細(xì)胞水平上的遺傳操作(細(xì)胞工程)和分子水平上的遺傳操作(基因工程)。

基因工程又叫做基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)。通俗的說(shuō)，就是按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來(lái)，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細(xì)胞里，定向地改造生物的遺傳性狀。第二頁(yè)，共十九頁(yè)。限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶質(zhì)?！d體主要存在于微生物中，能識(shí)別特定的核苷酸序列，并且在特定切點(diǎn)上切割DNA?？梢园褍煞N來(lái)源的DNA（用同一種限制酶切割）的黏性末端黏合起來(lái)。把外源基因送入受體細(xì)胞的工具。第1節(jié)工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生第三頁(yè)，共十九頁(yè)。

GAATTCCTTAAGGCTTAA黏性末端：被限制酶切開(kāi)的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個(gè)伸出的核苷酸，它們之間堿基正好互補(bǔ)配對(duì)。AATTCG第四頁(yè)，共十九頁(yè)。DNA連接酶:作用：可以把兩種來(lái)源的DNA（用同一種限制

酶切割）的黏性末端黏合起來(lái)。第五頁(yè)，共十九頁(yè)。質(zhì)粒：存在于許多細(xì)菌以及酵母菌等生物中，是細(xì)胞染色體外能自主復(fù)制的很小的環(huán)狀DNA分子。第六頁(yè)，共十九頁(yè)。限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶質(zhì)?！d體基因工程操作的工具第七頁(yè)，共十九頁(yè)。第八頁(yè)，共十九頁(yè)。剪切拼接導(dǎo)入表達(dá)（一）獲得目的基因（二）形成重組DNA分子（三）將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞（四）目的基因的檢測(cè)和表達(dá)第2節(jié)基因工程的原理和技術(shù)1、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞2、目的基因的表達(dá)第九頁(yè)，共十九頁(yè)。步驟一獲得目的基因人工合成利用PCR技術(shù)擴(kuò)增已知序列：從基因文庫(kù)獲得未知序列：(DNAlibrary)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction)第十頁(yè)，共十九頁(yè)。氫鍵斷裂，形成單鏈DNA。引物與DNA模板結(jié)合，形成局部雙鏈。在酶的作用下，不斷延伸，合成雙鏈DNA。多次循環(huán)，獲得大量雙鏈DNA分子。PCR技術(shù)擴(kuò)增第十一頁(yè)，共十九頁(yè)。鳥(niǎo)槍法：散彈射擊法供體細(xì)胞DNA限制酶許多DNA片段載入運(yùn)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞擴(kuò)增產(chǎn)生特定性狀分離目的基因從基因文庫(kù)獲得第十二頁(yè)，共十九頁(yè)。目的基因的mRNA逆轉(zhuǎn)錄單鏈DNA合成雙鏈DNA（目的基因）蛋白質(zhì)氨基酸序列推測(cè)mRNA的核苷酸序列推測(cè)結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列化學(xué)合成目的基因人工合成法逆轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知氨基酸序列直接合成DNA第十三頁(yè)，共十九頁(yè)。步驟二形成重組DNA分子第十四頁(yè)，共十九頁(yè)。步驟三將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞第十五頁(yè)，共十九頁(yè)。1.基因工程中常用的受體細(xì)胞有哪些？2.導(dǎo)入過(guò)程如何？大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑受體細(xì)胞：細(xì)菌CaCl2細(xì)胞壁的通透性增大重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞目的基因隨受體細(xì)胞的繁殖而復(fù)制第十六頁(yè)，共十九頁(yè)。步驟四目的基因的檢測(cè)和表達(dá)1、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞2、目的基因的表達(dá)通過(guò)檢測(cè)標(biāo)記基因的有無(wú)，來(lái)判斷目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，受體細(xì)胞必須表現(xiàn)特定的性狀。第十七頁(yè)，共十九頁(yè)。練習(xí)1．質(zhì)粒是基因工程最常用的運(yùn)載體，它的主要特點(diǎn)

是：()①能自主復(fù)制②不能自主復(fù)制③結(jié)構(gòu)很小

④蛋白質(zhì)⑤環(huán)狀RNA⑥環(huán)狀DNA

⑦能“友好”地“借居”A．①③⑤⑦B．②④⑥

C．①③⑥⑦D．②③⑥⑦C2．下列不是基因載體必須具備的條件的是()A、能自我復(fù)制B、有多個(gè)限制酶切點(diǎn)

C、具有標(biāo)記基因D、它是環(huán)狀DNAD第十八頁(yè)，共十九頁(yè)。練習(xí)4．有關(guān)基因工程的敘述正確的是()A.限制性內(nèi)切酶只在獲得目的基因時(shí)才用

B.重組質(zhì)粒的形成在細(xì)胞內(nèi)完成

C.質(zhì)粒都可以作為運(yùn)載體

D.蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)可為合成目的基因提供資料D3.有關(guān)基因工程的敘述中，錯(cuò)誤的是（）A、DNA連接酶將黏性末端