第六章原核生物基因表達調(diào)控詳解演示文稿

第六章原核生物基因表達調(diào)控詳解演示文稿第一頁，共八十五頁。優(yōu)選第六章原核生物基因表達調(diào)控第二頁，共八十五頁。2022/11/293第一節(jié)原核生物基因表達調(diào)控的概述基因表達（geneexpression)：是指DNA分子所承載的遺傳信息，通過密碼子—反密碼子系統(tǒng)，轉(zhuǎn)變成蛋白質(zhì)或功能RNA分子的過程，稱為基因表達。基因表達調(diào)控（generegulationorgenecontrol):

是指對基因表達過程的調(diào)節(jié)。第三頁，共八十五頁。2022/11/294基因表達調(diào)控主要表現(xiàn)在以下幾個方面：1、轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)控（transcriptionalregulation);2、mRNA加工成熟水平上的調(diào)控（differentialprocessingofRNAtranscription);3、翻譯水平上的調(diào)控（differentialtranslationofmRNA)第四頁，共八十五頁。2022/11/295基因調(diào)控的指揮系統(tǒng)：原核生物營養(yǎng)水平（nutritionalstatus)環(huán)境因素(environmentalfactors)真核生物激素水平（hormonelevel)發(fā)育階段（developmentalstage)第五頁，共八十五頁。2022/11/296一、原核基因調(diào)控機制的類型與特點根據(jù)調(diào)控機制的不同：正轉(zhuǎn)錄調(diào)控（positivetranscriptionregulation）：調(diào)節(jié)基因的產(chǎn)物是激活蛋白（activator），起著提高結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄水平的作用。負轉(zhuǎn)錄調(diào)控（negativetranscriptionregulation）：調(diào)節(jié)基因的產(chǎn)物是阻遏蛋白（reppressor），起著阻止結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄的作用。第六頁，共八十五頁。2022/11/297根據(jù)作用特征：誘導(dǎo)（induction）：調(diào)節(jié)因子與效應(yīng)物結(jié)合后，開啟基因的轉(zhuǎn)錄活性稱為

誘導(dǎo)（induction）；阻遏（repression）：調(diào)節(jié)因子與效應(yīng)物結(jié)合后，關(guān)閉基因的轉(zhuǎn)錄活性稱為

阻遏（repression）。第七頁，共八十五頁。2022/11/298第八頁，共八十五頁。2022/11/299第九頁，共八十五頁。2022/11/2910調(diào)節(jié)基因產(chǎn)物

調(diào)節(jié)基因產(chǎn)物與效應(yīng)物結(jié)合

基因表達基因不表達阻遏蛋白負控誘導(dǎo)系統(tǒng)

負控阻遏系統(tǒng)

激活蛋白正控誘導(dǎo)系統(tǒng)

正控阻遏系統(tǒng)

第十頁，共八十五頁。2022/11/2911σ

因子是參與大腸桿菌基因表達調(diào)控最常見的蛋白質(zhì)。6種σ

因子：σ70、σ54、σ38、σ32、σ28、σ24。

除σ54

外，其余5種σ

因子在結(jié)構(gòu)上均具有同源性，統(tǒng)稱為σ70家族。第十一頁，共八十五頁。2022/11/2912TTGACATATAAT-35-10Startpoint16-19bp5-9bpσ70因子識別并結(jié)合在所調(diào)控基因上游的區(qū)域CTGGNATTGCA-24-

12Startpoint

7-9bp6-8bpσ54因子識別并結(jié)合在所調(diào)控基因上游的區(qū)域第十二頁，共八十五頁。2022/11/29131、特殊代謝物對基因活性的調(diào)節(jié)可誘導(dǎo)調(diào)節(jié)：是指一些基因在某些代謝物的誘導(dǎo)下使其活化，由原來的關(guān)閉狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)殚_放狀態(tài)。如：大腸桿菌的乳糖操縱子可阻遏調(diào)節(jié)：是指一些基因由于某些代謝物的積累，而使其由原來的開放狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)殛P(guān)閉狀態(tài)。如：色氨酸操縱子二、原核基因調(diào)節(jié)的主要特點第十三頁，共八十五頁。2022/11/2914無誘導(dǎo)物時，基因關(guān)閉誘導(dǎo)物開啟基因可誘導(dǎo)的操縱子：是一些編碼糖和氨基酸分解代謝蛋白的基因；第十四頁，共八十五頁。2022/11/2915可阻遏的操縱子：是一些合成各種細胞代謝過程中所必須的小分子物質(zhì)。第十五頁，共八十五頁。2022/11/29162、弱化子對基因活性的調(diào)節(jié)弱化子(attenuator)：是指起轉(zhuǎn)錄終止信號的一段核苷酸序列。trp操縱子mRNA前導(dǎo)序列結(jié)構(gòu)第十六頁，共八十五頁。2022/11/2917細胞中某一氨基酸或嘧啶的濃度發(fā)生改變氨酰–tRNA的濃度變化核糖體在轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA上的結(jié)合位置不同，使得RNA形成特定的二級結(jié)構(gòu)由RNA的二級結(jié)構(gòu)判斷基因能否繼續(xù)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)機理：第十七頁，共八十五頁。2022/11/2918色氨酸含量和核糖體位置對弱化子結(jié)構(gòu)的影響當(dāng)色氨酸充足時，前導(dǎo)序列的合成正常進行，核糖體占據(jù)1區(qū)和部分2區(qū)，2、3不能有效配對；3、4配對形成終止子的發(fā)卡結(jié)構(gòu)，轉(zhuǎn)錄終止。Trp+轉(zhuǎn)錄終止第十八頁，共八十五頁。2022/11/2919當(dāng)缺乏色氨酸時，翻譯在雙色氨酸密碼子處中止；核糖體僅占據(jù)1區(qū)，2、3區(qū)配對；3、4區(qū)不能形成發(fā)卡結(jié)構(gòu)，轉(zhuǎn)錄繼續(xù)。Trp-轉(zhuǎn)錄繼續(xù)第十九頁，共八十五頁。2022/11/2920前導(dǎo)區(qū)的轉(zhuǎn)錄無色氨酸時，轉(zhuǎn)錄可持續(xù)進行有色氨酸存在時，轉(zhuǎn)錄在弱化子區(qū)域終止第二十頁，共八十五頁。2022/11/29213、降解物對基因活性的調(diào)節(jié)葡萄糖效應(yīng)或降解物抑制作用：細菌培養(yǎng)基中在葡萄糖存在的情況下，即使加入乳糖、半乳糖等誘導(dǎo)物，與其對應(yīng)的操縱子也不會啟動，這種現(xiàn)象稱為葡萄糖效應(yīng)或降解物抑制作用。葡萄糖抑制腺苷酸環(huán)化酶的活性導(dǎo)致環(huán)腺苷酸的合成減少環(huán)腺苷酸代謝物激活蛋白復(fù)合物復(fù)合物結(jié)合在啟動子區(qū)域是乳糖、半乳糖等糖類mRNA轉(zhuǎn)錄所必需的。第二十一頁，共八十五頁。2022/11/29224、細菌的應(yīng)急反應(yīng)

是指細菌在供給物全面匱乏的情況下，難以找到代用物，所作出的一種反應(yīng)，幫助細菌渡過難關(guān)。應(yīng)急反應(yīng)的機理：空載的tRNA激活焦磷酸轉(zhuǎn)移酶鳥苷四磷酸ppGpp鳥苷五磷酸pppGpp大量合成關(guān)閉一些基因打開一些基因第二十二頁，共八十五頁。2022/11/2923

1、原核基因調(diào)控機制的類型與特點

正轉(zhuǎn)錄調(diào)控負轉(zhuǎn)錄調(diào)控誘導(dǎo)阻遏2、原核基因調(diào)節(jié)的主要特點

a、特殊代謝物對基因表達的調(diào)節(jié)

b、弱化子對基因活性的調(diào)節(jié)

c、降解物對基因活性的調(diào)節(jié)

d、細菌的應(yīng)急反應(yīng)小結(jié)第二十三頁，共八十五頁。2022/11/2924β-半乳糖苷酶透過酶轉(zhuǎn)乙酰酶阻遏物第二節(jié)乳糖操縱子與負控誘導(dǎo)系統(tǒng)第二十四頁，共八十五頁。2022/11/2925

阻遏蛋白基因（I）屬于組成型的調(diào)控，是經(jīng)常表達的，因此，lac操縱子通常是處于關(guān)閉狀態(tài)的。lac操縱子的結(jié)構(gòu)阻遏蛋白基因（I）啟動區(qū)（P）操縱區(qū)（O）CAP-cAMP結(jié)合部位三個結(jié)構(gòu)基因ZYA第二十五頁，共八十五頁。2022/11/2926一、酶的誘導(dǎo)

——lac體系受調(diào)控的證據(jù)E.coli

在不含乳糖的培養(yǎng)基生長時，β-半乳糖苷酶含量極低；當(dāng)加入乳糖或半乳糖后，則迅速升高。兩種含硫的乳糖類似物：異丙基巰基半乳糖苷（IPTG）巰甲基半乳糖苷（TMG）第二十六頁，共八十五頁。2022/11/2927誘導(dǎo)物（inducer）：如果某物質(zhì)能促使細胞產(chǎn)生一特定的酶，該物質(zhì)就叫做誘導(dǎo)物；安慰誘導(dǎo)物（gratuitousinducers）：可誘導(dǎo)酶的合成，但不被所誘導(dǎo)的酶降解的物質(zhì)稱為安慰誘導(dǎo)物。IPTG（異丙基巰基半乳糖苷）是lac

基因的安慰誘導(dǎo)物。輔阻遏物（corepressor）如果某物質(zhì)能阻止細胞產(chǎn)生一特定的酶，該物質(zhì)就叫做輔阻遏物。第二十七頁，共八十五頁。2022/11/2928二、乳糖操縱子的模型及其影響因子

操縱子模型：一個或幾個結(jié)構(gòu)基因與一個調(diào)節(jié)基因、一個操縱區(qū)組成一個操縱單元。這個單元稱為操縱子（operon）。β-半乳糖苷酶透過酶轉(zhuǎn)乙酰酶阻遏物第二十八頁，共八十五頁。2022/11/2929

操縱區(qū)位于啟動子與結(jié)構(gòu)基因之間，與啟動子部分重疊，阻遏物結(jié)合于操作區(qū)時，即阻止RNA聚合酶起始轉(zhuǎn)錄。第二十九頁，共八十五頁。2022/11/2930乳糖操縱子控制模型的主要內(nèi)容：②操縱區(qū)位于啟動子與結(jié)構(gòu)基因之間，不能單獨起始結(jié)構(gòu)基因的表達；③操縱區(qū)是一小段DNA序列，是阻遏物結(jié)合位點；④操縱與啟動子部分重疊，當(dāng)阻遏物與操縱區(qū)結(jié)合時，即阻止RNA聚合酶起始轉(zhuǎn)錄；⑤誘導(dǎo)物通過與阻遏物結(jié)合，改變其三維構(gòu)象，使之不能與操縱區(qū)結(jié)合，從而激發(fā)mRNA的合成。①一條多順反子mRNA編碼Z、Y、A基因；第三十頁，共八十五頁。2022/11/2931第三十一頁，共八十五頁。2022/11/2932調(diào)節(jié)基因阻遏蛋白產(chǎn)生結(jié)合操縱區(qū)相鄰啟動區(qū)乳糖操縱子中調(diào)節(jié)基因的作用過程：乳糖操縱子中誘導(dǎo)物的作用機理：誘導(dǎo)物作用的對象是阻遏蛋白。阻礙RNA聚合酶與啟動子區(qū)的正常結(jié)合結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄成mRNA并合成蛋白質(zhì)抑制第三十二頁，共八十五頁。2022/11/2933（一）、lac操縱子的本底水平表達誘導(dǎo)物的形成需要有β-半乳糖苷酶的存在；誘導(dǎo)物作用需要跨膜，跨膜需要透過酶的存在；透過酶的產(chǎn)生又需要誘導(dǎo)物的存在；β-半乳糖苷酶的產(chǎn)生又需要誘導(dǎo)物的存在；

在非誘導(dǎo)的狀態(tài)下仍有少量的lacmRNA合成，這種合成被稱為本底水平的組成型合成（backgroundlevelconstitutivesynthesis)。第三十三頁，共八十五頁。2022/11/2934（二）、大腸桿菌對乳糖的反應(yīng)乳糖本底水平透過酶進入細菌細胞結(jié)合阻遏蛋白阻遏蛋白失活，β-半乳糖苷酶和透過酶表達細胞吸收大量乳糖去向葡萄糖半乳糖異構(gòu)乳糖結(jié)合阻遏蛋白當(dāng)阻遏蛋白的濃度超過異構(gòu)乳糖的濃度，細胞重新建立阻遏狀態(tài)，導(dǎo)致lacmRNA的合成被抑制。本底水平β-半乳糖苷酶葡萄糖-1,6-半乳糖誘導(dǎo)物第三十四頁，共八十五頁。2022/11/2935（三）、阻遏物lac

I

基因產(chǎn)物及功能Lac操縱子阻遏物mRNA是由弱啟動子控制下組成型合成的，該阻遏蛋白具有4個相同的亞基，每個亞基均含347個氨基酸殘基。lacI基因為組成型，通過啟動子的上升突變體可獲得較多的阻遏蛋白；β-半乳糖苷酶透過酶轉(zhuǎn)乙酰酶阻遏物第三十五頁，共八十五頁。2022/11/2936調(diào)節(jié)基因lacI的突變也可導(dǎo)致乳糖操縱子基因的組成型表達。第三十六頁，共八十五頁。2022/11/2937操縱區(qū)lacO的突變（lacOc）可導(dǎo)致乳糖操縱子基因的組成型表達。第三十七頁，共八十五頁。2022/11/2938（四）、葡萄糖對lac操縱子的影響

在葡萄糖存在時，E.coli優(yōu)先利用葡萄糖；此時即使培養(yǎng)基中含有乳糖，乳糖操縱子蛋白仍然含量很低。這是通過阻止乳糖操縱子表達來完成的，這種效應(yīng)稱為降解物抑制（cataboliterepression）。第三十八頁，共八十五頁。2022/11/2939葡萄糖葡萄糖-6-磷酸甘油某些代謝產(chǎn)物抑制活性腺苷酸環(huán)化酶ATPcAMPCrp基因編碼代謝物激活蛋白CAPcAMP-CAP

葡萄糖對其它糖的代謝抑制，是通過對cAMP的抑制完成的。（五）、cAMP與代謝物激活蛋白第三十九頁，共八十五頁。2022/11/2940

代謝物活化蛋白：CAP（Catabolitegeneactivatorprotein；cAMPreceptorprotein

）是一些啟動子起始轉(zhuǎn)錄必需的正調(diào)控因子。

CAP只有與cAMP結(jié)合后才能與其結(jié)合區(qū)域結(jié)合。第四十頁，共八十五頁。2022/11/2941CAP的結(jié)合部位

CAP結(jié)合部位不太固定，方向也可以不同。半乳糖操縱子乳糖操縱子阿拉伯糖操縱子第四十一頁，共八十五頁。2022/11/2942三、lacoperon的其它問題

lacoperon的功能是在正負兩個調(diào)控體系的協(xié)調(diào)作用下實現(xiàn)的。阻遏蛋白封閉轉(zhuǎn)錄時，CAP不發(fā)揮作用；如沒有CAP加強轉(zhuǎn)錄，即使阻遏蛋白從operator上解聚仍無轉(zhuǎn)錄活性；

CAP組成型合成，所以cAMP－CAP復(fù)合物取決于cAMP含量;第四十二頁，共八十五頁。2022/11/2943腺苷酸環(huán)化酶位于細胞膜上，其活性與葡萄糖運輸?shù)拿赣嘘P(guān)，因此cAMP－CAP調(diào)控乳糖、半乳糖、阿拉伯糖等糖類代謝有關(guān)的酶;降解物敏感型操縱元：只要有葡萄糖存在，這些操縱元就不表達。第四十三頁，共八十五頁。2022/11/29442.A基因及其生理功能

編碼β

-半乳糖苷乙?；D(zhuǎn)移酶，使半乳糖苷乙?；?。該酶不參與乳糖代謝！

生理意義：在細胞中有許多能被半乳糖苷酶降解的半乳糖苷類物質(zhì)，其分解產(chǎn)物不能進一步代謝，積累，抑制細胞生長。半乳糖苷乙?；?，即無毒。所以lacA雖不在乳糖降解中起作用，但可抑制有害物質(zhì)的積累。第四十四頁，共八十五頁。2022/11/29453.lac基因產(chǎn)物數(shù)量，1：0.5：0.2

不同酶的數(shù)量差異，是由于在翻譯水平上的調(diào)節(jié)。方式有二:

核糖體脫離:多順反子的差別性翻譯;

內(nèi)切酶作用:在lacmRNA分子內(nèi)部，a基因比z基因更易受內(nèi)切酶作用.第四十五頁，共八十五頁。2022/11/2946第四十六頁，共八十五頁。2022/11/2947SummaryoflacoperonregulationGlucosecAMPLactoseTranscriptionoflacmRNAHighLowPresentlowrateofexpressionHighLowAbsentessentiallynoneLowHighAbsentessentiallynoneLowHighPresenthighrateofexpression第四十七頁，共八十五頁。2022/11/2948

生物細胞中的氨基酸合成，也受操縱元的調(diào)節(jié)。細胞需要某種氨基酸時，其基因即表達，不需要時基因關(guān)閉，達到經(jīng)濟的原則。第三節(jié)色氨酸操縱子與負控阻遏系統(tǒng)第四十八頁，共八十五頁。2022/11/2949trp操縱子的組成鄰氨基苯甲酸合成酶吲哚甘油磷酸合成酶色氨酸合成酶鄰氨基苯甲酸磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶第四十九頁，共八十五頁。2022/11/2950trpR,阻遏蛋白

P，-40~+18O,-21~+1L,+1~+162

結(jié)構(gòu)基因一、trp操縱子的結(jié)構(gòu)大腸肝菌中的trp操縱子第五十頁，共八十五頁。2022/11/2951trp操縱子的結(jié)構(gòu)操縱區(qū)啟動子區(qū)（P）操縱子（O）弱化子區(qū)（a）結(jié)構(gòu)基因E:鄰氨基苯甲酸合成酶（與G基因為融合基因）C:吲哚甘油磷酸合成酶B:色氨酸合成酶α亞基

D:鄰氨基苯甲酸磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶A:色氨酸合成酶β亞基

前導(dǎo)區(qū)(L)第五十一頁，共八十五頁。2022/11/2952二、Trpoperon的阻遏系統(tǒng)1、TrpR四聚體第五十二頁，共八十五頁。2022/11/2953阻遏蛋白＋trp→

有活性的阻遏物＋trpO→不轉(zhuǎn)錄第五十三頁，共八十五頁。2022/11/29542、阻遏蛋白的結(jié)合位點trpO-21~+1，反向重復(fù)序列trpP-40~+18活性阻遏物與trpO的結(jié)合，RNApol與啟動子的結(jié)合發(fā)生競爭。第五十四頁，共八十五頁。2022/11/29553、阻遏系統(tǒng)

主管轉(zhuǎn)錄是否啟動，在Trp含量高時，mRNA起始合成，但不能自動延伸，一般在trpE之前終止轉(zhuǎn)錄。

粗調(diào)開關(guān)弱化的mRNA第五十五頁，共八十五頁。2022/11/2956

色氨酸操縱子:由與色氨酸合成相關(guān)的基因及其調(diào)控序列組成。當(dāng)缺乏色氨酸時，trp

操縱子基因表達；當(dāng)外源色氨酸含量較高時，操縱子中的基因受到阻遏。trp操縱子的阻遏系統(tǒng)

色氨酸調(diào)節(jié)（trpR）基因突變會引起trpmRNA的組成型合成。只有在色氨酸存在的情況下，阻遏蛋白與之結(jié)合形成有活性的阻遏物，與操縱區(qū)結(jié)合關(guān)閉trpmRNA的轉(zhuǎn)錄。第五十六頁，共八十五頁。2022/11/2957三、弱化子對基因表達的調(diào)節(jié)

阻遏發(fā)生時，轉(zhuǎn)錄的起始頻率下降到1/70，但trp酶系統(tǒng)活性卻下降到1/600。弱化作用（attenuation）：是指控制一些細菌操縱子轉(zhuǎn)錄終止的調(diào)節(jié)。弱化子（attenuator）：是指弱化所發(fā)生的終止子序列，并且這種終止是被調(diào)節(jié)的，這段序列就稱為弱化子。1、弱化子（attenuator）第五十七頁，共八十五頁。2022/11/29582、前導(dǎo)區(qū)：在trpmRNA5‘端trpE基因的起始密碼子前有一個長162bp的mRNA片段，被稱為前導(dǎo)區(qū)。

前導(dǎo)肽：由前導(dǎo)序列指導(dǎo)合成的含有14個氨基酸殘基的肽稱為前導(dǎo)肽。前導(dǎo)序列結(jié)構(gòu)特點：第10和11位兩個密碼子為色氨酸密碼子。第五十八頁，共八十五頁。2022/11/2959

弱化子，衰減子，α

前導(dǎo)RNA，140bp第五十九頁，共八十五頁。2022/11/2960弱化子，衰減子，α第六十頁，共八十五頁。2022/11/2961

前導(dǎo)肽14aa第六十一頁，共八十五頁。2022/11/29623、trpmRNA前導(dǎo)序列結(jié)構(gòu)第六十二頁，共八十五頁。2022/11/2963trp缺乏tRNAtrp也少核糖體通過兩個trp密碼子的速度慢，占據(jù)前導(dǎo)序列的trp1區(qū)2區(qū)與3區(qū)配對，不能形成終止子結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄4、轉(zhuǎn)錄的弱化作用第六十三頁，共八十五頁。2022/11/2964trp濃度高前導(dǎo)肽中trp合成速度快前導(dǎo)肽一直合成至其末端核糖體占據(jù)1區(qū)和2區(qū)3區(qū)與4區(qū)配對，形成終止子結(jié)構(gòu)，使轉(zhuǎn)錄終止第六十四頁，共八十五頁。2022/11/2965弱化子對轉(zhuǎn)錄調(diào)控的關(guān)鍵空間結(jié)構(gòu)，10thand11thcodonsencodetrpresidues(rareAA)時間，核糖體停頓在2個Trp密碼子上時，產(chǎn)生延遲，此時4區(qū)未轉(zhuǎn)錄出來第六十五頁，共八十五頁。2022/11/2966RPOleadingseq.EDCBAtrp+為什么需要阻遏體系？當(dāng)大量Trp存在時，阻遏系統(tǒng)起作用。阻遏物與之結(jié)合，阻止先導(dǎo)mRNA合成。

經(jīng)濟Negative—repressibleoperon可以被最終合成產(chǎn)物所阻遏四、阻遏作用與弱化作用的協(xié)調(diào)第六十六頁，共八十五頁。2022/11/2967RPOleadingseq.EDCBA少量trp+不足以結(jié)合O位點為什么需要弱化系統(tǒng)？當(dāng)trp濃度低時，阻遏物從有活性變?yōu)闊o活性，速度極慢，不能很快引發(fā)trp合成。因此需要一個能快速作出反應(yīng)的系統(tǒng)，以保持培養(yǎng)基中適當(dāng)?shù)腡rp水平。第六十七頁，共八十五頁。2022/11/2968大腸肝菌中共有5個基因參與色氨酸生物合成，構(gòu)成色氨酸操縱子。其中trpG-D，trpC-F為融合基因，翻譯出的多肽具有雙重功能。有兩個啟動子，一個位于操縱子5‘，一個位于trpG-D編碼區(qū)。大腸肝菌色氨酸操縱子受到由色氨酸激活的負阻遏蛋白的調(diào)節(jié)作用。一旦轉(zhuǎn)錄越過前導(dǎo)區(qū)，開始結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄，又會受弱化子的調(diào)控，感受無負載的tRNATrp的變化。使轉(zhuǎn)錄機器在前導(dǎo)區(qū)附近停止或繼續(xù)結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。第六十八頁，共八十五頁。2022/11/2969結(jié)構(gòu)基因galE:異構(gòu)酶galT:半乳糖-磷酸尿嘧啶核苷轉(zhuǎn)移酶galK:半乳糖激酶作用：半乳糖葡萄糖–1–磷酸第四節(jié)其他操縱子一、半乳糖（gal）操縱子第六十九頁，共八十五頁。2022/11/2970

無外源葡萄糖時，細菌也可利用半乳糖。gal操縱子的調(diào)控與乳糖操縱子基本相同，但稍有差別：

雙啟動子;

雙操縱區(qū),一個在P區(qū)上游–67～–

73，另一個在結(jié)構(gòu)基因galE內(nèi)部調(diào)節(jié)基因距離結(jié)構(gòu)基因很遠；在有外源葡萄糖時，仍然可以被低水平誘導(dǎo)。第七十頁，共八十五頁。2022/11/2971S2S1轉(zhuǎn)錄方向-101、cAMP–CAP對gal啟動子的作用

S1起始依賴于

cAMP-CAP，只有當(dāng)葡萄糖不存在時才可轉(zhuǎn)錄，需要有半乳糖、CAP和較高濃度的cAMP;S2起始不依賴于

cAMP-CAP，只有當(dāng)葡萄糖存在時才可轉(zhuǎn)錄。第七十一頁，共八十五頁。2022/11/29722、雙啟動子的生理功能半乳糖作為惟一碳源供細胞生長半乳糖差向異構(gòu)酶的作用UDP-葡萄糖UDP-半乳糖不依賴于cAMP-CAP啟動子S2依賴于cAMP-CAP啟動子S1是大腸肝菌細胞壁合成的前體第七十二頁，共八十五頁。2022/11/2973二、ara操縱子阿拉伯糖降解araB:核酮糖激酶araA：L-阿拉伯糖異構(gòu)酶araD：L-核酮糖-5-磷酸-4-差向異構(gòu)酶Operator2Operator1regulategenearaBADCRP結(jié)合位點第七十三頁，共八十五頁。2022/11/2974araC與araBAD相鄰，但轉(zhuǎn)錄方向相反。araC

與

araBAD的結(jié)構(gòu)C蛋白有三個結(jié)合位點：O1,O2,IC基因為自我調(diào)節(jié)基因：缺乏C蛋白時，araC表達；當(dāng)C蛋白含量升高時，抑制araC的表達。具有正、負調(diào)節(jié)作用。第七十四頁，共八十五頁。2022/11/2975（1）當(dāng)葡萄糖水平較高、阿拉伯糖水平較低時，C蛋白與操縱區(qū)O2及araI誘導(dǎo)因子結(jié)合區(qū)上半?yún)^(qū)結(jié)合，形成DNA回轉(zhuǎn)結(jié)構(gòu)，araBAD基因不表達；（2）當(dāng)體系中有阿拉伯糖、無葡萄糖時，AraC與阿拉伯糖相結(jié)合，改變構(gòu)象成為激活蛋白，AraC同源體分別與araO1和araI區(qū)結(jié)合。RNA聚合酶在AraC蛋白和CRP-cAMP的作用下，起始BAD基因表達。第七十五頁，共八十五頁。2022/11/2976第五節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的其它調(diào)控方式一、σ因子的調(diào)節(jié)作用不同σ因子的選擇；σ因子本身活性的調(diào)節(jié)；二、組蛋白類似蛋白的調(diào)節(jié)作用在細菌細胞中存在的用來維持DNA高級結(jié)構(gòu)的非特異性DNA結(jié)合蛋白，稱為組蛋白類似蛋白。第七十六頁，共八十五頁。2022/11/2977三、轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的作用轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子：指與基因的啟動子區(qū)結(jié)合，對基因的轉(zhuǎn)錄起激活或抑制作用的DNA結(jié)合蛋白稱為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子。四、抗終止因子的調(diào)節(jié)作用抗終止因子是能夠在特定位點阻止轉(zhuǎn)錄終止的一類蛋白質(zhì)。這種調(diào)節(jié)作用主要見于噬菌體和少數(shù)細菌中。參與大腸肝菌抗終止作用的蛋白是Nus蛋白。第七十七頁，共八十五頁。2022/11/2978第七節(jié)轉(zhuǎn)錄后調(diào)控一、翻譯起始的調(diào)控（1）起始密碼子AUG，GUG，UUG，AUU，這些不常見起始密