導(dǎo)學(xué)案：蛋白質(zhì)的提取和分離

蛋白質(zhì)的提取和分離導(dǎo)學(xué)案【課標(biāo)要求】嘗試蛋白質(zhì)的提取和分離【知識(shí)梳理】一、背景知識(shí)1．常用的蛋白質(zhì)分離提純技術(shù)有和等。其中技術(shù)最為快捷靈敏，簡便易行。2．電泳現(xiàn)象：。3．電泳技術(shù)分離蛋白質(zhì)的原理：。4．聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）：。二、實(shí)踐案例——血清蛋白的提取和分離1．材料用具（略）2．活動(dòng)程序（1）點(diǎn)樣：新配制血清5μL，與質(zhì)量濃度為mL的蔗糖溶液及質(zhì)量分?jǐn)?shù)為的指示劑等體積混勻后，用加樣器吸取5μL樣品，小心加到電泳樣品槽的膠面上。（2）電泳：打開穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀的電源，將電流調(diào)節(jié)至mA，待樣品進(jìn)入分離膠后，改為mA,當(dāng)溴酚藍(lán)前沿距離硅膠框下緣時(shí)，將電流調(diào)回零。關(guān)閉電源。（3）染色：取出凝膠，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為的中，染色與同時(shí)進(jìn)行，使染色液沒過膠板，染色。（4）脫色：用體積分?jǐn)?shù)為的浸泡漂洗數(shù)次，每隔更換脫色液，直至底色脫凈，背景清晰。（5）烘干膠板：將已脫色的凝膠板放在保存液中浸泡然后將凝膠板放在兩層透氣玻璃紙中間，自然干燥即可獲得血清蛋白的電泳譜帶。3．結(jié)果分析（1）分析沒有出現(xiàn)電泳譜帶的原因（2）通過辨認(rèn)電泳譜帶可初步判斷血清中蛋白質(zhì)的種類三、探究活動(dòng)1．牛奶中酪蛋白的提取和檢測提取原理：當(dāng)pH=時(shí)，酪蛋白的溶解度降低，并析出沉淀。用除去酪蛋白中的脂肪后，即得到純的酪蛋白。檢測原理：酪蛋白中的酪氨酸，能與起顏色反應(yīng)，首先生成白色沉淀，加熱后變成。2．卵清蛋白的分離用聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)分離（同上）四、意義1．胰島素的提純2．對(duì)細(xì)胞癌變做出診斷【復(fù)習(xí)指導(dǎo)】本節(jié)課復(fù)習(xí)以聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）為例，以電泳技術(shù)分離蛋白質(zhì)的原理為基礎(chǔ)，注重電泳技術(shù)的主要的步驟，明確點(diǎn)樣、染色、脫色等在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中的地位，明確各步驟所用試劑以及它們的作用?！镜漕}解析】下列敘述正確的是（）A．蛋白質(zhì)中含有游離的氨基，是堿性電解質(zhì)B．蛋白質(zhì)中含有游離的羧基，是酸性電解質(zhì)C．蛋白質(zhì)在電場中可以向與其自身所帶電荷相同的電極方向移動(dòng)D．蛋白質(zhì)在電場中可以向與其自身所帶電荷相反的電極方向移動(dòng)[解析]電泳技術(shù)分離蛋白質(zhì)的原理：蛋白質(zhì)中既含有游離的氨基，又含有羧基