臨床生物化學(xué)檢驗

安岳縣檢驗學(xué)會臨床生物化學(xué)檢驗

安岳縣中醫(yī)醫(yī)院檢驗科袁國平

分析前的質(zhì)量控制要點有哪些？在選購全自動生化分析儀時,應(yīng)重點了解哪些基本知識?如何選擇校準(zhǔn)物質(zhì)?校準(zhǔn)方法?校準(zhǔn)頻率?全自動生化分析儀常見的交叉污染的原因?分析前的質(zhì)量控制要點有哪些?生化檢驗過程的三階段I分析前醫(yī)生接診，開檢驗申請單患者準(zhǔn)備（生理特征、狀態(tài)）標(biāo)本采集、標(biāo)本運送標(biāo)本處理

II分析中

標(biāo)本檢測

III分析后結(jié)果審核、報告發(fā)出對檢驗結(jié)果的正確評價和解釋分析前：是指從臨床醫(yī)生開出檢驗單開始，到實驗室進(jìn)入分析檢驗的這一段過程。包括檢驗申請、患者準(zhǔn)備、原始樣品的采集、運送和實驗室預(yù)處理等步驟。一、實驗室統(tǒng)計分析前：68.2%分析中：13.3%分析后：18.5%~74%未對病人造成不良影響~19%造成對病人做進(jìn)一步的檢查~6.4%造成對病人的治療方案修改

——ClinicalChemistry1977,43(8):1348~1351重要性分析前質(zhì)量管理是一個最薄弱的環(huán)節(jié)，影響檢驗結(jié)果質(zhì)量占60%以上從“檢驗醫(yī)學(xué)”的要求來看，檢驗不能只考慮分析階段的質(zhì)量保證，還必須重視和參與分析前的質(zhì)量保證《分析前因素對臨床檢驗結(jié)果影響》第3版人民衛(wèi)生出版社第二章第十五條醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實驗室應(yīng)有分析前質(zhì)量保證措施制定患者準(zhǔn)備、標(biāo)本采集、標(biāo)本儲存、標(biāo)本運送、標(biāo)本接收等標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程目的：確保檢驗前程序處于受控狀態(tài)衛(wèi)生部文件衛(wèi)生部關(guān)于印發(fā)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實驗室管理辦法》的通知1、患者準(zhǔn)備控制的要點①不可變的生物因素：年齡、性別、種族等生理節(jié)律變化（日周期、月周期、妊娠、季節(jié)、海拔）②可變的生物因素：情緒、運動、飲食、飲酒、藥物③其他

如采取標(biāo)本時：體位、止血帶等1.患者準(zhǔn)備控制的要點

作好解釋工作

即向患者說明作該項檢驗的目的及注意事項，消除在抽血時的恐懼和緊張。避免飲食、藥物的影響盡力爭取患者的協(xié)助

特別是餐后2h血糖或糖耐量實驗，要告之方法、注意事項。2、血液標(biāo)本的的采集采血順順序血培養(yǎng)→凝凝血像→肝肝功免疫→→急診生化化→血常規(guī)→→血沉根據(jù)CLSIH3-A5文件最佳采樣時時間的選擇擇晨起空腹時或者禁食12h能減少晝夜夜節(jié)律帶來來的影響患者處于平平靜狀態(tài)，，減少由于于運動帶來來的影響減少飲食的的影響易于與正常常參考范圍圍作比較檢出陽性率最高的時間間：如血培養(yǎng)對診斷最有有價值的時間：如餐后2h血糖采集部位靜脈穿刺采血部位:常選擇肘肘靜脈或頸頸靜脈應(yīng)該在非水水腫,非炎炎癥部位采采血同時不能在在任何輸液液的“下游游”采血電解質(zhì)(鈉鈉、鉀、氯氯結(jié)果錯誤誤）葡萄糖（葡葡萄糖濃度度升高）輸血（血紅紅蛋白結(jié)果果錯誤）患者識別標(biāo)本采集前前應(yīng)核實患患者身份口頭確認(rèn)、、腕帶掃描描問題：確認(rèn)患者姓姓名是由護(hù)護(hù)士發(fā)問還是患者自報名字？？？避免溶血顯性溶血：當(dāng)血紅素素等于或者者大于300mg/L時能肉眼觀察察到。非顯性溶血血：肉眼觀察察不到的溶溶血。溶血標(biāo)本項目紅紅細(xì)細(xì)胞/血漿漿溶溶血標(biāo)本/正常標(biāo)本本氯0.501.05鉀22.71.91磷0.78-2.64鈣0.100.96ALT6.72.2AST40.03.59LDH180.08.04CK10014.08Cr1.631.94UA0.550.50Glu0.820.91BUN0.821.14抗凝劑的的選擇及及影響EDTA、NaF、草草酸鹽等等不能用用于鈣離子測定含有K、Na離子的抗凝凝劑不能用于于測定K、Na離子子標(biāo)本的抗凝草酸鹽、氟化化物不能用于于酶法測定草酸鹽可抑制制Amy、Acp、LDH的活性氟化物可激活活尿素酶、淀淀粉酶等凝血因子檢測測用枸櫞酸鈉抗凝優(yōu)于草酸酸鹽3、標(biāo)本的唯一標(biāo)標(biāo)志性標(biāo)本容器的標(biāo)標(biāo)簽上至少應(yīng)應(yīng)注明下列內(nèi)內(nèi)容：患者姓名及病病歷號送檢科別及病病床號送檢標(biāo)本名稱稱及量檢驗項目采集標(biāo)本的時時間唯一條碼號防止張冠李戴戴4、標(biāo)本的拒收下列情況可拒拒收（各臨床床實驗室應(yīng)有有規(guī)定）溶血、脂血嚴(yán)嚴(yán)重者（視病病情而定）抗凝血中有凝凝塊；該抗凝凝未加抗凝劑劑者血量不足（如如血沉、PT等）不應(yīng)接觸空氣氣的接觸了空空氣標(biāo)本采集與送送檢時間間隔隔過長者該加防腐劑未未加防腐劑者者用錯真空采血血管者唯一性標(biāo)識錯錯誤或不清楚楚者案例分析檢測項目結(jié)結(jié)果參參考范范圍單單位位鉀23.73.5-5.5mmol/LALP-240-120U/L鈣0.302.10-2.60mmol/L其他項目正常常原因護(hù)士采血用的的真空管拿錯錯,用的EDTA-K3采的生化標(biāo)標(biāo)本，然后倒倒進(jìn)生化用管管中。真空管含鉀；；血漿中的鈣鈣離子被熬合合。不二過，不諉諉過在選購全自動動生化分析儀儀的時候，應(yīng)重點了解哪哪些基本知識識？一、自動生化化分析儀簡介介概念：是將臨床化化學(xué)分析過程程中的加樣過過程中的加樣樣、加試劑、、混合、孵育育反應(yīng)、檢測測、結(jié)果計算算、打印及實實驗后清洗等等步驟進(jìn)行自自動化操作的的儀器具有快速、簡便、、靈敏、準(zhǔn)確確、標(biāo)準(zhǔn)化、、微量等特點自動生化分析析儀分類按反應(yīng)裝置的的結(jié)構(gòu)：連續(xù)流動式、、離心式、分分立式、干片片式按自動化程度度全自動型、半半自動型按同時可測項項目單通道、多通通道按儀器的復(fù)雜雜程度及功能能小型、中型、、大型生化分析儀的的常用技術(shù)光譜分析技術(shù)術(shù)a.免疫比濁濁法b.紫外可見見分光光度法法終點分析法、、連續(xù)監(jiān)測法法c.反射光度度法紫外可見分光光光度法概念：是利用某些物物質(zhì)的分子吸吸收200-800nm光譜區(qū)的輻輻射來進(jìn)行分分析測定的方方法?？梢娮贤夤獾牡姆秶鹤贤夤獾姆秶鷩?00———400nm可見光的范圍圍：400———760nm光吸收的基本本定律：朗伯伯比爾定律定義：當(dāng)一束平行單單色光垂直同同過某一均勻勻非散射的吸吸光物質(zhì)時，，其吸光度A與吸光物質(zhì)質(zhì)的濃度C及及吸收層厚度度b成正比。。用途：化學(xué)法及酶學(xué)學(xué)終點法的測測定。A=-logT=K××b×cA：為吸光度度K：摩爾吸光光系數(shù)b:液液層厚度（光光徑）c:吸吸收物質(zhì)的的濃度透射比濁法在光源的光路路方向上測量量透射光強(qiáng)度度與人射光強(qiáng)度的的比值和膠體體溶液中質(zhì)點點間的關(guān)系稱為透透射比濁法比色分析：反應(yīng)類型直接測量：具有特征性的的吸收峰，不不經(jīng)任何反應(yīng)應(yīng)直接在指定定波長測量單一反應(yīng)：待測反應(yīng)本身身有特征性吸吸收峰的底物物或產(chǎn)物量的的變化偶聯(lián)反應(yīng)：底物或產(chǎn)物無無特征性吸收收峰，需經(jīng)過過其他反應(yīng)生生成有特征性性吸收峰測量量的化合物。。這種反應(yīng)稱稱為指示反應(yīng)比色分析：干擾因素溶血：血紅蛋白及及其它內(nèi)容物物的釋放黃疸：影響光度測測量脂血：干擾光度測測量，污損管管路二、指示反應(yīng)應(yīng)及波長常見的指示反反應(yīng)脫氫酶系統(tǒng)（（ALT、AST、LDH、CK））NADH或NADPH作作底物或產(chǎn)物物用340nm/405nm硝基苯衍生物物系統(tǒng)（ALP、GGT、AMY））硝基苯衍生物物的用405/476nm過氧化物酶系系統(tǒng)（GIU、UA、CHO/HDL/LDL）Trinder反應(yīng)多用用520/600nm,550/660nm三、生化分析析的檢測方法法終點分析法：一點終點法，，兩點終點分分析法固定時間法連續(xù)監(jiān)測法：兩點速率法，，多點速率法法1、終點法一點終點法：當(dāng)待測物質(zhì)質(zhì)與試劑的反反應(yīng)達(dá)到平衡衡時，測定吸吸光度，計算算待測物的濃濃度優(yōu)點：吸光度穩(wěn)定定，對溫度、、時間和顯色色劑用量要求求不高不足：反應(yīng)時間長長測定項目：TP、Alb、Mg1、終點法兩點終點法：在被測物質(zhì)反反應(yīng)或指示反反應(yīng)尚未開始始時，選擇第第一個吸光度度，在反應(yīng)到到達(dá)平衡時選選擇第二個吸吸光度，此兩兩點吸光度之之差用于計算算結(jié)果。能減少溶血、、黃疸和脂濁濁等造成的干干擾測定項目：TP、Alb、Mg2、固定時間間法指在時間—吸吸光度曲線上上取尚在反應(yīng)應(yīng)中的兩點間間的差值來計計算結(jié)果。此此兩點即不是是反應(yīng)的起點點也不是終點點。該分析方方法有助助于解決決某些反反應(yīng)的非特異性性問題測定項目目：Crea苦苦味酸法法3、動力力法（連連續(xù)監(jiān)測測法）動力學(xué)法法：在零級級反應(yīng)期期連續(xù)測測定酶促促反應(yīng)過過程中的的底物或或產(chǎn)物量量的變化化，求出出酶反應(yīng)應(yīng)初速度度，間接接計算出出酶活力力濃度主要用于于酶活性性及其代代謝產(chǎn)物物的測定定測定結(jié)果果較終點點法準(zhǔn)確確不需要終終止反應(yīng)應(yīng)四、自動動生化分分析儀的的結(jié)構(gòu)樣品及運運送系統(tǒng)統(tǒng)試劑系統(tǒng)統(tǒng)檢測系統(tǒng)統(tǒng)清洗及管管路系統(tǒng)統(tǒng)微機(jī)管理理系統(tǒng)如何選擇擇校準(zhǔn)物物質(zhì)？校校準(zhǔn)準(zhǔn)方法？？校校準(zhǔn)頻率率？校準(zhǔn)的定定義校準(zhǔn)是一個測測試和調(diào)調(diào)整儀器器、試劑劑或檢測測系統(tǒng)以以提供檢驗反應(yīng)應(yīng)和所測測物質(zhì)之之間的已已知關(guān)系系的過程程校準(zhǔn)決定在規(guī)規(guī)定范圍圍內(nèi)檢驗驗結(jié)果的的準(zhǔn)確性和和可靠性性校準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)的選擇擇傳統(tǒng)的臨臨床檢驗驗，要使使檢驗結(jié)結(jié)果可靠靠或有依依據(jù)，往往往有一一個標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)品為了克服服純標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)液和患患者樣品品間的基基體差異異，20年前開開始引用用具有與與患者樣樣品基質(zhì)質(zhì)相似的的校準(zhǔn)品品替代標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品，，用于日日常工作作什么是校校準(zhǔn)品？？校準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)的選擇擇SFDA批準(zhǔn)生生產(chǎn)和注注冊登記記的儀器器、試劑劑和檢測測系統(tǒng)實驗室使使用制造造商規(guī)定定的校準(zhǔn)準(zhǔn)品當(dāng)使用SFDA未審批批的方法法時選擇合適適的（配配套的））標(biāo)準(zhǔn)品品/校準(zhǔn)準(zhǔn)品如有可能能，校準(zhǔn)準(zhǔn)品應(yīng)能能溯源到到參考方方法或參參考物質(zhì)質(zhì)校準(zhǔn)頻率率根據(jù)檢測測項目方法法和試劑的穩(wěn)穩(wěn)定性不同而定定每日校準(zhǔn)準(zhǔn)CO2ISE每周校準(zhǔn)準(zhǔn)試試劑劑不穩(wěn)定定的特殊殊項目每月校準(zhǔn)準(zhǔn)大大部部分生化化項目（（21天天左右））每兩月校校準(zhǔn)特特殊項目目所有項目目至少每每六個月月校準(zhǔn)一一次如有下列列情況發(fā)發(fā)生時，，必須進(jìn)行校準(zhǔn)準(zhǔn)改變試劑劑的種類，或者批號改變儀器或者者檢測系系統(tǒng)進(jìn)行行了一次次大的預(yù)預(yù)防性維護(hù)不或者更更換了重重要部件件質(zhì)控反映映出異常常的趨勢勢或偏移移，或者者超出了了實驗室室規(guī)定的的接受限限，采取取一般性性糾正措措施后，，不能識識別和糾糾正問題題時校準(zhǔn)方法法K因數(shù)法法（一點點線形法法）兩點線性性多點線性性（非線線性法））1、K因因數(shù)法（（一點法法）由空白液液的標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)（C1）和通過過公式計計算得出出的K因因數(shù)制成成的曲線線K因數(shù)法法測定C1（試試劑空白白）的吸吸光度時時，先輸輸入K值值再計算算濃度值值：CX=（AX—B）+C1分析項目目：適用用各種酶酶活性的的測定2、兩點點線性法法由空白液和含有一一定濃度度標(biāo)準(zhǔn)液液的標(biāo)準(zhǔn)（2）的兩點吸吸光度繪繪制的曲曲線此法適用用所有的分析方方法包括括1點法法、2點點速率法和速率率法分析項目目：TP、ALB、TC、TG、Urea、Crea等等3、非線線性法可以使用用3~6種濃度度標(biāo)準(zhǔn)物物，在選選定波長長測定出出各自的的吸光度度，利用用濃度和和吸光度度之間的的關(guān)系繪繪制成非非線性標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線線測定（C1—Cn標(biāo)準(zhǔn)液））的吸光光度B——An。儀器采采用Logit-Log進(jìn)行行擬合式式的計算算出曲線線各常數(shù)數(shù)分析項目目：常為免疫疫項目，，CRP、ASO、RF等全自動生生化分析析儀常見見交叉污污染的原原因？比色分析析：交叉污染染測試項目目A試劑針，，比色杯杯等試劑和樣樣品成分分殘留干擾下一一個測試試項目B交叉污染染的原因因①多項目目，多樣樣本處理理②處理能能力的提提高（高高速化））共有化①樣本針針②試劑劑針③比比色杯④④攪拌棒棒交叉污染染交叉污染染的原因因①不正確確的清洗洗方法或或清洗能能力下降降（日常維維護(hù)欠缺缺，儀器器老化））②生化