液相色譜維修保養(yǎng)課件

液相色譜儀的保養(yǎng)與維修

M.LUOM.LUO

一.儀器的保養(yǎng)

M.LUO1.整機保養(yǎng)（一）《短期停機》在完成一天工作以后，都要停機等第二天再繼續(xù)工作，則可按以下步驟停機。A）關(guān)閉二次儀表（記錄儀、積分儀或色譜工作站）。B）關(guān)閉檢測器電源（同時切斷柱箱溫度檢測器的電源）。C）停止恒流泵工作，然后切斷其電源。D）用二次蒸餾水沖洗進樣閥的進樣孔（在“LOAD”和“INJECT”兩個位置）。E）切斷實驗室工作電源，加滿盛液瓶中的流動相，待第二天使用。F）將儀器罩上防塵罩。M.LUO整機保養(yǎng)（二）D）用二次蒸餾水或去離子水輸入輸液泵，開啟泵，流量1mL/min~2mL/min，沖洗泵體、進樣閥、檢測器流通池數(shù)分鐘，在沖洗過程切換六通閥數(shù)次，使定量管得到清洗。E）拆除替代柱的導(dǎo)管、泵輸入端和出口的導(dǎo)管和流通池輸入、輸出口導(dǎo)管，分別用螺帽密封輸液泵出口和流通池輸入、輸出口。F）撥下總電源接線板的插頭，貯存好專用的流動相和樣品，用干布擦洗儀器，罩上防塵罩。G）檢測器存放地點應(yīng)干燥，必要時應(yīng)將其密封存放在干燥容器內(nèi)，以預(yù)防光學(xué)系統(tǒng)霉變。M.LUO《輸液泵是液相色譜儀的心臟部件，品質(zhì)再好的泵，若不注意日常保養(yǎng)，其損壞的幾率是極高的，將大大降低儀器的使用價值。》a)使用甲醇作流動相，請注意自身保護和環(huán)境保護，廢液注入空瓶內(nèi)，集中處理，不得倒入下水道內(nèi)。b)輸液泵使用前，先注意探漏檢查，視各密封點和泵體有否漏液。c)在無流動相通入的情況下，嚴禁啟動泵體電機，以免柱塞密封環(huán)磨損。d)測試泵流量性能時，用于收集液體的容器，應(yīng)選用小口瓶頸的容器，防止收集過程中，溶液蒸發(fā)，影響測量精度。2.輸液泵的保養(yǎng)M.LUOe)金屬泵體的輸液泵，應(yīng)盡量避免使用含有鹵離子（如KCL、NaCL、NH4CL）的流動相或能產(chǎn)生鹵離子的流動相，若必須使用此類流動相，建議使用泵體用非金屬材料制造的輸液泵。方則使用后，應(yīng)立即使用去離子水清洗泵體和整個色譜系統(tǒng)的管路。f)使用的流動相必須是HPLC級或分析純級，特別是配置的流動相，在使用前，必須過濾掉其中的顆粒狀雜質(zhì)和其他物質(zhì)（使用0.45μm的濾膜過濾）g)長期不使用輸液泵，應(yīng)在最后分析結(jié)束時，用注射器吸取去離子水通過專用的泵頭清洗孔清洗泵體和柱塞桿。以延長密封圈和寶石柱塞桿的壽命。h)輸液泵液路在維修或保養(yǎng)時，應(yīng)切斷儀器電源。非專業(yè)維修人員請不要打開機箱罩。輸液泵的保養(yǎng)M.LUO《可按下圖所示清洗單向閥和泵體》抽取閥體導(dǎo)管單向閥輸入端注射器酒精（乙醇）《或去離子水》清洗單向閥和閥體：M.LUO《清洗單向閥》單向閥不易損壞，但長期運行，會有污染物粘在閥芯中的寶石球和寶石座上，為此須拆開閥體，進行清洗。輸入端單向閥輸出端單向閥寶石座寶石球φ3mm寶石球Φ1.75mmM.LUO《輸液泵主要零部件的推薦保養(yǎng)周期》(2)

項目

推薦保養(yǎng)周期備注檢查沖洗管路的密封圈

貳年若沖洗柱塞桿時，有沖洗液泄漏，則需要更換密封圈。檢查管路過濾器半年長期使用造成過濾器堵塞，請用超聲波清洗器清洗檢查流動相儲液瓶中不銹鋼過濾頭貳年長期使用后，流動相中的微?？赡軙氯^濾頭，可用壓縮空氣反吹清洗或用超聲波清洗。檢查進出口單向閥壹年發(fā)現(xiàn)進出口單向閥污染造成壓力上不去或設(shè)置流量誤差過大時，應(yīng)用超聲波清洗器清洗閥芯M.LUO《過濾樣品的器具》注射器過濾膜（＜4.5μ）A.有機相－－有機溶劑B.無機相－－無機水溶液過濾器《測試樣品的處理》分析樣品（注射器內(nèi)）過濾器已過濾的樣品小燒杯若進樣量小于20微升，可使用50微升的微量平頭注射器（液相專用）。每次進樣保持20微升，可使用1毫升的注射器，但必須使用特殊的平頭注射針頭，每次注射量約0.05～0.1毫升，可一次吸取0.9～1毫升的分析樣品，多次進樣。（轉(zhuǎn)動進樣閥時，不必拔出注射器）

《專用注射器》1mL注射器特殊平頭針頭（閥附件）50微升微量平頭針頭注射器六通閥的清洗《當多次進樣，特別是注射過高濃樣品或黏度較大的樣品后，很容易污染閥體。因此當使用久后，必須進行清洗?！?/p>

可采用閥體專用的清洗接頭（見圖），按圖所示接在2ml~5ml的注射器上，吸取酒精溶液，然后從進樣口注射進去，余液從排液管導(dǎo)出，在“LOAD”和“INJECT”兩個位置各進行數(shù)次。

最后再用二次蒸餾水沖洗數(shù)次用干凈的壓縮空氣或氮氣吹凈進樣口及定量管、廢液管中的余液，待用。M.LUO

《清洗六通閥》當六通閥污染嚴重或通孔有異物進入而堵塞時，則必須將閥拆開，取出其中定子、定子組件、轉(zhuǎn)子密封圈，浸入酒精溶液中清洗，然后再用超聲波清洗器在二次蒸餾水浸洗中進行清洗，用干凈氣體沖洗各通孔后，烘干，重新組合裝配。注射器酒精六通閥進樣口清洗接頭對準緊壓閥體M.LUO液相色譜柱的保養(yǎng)重新安裝時，可稍稍削去柱管輸入端管口一薄層固定相（最好削后用同類固定相填補）然后裝上過濾片，擰緊柱接頭，封閉兩端螺口。固定柱管柱接頭卸柱接頭取出過濾片清洗過濾片、接頭除去污染層（柱頭）補充柱填料重新安裝柱接頭色譜柱常期不使用時，除了進行清洗處理外，還必須在其中充入該柱規(guī)定的貯藏液（甲醇、去離子水等）后再密封保存，重新啟用時，應(yīng)用流動相沖洗數(shù)分鐘后，再接入檢測器，以免貯藏液進入流通池。注：液相色譜柱的種類繁多，不同的分析對象，應(yīng)選用不同的分離柱、流動相和操作波長。在實際應(yīng)用中用戶可參閱專業(yè)液相色譜儀文獻和書籍中介紹的內(nèi)容結(jié)合本儀器的特點，選擇最佳的分析條件，以達到您的分析目的。液相色譜柱的保養(yǎng)

《陽離子分離柱（YSC系列）》無機物污染：

0.2M酒石酸鈉淋洗15min→去離子水淋洗10min→1NHNO3淋洗15min→正常淋洗液平衡15～20min→使用有機物污染：

10％乙睛＋90％0.2M酒石酸鈉淋洗15min→去離子水淋洗10min→1NHNO3淋洗15min→正常淋洗液平衡15～20min→使用保存：

0.3％H3BO3淋洗10min，然后密封保存。（用去離子水淋洗5min后方能使用）常用離子色譜柱的保養(yǎng)（供參考）3.4.2色譜柱保養(yǎng)5.液相檢測器的保養(yǎng)微小的顆粒雜質(zhì)或薄膜沉積在流通池里，會導(dǎo)致基線噪聲的增加或降低靈敏度。此時必須進行清洗處理。一般常規(guī)清洗不必拆下流通池，可直接在流通池入口處（即檢測器輸入端），接上一個專用的注射器接頭，依次用去離子水、酒精和3MHNO3沖洗流通池，最后用去離子水反復(fù)沖洗數(shù)次。檢測器出口用玻璃瓶盛接流出的廢液。若檢測器已長期使用或受到高濃度樣品的污染，經(jīng)上述方法還不能除去污垢，就得取下流通池，按以下步驟拆開進行清洗：3.4.2色譜柱保養(yǎng)液相檢測器的保養(yǎng)4）烘干各部件（注意：避免用手直接接觸透鏡及石英窗）。5）重新裝配流通池體。6)按原樣裝在流通池支架上，并接好導(dǎo)管，并進行試漏。（方法：池體輸入端與恒流泵連接，開啟恒流泵（流動相用蒸餾水），視各密封點及石英窗口是否有漏液溢出。7）裝入紫外檢測器機箱內(nèi)，蓋上蓋板，并用原螺釘、螺帽固定。注：上述拆洗應(yīng)有經(jīng)培訓(xùn)過的專業(yè)維修人員進行。

3.4.2色譜柱保養(yǎng)6.使用液相色譜儀應(yīng)注意的事項開啟輸液泵后，應(yīng)放空泵的輸出端，排除泵體內(nèi)的氣泡再與進樣閥、色譜柱相接，方能使流速穩(wěn)定。第一次使用的色譜柱或進樣過高濃度樣品的色譜柱，應(yīng)在設(shè)置流量下，將柱出口放空，老化數(shù)小時后，再與檢測器的流通池輸入端相連接。開啟柱箱溫度控制器后，應(yīng)注意色譜柱的最高使用溫度，防止過溫。檢測器開啟后，請勿帶電搬動位置，防止機內(nèi)氘燈損壞。流通池流出的廢液必須集中收集處理，防止污染環(huán)境。3.4.2色譜柱保養(yǎng)使用液相色譜儀應(yīng)注意的事項必須使用平頭專用注射針進入樣品，嚴禁使用普通針尖針頭進樣。若進樣量小于定量管的容量時,可使用微量平口注射器注入六通閥后(不要拔出注射器)，立即轉(zhuǎn)動六通閥，完成一次進樣。當信號電壓超過1V或滿量程信號超過量程范圍時，有可能出現(xiàn)“平頭峰”，其積分面積及保留時間會產(chǎn)生很大的誤差，此時應(yīng)稀釋樣品或擴大量程范圍后再進樣。

液相色譜儀結(jié)構(gòu)復(fù)雜，且不同型號的色譜儀，出故障時產(chǎn)生的現(xiàn)象有可能不同，以下羅列的現(xiàn)象僅供參考：現(xiàn)象原因排除方法輸液泵壓力指示為零(或＜0.5MPa)且柱后無液體流出。1.柱前導(dǎo)管接頭漏液2.泵柱室內(nèi)有大量氣泡存在3.貯液瓶內(nèi)試劑用完4.輸液泵未工作1.檢查各接口是否有漏液；2.放開泵出口接頭；用“清洗”鍵沖洗泵體；3.添加流動相；4.按輸液泵操作方法，檢查其工作狀態(tài)。

常見故障排除現(xiàn)象原因排除方法輸液泵壓力指示超過規(guī)定的范圍，且柱后無液體流出 1.分離柱阻力過大(陳舊柱子)2.柱前導(dǎo)管堵塞3.泵柱塞內(nèi)有少量氣泡存在4.柱子進口處過濾膜堵塞5.進樣閥手柄未旋到底(處于中間狀態(tài))6.導(dǎo)管中有顆粒狀固體堵塞1.更換柱子2.從柱后開始逐級向上拆開接頭檢查3.拆開泵接頭，用“清洗”檔趕盡氣泡。4.拆開柱前接頭、更換或清洗過濾膜5.左右旋動六通閥至極限位置6.逐級檢查，并更換導(dǎo)管

常見故障排除現(xiàn)象原因排除方法柱前壓力逐漸升高1.流動相中存在大顆粒的物質(zhì)2.樣品未經(jīng)過過濾處理3.柱子輸入端濾片污染1.流動相經(jīng)＜5μ的真空抽濾瓶過濾后再使用2.樣品須經(jīng)濾膜過濾3.拆下柱的濾片用超聲波清洗,同時刮去柱口表面被污染的固定相基線大幅度波動(即紫外檢測器的輸出電平值極不穩(wěn)定)1.流通池內(nèi)留有大量的氣泡2.流通池漏液3.紫外檢測器有故障

1.排除氣泡2.檢修流通池3.停止恒流泵工作，檢查紫外檢測器

常見故障排除現(xiàn)象原因排除方法組份峰極小或不出峰1.波長選擇不正確2.檢測器輸出衰減太大3.進樣口漏液4.進樣閥樣品廢液管堵塞，樣品未進入定量管

5.進樣后未按啟動鍵6.定量管容積過小7.樣品濃度過稀8.檢測器燈源老化或失效9.流動相不純1.按標準重新選擇波長2.重新選擇輸出量程范圍3.修理進樣閥4.拆下六通閥上廢液管(5#,6#)重新安裝5.進樣后立即按啟動鍵6.更換大容量定量管7.濃縮樣品后再進樣8.更換燈源9.選擇高純度的流動相

常見故障排除現(xiàn)象原因排除方法溫度指示波動＞±1℃1.設(shè)置溫度值過低2.柱箱密封蓋未蓋好3.溫度控制器未啟動4.柱箱升過高溫后，再設(shè)置低溫5.溫控部件有故障6.控溫鉑電阻接觸不良1.設(shè)置最低溫度應(yīng)室溫以上10℃2.檢查柱安裝過程3.按起始鍵(指示燈亮)4.開機后會逐漸穩(wěn)定(正?，F(xiàn)象)5.修理溫度控制器6擰緊固定鉑電阻引線的螺釘

常見故障排除現(xiàn)象原因排除方法檢測器開機時屏幕顯示不正常，出現(xiàn)缺字、坐標圖形異樣、光標無法移動等象。工作電源不正?；騼x器附件有強干擾源存在1.檢查工作電源電壓，采取穩(wěn)壓措施2.關(guān)機后重新開機3.檢測器微機系統(tǒng)故障常見圖譜分析

由于液相色譜儀在工作中受到的影響因素較多，因此出現(xiàn)的色譜圖形也較為復(fù)雜，除與操作者的使用和儀器所處的環(huán)境有關(guān)外，還與分離柱、流動相性質(zhì)、分析對象的性質(zhì)、所選擇的工作條件有關(guān)?，F(xiàn)僅對與儀器性能有關(guān)的常見圖譜作一粗略分析，供參考。

圖譜分析原因現(xiàn)象說明及排除1.環(huán)境溫度變化過大2.液流不穩(wěn)定或有漏液3.在技術(shù)指標范圍內(nèi) 1.避開室內(nèi)通風(fēng)口位置和發(fā)熱或制冷源2.觀察泵的工作狀態(tài),并查漏3.＜1×10-4Au

圖譜分析原因現(xiàn)象說明及排除1.外界干擾訊號2.輸液泵柱室內(nèi)有氣泡3.流通池內(nèi)有氣泡1.使機殼良好接地，排除附近干擾源2.用“清洗”鍵或排放閥排除氣泡3.拆下輸入導(dǎo)管，大流量沖洗池體或在池體出口增加阻力(接長排液導(dǎo)管) 漂移1.儀器在穩(wěn)定中2.在技術(shù)指標范圍內(nèi)3.柱箱升過高溫后，再處于室溫工作4.檢測器工作不穩(wěn)定1.正?，F(xiàn)象2.屬正常狀態(tài)3.將分離柱從柱箱內(nèi)取出后使用4.元器件工作點不穩(wěn)定，修理后再使用

圖譜分析原因現(xiàn)象說明及排除1.組份分離不佳

a.色譜柱選擇有誤

b.流動相不符合分析要求

c.柱后導(dǎo)管過長2.波長選擇不正確3.流速過大1.重疊峰

a.更換色譜柱

b.重新選擇流動相

c.盡可能減短柱后導(dǎo)管長度2.重選波長，增大組份的吸光度差異3.減小流量值1．流動相已用完2．溫度控制器失控(恒溫開啟條件下)3．在工作過程添加流動相 1.突然漂移大多為流動相用完造成2.檢查溫度控制器3.盡可能不要在工作時加流動相，可采用較大的貯液瓶

圖譜分析原因現(xiàn)象說明及排除1．放大器量程選擇過大2．放大器無輸出3．二次儀表或檢測器失效1.減小量程范圍(若接積分儀，可減小儀器的滿度電壓值)2.未按起始鍵3.更換失效的部件基線無噪聲出倒峰1.組份吸光度小于流動相的吸光度2.流動相在該波長的透過率＜100%3.輸出訊號極性接反1.屬正常情況2.選擇百分透過率為100%級別的液相專用流動相3.對換二次儀表訊號線的極性圖譜分析原因現(xiàn)象說明及排除1.進樣器污染2.流通池污染3.燈源老化4.檢測器放大器失調(diào)1.進樣多次或進過濃樣品后未清洗進樣閥造成2.清洗池體。多次進樣后未清洗池體或久日未使用后重新開機時易發(fā)生3.使用時間已大于1000小時4.重調(diào)放大器噪聲過大1）視“現(xiàn)象”分析故障原因，在工作過程中積累經(jīng)驗。2)正確操作和良好的保養(yǎng)

是減少儀器故障的關(guān)鍵。

內(nèi)容要點液相色譜儀的應(yīng)用實例

M.LUOM.LUO1.標樣“萘/甲醇”色譜圖譜萘2.分析檸檬汽水苯甲酸3.分析冷罐裝鮮果水A-K糖山梨酸4.分析飲料中添加劑A-K糖苯甲酸山梨酸糖精各種發(fā)色團吸收紫外線的波長功能團發(fā)色團波長（nm）醚(ETHER)－O－185烯烴(OLEFIS)－C=C－185硫醚(THIOETHER)－S－194,215胺(AMINE)－NH2195硫醇(THIOL)－SH195二硫化物(DISULFIDE)－S－S194,225嗅化物(BROMIDE)－Br208碘化物(IODIDE)－I260重氮基(AZIDO)C=N－190

酮(KETONE)C=O270－280各種發(fā)色團吸收紫外線的波長功能團發(fā)色團波長（nm）硫酮(THIOKETONE)C=S205酯(ESTERS)－COOR205醛(ALDEHYDE)－CHO280－300烊基(CARBOXYL)－COOH200－210亞硝酸鹽(NITRITE)－ONO220－230,300－40

草酸(OXALICACID)HOOC－COOH250偶氮基(AZO)－N=N－285－400

亞硝基(NITROSO)

－N=O302硝酸鹽(NITRATE)－OHO2270(左右)苯(BENAENE)202,255各種發(fā)色團吸收紫外線的波長功能團發(fā)色團波長（nm）二苯基(DIPHENL)246

萘(NAPHTHALENE)220,275,312蒽(ANTHRACENE)252,375吡啶(PYRIDINE)195,251喹啉(QUINOLINE)227,270,314異喹啉(ISOQUINOLINE)216,266,317常用液相色譜流動相的性質(zhì)溶劑吸收紫外線的波長(nm)丙酮330二氧雜環(huán)乙烷215乙腈190異丙醇205乙醇210甲醇205乙酸208烷乙磺酸(0.005M)230四丁基氫氧化銨(0.005M)215辛烷磺酸230四丙基氫氧化銨195離子色譜儀（液相色譜儀的一種特殊形式）

M.LUO<離子色譜儀概況介紹>

離子色譜儀屬于液相色譜儀的一種類型,它是上世紀七十年代創(chuàng)始的一種新的分離分析檢測技術(shù)。是當今世界最新技術(shù)開發(fā)和生命科學(xué)研究所必須的設(shè)備。離子色譜儀廣泛應(yīng)用于水利、電力、環(huán)境保護、生命科學(xué)等領(lǐng)域的ppb、ppt級超痕量分析，特別是溶液中的糖、酶化學(xué)的分析，成功地解決了高壓液相色譜儀在高溫條件時固定相分解而導(dǎo)致無法分析的弱點。M.LUO

離子色譜儀由輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等四個部份組成：輸液系統(tǒng)――由于離子色譜儀的流動相是具有酸性或堿性的水溶液，因此要求輸液泵的液路部份為耐腐蝕、耐高壓形變的高分子有機材料，目前通常用“聚醚醚酮”（PEEK）來加工（壓鑄）導(dǎo)管、泵體、接頭和密封墊圈，這是整個系統(tǒng)的關(guān)鍵組件，也是制造技術(shù)中的難點。M.LUO

M.LUO分離系統(tǒng)――高效分離柱和適合不同領(lǐng)域的色譜柱是離子色譜的關(guān)鍵部件。目前國內(nèi)無品牌商品，而國外已有40～50種以上的分離柱，國內(nèi)還處于空白點，也是目前技術(shù)攻關(guān)的目標之一。由于離子色譜儀常用檢測器是“電導(dǎo)檢測器”,因此與分離柱相配套的陰、陽離子微膜抑制器是儀器獨有的關(guān)鍵部件，其中抑制能力穩(wěn)定性和全自動再生系統(tǒng)是抑制器制造的一大難點。目前國內(nèi)僅有個別大專院校在實驗室少量生產(chǎn)，國內(nèi)用戶主要靠進口商品。檢測器――

常用的檢測器是

電導(dǎo)檢測器和紫外檢測器。

M.LUOJJG823－1993離子色譜儀國家技術(shù)監(jiān)督局（國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局）×××××－××××

離子色譜儀**************公司M.LUO執(zhí)行的質(zhì)量標準離子色譜儀主要技術(shù)指標JJG823－1993

M.LUO輸液路系統(tǒng)液流量設(shè)定值誤差0.5mL/min1.0mL/min2.0mL/min3.0mL/min系SS±5%±4%±3%±2%統(tǒng)流量穩(wěn)定性誤差

SR±3%±2%±2%±2%色譜柱設(shè)定值誤差ΔTS恒溫箱溫度穩(wěn)定性TC不超過±3℃（20℃、35℃）不超過±2℃（20℃、35℃）在5MPa液壓下無漏液基線穩(wěn)定性：基線噪聲：≤１.5％FS

基線漂移：不超過±3.0％FS離子色譜儀主要技術(shù)指標JJG823－1993

最小檢出濃度：線性范圍：

≥102

（SO4－－、Na＋、Ca＋＋）線性相關(guān)系數(shù)：

≥0.995（SO4－－、Na＋、Ca＋＋）重復(fù)性：（NO3－、

SO4－－、Na＋、Ca＋＋）定性重復(fù)性——≤1.5％定量重復(fù)性——≤5.0％

M.LUO檢測離子Cl－NO3－Na＋Ca＋＋濃度（μg/g）≤0.005

≤0.05≤0.05≤0.10離子色譜儀主要技術(shù)指標JJG823－1993

M.LUO分離能力：

對應(yīng)以下組分離子：

F－→CL－；NO3－→SO4－－；Mg＋＋→Ca＋＋；NH4＋→K＋

分離度（RS）≥1.2洗脫時間:

（F－、CL－、NO2－、PO43－、Br－、NO3－、SO42－）≤18min

（Li＋、Na＋、NH4＋、K＋）≤15min

(Ca＋＋、

Mg＋＋）≤12min主要關(guān)鍵部件

M.LUO1.微膜抑制器加壓自動再生（第三代產(chǎn)品）專利高容量自動連續(xù)再生微膜化學(xué)抑制器（第六代產(chǎn)品）微膜抑制器的工作原理

廢液

Na2SO4

再生液(H2SO4)

H+

Na+微膜

Na+OH-H2O洗脫劑(NaOH)OH-Na+Na+OH-H2O

樣品(NaF,Na+OH-H+OH-HF,HCLNaCL,Na2SO4)H2OH2SO4

微膜

Na+

H+廢液

Na2SO4

再生液(H2SO4)

M.LUO微膜抑制器的功能洗脫劑(NaOH)F-,Cl-,SO42-本底電導(dǎo)(μs)F-CL-SO4

2-

分離柱(NaF,NaCL

(不使用抑制器)Na2SO4Na2SO4,NaOH)時間

抑

制

本底電導(dǎo)(μs)

器

高電導(dǎo)

F-

CL-SO