臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)課件第26章腫瘤免疫及其免疫檢測(cè)

第二十五章

腫瘤免疫及免疫檢驗(yàn)

第二十五章腫瘤免疫及免疫檢驗(yàn)思考題

小結(jié)

第一節(jié)

腫瘤抗原分類(lèi)

一、根據(jù)腫瘤抗原的特異性分類(lèi)

二、根據(jù)腫瘤抗原產(chǎn)生機(jī)制分類(lèi)

第二節(jié)

機(jī)體抗腫瘤免疫效應(yīng)機(jī)制

第三節(jié)

常見(jiàn)惡性腫瘤疾病與相關(guān)腫瘤標(biāo)志物

一、腫瘤標(biāo)志物概述

二、腫瘤標(biāo)志物的分類(lèi)

三、常見(jiàn)惡性腫瘤與

相關(guān)腫瘤標(biāo)志物

第四節(jié)

腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)與臨床應(yīng)用

第五節(jié)

腫瘤患者免疫功能檢測(cè)與臨床應(yīng)用

思考題小結(jié)第一節(jié)腫瘤抗原分類(lèi)一、根據(jù)腫瘤抗原概述

?腫瘤的流行與危害

?流行：腫瘤死亡率高（180.5/10萬(wàn)）、每年癌癥死亡270萬(wàn)，我國(guó)癌癥死亡率為13%，即每7-8人就有1人死于癌癥

?五大癌癥：肺癌（居首）、肝癌、胃癌、食管癌和結(jié)直腸癌。

?癌癥地域分布明顯：食管癌（河南、河北中原地區(qū)）、肝癌（東南沿海），且男多于女（1.68:1）

概述?腫瘤的流行與危害?流行：腫瘤死亡率高（180.5/?腫瘤的診斷

?三早原則（早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療）

?影像學(xué)檢查（X射線、B超、CT、MRI、超聲波），

?病理活檢（內(nèi)窺鏡，胃癌），準(zhǔn)確性高

?腫瘤標(biāo)志物：肝癌（AFP）、結(jié)腸癌（CEA)?腫瘤標(biāo)志物的目的

?腫瘤早期篩查、輔助診斷、病情監(jiān)測(cè)和判斷預(yù)后、轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)有效手段

?腫瘤的診斷?三早原則（早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療）?影像學(xué)腫瘤免疫學(xué)（tumorimmunology）是研究腫瘤抗原性質(zhì)、機(jī)體對(duì)腫瘤的免疫應(yīng)答、機(jī)體免疫功能與腫瘤發(fā)生發(fā)展的相互關(guān)系以及腫瘤的免疫診斷和免疫防治的科學(xué)。

腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)是通過(guò)免疫學(xué)方法進(jìn)行腫瘤的輔助診斷、療效觀察和復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)以及對(duì)患者免疫功能狀態(tài)的評(píng)估。在腫瘤診治的各種方法和手段中，腫瘤標(biāo)志物（tumormarker,TM）檢測(cè)是通過(guò)實(shí)驗(yàn)室方法發(fā)現(xiàn)腫瘤異常存在的一種手段。

腫瘤免疫學(xué)（tumorimmunology）是研究腫瘤抗原第一節(jié)

腫瘤抗原分類(lèi)

?

腫瘤抗原（tumorantigen）

?定義：是指在細(xì)胞在癌變過(guò)程中新出現(xiàn)或異常表達(dá)的抗原物質(zhì)。如新出現(xiàn)的如神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE,小細(xì)胞肺癌)，異常表達(dá)的如甲胎蛋白AFP(肝癌）

?意義

?腫瘤發(fā)生發(fā)展和機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答發(fā)揮作用

?腫瘤免疫診斷和防治的分子基礎(chǔ)

第一節(jié)腫瘤抗原分類(lèi)?腫瘤抗原（tumorantig1．腫瘤特異性抗原（tumorspecificantigen,TSA）

?它只表達(dá)于腫瘤細(xì)胞，而不存在于正常組織細(xì)胞。

?曾稱：腫瘤特異移植性抗原或腫瘤排斥抗原

?存在：不同個(gè)體的同一組織類(lèi)型。如黑色素瘤相關(guān)排斥抗原（MARA),在正常黑色素細(xì)胞不存在，但存在不同個(gè)體的黑色瘤細(xì)胞

一、根據(jù)腫瘤抗原的特異性分類(lèi)

1．腫瘤特異性抗原（tumorspecificantig2．腫瘤相關(guān)性抗原(tumorassociatedantigen,TAA)

?是指非腫瘤細(xì)胞所特有的，正常組織或細(xì)胞也可表達(dá)的抗原物質(zhì)

?此類(lèi)抗原在癌變細(xì)胞的表達(dá)水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)正常細(xì)胞。

?TAA表現(xiàn)為量的變化，而無(wú)腫瘤特異性，如胚胎抗原（AFP、CEA)、分化抗原和過(guò)度表達(dá)的癌基因產(chǎn)物

2．腫瘤相關(guān)性抗原(tumorassociated1．理化因素誘發(fā)的腫瘤抗原

?它只表達(dá)于腫瘤細(xì)胞，而不存在于正常組織細(xì)胞。

?化學(xué)致癌劑(甲基膽蒽誘發(fā)肉瘤、偶氮染料和二乙基硝酸）、物理致癌（紫外線、X射線）

?特點(diǎn)：特異性強(qiáng)但免疫原性弱，具有高度異質(zhì)性。即不同個(gè)體甚至同一個(gè)體，其特異性和免疫原性均不相同，很難診斷和檢測(cè)此類(lèi)抗原。

二、根據(jù)腫瘤抗原產(chǎn)生機(jī)制分類(lèi)

1．理化因素誘發(fā)的腫瘤抗原?它只表達(dá)于腫瘤細(xì)胞，而不存在于2．病毒誘發(fā)的腫瘤抗原

?DNA或RNA病毒誘發(fā)：病毒DNA整合到宿主染色體上，誘發(fā)細(xì)胞惡變。

?特點(diǎn)：具有病毒特異性，及較強(qiáng)的免疫原性，無(wú)種系、個(gè)體和器官特異性。

?人原發(fā)性肝癌（HBV、HCV)、人宮頸癌（HPV、HSV)、人鼻咽癌（EB）、人T細(xì)胞白血病（人類(lèi)嗜T細(xì)胞白血病病毒，HTLV-1)

2．病毒誘發(fā)的腫瘤抗原?DNA或RNA病毒誘發(fā)：病毒DNA3．自發(fā)性腫瘤抗原

?機(jī)制尚未闡明，人類(lèi)大部分屬于此類(lèi)。

?抗原大多為基因突變產(chǎn)物：如癌基因（ras)、抑癌基因(p53)、及突變產(chǎn)物(bcl-abl)?一些抗原類(lèi)似自發(fā)腫瘤抗原，有獨(dú)特的抗原性；一些類(lèi)似病毒抗原，具有共同特性。

3．自發(fā)性腫瘤抗原?機(jī)制尚未闡明，人類(lèi)大部分屬于此類(lèi)。?4．正常細(xì)胞成分的異常表達(dá)

①分化抗原：是組織細(xì)胞在分化、發(fā)育的不同階段表達(dá)或消失的正常分子。腫瘤細(xì)胞可停滯到某個(gè)細(xì)胞的幼稚階段，可表達(dá)該類(lèi)型的分化抗原，可作為腫瘤起源的診斷性標(biāo)志。如B細(xì)胞惡性淋巴瘤，若檢測(cè)到CD10(B細(xì)胞特征性標(biāo)志），可診斷B細(xì)胞惡性淋巴瘤。

4．正常細(xì)胞成分的異常表達(dá)①分化抗原：是組織細(xì)胞在分化、發(fā)②胚胎抗原：是胚胎組織成分產(chǎn)生的正常成分，出生后逐漸消失或微量表達(dá)。而腫瘤細(xì)胞該抗原異常表達(dá)，可作為腫瘤診斷的重要依據(jù)。如AFP和癌胚抗原（CEA),抗原性弱。

②胚胎抗原：是胚胎組織成分產(chǎn)生的正常成分，出生后逐漸消失或微③過(guò)度表達(dá)抗原:細(xì)胞癌變后多種信號(hào)分子過(guò)度表達(dá)，具有抗凋亡作用，使腫瘤細(xì)胞長(zhǎng)期存活，如ras，c-myc等基因產(chǎn)物。

④細(xì)胞突變產(chǎn)生的獨(dú)特型抗原：某些腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)TCR和BCR，如可作為診斷標(biāo)志物。如T和B細(xì)胞白血病細(xì)胞表達(dá)獨(dú)特型TCR和BCR。

③過(guò)度表達(dá)抗原:細(xì)胞癌變后多種信號(hào)分子過(guò)度表達(dá)，具有抗凋亡作

第二節(jié)

機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)機(jī)制

?腫瘤的發(fā)生與機(jī)體的免疫功能密切相關(guān)，免疫系

統(tǒng)能識(shí)別并及時(shí)清除突變細(xì)胞，防止其形成腫瘤。

?機(jī)體抗腫瘤的效應(yīng)機(jī)制包括細(xì)胞免疫和體液免

疫，細(xì)胞免疫是主力，體液免疫起協(xié)同作用。

?對(duì)免疫原性強(qiáng)的腫瘤，特異性免疫應(yīng)答是主要的，而免疫原性弱的腫瘤，非特異性免疫應(yīng)答發(fā)揮重要意義

第二節(jié)機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)機(jī)制?腫瘤的發(fā)生與一、抗腫瘤的細(xì)胞免疫機(jī)制

（一）T細(xì)胞

?

CD8+T細(xì)胞：主要的效應(yīng)細(xì)胞，其一通過(guò)識(shí)別腫瘤上抗原，通過(guò)溶細(xì)胞作用直接殺傷靶細(xì)胞；其二分泌多種細(xì)胞因子，間接殺傷腫瘤細(xì)胞

?CD4+T細(xì)胞：釋放細(xì)胞因子(IFN-γ、IL-2)激活NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞，并增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞的殺傷功能。

?γδ+T細(xì)胞：類(lèi)似CTL,可直接殺傷靶細(xì)胞，但不受MHC限制。

一、抗腫瘤的細(xì)胞免疫機(jī)制（一）T細(xì)胞?CD8+T細(xì)胞（二）NK細(xì)胞

?

廣譜殺傷腫瘤的效應(yīng)細(xì)胞，早期發(fā)揮重要作用，是清除腫瘤的第一道防線。

?無(wú)腫瘤特異性和MHC限制性

（三）

巨噬細(xì)胞

1.將腫瘤抗原信號(hào)提呈給T細(xì)胞，并促進(jìn)其激活，誘導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答

2.釋放溶酶體酶直接殺傷腫瘤細(xì)胞

3.ADCC4.分泌TNF、NO等毒性分子間接殺傷腫瘤細(xì)胞。

（二）NK細(xì)胞?廣譜殺傷腫瘤的效應(yīng)細(xì)胞，早期發(fā)揮重要作（四）

樹(shù)突狀細(xì)胞

?

參與腫瘤抗原的提呈

?參與激發(fā)針對(duì)腫瘤的初次和再次T細(xì)胞應(yīng)答的功能

（四）樹(shù)突狀細(xì)胞?參與腫瘤抗原的提呈?參與激發(fā)針對(duì)腫二、抗腫瘤的體液免疫機(jī)制

（一）

提呈腫瘤抗原

?

B細(xì)胞：以BCR撲捉腫瘤的可溶性抗原，加工處理后提呈給CD4+T細(xì)胞對(duì)腫瘤的免疫應(yīng)答

二、抗腫瘤的體液免疫機(jī)制（一）提呈腫瘤抗原?B細(xì)胞：（二）

分泌抗體介導(dǎo)腫瘤殺傷效應(yīng)

1.補(bǔ)體的溶細(xì)胞效應(yīng)

（CDC):僅殺傷單個(gè)腫瘤細(xì)胞

2.抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒效應(yīng)

（ADCC)3.抗體的免疫調(diào)理作用:吞噬細(xì)胞有Fc受體,早期

4.抗體封閉腫瘤細(xì)胞表面某些受體:轉(zhuǎn)鐵蛋白可促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)，而其抗體可抑制腫瘤的生長(zhǎng)

5.抗體干擾腫瘤細(xì)胞粘附作用

：限制腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移

（二）分泌抗體介導(dǎo)腫瘤殺傷效應(yīng)1.補(bǔ)體的溶細(xì)胞效應(yīng)（C第三節(jié)

常見(jiàn)惡性腫瘤疾病與相關(guān)腫瘤標(biāo)志物

一

腫瘤標(biāo)志物概述

?是指在腫瘤的發(fā)生和增殖過(guò)程中，由腫瘤細(xì)胞生物合成、釋放或是機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類(lèi)物質(zhì)。包括蛋白質(zhì)、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基因產(chǎn)物等。

第三節(jié)常見(jiàn)惡性腫瘤疾病與相關(guān)腫瘤標(biāo)志物一腫瘤標(biāo)志物概腫瘤標(biāo)志物的發(fā)展

腫瘤標(biāo)志物的發(fā)展?理想標(biāo)志物條件：

①敏感性高，有助早期發(fā)現(xiàn)和診斷腫瘤

②特異性強(qiáng)，僅腫瘤患者陽(yáng)性，能鑒別良、惡性腫瘤

③腫瘤標(biāo)志物濃度和腫瘤轉(zhuǎn)移、惡性程度有關(guān)，能協(xié)助腫瘤分期和預(yù)后判斷。

④腫瘤標(biāo)志物的濃度和腫瘤大小有關(guān)，半衰期短，有效治療后很快下降，較快反映體內(nèi)腫瘤的實(shí)際情況

⑤存在于體液特別是血液中，易于檢測(cè)

⑥與預(yù)后有關(guān)，具有可靠的預(yù)測(cè)價(jià)值

?理想標(biāo)志物條件：①敏感性高，有助早期發(fā)現(xiàn)和診斷腫瘤②特二

、腫瘤標(biāo)志物分類(lèi)

體液腫瘤標(biāo)志物的分類(lèi)和命名尚未完全統(tǒng)一，一般分為：

⑴

胚胎抗原類(lèi)：如AFP，CEA等，

⑵

糖蛋白抗原類(lèi)：如CA125，CA15-3，CA19-9等。

⑶

激素類(lèi)：如患甲狀腺髓樣癌時(shí)降鈣素升高，患絨毛膜細(xì)胞癌時(shí)HCG明顯升高。

⑷

酶和同工酶類(lèi):肝癌時(shí)谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）升高，前列腺癌PSA(前列腺特異抗原）升高等。

⑸

蛋白質(zhì)類(lèi)：β2微球蛋白，鐵蛋白升高，而多發(fā)骨髓瘤本周蛋白陽(yáng)性，

⑹

癌基因產(chǎn)物類(lèi)：如ras基因蛋白，myc基因蛋白，p53抑癌基因蛋白等。

二、腫瘤標(biāo)志物分類(lèi)體液腫瘤標(biāo)志物的分類(lèi)和命名尚未完全統(tǒng)一三、常見(jiàn)惡性腫瘤與相關(guān)腫瘤標(biāo)志物

（一）肺癌

死亡率最高腫瘤，分為鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、大細(xì)胞癌和小細(xì)

胞癌四類(lèi)。

1.神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）

NSE是烯醇化酶的一種同功酶，而烯醇化酶同功酶根據(jù)α，

β，γ三個(gè)亞基的不同，可分為αα、ββ、γγ、αβ和αγ五種二聚

體同功酶。γγ亞基組成的同功酶屬神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞

特有，故命名為神經(jīng)元特異性烯醇化酶。NSE是一種酸性蛋

白酶，參與糖酵解。腫癌組織糖酵解作用加強(qiáng)，細(xì)胞增殖周

期加快，細(xì)胞內(nèi)的NSE釋放進(jìn)入血液增多，導(dǎo)致此酶在血清

內(nèi)含量增高。

NSE用于小細(xì)胞肺癌鑒別診斷（陽(yáng)性率65%~100%）

三、常見(jiàn)惡性腫瘤與相關(guān)腫瘤標(biāo)志物（一）肺癌死亡率最高腫瘤

2.胃泌素釋放肽前體（ProGRP)?主要表達(dá)于胃腸道、呼吸道和中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在血清中穩(wěn)定，健康人血清ProGRP＜50pg/ml?ProGRP用于小細(xì)胞肺癌的診斷、療效監(jiān)測(cè)和預(yù)后判斷，敏感性47~86%，特異性100%。

3.CYFRA21-1：

?廣泛分布正常組織如支氣管上皮細(xì)胞等，腫瘤發(fā)生時(shí)因細(xì)胞溶解被破壞而釋放如血。

?對(duì)非小細(xì)胞癌的診斷：如鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、大細(xì)胞癌,陽(yáng)性率分別為67%，46%、67%。

?判斷預(yù)后：血清水平跟腫瘤惡性程度一致。

2.胃泌素釋放肽前體（ProGRP)?主要表達(dá)于胃腸道、(二）肝癌

1.甲胎蛋白（AFP)?AFP是胎兒發(fā)育早期合成的一種糖蛋白(α1球蛋白)，分子量70kD，胎兒出生后不久即逐漸消失。參考值：血清AFP<20μg/L，臨床唯一推薦的腫瘤標(biāo)志物

?應(yīng)用

①

對(duì)高危人群進(jìn)行肝癌的篩查：乙肝和丙肝肝硬化患者，但一般在300μg/L以下，而原發(fā)性肝癌，77%的患者AFP>300μg/L，但有部分患者AFP始終不升高

②生殖系統(tǒng)腫瘤和胚胎性腫瘤，如睪丸癌、畸胎瘤等升高

③肝癌的預(yù)后判斷

(二）肝癌1.甲胎蛋白（AFP)?AFP是胎兒發(fā)育早期合

2.去飽和-γ-羧基-凝血酶原（DCP)?缺乏凝血活性的異常凝血酶原，主要應(yīng)用美國(guó)、日本，臨界值84AU/L,對(duì)肝癌診斷的敏感性和特異性分別為87%，85%。

?DCP用于預(yù)后判斷：鑒別肝硬化和肝細(xì)胞癌的敏感性和特異性高于AFP(90%,91%)3.磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（Glypican-3，GPC-3）

?正常人群和肝炎患者不表達(dá)，而75%的肝細(xì)胞癌患者陽(yáng)性

2.去飽和-γ-羧基-凝血酶原（DCP)?缺乏凝血活性的(三）胃癌

CA72-4和CA19-9檢測(cè)敏感性低，不能用于胃癌的早期篩查，而

胃蛋白酶酶原可作為早期診斷的較好指標(biāo)

1.CA72-4?1989年首次報(bào)道，健康人血清濃度<6kU/L?敏感性不高，早期低于35%?是疾病分期和判斷癌癥患者是否由殘余腫瘤的良好指標(biāo)，

2.CA19-9?胃腸癌相關(guān)抗原，與胰腺癌、膽囊癌、胃癌相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物，抗原類(lèi)似CEA?胚胎期存在此抗原，健康人血清濃度<37kU/L,?敏感性不高，早期低于35%(三）胃癌CA72-4和CA19-9檢測(cè)敏感性低，不能用于3.胃蛋白酶酶原（PG)?PG是胃粘膜分泌的胃蛋白酶前體,分兩個(gè)亞群，胃底腺主細(xì)胞分泌的PGⅠ和胃底腺、賁門(mén)腺、幽門(mén)腺等分泌的PGⅡ

?胃癌患者PGⅠ含量及PGⅠ

/PGⅡ比值均明顯降低，作為胃癌輔助診斷指標(biāo)。敏感性和特異性分別為77%和73%。

3.胃蛋白酶酶原（PG)?PG是胃粘膜分泌的胃蛋白酶前體,(四）結(jié)直腸癌

腸癌根治術(shù)后，約40~50%患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，而CEA對(duì)復(fù)

發(fā)監(jiān)測(cè)和療效評(píng)價(jià)有一定作用。

1.CEA?1965年CEA發(fā)現(xiàn)于成人結(jié)腸癌組織中，分子量約為200kD，可溶性糖蛋白，主要存在于成人癌組織以及胎兒的胃腸管組織中，故名癌胚抗原，是一種廣譜腫瘤標(biāo)志物。

參考值：血清CEA<5.0μg/L

(四）結(jié)直腸癌腸癌根治術(shù)后，約40~50%患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)和臨床意義：

①

結(jié)腸癌、直腸癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，轉(zhuǎn)移性

惡性腫瘤也有不同程度的陽(yáng)性率；

②

早期無(wú)癥狀人群中檢出率低，不用于結(jié)腸癌的篩查，可用

于腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的監(jiān)測(cè)。

③

吸煙者中約有33%的人CEA＞5μg/L。

2.CA242?是胰腺癌和直腸癌的標(biāo)志物，68%胰腺癌患者、55%-85%的直腸癌患者、44%胃癌患者，CA242升高。

?可作為患者治療監(jiān)測(cè)CEA的補(bǔ)充

臨床意義：①結(jié)腸癌、直腸癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，(五）前列腺癌

血清PSA+直腸指診用于癌癥的普查

PSA是一種由前列腺上皮細(xì)胞分泌的蛋白酶。在血清中PSA以兩種生化形式存在：一部分(5%～40%)是以低分子量(33kD)的

游離PSA（f-PSA）形式存在；大部分(60%～90%)是以PSA和α1–抗糜蛋白酶、

α2-巨球蛋白等結(jié)合的形式存在，

稱復(fù)合PSA(c-PSA)。總PSA（t-PSA）,包括血清中f-PSA和c-PSA。

參考值：血清t-PSA<4.0μg/L，

f-PSA<0.8μg/L，

f-PSA/t-PSA>25％

(五）前列腺癌血清PSA+直腸指診用于癌癥的普查(六）乳腺癌

腫瘤標(biāo)志物在早期診斷陽(yáng)性率低（15~35%），主要用于監(jiān)測(cè)乳腺癌術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。

1.CA15-3：

?CA15-3是一種乳腺癌相關(guān)抗原，屬糖蛋白，分子量300~500kD，與CA15-3同類(lèi)的多態(tài)性上皮粘蛋白抗原還有CA549,CA27-29等。參考值：血清CA15-3<28kU/L。

?不宜作為早期篩查指標(biāo)，但可用于轉(zhuǎn)移性乳腺癌的首選指標(biāo)

2.乳腺癌易感基因：BRCA1和BRCA2，對(duì)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、早期診斷和及時(shí)治療有意義

3.個(gè)體化靶標(biāo)：ER(雌激素受體）和PR（孕激素受體）：ER陽(yáng)性患者，他莫昔芬治療1、2和5年，腫瘤復(fù)發(fā)率降低21%、28%和50%。PR類(lèi)似。

(六）乳腺癌腫瘤標(biāo)志物在早期診斷陽(yáng)性率低（15~35%），常用腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)項(xiàng)目

第四節(jié)

腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)與臨床應(yīng)用

常用腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)項(xiàng)目第四節(jié)腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)與臨床應(yīng)用一、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的影響因素

（一）分析前影響因素

1.標(biāo)本采集和保存的影響：

?血清標(biāo)本常用，若收集腫瘤組織附近的分泌液，可提高檢查的靈敏度，如乳汁測(cè)定CA15-3和CEA,?前列腺按摩、刺激等提高血液中PSA,應(yīng)盡量避免

?血液標(biāo)本離心后4℃保存，長(zhǎng)期-70℃保存

2.某些藥物濃度的影響

?抗雄激素治療前列腺癌可抑制PSA產(chǎn)生

3.自身狀況的影響：肝功能異常、膽道排泄不暢可造成CEA、ALP等升高

4.生物學(xué)因素的影響：PSE隨年齡增長(zhǎng)而升高。

一、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的影響因素（一）分析前影響因素1.標(biāo)本（二）分析中影響因素

1.測(cè)定方法和試劑的影響：手工方法誤差大，自動(dòng)化儀器重復(fù)性好，盡量使用同一方法、同一儀器和同一廠家試劑盒

2.鉤狀效應(yīng)的影響：ELISA,若抗原濃度過(guò)高，會(huì)出現(xiàn)高濃度后帶現(xiàn)象，此時(shí)免疫反應(yīng)明顯抑制，測(cè)定結(jié)果偏低。應(yīng)對(duì)樣品稀釋后再測(cè)。

3.交叉污染的影響：高濃度標(biāo)本測(cè)后出現(xiàn)，結(jié)果偏高

4.嗜異性抗體的影響：以前使用鼠單克隆抗體治療后，在體內(nèi)產(chǎn)生人抗鼠單克隆抗體，則與兩種單克隆抗體橋連，即使無(wú)抗原存在，也出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果

（三）分析后的影響因素

1.參考區(qū)間

2.結(jié)果報(bào)告與解釋

（二）分析中影響因素1.測(cè)定方法和試劑的影響：手工方法誤差二、腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用

1.腫瘤的輔助診斷：不能代替影像學(xué)和病理學(xué)檢查，只能作為輔助診斷指標(biāo)：如：CA125與陰道超聲聯(lián)合可作為高危女性卵巢癌早期診斷指標(biāo)

2.腫瘤的鑒別診斷和臨床分期：幫助區(qū)分良、惡性腫瘤和腫瘤類(lèi)型：如CEA和NSE可輔助區(qū)分胃腸道腫瘤病理類(lèi)型。

3.腫瘤的復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)和預(yù)后判斷：動(dòng)態(tài)測(cè)定血清腫瘤標(biāo)志物是監(jiān)測(cè)病情的重要指標(biāo)：如CEA被推薦作為結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移、乳腺癌骨和肺轉(zhuǎn)移的監(jiān)測(cè)指標(biāo)。

4.腫瘤的療效監(jiān)測(cè)：成功治療，腫瘤標(biāo)志物即明顯下降，下降至正常，則治療成功；若未明顯下降，說(shuō)明手術(shù)未能成功切除腫瘤。

5.腫瘤的個(gè)體化醫(yī)療

6.腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢查

二、腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用1.腫瘤的輔助診斷：不能代替影像學(xué)常用腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的臨床應(yīng)用

腫瘤

首選標(biāo)志物

補(bǔ)充標(biāo)志物

肺癌

NSE、CYFRA21-1CEA、TPA、SCC、ACTH、降鈣素

肝癌

AFPAFU、γGT、CEA、ALP乳腺癌CA15-3、CA549CEA、hCG、降鈣素、鐵蛋白

胃癌CA72-4CEA、CA19-9、CA50前列腺癌PSAf-PSA、c-PSA、PAP結(jié)腸直腸癌CEACA19-9、CA50胰腺癌CA19-9CA50、CEA、CA125卵巢癌CA125CEA、hCG、CA72-4睪丸腫瘤AFP、hCG宮頸癌SCCCEA、CA125、TPA膀胱癌

無(wú)TPA、CEA骨髓瘤

β2-M、本周蛋白

常用腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的臨床應(yīng)用腫瘤首選

腫瘤的發(fā)生與機(jī)體的免疫功能狀態(tài)，尤其是細(xì)胞免疫狀態(tài)密切相關(guān)。腫瘤患者的免疫功能測(cè)定對(duì)了解病情、評(píng)價(jià)療效、判斷腫瘤的發(fā)展及預(yù)后有重要價(jià)值。

判斷機(jī)體免疫功能狀態(tài)的常用指標(biāo)，包括T細(xì)胞及其亞群測(cè)定，T細(xì)胞增殖試驗(yàn)，巨噬細(xì)胞功能測(cè)定，NK細(xì)胞活性測(cè)定，T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(LMC)測(cè)定以及血清中抗體、補(bǔ)體、某些細(xì)胞因子，如IL-2、TNF、IFN等測(cè)定

第五節(jié)、

腫瘤患者免疫功能狀態(tài)的檢測(cè)及臨床意義

腫瘤的發(fā)生與機(jī)體的免疫功能狀態(tài)，尤其是細(xì)胞免疫狀態(tài)密切相?腫瘤抗原是指在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中新出現(xiàn)的或過(guò)度表達(dá)的抗原物質(zhì)。

?機(jī)體的抗腫瘤免疫學(xué)機(jī)制十分復(fù)雜，包括體液免疫機(jī)制和細(xì)胞免疫機(jī)制，其中細(xì)胞免疫發(fā)揮主要作用。

?腫瘤標(biāo)志物是腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)的重要組成部分

，在腫瘤的輔助診斷、療效觀察和復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)等方面有重要價(jià)值。

?單一腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的靈敏度較低，選擇一些敏感性好，特異性較高，可以互補(bǔ)的腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合測(cè)定，可提高腫瘤的檢出率。

?腫瘤標(biāo)志物測(cè)定方法很多，有放射免疫測(cè)定法，酶聯(lián)免疫測(cè)定法，化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法等。

小

結(jié)

?腫瘤抗原是指在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中新出現(xiàn)的或過(guò)度表達(dá)的抗原1.什么叫腫瘤免疫和腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)？

2.腫瘤抗原的定義和腫瘤抗原的分類(lèi)。

3.腫瘤特異性抗原和腫瘤相關(guān)性抗原。

4.機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)機(jī)制。

5.腫瘤標(biāo)志物的定義與分類(lèi)。

6.腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用。

7.常見(jiàn)的腫瘤標(biāo)志物的臨床意義和評(píng)價(jià)。

8.腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的聯(lián)合應(yīng)用原則和評(píng)價(jià)。

9.腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的影響因素和注意事項(xiàng)。

10.腫瘤患者免疫功能狀態(tài)的檢測(cè)包括哪些內(nèi)容？

思考題

1.什么叫腫瘤免疫和腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)？2.腫瘤抗原的定義和腫第二十五章

腫瘤免疫及免疫檢驗(yàn)

第二十五章腫瘤免疫及免疫檢驗(yàn)思考題

小結(jié)

第一節(jié)

腫瘤抗原分類(lèi)

一、根據(jù)腫瘤抗原的特異性分類(lèi)

二、根據(jù)腫瘤抗原產(chǎn)生機(jī)制分類(lèi)

第二節(jié)

機(jī)體抗腫瘤免疫效應(yīng)機(jī)制

第三節(jié)

常見(jiàn)惡性腫瘤疾病與相關(guān)腫瘤標(biāo)志物

一、腫瘤標(biāo)志物概述

二、腫瘤標(biāo)志物的分類(lèi)

三、常見(jiàn)惡性腫瘤與

相關(guān)腫瘤標(biāo)志物

第四節(jié)

腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)與臨床應(yīng)用

第五節(jié)

腫瘤患者免疫功能檢測(cè)與臨床應(yīng)用

思考題小結(jié)第一節(jié)腫瘤抗原分類(lèi)一、根據(jù)腫瘤抗原概述

?腫瘤的流行與危害

?流行：腫瘤死亡率高（180.5/10萬(wàn)）、每年癌癥死亡270萬(wàn)，我國(guó)癌癥死亡率為13%，即每7-8人就有1人死于癌癥

?五大癌癥：肺癌（居首）、肝癌、胃癌、食管癌和結(jié)直腸癌。

?癌癥地域分布明顯：食管癌（河南、河北中原地區(qū)）、肝癌（東南沿海），且男多于女（1.68:1）

概述?腫瘤的流行與危害?流行：腫瘤死亡率高（180.5/?腫瘤的診斷

?三早原則（早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療）

?影像學(xué)檢查（X射線、B超、CT、MRI、超聲波），

?病理活檢（內(nèi)窺鏡，胃癌），準(zhǔn)確性高

?腫瘤標(biāo)志物：肝癌（AFP）、結(jié)腸癌（CEA)?腫瘤標(biāo)志物的目的

?腫瘤早期篩查、輔助診斷、病情監(jiān)測(cè)和判斷預(yù)后、轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)有效手段

?腫瘤的診斷?三早原則（早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療）?影像學(xué)腫瘤免疫學(xué)（tumorimmunology）是研究腫瘤抗原性質(zhì)、機(jī)體對(duì)腫瘤的免疫應(yīng)答、機(jī)體免疫功能與腫瘤發(fā)生發(fā)展的相互關(guān)系以及腫瘤的免疫診斷和免疫防治的科學(xué)。

腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)是通過(guò)免疫學(xué)方法進(jìn)行腫瘤的輔助診斷、療效觀察和復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)以及對(duì)患者免疫功能狀態(tài)的評(píng)估。在腫瘤診治的各種方法和手段中，腫瘤標(biāo)志物（tumormarker,TM）檢測(cè)是通過(guò)實(shí)驗(yàn)室方法發(fā)現(xiàn)腫瘤異常存在的一種手段。

腫瘤免疫學(xué)（tumorimmunology）是研究腫瘤抗原第一節(jié)

腫瘤抗原分類(lèi)

?

腫瘤抗原（tumorantigen）

?定義：是指在細(xì)胞在癌變過(guò)程中新出現(xiàn)或異常表達(dá)的抗原物質(zhì)。如新出現(xiàn)的如神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE,小細(xì)胞肺癌)，異常表達(dá)的如甲胎蛋白AFP(肝癌）

?意義

?腫瘤發(fā)生發(fā)展和機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答發(fā)揮作用

?腫瘤免疫診斷和防治的分子基礎(chǔ)

第一節(jié)腫瘤抗原分類(lèi)?腫瘤抗原（tumorantig1．腫瘤特異性抗原（tumorspecificantigen,TSA）

?它只表達(dá)于腫瘤細(xì)胞，而不存在于正常組織細(xì)胞。

?曾稱：腫瘤特異移植性抗原或腫瘤排斥抗原

?存在：不同個(gè)體的同一組織類(lèi)型。如黑色素瘤相關(guān)排斥抗原（MARA),在正常黑色素細(xì)胞不存在，但存在不同個(gè)體的黑色瘤細(xì)胞

一、根據(jù)腫瘤抗原的特異性分類(lèi)

1．腫瘤特異性抗原（tumorspecificantig2．腫瘤相關(guān)性抗原(tumorassociatedantigen,TAA)

?是指非腫瘤細(xì)胞所特有的，正常組織或細(xì)胞也可表達(dá)的抗原物質(zhì)

?此類(lèi)抗原在癌變細(xì)胞的表達(dá)水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)正常細(xì)胞。

?TAA表現(xiàn)為量的變化，而無(wú)腫瘤特異性，如胚胎抗原（AFP、CEA)、分化抗原和過(guò)度表達(dá)的癌基因產(chǎn)物

2．腫瘤相關(guān)性抗原(tumorassociated1．理化因素誘發(fā)的腫瘤抗原

?它只表達(dá)于腫瘤細(xì)胞，而不存在于正常組織細(xì)胞。

?化學(xué)致癌劑(甲基膽蒽誘發(fā)肉瘤、偶氮染料和二乙基硝酸）、物理致癌（紫外線、X射線）

?特點(diǎn)：特異性強(qiáng)但免疫原性弱，具有高度異質(zhì)性。即不同個(gè)體甚至同一個(gè)體，其特異性和免疫原性均不相同，很難診斷和檢測(cè)此類(lèi)抗原。

二、根據(jù)腫瘤抗原產(chǎn)生機(jī)制分類(lèi)

1．理化因素誘發(fā)的腫瘤抗原?它只表達(dá)于腫瘤細(xì)胞，而不存在于2．病毒誘發(fā)的腫瘤抗原

?DNA或RNA病毒誘發(fā)：病毒DNA整合到宿主染色體上，誘發(fā)細(xì)胞惡變。

?特點(diǎn)：具有病毒特異性，及較強(qiáng)的免疫原性，無(wú)種系、個(gè)體和器官特異性。

?人原發(fā)性肝癌（HBV、HCV)、人宮頸癌（HPV、HSV)、人鼻咽癌（EB）、人T細(xì)胞白血病（人類(lèi)嗜T細(xì)胞白血病病毒，HTLV-1)

2．病毒誘發(fā)的腫瘤抗原?DNA或RNA病毒誘發(fā)：病毒DNA3．自發(fā)性腫瘤抗原

?機(jī)制尚未闡明，人類(lèi)大部分屬于此類(lèi)。

?抗原大多為基因突變產(chǎn)物：如癌基因（ras)、抑癌基因(p53)、及突變產(chǎn)物(bcl-abl)?一些抗原類(lèi)似自發(fā)腫瘤抗原，有獨(dú)特的抗原性；一些類(lèi)似病毒抗原，具有共同特性。

3．自發(fā)性腫瘤抗原?機(jī)制尚未闡明，人類(lèi)大部分屬于此類(lèi)。?4．正常細(xì)胞成分的異常表達(dá)

①分化抗原：是組織細(xì)胞在分化、發(fā)育的不同階段表達(dá)或消失的正常分子。腫瘤細(xì)胞可停滯到某個(gè)細(xì)胞的幼稚階段，可表達(dá)該類(lèi)型的分化抗原，可作為腫瘤起源的診斷性標(biāo)志。如B細(xì)胞惡性淋巴瘤，若檢測(cè)到CD10(B細(xì)胞特征性標(biāo)志），可診斷B細(xì)胞惡性淋巴瘤。

4．正常細(xì)胞成分的異常表達(dá)①分化抗原：是組織細(xì)胞在分化、發(fā)②胚胎抗原：是胚胎組織成分產(chǎn)生的正常成分，出生后逐漸消失或微量表達(dá)。而腫瘤細(xì)胞該抗原異常表達(dá)，可作為腫瘤診斷的重要依據(jù)。如AFP和癌胚抗原（CEA),抗原性弱。

②胚胎抗原：是胚胎組織成分產(chǎn)生的正常成分，出生后逐漸消失或微③過(guò)度表達(dá)抗原:細(xì)胞癌變后多種信號(hào)分子過(guò)度表達(dá)，具有抗凋亡作用，使腫瘤細(xì)胞長(zhǎng)期存活，如ras，c-myc等基因產(chǎn)物。

④細(xì)胞突變產(chǎn)生的獨(dú)特型抗原：某些腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)TCR和BCR，如可作為診斷標(biāo)志物。如T和B細(xì)胞白血病細(xì)胞表達(dá)獨(dú)特型TCR和BCR。

③過(guò)度表達(dá)抗原:細(xì)胞癌變后多種信號(hào)分子過(guò)度表達(dá)，具有抗凋亡作

第二節(jié)

機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)機(jī)制

?腫瘤的發(fā)生與機(jī)體的免疫功能密切相關(guān)，免疫系

統(tǒng)能識(shí)別并及時(shí)清除突變細(xì)胞，防止其形成腫瘤。

?機(jī)體抗腫瘤的效應(yīng)機(jī)制包括細(xì)胞免疫和體液免

疫，細(xì)胞免疫是主力，體液免疫起協(xié)同作用。

?對(duì)免疫原性強(qiáng)的腫瘤，特異性免疫應(yīng)答是主要的，而免疫原性弱的腫瘤，非特異性免疫應(yīng)答發(fā)揮重要意義

第二節(jié)機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)機(jī)制?腫瘤的發(fā)生與一、抗腫瘤的細(xì)胞免疫機(jī)制

（一）T細(xì)胞

?

CD8+T細(xì)胞：主要的效應(yīng)細(xì)胞，其一通過(guò)識(shí)別腫瘤上抗原，通過(guò)溶細(xì)胞作用直接殺傷靶細(xì)胞；其二分泌多種細(xì)胞因子，間接殺傷腫瘤細(xì)胞

?CD4+T細(xì)胞：釋放細(xì)胞因子(IFN-γ、IL-2)激活NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞，并增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞的殺傷功能。

?γδ+T細(xì)胞：類(lèi)似CTL,可直接殺傷靶細(xì)胞，但不受MHC限制。

一、抗腫瘤的細(xì)胞免疫機(jī)制（一）T細(xì)胞?CD8+T細(xì)胞（二）NK細(xì)胞

?

廣譜殺傷腫瘤的效應(yīng)細(xì)胞，早期發(fā)揮重要作用，是清除腫瘤的第一道防線。

?無(wú)腫瘤特異性和MHC限制性

（三）

巨噬細(xì)胞

1.將腫瘤抗原信號(hào)提呈給T細(xì)胞，并促進(jìn)其激活，誘導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答

2.釋放溶酶體酶直接殺傷腫瘤細(xì)胞

3.ADCC4.分泌TNF、NO等毒性分子間接殺傷腫瘤細(xì)胞。

（二）NK細(xì)胞?廣譜殺傷腫瘤的效應(yīng)細(xì)胞，早期發(fā)揮重要作（四）

樹(shù)突狀細(xì)胞

?

參與腫瘤抗原的提呈

?參與激發(fā)針對(duì)腫瘤的初次和再次T細(xì)胞應(yīng)答的功能

（四）樹(shù)突狀細(xì)胞?參與腫瘤抗原的提呈?參與激發(fā)針對(duì)腫二、抗腫瘤的體液免疫機(jī)制

（一）

提呈腫瘤抗原

?

B細(xì)胞：以BCR撲捉腫瘤的可溶性抗原，加工處理后提呈給CD4+T細(xì)胞對(duì)腫瘤的免疫應(yīng)答

二、抗腫瘤的體液免疫機(jī)制（一）提呈腫瘤抗原?B細(xì)胞：（二）

分泌抗體介導(dǎo)腫瘤殺傷效應(yīng)

1.補(bǔ)體的溶細(xì)胞效應(yīng)

（CDC):僅殺傷單個(gè)腫瘤細(xì)胞

2.抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒效應(yīng)

（ADCC)3.抗體的免疫調(diào)理作用:吞噬細(xì)胞有Fc受體,早期

4.抗體封閉腫瘤細(xì)胞表面某些受體:轉(zhuǎn)鐵蛋白可促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)，而其抗體可抑制腫瘤的生長(zhǎng)

5.抗體干擾腫瘤細(xì)胞粘附作用

：限制腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移

（二）分泌抗體介導(dǎo)腫瘤殺傷效應(yīng)1.補(bǔ)體的溶細(xì)胞效應(yīng)（C第三節(jié)

常見(jiàn)惡性腫瘤疾病與相關(guān)腫瘤標(biāo)志物

一

腫瘤標(biāo)志物概述

?是指在腫瘤的發(fā)生和增殖過(guò)程中，由腫瘤細(xì)胞生物合成、釋放或是機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類(lèi)物質(zhì)。包括蛋白質(zhì)、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基因產(chǎn)物等。

第三節(jié)常見(jiàn)惡性腫瘤疾病與相關(guān)腫瘤標(biāo)志物一腫瘤標(biāo)志物概腫瘤標(biāo)志物的發(fā)展

腫瘤標(biāo)志物的發(fā)展?理想標(biāo)志物條件：

①敏感性高，有助早期發(fā)現(xiàn)和診斷腫瘤

②特異性強(qiáng)，僅腫瘤患者陽(yáng)性，能鑒別良、惡性腫瘤

③腫瘤標(biāo)志物濃度和腫瘤轉(zhuǎn)移、惡性程度有關(guān)，能協(xié)助腫瘤分期和預(yù)后判斷。

④腫瘤標(biāo)志物的濃度和腫瘤大小有關(guān)，半衰期短，有效治療后很快下降，較快反映體內(nèi)腫瘤的實(shí)際情況

⑤存在于體液特別是血液中，易于檢測(cè)

⑥與預(yù)后有關(guān)，具有可靠的預(yù)測(cè)價(jià)值

?理想標(biāo)志物條件：①敏感性高，有助早期發(fā)現(xiàn)和診斷腫瘤②特二

、腫瘤標(biāo)志物分類(lèi)

體液腫瘤標(biāo)志物的分類(lèi)和命名尚未完全統(tǒng)一，一般分為：

⑴

胚胎抗原類(lèi)：如AFP，CEA等，

⑵

糖蛋白抗原類(lèi)：如CA125，CA15-3，CA19-9等。

⑶

激素類(lèi)：如患甲狀腺髓樣癌時(shí)降鈣素升高，患絨毛膜細(xì)胞癌時(shí)HCG明顯升高。

⑷

酶和同工酶類(lèi):肝癌時(shí)谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）升高，前列腺癌PSA(前列腺特異抗原）升高等。

⑸

蛋白質(zhì)類(lèi)：β2微球蛋白，鐵蛋白升高，而多發(fā)骨髓瘤本周蛋白陽(yáng)性，

⑹

癌基因產(chǎn)物類(lèi)：如ras基因蛋白，myc基因蛋白，p53抑癌基因蛋白等。

二、腫瘤標(biāo)志物分類(lèi)體液腫瘤標(biāo)志物的分類(lèi)和命名尚未完全統(tǒng)一三、常見(jiàn)惡性腫瘤與相關(guān)腫瘤標(biāo)志物

（一）肺癌

死亡率最高腫瘤，分為鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、大細(xì)胞癌和小細(xì)

胞癌四類(lèi)。

1.神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）

NSE是烯醇化酶的一種同功酶，而烯醇化酶同功酶根據(jù)α，

β，γ三個(gè)亞基的不同，可分為αα、ββ、γγ、αβ和αγ五種二聚

體同功酶。γγ亞基組成的同功酶屬神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞

特有，故命名為神經(jīng)元特異性烯醇化酶。NSE是一種酸性蛋

白酶，參與糖酵解。腫癌組織糖酵解作用加強(qiáng)，細(xì)胞增殖周

期加快，細(xì)胞內(nèi)的NSE釋放進(jìn)入血液增多，導(dǎo)致此酶在血清

內(nèi)含量增高。

NSE用于小細(xì)胞肺癌鑒別診斷（陽(yáng)性率65%~100%）

三、常見(jiàn)惡性腫瘤與相關(guān)腫瘤標(biāo)志物（一）肺癌死亡率最高腫瘤

2.胃泌素釋放肽前體（ProGRP)?主要表達(dá)于胃腸道、呼吸道和中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在血清中穩(wěn)定，健康人血清ProGRP＜50pg/ml?ProGRP用于小細(xì)胞肺癌的診斷、療效監(jiān)測(cè)和預(yù)后判斷，敏感性47~86%，特異性100%。

3.CYFRA21-1：

?廣泛分布正常組織如支氣管上皮細(xì)胞等，腫瘤發(fā)生時(shí)因細(xì)胞溶解被破壞而釋放如血。

?對(duì)非小細(xì)胞癌的診斷：如鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、大細(xì)胞癌,陽(yáng)性率分別為67%，46%、67%。

?判斷預(yù)后：血清水平跟腫瘤惡性程度一致。

2.胃泌素釋放肽前體（ProGRP)?主要表達(dá)于胃腸道、(二）肝癌

1.甲胎蛋白（AFP)?AFP是胎兒發(fā)育早期合成的一種糖蛋白(α1球蛋白)，分子量70kD，胎兒出生后不久即逐漸消失。參考值：血清AFP<20μg/L，臨床唯一推薦的腫瘤標(biāo)志物

?應(yīng)用

①

對(duì)高危人群進(jìn)行肝癌的篩查：乙肝和丙肝肝硬化患者，但一般在300μg/L以下，而原發(fā)性肝癌，77%的患者AFP>300μg/L，但有部分患者AFP始終不升高

②生殖系統(tǒng)腫瘤和胚胎性腫瘤，如睪丸癌、畸胎瘤等升高

③肝癌的預(yù)后判斷

(二）肝癌1.甲胎蛋白（AFP)?AFP是胎兒發(fā)育早期合

2.去飽和-γ-羧基-凝血酶原（DCP)?缺乏凝血活性的異常凝血酶原，主要應(yīng)用美國(guó)、日本，臨界值84AU/L,對(duì)肝癌診斷的敏感性和特異性分別為87%，85%。

?DCP用于預(yù)后判斷：鑒別肝硬化和肝細(xì)胞癌的敏感性和特異性高于AFP(90%,91%)3.磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（Glypican-3，GPC-3）

?正常人群和肝炎患者不表達(dá)，而75%的肝細(xì)胞癌患者陽(yáng)性

2.去飽和-γ-羧基-凝血酶原（DCP)?缺乏凝血活性的(三）胃癌

CA72-4和CA19-9檢測(cè)敏感性低，不能用于胃癌的早期篩查，而

胃蛋白酶酶原可作為早期診斷的較好指標(biāo)

1.CA72-4?1989年首次報(bào)道，健康人血清濃度<6kU/L?敏感性不高，早期低于35%?是疾病分期和判斷癌癥患者是否由殘余腫瘤的良好指標(biāo)，

2.CA19-9?胃腸癌相關(guān)抗原，與胰腺癌、膽囊癌、胃癌相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物，抗原類(lèi)似CEA?胚胎期存在此抗原，健康人血清濃度<37kU/L,?敏感性不高，早期低于35%(三）胃癌CA72-4和CA19-9檢測(cè)敏感性低，不能用于3.胃蛋白酶酶原（PG)?PG是胃粘膜分泌的胃蛋白酶前體,分兩個(gè)亞群，胃底腺主細(xì)胞分泌的PGⅠ和胃底腺、賁門(mén)腺、幽門(mén)腺等分泌的PGⅡ

?胃癌患者PGⅠ含量及PGⅠ

/PGⅡ比值均明顯降低，作為胃癌輔助診斷指標(biāo)。敏感性和特異性分別為77%和73%。

3.胃蛋白酶酶原（PG)?PG是胃粘膜分泌的胃蛋白酶前體,(四）結(jié)直腸癌

腸癌根治術(shù)后，約40~50%患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，而CEA對(duì)復(fù)

發(fā)監(jiān)測(cè)和療效評(píng)價(jià)有一定作用。

1.CEA?1965年CEA發(fā)現(xiàn)于成人結(jié)腸癌組織中，分子量約為200kD，可溶性糖蛋白，主要存在于成人癌組織以及胎兒的胃腸管組織中，故名癌胚抗原，是一種廣譜腫瘤標(biāo)志物。

參考值：血清CEA<5.0μg/L

(四）結(jié)直腸癌腸癌根治術(shù)后，約40~50%患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)和臨床意義：

①

結(jié)腸癌、直腸癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，轉(zhuǎn)移性

惡性腫瘤也有不同程度的陽(yáng)性率；

②

早期無(wú)癥狀人群中檢出率低，不用于結(jié)腸癌的篩查，可用

于腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的監(jiān)測(cè)。

③

吸煙者中約有33%的人CEA＞5μg/L。

2.CA242?是胰腺癌和直腸癌的標(biāo)志物，68%胰腺癌患者、55%-85%的直腸癌患者、44%胃癌患者，CA242升高。

?可作為患者治療監(jiān)測(cè)CEA的補(bǔ)充

臨床意義：①結(jié)腸癌、直腸癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，(五）前列腺癌

血清PSA+直腸指診用于癌癥的普查

PSA是一種由前列腺上皮細(xì)胞分泌的蛋白酶。在血清中PSA以兩種生化形式存在：一部分(5%～40%)是以低分子量(33kD)的

游離PSA（f-PSA）形式存在；大部分(60%～90%)是以PSA和α1–抗糜蛋白酶、

α2-巨球蛋白等結(jié)合的形式存在，

稱復(fù)合PSA(c-PSA)。總PSA（t-PSA）,包括血清中f-PSA和c-PSA。

參考值：血清t-PSA<4.0μg/L，

f-PSA<0.8μg/L，

f-PSA/t-PSA>25％

(五）前列腺癌血清PSA+直腸指診用于癌癥的普查(六）乳腺癌

腫瘤標(biāo)志物在早期診斷陽(yáng)性率低（15~35%），主要用于監(jiān)測(cè)乳腺癌術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。

1.CA15-3：

?CA15-3是一種乳腺癌相關(guān)抗原，屬糖蛋白，分子量300~500kD，與CA15-3同類(lèi)的多態(tài)性上皮粘蛋白抗原還有CA549,CA27-29等。參考值：血清CA15-3<28kU/L。

?不宜作為早期篩查指標(biāo)，但可用于轉(zhuǎn)移性乳腺癌的首選指標(biāo)

2.乳腺癌易感基因：BRCA1和BRCA2，對(duì)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、早期診斷和及時(shí)治療有意義

3.個(gè)體化靶標(biāo)：ER(雌激素受體）和PR（孕激素受體）：ER陽(yáng)性患者，他莫昔芬治療1、2和5年，腫瘤復(fù)發(fā)率降低21%、28%和50%。PR類(lèi)似。

(六）乳腺癌腫瘤標(biāo)志物在早期診斷陽(yáng)性率低（15~35%），常用腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)項(xiàng)目

第四節(jié)

腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)與臨床應(yīng)用

常用腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)項(xiàng)目第四節(jié)腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)與臨床應(yīng)用一、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的影響因素

（一）分析前影響因素

1.標(biāo)本采集和保存的影響：

?血清標(biāo)本常用，若收集腫瘤組織附近的分泌液，可提高檢查的靈敏度，如乳汁測(cè)定CA15-3和CEA,?前列腺按摩、刺激等提高血液中PSA,應(yīng)盡量避免

?血液標(biāo)本離心后4℃保存，長(zhǎng)期-70℃保存

2.某些藥物濃度的影響

?抗雄激素治療前列腺癌可抑制PSA產(chǎn)生

3.自身狀況的影響：肝功能異常、膽道排泄不暢可造成CEA、ALP等升高

4.生物學(xué)因素的影響：PSE隨年齡增長(zhǎng)而升高。

一、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的影響因素（一）分析前影響因素1.標(biāo)本（二）分析中影響因素

1.測(cè)定方法和試劑的影響：手工方法誤差大，自動(dòng)化儀器重復(fù)性好，盡量使用同一方法、同一儀器和同一廠家試劑盒

2.鉤狀效應(yīng)的影響：ELISA,若抗原濃度過(guò)高，會(huì)出現(xiàn)高濃度后帶現(xiàn)象，此時(shí)免疫反應(yīng)明顯抑制，測(cè)定結(jié)果偏低。應(yīng)對(duì)樣品稀釋后再測(cè)。

3.交叉污染的影響：高濃度標(biāo)本測(cè)后出現(xiàn)，結(jié)果偏高

4.嗜異性抗體的影響：以前使用鼠單克隆抗體治療后，在體內(nèi)產(chǎn)生人抗鼠單克隆抗體，則與兩種單克隆抗體橋連，即使無(wú)抗原存在，也出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果

（三）分析后的影響因素

1.參考區(qū)間

2.結(jié)果報(bào)告與解釋

（二）分析中影響因素1.測(cè)定方法和試劑的影響：手工方法誤差二、腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用

1.腫瘤的輔助診斷：不能代替影像學(xué)和病理學(xué)檢查，只能作為輔助診斷指標(biāo)：如：CA125與陰道超聲聯(lián)合可作為高危女