新藥分析方法的建立與驗證課件

分析方法的建立與驗證上海浦融生物科技有限公司ChamQuest1分析方法的建立與驗證上海浦融生物科技有限公司1分析方法的建立與驗證0.引言1.分析方法在藥品開發(fā)中的應(yīng)用2.分析方法開發(fā)的基本問題3.分析方法的驗證與轉(zhuǎn)移2分析方法的建立與驗證0.引言20.引言上海浦融生物科技有限公司ChamQuest30.引言上海浦融生物科技有限公司3藥物質(zhì)量體系InvestigationalProductsPharmaceuticalDevelopmentTechnologyTransferCommercialManufacturingProductDiscontinuationGMPManagementResponsibilityKnowledgeManagementQualityRiskManagementProcessPerformance&ProductQualityMonitoringSystemCorrectiveAction/PreventativeAction(CAPA)SystemChangeManagementSystemManagementReviewPQSelementsEnablers4藥物質(zhì)量體系InvestigationalProducts強生技術(shù)轉(zhuǎn)移模式PhaseIPhaseIIAClinicalTrialsPhaseIIIClinicalTrialsFilingandLaunchEarlyDevelopmentStartingPoint-(SourcingDecision)RegistrationBatches(PhaseIIIClinicalTrials)Pre-Validation(FinalScale-UpActivities)Validation*LaunchFilePAIFullDevelopmentEndPointFilingandLaunchProcessOutputsDevelopmentActivitiesDevelopmentReportsPDIRTTPPTTSPIRPhaseIIbTransferSignoffAcceptanceAMTR(In-Processtesting)AnalyticalPre-TransferAnalyticalMethodTransferAMTRMicroMethodTransferMDDSMMTRADDSPTRTimelineforActivityTTS–TechnologyTransferStrategyTTPP–TechnologyTransferProjectPlanPIR–ProductIntroductionReportPDIR–PharmaceuticalDevelopmentInterimReportReportNameAbbreviationsADDS-AnalyticalDevelopmentDocumentationSetAMTR–AnalyticalMethodTransferReportAMTR(In-ProcessTesting)–AnalyticalMethodTransferReportforin-processtestingtransferPTR–ProductTransferReportMMTR–MicrobiologicalMethodTransferReportMDDS–MicrobiologicalDevelopmentDocumentationSetOngoingActivity(asrequired)*Validationmayoccurpriortoregulatorysubmission5強生技術(shù)轉(zhuǎn)移模式PhaseIPhaseIIAClini分析方法的生命周期(LifeCycle)方法的建立方法的驗證方法的轉(zhuǎn)移6分析方法的生命周期(LifeCycle)方法的建立方法的驗1.分析方法在藥品開發(fā)

過程中的應(yīng)用上海浦融生物科技有限公司ChamQuest71.分析方法在藥品開發(fā)

過程中的應(yīng)用上海浦融生物科技有限公藥品開發(fā)過程概要藥物發(fā)現(xiàn)(drugdiscovery/leadoptimization)早期開發(fā)(earlydevelopment)毒理Toxicology藥代動力學(xué)Pharmcokinetics臨床試驗申請IND臨床研究(Clinical)I&II期臨床試驗ClinicalphaseI&IIIII期臨床試驗ClinicalphaseIII化學(xué)與生產(chǎn)控制(CMC)化學(xué)開發(fā)Chemicaldevelopment藥品開發(fā)Pharmaceuticaldevelopment分析開發(fā)Analyticaldevelopment工藝放大Scale-up輸送技術(shù)開發(fā)DeliveryDevelopment技術(shù)轉(zhuǎn)移TechnologyTransfer申報與審批(Regulatoryfilings)生產(chǎn)及商業(yè)運作(Manufacturing&commercialization)8藥品開發(fā)過程概要藥物發(fā)現(xiàn)(drugdiscovery/le藥品開發(fā)中分析測試的作用產(chǎn)品的安全性 Productsafety制劑的生物利用性Dosageform’sbioavailability原料,中間體及產(chǎn)品規(guī)格的確定SpecsettingforAPI,intermediates,andproduct產(chǎn)品的有效期的確定Shelf-lifeofproduct制劑配方的優(yōu)化Determiningoptimumformulation雜質(zhì)與降解物的定性,定量和“確認(rèn)“ID,quantitationand“qualification”ofimpurities°radants藥物原料的晶體結(jié)構(gòu)Crystallineformdetermination清潔工藝支持Swabtesting&cleaningvalidation支持臨床及臨床前研究Pre-clinical&clinicalsupport(safety&efficacy)9藥品開發(fā)中分析測試的作用產(chǎn)品的安全性9CMC中的主要分析方法及數(shù)據(jù)Methodvalidation(方法驗證)PhysicalcharacterizationofAPI&drugproduct(物理表征)In-processcontrol(過程控制)Characterizationofreferencestandards(標(biāo)準(zhǔn)物表征)Specification(規(guī)格)Evaluationofcontainer/enclosure(包裝材料評估)DrugproductandAPIstability(產(chǎn)品及原料的穩(wěn)定性)Referencetocompendialtestingmethodsandinactive(非活性成份的藥典方法)Bioequivalence(生物等同性)Pharmaceuticaldevelopmentreport(藥物開發(fā)報告)10CMC中的主要分析方法及數(shù)據(jù)Methodvalidati分析方法及分析測試涉及多領(lǐng)域?qū)W科產(chǎn)品開發(fā):劑型包裝分析測試臨床試驗支持過程開發(fā)/表征/控制穩(wěn)定性/產(chǎn)品釋放毒理/藥代動力學(xué)法規(guī)申報支持11分析方法及分析測試涉及多領(lǐng)域?qū)W科產(chǎn)品開發(fā):分析測試臨床試驗支分析方法在藥物發(fā)現(xiàn)階段的作用幫助確認(rèn)新化學(xué)物種的結(jié)構(gòu)Confirmationofexpectedstructure初步的定量結(jié)果Tentativecontentassayassignment主要使用HPLC和LC/MSMostlyHPLCandLC/MS不要求GMPNocGMPrequirements12分析方法在藥物發(fā)現(xiàn)階段的作用幫助確認(rèn)新化學(xué)物種的結(jié)構(gòu)12分析方法在PRE-IND階段的作用在PRE-IND階段,研究和表征:毒理Toxocologyprofile綜合藥理Generalpharmacologyprofile臨床前藥理Preclinicalpharmacologyprofile化學(xué)和藥劑學(xué)性質(zhì)Somechemical&pharmaceuticalproperty上列數(shù)據(jù)將在IND/CTA申報中使用生產(chǎn)和表征PilotBatch(PB,100-300g)供PRE-IND使用雜質(zhì)和降解物確定identificationforimpurity°radants穩(wěn)定性StabilityofNMEforpre-formulation.溶劑中穩(wěn)定性Solutionstability:pH,ions,light,oxidantsAPI穩(wěn)定性APIstabilityat25/60forprovisionalshelflife方法HPLCformethod,andprofiling物理表征X-ray,physicaltestingforcharacterization

13分析方法在PRE-IND階段的作用在PRE-IND階段,研分析方法在PHASEI/II階段的作用PHASEI選擇相對穩(wěn)定劑型,對健康志愿人員臨床研究(SAD,MAD,etc.)安全性Safety,容忍度tolerability,動力學(xué)kinetics分析方法要求定量方法初步的穩(wěn)定性試驗IND方法認(rèn)證支持過程放大,劑型開發(fā),等14分析方法在PHASEI/II階段的作用PHASEI14分析方法在PHASEI/II階段的作用PHASEII穩(wěn)定性研究和釋放規(guī)范(releasespec):API&DP穩(wěn)定性指示純度指示確認(rèn)主要的雜質(zhì)和降解物如果沒有標(biāo)準(zhǔn)物,可使用API面積%接近方法驗證配方精化過程放大15分析方法在PHASEI/II階段的作用PHASEII15分析方法在PHASEIII階段的作用PHASEIII大規(guī)模多國多中心double-blind臨床試驗嚴(yán)格的方法開發(fā)和驗證耐用性,可轉(zhuǎn)移性最終確定:制劑配方方法規(guī)格(規(guī)范)雜質(zhì)和降解產(chǎn)物檢測:臨床試驗物品釋放正式穩(wěn)定性工藝過程放大及優(yōu)化清潔驗證

16分析方法在PHASEIII階段的作用PHASEIII16分析方法在申報與審批(Regulatoryfilings)階段的作用NDA/MAA申報Methodtransfer(方法轉(zhuǎn)移)Processvalidation(過程工藝驗證)Continuedstability(繼續(xù)進行的穩(wěn)定性實驗)Continuedclinicalsupport(繼續(xù)進行的臨床試驗支持)Pre-approvalinspection(PAI)(批準(zhǔn)前檢查)17分析方法在申報與審批(Regulatoryfilings分析方法對劑型開發(fā)的支持決定最終劑型的影響因素:藥物的治療作用Proposedindicationofthedrug藥物利用度Bioavailabilityprofile用藥劑量Drugpotency原料藥的穩(wěn)定性StabilityofAPI,shelf-life用藥方便性與市場要求Patientconvenience&marketingexpectations生產(chǎn)過程與成本的考慮Manufacturing&costconsideration釋放要求Releasecharacteristics(e.g.delayedrelease,etc)18分析方法對劑型開發(fā)的支持決定最終劑型的影響因素:18常見劑型Oral口服劑型(片劑,口服液,等)Parenteral(IV,subcutaneous,etc)注射劑Inhalation噴霧劑Transdermal透皮劑型Topical(creamsandointments)表皮局部劑型19常見劑型Oral19一些特殊劑型的分析方法會遇到很多技術(shù)挑戰(zhàn)Implantdelivery(植入式藥物輸送)Drug/devicecombinationaldrugdelivery(藥品/器械復(fù)合型藥物輸送)Liposomaldrugdelivery(脂質(zhì)體藥物輸送)20一些特殊劑型的分析方法會遇到很多技術(shù)挑戰(zhàn)Implantde分析方法是劑型開發(fā)的基礎(chǔ)API表征Solubility(穩(wěn)定性),crystalstructure(晶體結(jié)構(gòu)),particlesize(顆粒尺寸)制劑組份的兼容性制劑的穩(wěn)定性制劑藥釋功能溶解度,溶解速率,等制劑工藝Uniformity,residualsolventfromcasting,etc(均勻性,殘留溶劑等)21分析方法是劑型開發(fā)的基礎(chǔ)API表征21

2.分析方法開發(fā)的基本問題

22

2.分析方法開發(fā)的基本問題

22分析方法的基本構(gòu)成分析要求ID(鑒別試驗)Assay(含量測定)Impurity(雜質(zhì)檢查)ReleaseRate/Dissolution……(功能檢查)樣品與樣品制備API(原料藥)Excipient/functionalingredient/RS(輔料/功能性輔料/殘留料)制劑(FinishedProduct)Tablet(片劑)Capsule(膠囊)TransdermalPatch(透皮貼片)IVInhale…….分析儀器與操作參數(shù)(方法)HPLCGCUV……..數(shù)據(jù)分析23分析方法的基本構(gòu)成分析要求23分析要求Speed(速度)Resolution(解析度)Cost(成本)Robustness(耐用)24分析要求Speed(速度)ResolutionCost(成優(yōu)先考慮基本要求含量測定速度/解析能力1)與輔料分離2)耐用性雜質(zhì)/降解物解析能力/靈敏度穩(wěn)定性指示1)與輔料分離,雜質(zhì)/降解物分離2)雜質(zhì)定量(靈敏度>0.1%)3)耐用性溶出度速度單峰定量,耐用性25優(yōu)先考慮基本要求含量測定速度/解析能力1)與輔料分離雜質(zhì)/穩(wěn)定性指示(Stability-Indicating)基于藥品活性組分(AI)的結(jié)構(gòu)特性，化學(xué)特性或生物特性的定量分析方法，該方法能將活性組分（AI）與降價組分（degradationproduct)區(qū)分開來，使活性組分能夠被準(zhǔn)確地確定。(FDAGuidelineforsubmittingdocumentationforthestabilityofhumandrugsandbiologics)AI(活性組份):API(原料藥)NovelExcepients(全新輔料)FunctionalExcepients(功能輔料)ImpuritiesDegradationProduct(降階產(chǎn)物)SyntheticImpurities(合成雜質(zhì))Residuals(殘留物)26穩(wěn)定性指示(Stability-Indicating)基于藥方法案例:Fentanyl27方法案例:Fentanyl27方法案例:Fentanyl28方法案例:Fentanyl28方法案例:Fentanyl29方法案例:Fentanyl29方法案例:Fentanyl30方法案例:Fentanyl30方法案例:FentanylImpB具有潛在致癌毒性，F(xiàn)DA要求控制<0.001%IncomingMaterialControl(進料控制)<0.005%GenotoxicityWhitePaperforacuteapplication(基因毒理白皮文件):0.01%方法耐用性是一個挑戰(zhàn).方法在0.002%濃度上得到驗證.31方法案例:FentanylImpB具有潛在致癌毒性，F(xiàn)D分析方法開發(fā):強化降解APISolidStateDegradation(固相中降解)SolutionDegradation(液相中降解)FinishedProduct(產(chǎn)品)CommonDegradationPathways:(通常的降解途徑)AcidHydrolysis(酸解)BaseHydrolysis(堿解)Temperature(溫度)Photolysis(光解)Oxidation(氧化)32分析方法開發(fā):強化降解API32強化降階案例(化合物–3100)API固相:(希望20%降解)熱:70C3周濕:70C/75%RH3周光照:SuntestXLS光照室用Xenonarc燈通過玻璃窗發(fā)射765W/m2at72F的模擬日光在5小時,24小時取樣(3xICHguideline)氧化:用濾紙封蓋樣品壓力容器在70C下加300psi氧氣在3天和7天時取樣Initiated氧化:32mgAPI加入7ginitiator(AIBN)在70C下加300psi氧氣在1天和3天時取樣33強化降階案例(化合物–3100)API固相:(希望強化降階案例(化合物-3100)API在溶液中強化降解)直到7天(Forupto7days):Water50CAcid0.1NHClinwater,50CpH2.0Citratebuffer,50CpH4.0Citratebuffer,50CpH6.0Citratebuffer,50CpH8.0Boratebuffer,50CpH10.0Boratebuffer,50CBase(0.1NNaOHinwater50C)Fluorescentlight(inwaterRT)Oxidation3.0%H2O2inwater,50CPolyethyleneGlycol4000.5%Methocelsolutioninwater20%HPBCDinH2O34強化降階案例(化合物-3100)API在溶液中強化降解)溶液中強化降解樣品譜圖(ChromatogramsofSolutionStressedSamples)Watersolution,50oCfor7days

0.1NNaOHsolution,50oCfor7days

35溶液中強化降解樣品譜圖(ChromatogramsofS降解物Table3.SolutionForcedDegradationExperiments(area%)

36降解物Table3.SolutionForcedDe產(chǎn)品的降解實驗(StressStudiesforDrugProduct)強化至15%降解(一般規(guī)格為90-110%)檢查專屬性(Specificity)和穩(wěn)定性(stabilitytesting)應(yīng)用正交方法或正交技術(shù)對每個強化降解樣品,至少要用LC-PDA數(shù)據(jù)評估其“峰純度(peakpurity)”.37產(chǎn)品的降解實驗(StressStudiesforDru固體制劑強化方式SolidDosageFormStressingStrategy(JNJ)StressingCategoryExperimentalConditionMaximumStressingDurationAcid/BaseExcipientsand/orproductionstepsshouldbeevaluatedtodecideifacid/basestressingisnecessary.Ingeneral,acid/basestressingofsoliddosageformsisnotpreferred.OxidativeNotnecessaryforopendishexperiments.Forcaseswhereopendishexperimentsarenotpossible,stressingunderanenrichedoxygenatmosphereissuggested.Insuchcases,stresstheDPinaclosedcontainerhavingaheadspaceenrichedwithoxygenandatanelevatedtemperature(seethermalstressingexperimentalconditionsandduration).Photostability1and2ICH(Option1or2)NAThermal70or80C*2weeks60C8weeks50C8weeks40C8weeksThermal/Humidity70or80C*/>65%2weeks60C/>65%8weeks50C/>65%8weeks40C/>65%8weeks38固體制劑強化方式SolidDosageFormStre液體/膠體制劑強化方式Solutions/Suspensions/CreamsStressingStrategy(JNJ)StressingCategoryExperimentalConditionMaximumStressingDurationAcidOption1:Formulationsamplespreparedat2pHunitsbelowthemarketedpH@50C*1weekOption2:0.01N0.1NHCl@50C*

Addacidsolutiontosample,mixwellandplaceinoven.Addupto10%(v/v)forsolutionsand10%(w/w)forsuspensions/creams1weekBaseOption1:Formulationsamplespreparedat2pHunitsabovethemarketedpH@50C*1weekOption2:0.01N0.1NNaOH@50C*

Addbasesolutiontosample,mixwellandplaceinoven.Addupto10%(v/v)forsolutionsand10%(w/w)forsuspensions/creams1weekOxidativeEnrichedOxygenAtmosphere**/70or80C***2weeksEnrichedOxygenAtmosphere**/60C8weeksEnrichedOxygenAtmosphere**/50C8weeksEnrichedOxygenAtmosphere**/40C8weeksPhotostability1and2ICHOption1or2NAThermal70or80C***2weeks60C8weeks50C8weeks40C8weeksThermal/HumidityNotNecessary39液體/膠體制劑強化方式Solutions/Suspensio分析方法的正交性(Orthogonality)相互正交的分析方法/技術(shù)是基于不同的分析/分離機理?；旌衔镏芯哂胁煌再|(zhì)的組分在相互正交的方法中的表現(xiàn)特征截然不同，因此互補性地避免了在單一分析方法/技術(shù)中得不到有效分析/分離的誤區(qū)。正交分析技術(shù) LC-UVLC-MSCEGC正交分析方法ReversePhase,NormalPhase,IC,etcReversePhase:C18,Phenyl-,NH2-,PDA(不同波長)40分析方法的正交性(Orthogonality)相互正交的分析正交方法/技術(shù)的應(yīng)用應(yīng)用：API純度(APIPurity)方法開發(fā)(MethodDevelopment)雜質(zhì)剖析(ImpurityProfiling)專屬性驗證(SpecificityValidation)穩(wěn)定性實驗(StabilityStudies)要求耐用性不重要(Robustnessisnotaconcern)效率和速度不重要(Efficiency&Speedisnotaconcern)不是一個日常方法(Notaroutinemethod)41正交方法/技術(shù)的應(yīng)用應(yīng)用：41一個快速分析新方法

FastAnalysisforSkinFluxand

ReleaseRateDetermination

inTransdermalDrugDeliverySystems

UsingNPSBasedHPLCColumnJasonZhang,RichardRobertsonandSteveFieldsALZACorporation42一個快速分析新方法

FastAnalysisforSTransdermalSystems-HighVolumeSampleTypes

(溶出度)MultipleStabilityConditions(多穩(wěn)定性實驗條件)ReplicateSamples(重復(fù)樣品)MultipleTimepoints(多時間點)50-200Injections(50-200進樣)ReleaseRate(Development&QC)TTSSystem43TransdermalSystems-HighVolTransdermalSystems-HighVolumeSampleTypes

(透皮實驗)MultipleFormulations(多配方)ReplicateSamples(重復(fù)樣品)MultipleTimepoints(多時間點)100-1000Injections(100-1000進樣)TTSsystemDrugSkinSkinFlux(Research)44TransdermalSystems-HighVolWhatisNPS?(Non-PorousSilica)1.5umdiameter45WhatisNPS?(Non-PorousSilicNPSoffers高添充密度提高重復(fù)性平穩(wěn)的vanDeemter曲線46NPSoffers高添充密度46代表性實驗參數(shù)

--方法:ALZA-33D-TRANSTM47代表性實驗參數(shù)

--方法:ALZA-33D-TRANSTALZA-33(含anti-irritant)ConventionalNPSALZA-33anti-irritantmin.48ALZA-33(含anti-irritant)Conve透皮樣品ALZA-33matrixanti-irritantconventionalNPSSkinFluxSample6-849透皮樣品ALZA-33matrixanti-irritant一個溶出度測定方法byNPS0.37min.minuteALZA-31150一個溶出度測定方法byNPS0.37min.minutNPS相對于傳統(tǒng)柱的優(yōu)勢(以一個典型的透皮實驗為例(600樣品))100hrs10hrs6.0L0.3L3.0L0.09L51NPS相對于傳統(tǒng)柱的優(yōu)勢(以一個典型的透皮實驗為例(方法驗證線性0.9998系統(tǒng)適用性:保留時間 RSD 0.08%峰面積 RSD 0.19%拖尾因子 1.752方法驗證線性0.999852樣品制備(HPLC)基本要求:全部或準(zhǔn)確定量部分API溶入溶劑中可注射入HPLCAPI通常劑型:片劑膠囊注射劑透皮53樣品制備(HPLC)基本要求:53透皮給藥系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)釋藥層背襯層藥物儲庫與粘附層(如.Testoderm?,DuragesicCII?)54透皮給藥系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)釋藥層背襯層藥物儲庫與粘附層(如.TTrandermal分析方法的幾個問題標(biāo)簽含量vs.目標(biāo)含量樣品的制備回收率的驗證與溶解動力學(xué)實驗IVIVC分辯功能(DiscriminatoryPower)基因毒性Genotoxicity55Trandermal分析方法的幾個問題標(biāo)簽含量vs.目分析樣品的制備目標(biāo)提取藥物,雜質(zhì),輔料藥物提取或溶出的策略有選擇性地完全多相56分析樣品的制備目標(biāo)提取藥物,雜質(zhì),輔料56選擇性提取有機溶劑+水乙腈或甲醇聚合物骨架部分分解要求進行充分的動力學(xué)研究4–48小時攪拌–攪動,震搖,超聲57選擇性提取有機溶劑+水57完全提取強的有機溶劑–THF使聚合物完全溶解非?？焖傧♂尶赡軙袉栴}相分離與HPLC的兼容性可能會用到凝膠滲透-液相（GPC-LC）連用柱58完全提取強的有機溶劑–THF58多相提取液-液提取正己烷:ACN/H2O體積測定的準(zhǔn)確度和精密度是一個挑戰(zhàn)相關(guān)的問題:藥物,降解產(chǎn)物的分配系數(shù)操作效率問題固相提取低壓,低分辨率液相色譜柱準(zhǔn)確度,精密度,可重復(fù)性有挑戰(zhàn)操作效率問題59多相提取液-液提取59

3.分析方法的驗證

60

3.分析方法的驗證

60方法驗證FDA對工業(yè)界的分析規(guī)程和方法驗證指南草案:化學(xué),生產(chǎn),和控制文件.2000年8月藥品評價與研究中心(CDER)指南:遞交方法驗證的樣品和分析數(shù)據(jù)的原則.1987年2月ICHQ2A:分析規(guī)程驗證內(nèi)容:定義和術(shù)語,國際協(xié)調(diào)協(xié)會.ICHQ2B:分析規(guī)程的驗證:方法學(xué),國際協(xié)調(diào)協(xié)會.ICHQ3A(R):新原料藥中的雜質(zhì),國際協(xié)調(diào)協(xié)會.ICHQ3B(R):新的藥品中的雜質(zhì),國際協(xié)調(diào)協(xié)會.ICHQ7A:藥物活性成分的GMP指南.ICHQ10:PharmaceuticalQualitySystemGlobalAnalyticalNetwork,TechnicalGuidanceDocument,ValidationofAnalyticalProceduresGlobalChemPharmDevelopment,GlobalSOPs.61方法驗證FDA對工業(yè)界的分析規(guī)程和方法驗證指南草案:化學(xué)PharmaceuticalQualitySystemInvestigationalProductsPharmaceuticalDevelopmentTechnologyTransferCommercialManufacturingProductDiscontinuationGMPManagementResponsibilityKnowledgeManagementQualityRiskManagementProcessPerformance&ProductQualityMonitoringSystemCorrectiveAction/PreventativeAction(CAPA)SystemChangeManagementSystemManagementReviewPQSelementsEnablers62PharmaceuticalQualitySystemI不同階段的方法驗證全球制藥行業(yè)的當(dāng)前實踐IND階段

這些方法是用于臨床試驗用品的放行和穩(wěn)定性測試,通常在原料藥和藥物制劑最終的測定方法之前使用.NDA階段這個階段的測試方法是根據(jù)最終的合成路線和制劑制備方法開發(fā)的，用于支持NDA/MAA的申報和商業(yè)原料藥和藥品的質(zhì)量控制.方法轉(zhuǎn)移(MethodTransfer)生產(chǎn)測試和連續(xù)改進(CommercialTesting&ContinuedImprovement)63不同階段的方法驗證全球制藥行業(yè)的當(dāng)前實踐63不同方法種類的方法驗證常用方法的驗證色譜方法的驗證溶出度,釋藥速率&功能性測試物理測試&濕化學(xué)測試微生物檢測64不同方法種類的方法驗證常用方法的驗證64不同測試類型的方法驗證A.

鑒別試驗–為了確保樣品中被分析物的一致性B.

DS和DP樣品中活性成分的檢測-為了準(zhǔn)確定量的測定樣品中含有的被分析物.這些方法包括含量分析(Assay)和含量均一性分析(ContentUniformity).C.

雜質(zhì)的定量檢測-為了準(zhǔn)確定量地測定樣品中的雜質(zhì)水平.D.

雜質(zhì)的限度檢測-作為一個限度檢測目的是準(zhǔn)確地反映樣品的純度特性.限度檢測還可以用于測定安慰劑中是否含有活性藥物成分.65不同測試類型的方法驗證A.

鑒別試驗–為了確保樣品根據(jù)不同的測試類型目前所使用的分析測試實例鑒別測試雜質(zhì)和降解物的測定含量檢測

定量限度

- 外觀- IR- DSC- 旋光性- 熔點/熔解曲線- HPLC,GC,CE-NMR-MS- AAS- 干燥失重- Coulometric

式和Karl-Fisher式水分測定-HPLC,GC,CE

- 透射- 硫酸灰分- 重金屬- 不溶物- 色澤和澄明度-HPLC,GC,CE

- 滴定-HPLC,GC,CE

66根據(jù)不同的測試類型目前所使用的分析測試實例鑒別測試雜質(zhì)和降解方法驗證特性專屬性(特異性)（Specificity)專屬性是對抗可能存在的組分(如雜質(zhì),降解物等)干擾,準(zhǔn)確可靠地測定被分析物的能力。專屬性的含義：鑒別，純度檢查，含量準(zhǔn)確測定準(zhǔn)確度(Accuracy)分析方法的準(zhǔn)確度表示的是測定值與真實值或者參考值的接近程度.67方法驗證特性專屬性(特異性)（Specificity)67方法驗證特性精密度(Precision)分析方法的精密度表示的是指在指定的條件下同一類樣品中不同的幾份樣品所得到的測定值之間的接近程度(分散程度).精密度可以分三種:可重復(fù)性(Repeatability)中間精密度(IntermediatePrecision)再現(xiàn)性(Reproducibility)68方法驗證特性精密度(Precision)68方法驗證特性可重復(fù)性可重復(fù)性表示的是在相同的操作條件下每隔一小段時間的精密度.可重復(fù)性也叫批內(nèi)精密度.系統(tǒng)可重復(fù)性系統(tǒng)的可重復(fù)性表示的是在相同的操作條件下每隔一小段時間時分析儀器的精密度,如.單份樣品或參考制劑的多次分析時的精密度.分析方法可重復(fù)性分析方法的可重復(fù)性表示的是在相同的條件下，每隔一小段時間后由相同的分析人員測定的分析方法的精密度,如.多種樣品制備方法的測試結(jié)果間的精密度.69方法驗證特性可重復(fù)性69方法驗證特性中間精密度中間精密度表示的是實驗室內(nèi)的變異性:不同日期,不同的分析人員,不同的設(shè)備等.再現(xiàn)性再現(xiàn)性表示的是實驗室之間的精密度(合作研究,通常用于方法的標(biāo)準(zhǔn)化).70方法驗證特性中間精密度70方法驗證特性檢測限度(DL)一個獨立的分析方法的檢測限指的是樣品中被分析物的最低含量,這個只需要可以檢測出來而不需要準(zhǔn)確定量.定量限度(QL)一個獨立的分析方法的定量限指的是在適當(dāng)?shù)木芏群蜏?zhǔn)確度下可以定量測定的樣品中的待測物的最低含量.定量限是樣品混合物中低含量組分的定量參數(shù),尤其適用于雜質(zhì)和降解產(chǎn)物的定量.71方法驗證特性檢測限度(DL)71方法驗證特性線性線性是指分析方法得到測試結(jié)果的能力（在一定范圍內(nèi)）,測試結(jié)果應(yīng)該與樣品中被測定成分的濃度（含量）直接稱正比.范圍分析方法的使用范圍是樣品中被分析物濃度（含量）的最大值和最小之間的間隔，該范圍內(nèi)的準(zhǔn)確度、精密度和線性的適用性水平應(yīng)該已經(jīng)過論證.72方法驗證特性線性72方法驗證特性穩(wěn)健性（耐用性）穩(wěn)健性是指分析方法不受一些小但是應(yīng)該考慮的方法參數(shù)的變異性因素影響的能力，可以為正常的使用過程提供一些指示.溶液的穩(wěn)定性溶液的穩(wěn)定性是測定目標(biāo)分析物在所描述的條件下可以保持穩(wěn)定的時間長度.過濾研究過濾研究考察的是過濾過程(如.結(jié)合目標(biāo)分析物和過濾裝置，以及污染物的提取等).這部分研究可以作為是準(zhǔn)確性研究和專屬性研究的一部分.73方法驗證特性穩(wěn)健性（耐用性）73方法驗證特性系統(tǒng)適用性測試（SystemSuitability)已經(jīng)提供了建議的系統(tǒng)適用性測試特征和限度,如果是可以適用的，應(yīng)該作為分析方法的組成部分.這可以在樣品測試之前確保方法和儀器都可以按預(yù)期運行.方法比較/跨越性研究(MethodComparison/CrossOverStudy)進行方法比較研究是為了證明不同分析方法之間是等價的.74方法驗證特性系統(tǒng)適用性測試（SystemSuitabiliIND/CTA方法驗證Table2:MethodValidationCharacteristics–IND/CTAMethods分析性能特征鑒別測試雜質(zhì)和降解產(chǎn)物測試分析測試

定量限度

特異性++++準(zhǔn)確度--1)-+精密度

-系統(tǒng)可重復(fù)性-+-+ -分析可重復(fù)性-+-+

-中間精密度----

-再現(xiàn)性----檢測限(DL)-++-定量限(QL)-+--線性-+-+范圍-+-+穩(wěn)健性----溶解穩(wěn)定性-+-+過濾研究-+-+系統(tǒng)適用性測試-+-+方法比較--1)-+1)75IND/CTA方法驗證Table2:MethodValNDA/MAA方法驗證Table3:MethodValidationCharacteristics–NDA/MAAMethods分析性能特征鑒別測試雜質(zhì)和降解產(chǎn)物測試檢測測試*

定量限度

特異性++++準(zhǔn)確度-+-+精密度

-系統(tǒng)可重復(fù)性-3)+-3)+ -分析可重復(fù)性-3)+-3)+ -中間精密度-+1)-+1) -再現(xiàn)性-+-+檢測限(DL)-++-定量限(QL)-+--線性-+-+范圍-+-+穩(wěn)健性-+2)+2)+2)溶解穩(wěn)定性-+-+過濾研究-+-+系統(tǒng)適用性測試-+-+方法比較-+3)-+3)1)如果有再現(xiàn)性數(shù)據(jù)的話中間精密度不是必須的

2)

穩(wěn)健性可以作為方法開發(fā)的一部分進行3)3是指在某些案例中需要進行的76NDA/MAA方法驗證Table3:MethodVal驗證方案–含量測定特異性(專屬性）1)注射輔料混合物(n=1)(對于藥物成品)2)注射已知雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的方法濃度水平的待測物，(n=1).(通常使用系統(tǒng)適用性溶液)3)對于穩(wěn)定性表征方法:

在下列應(yīng)力條件下進行強制降解研究(不限于): 40度，75%相對濕度，4周(開口) 60度或80度，4周在1.2M勒克斯熒光和200watts/m2的紫外光下照射(見ICH中的光穩(wěn)定性指南)4)用正交的方法或檢測系統(tǒng)來核實77驗證方案–含量測定特異性(專屬性）77驗證方案–含量測定特異性的接受標(biāo)準(zhǔn)1) 保留時間在待測物保留時間5%之內(nèi)的所有檢測峰的總面積(強制降解物除外)應(yīng)測定方法濃度水平待測物的0.1%(峰面積%).

2)分辨率:1.578驗證方案–含量測定特異性的接受標(biāo)準(zhǔn)78驗證方案–含量測定線性最少準(zhǔn)備5份以上的標(biāo)準(zhǔn)溶液，以在范圍確定時包括全部濃度范圍.如果測定方法中用到SLC，則需要進行單水平校準(zhǔn)評估.驗收標(biāo)準(zhǔn)1)r2

0.9952)計算所得的所有標(biāo)準(zhǔn)品濃度應(yīng)該在標(biāo)準(zhǔn)品理論濃度的2%范圍之內(nèi).79驗證方案–含量測定線性79驗證方案–含量測定準(zhǔn)確度1)在樣品基質(zhì)中加入下述每一水平的待測物(n=3)及在空白基質(zhì)中加入下述每一水平的待測物(n=1)作為控制樣品(ControlSample):(e.g.Assay70-100-130;Imp:RT-SL-2SL)? 含量范圍的下限? 含量范圍的中間? 含量范圍的上限2)對于控制樣品記錄下列內(nèi)容:? 將使用哪種類型的樣品及原因.? 如何制備控制樣品驗收標(biāo)準(zhǔn)1)單個加樣回收率:96-104%2)每個水平的平均回收率:97-103%3)單個控制樣品的回收率:理論值的98-102%4)對于精密度,整體的RSD(n=9):<5%80驗證方案–含量測定準(zhǔn)確度80濃度 驗收標(biāo)準(zhǔn)1-2RT 50-150%2-10RT 70-130%11-20RT 80-120%》20RT 90-110%70-130%DS 98-102%70-130%DP 97-103%81濃度 驗收標(biāo)準(zhǔn)81驗證方案–含量測定中間精密度在各獨立系列中制備并分析至少10個的樣品（經(jīng)過完整樣品制備過程）或者至少6個的具有代表性批次樣品的混合樣品（經(jīng)過完整樣品制備過程）或疊加樣品(spiked)在下述條件下:1)不同的3天2)不同的2位分析人員3)不同的2套儀器(如果可能的話最好是不同的供應(yīng)商)4)不同的2根柱子(至少是不同的批次，最好是不同的供應(yīng)商)5)不同的2個制劑批次

每次都重新測試系統(tǒng)適用性，使用新的標(biāo)準(zhǔn)品，使用新的流動相.驗收標(biāo)準(zhǔn):整體的%RSD:5%82驗證方案–含量測定中間精密度82驗證方案–含量測定再現(xiàn)性每個實驗室都應(yīng)該測定至少10個的抽樣制劑或者至少6個的具有代表性批次樣品的混合樣品或疊加樣品.驗收標(biāo)準(zhǔn)1)2個平均值之間的差異應(yīng)3%.2)兩個實驗室的整體%RSD都應(yīng)5%83驗證方案–含量測定再現(xiàn)性83驗證方案–含量測定檢測限在檢測限（LOD）濃度水平根據(jù)待測輔料混合溶液的疊加分析核實LOD(n=1).必要時額外測定較高或較低濃度的樣品LOD估計實例:

1)建立噪音水平

2)LOD的估計:3倍于噪音水平.定量限

在定量限（LOQ）濃度水平根據(jù)待測輔料混合溶液的疊加分析核實LOQ(n=6).必要時額外測定較高或較低濃度的樣品.標(biāo)準(zhǔn):1)6次注射進羊的RSD%均:10%2)單個回收率:85-115%;平均回收率:90-110%3)S/N比大約為10:1(如果上述標(biāo)準(zhǔn)達不到10：1可能會更高)84驗證方案–含量測定檢測限84驗證方案–含量測定溶液的穩(wěn)定性標(biāo)準(zhǔn)溶液:用原溶液中制備3份單獨的的中等標(biāo)準(zhǔn)范圍的稀釋液.按照用新鮮配制的標(biāo)準(zhǔn)品得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線分析至少1個月.(或者如果少于1個月的話，就分析的時間長度可以是預(yù)期使用的時間)樣品溶液:使用3個中等含量的疊加樣品(含量的100%).按照用新鮮配制標(biāo)準(zhǔn)品得到的曲線分析至少1周.

記錄樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的儲存條件.驗收標(biāo)準(zhǔn):樣品和標(biāo)準(zhǔn)品濃度的平均回收率應(yīng)在平均濃度（T0）2%范圍之內(nèi).單個樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的回收率:T0的3%范圍內(nèi)

85驗證方案–含量測定溶液的穩(wěn)定性85驗證方案–含量測定穩(wěn)健性

可以采用色譜的穩(wěn)健性時，注射6次系統(tǒng)適應(yīng)性樣品，改變流動參數(shù)，來確定方法的方法的穩(wěn)健性，:? 流動相的組成:(+/-)5%相對于有機相? 流動相的pH:(+/-)0.2個單位

? 柱溫:(+/-)5C

? 流速:(+/-)20%變異

? 緩沖液的濃度:(+/-)10%摩爾濃度柱的穩(wěn)健性:?至少3根不同批次或者來自不同供應(yīng)商的（如果可能的話）柱子86驗證方案–含量測定穩(wěn)健性86驗證方案–含量測定系統(tǒng)適用性測試(perUSP<621>)注射6針中間含量的溶液(活性藥物+雜質(zhì))驗收標(biāo)準(zhǔn)1)峰響應(yīng)值的RSD%:2%2)保留時間（RT）的RSD%:5%3)托尾因子:0.5T2.54)分離度:基線峰之間的分離度包括溶劑前沿,通常應(yīng)1.5.5)容量因子:1.5靈敏度樣品分離度樣品87驗證方案–含量測定系統(tǒng)適用性測試(perUSP<62測樣順序系統(tǒng)適用性測定洗脫空白溶液/輔料靈敏度樣品測定分離度樣品測定洗脫線性測定QC樣品洗脫樣品核對標(biāo)準(zhǔn)品88測樣順序系統(tǒng)適用性測定88MethodTransfer89MethodTransfer89ModelwithGeneralTimelineforTechnologyTransferPhaseIPhaseIIAClinicalTrialsPhaseIIIClinicalTrialsFilingandLaunchEarlyDevelopmentStartingPoint-(SourcingDecision)RegistrationBatches(PhaseIIIClinicalTrials)Pre-Validation(FinalScale-UpActivities)Validation*LaunchFilePAIFullDevelopmentEndPointFilingandLaunchProcessOutputsDevelopmentActivitiesDevelopmentReportsPDIRTTPPTTSPIRPhaseIIbTransferSignoffAcceptanceAMTR(In-Processtesting)AnalyticalPre-TransferAnalyticalMethodTransferAMTRMicroMethodTransferMDDSMMTRADDSPTRTimelineforActivityTTS–TechnologyTransferStrategyTTPP–TechnologyTransferProjectPlanPIR–ProductIntroductionReportPDIR–PharmaceuticalDevelopmentInterimReportReportNameAbbreviationsADDS-AnalyticalDevelopmentDocumentationSetAMTR–AnalyticalMethodTransferReportAMTR(In-ProcessTesting)–AnalyticalMethodTransferReportforin-processtestingtransferPTR–ProductTransferReportMMTR–MicrobiologicalMethodTransferReportMDDS–MicrobiologicalDevelopmentDocumentationSetOngoingActivity(asrequired)*Validationmayoccurpriortoregulatorysubmission90ModelwithGeneralTimelinefoScope分析技術(shù)轉(zhuǎn)移的任務(wù)DifferenttaskspartoftheAnalyticalTechnologyTransferare:analyticalmethods(分析方法)Specifications(規(guī)格)Stability(穩(wěn)定性)referencematerials(標(biāo)準(zhǔn)物)cleaningvalidation(清潔驗證)releaseofregistrationandvalidationbatches(注冊批量和驗證批量的釋放)Knowledge(知識)91Scope分析技術(shù)轉(zhuǎn)移的任務(wù)Differenttasks方法轉(zhuǎn)移過程(JNJ)GATTATTProjectPlanMethodDevelopmentATRingTestMethodValidationDevelopmentDocumentSetMethodTransferTransferofOwnershipATTStrategyTechnologyTransferStrategyPhaseDevelopmentPhaseSiteTransferPhase92方法轉(zhuǎn)移過程(JNJ)GATTATTProjectPl方法轉(zhuǎn)移過程(JNJSOP)PhaseIPreparationIddocumentation,personnelfromeachlabVerifyequipmentequivalencyDeterminetrainingrequirementDeterminetestingrequirementGenerateprotocolApprovalprotocolPhaseIIExecutionObtaintestsamplesandstandardsTrainreceivinglabanalystsCompletetrainingdocumentPerformequipmenteqtesting(ifapplicable)PerformtransfertestingReviewandapprovedata(eachlabindividually)Generatesummaryreport(receivinglab)93方法轉(zhuǎn)移過程(JNJSOP)PhaseIPrepara方法轉(zhuǎn)移過程PhaseIIIEvaluationandReportEvaluatetestresultsperacceptancecriteriaestablshedinTransferProtocol(Originatinglab)Writefinalreport(Originatinglab)Reviewandapprovefinalreport94方法轉(zhuǎn)移過程PhaseIIIEvaluationand方法轉(zhuǎn)移計劃書范例:

AReleaseRateMethodProtocolIndex1.0 Scope

2.0 Attachments

3.0 Objective4.0 Facilities5.0

LocationofRawData6.0

Training7.0 EquipmentandMaterials8.0 TestingandAcceptanceCriteria9.0

DiscussionandConclusion

10.0

ReferenceDocuments95方法轉(zhuǎn)移計劃書范例:

AReleaseRateMeth方法轉(zhuǎn)移計劃書范例:AReleaseRateMethod7.1 Drugreleaserate(AAM1.810)TestingSampleswillbetestedinaccordancewithAAM1.810.Bothsendingandreceivinglaboratorieswillperformtestingasperthefollowingplan.Bothsendingandreceivinglabswilleachprepare12individualsamplepreparationsforbothstrengthsasperthemethod.Thesendinglaboratorywillusedatapreviouslygeneratedforthelotclearance.

Thereceivinglabwillsummarizetheirresultsandsendthemtothetransferringlabforevaluationagainsttheacceptancecriteria.Anydeviationsfromtheprotocolmustbereportedtothetransferringlabforevaluationanddocumentedinthetransferreport.Allindividualresultsmustbereportedinmg/cm2to3decimalplaces(e.g.0.152mg/cm2).Meansmustbecalculatedonun-roundedresultsandmustbereportedto3decimalplaces.96方法轉(zhuǎn)移計劃書范例:AReleaseRateMetho方法轉(zhuǎn)移計劃書范例:AReleaseRateMethodSystemsuitabilityrequirementsofthemethodmustbeachievedinbothlabs.Theabsolutedifferenceinmeancumulativeamountsreleased(mg/cm2)betweenbothlabsateachofthespecifiedtimeintervalsmustbe5.0%ofthelabelclaim.The%RSD(n=24)ofbothlabsresultsmustbe10%forthe0.083,0.25,0.5htimeintervalsand15%forthe1and2htimeintervals.97方法轉(zhuǎn)移計劃書范例:AReleaseRateMetho方法轉(zhuǎn)移計劃書范例:AReleaseRateMethodRationale: Thedrugreleaserateacceptancecriteriaofabsolutedifferenceinmeancumulativeamountsreleased(mg/cm2)betweenbothlabsisspecifiedinIQP(InternationalQualityProcedure)66titled“AnalyticalMethodTransfer”andforthemidandhighlevelsinSOP9-406titled“NDA-LevelMethodValidationProtocolsforChromatographicQuantitativeAnalyticalMethodsforSmallMolecules”.Thesamplesizeperlabhasbeenincreasedfrom6to12tobetterdeterminethemeanforlotsthathavehigherthannormaldrugcontentvariation.SeeTable1.The%RSDacceptancecriteriadiffersfromthemethodvalidationacceptancecriteriaforreproducibilityperSOP9-406.Thismodifiedacceptancecriteriaistoaccountforthespecifiedlotshavingahigherthannormaldrugcontentvariationwhichmanifestsitselfinhighervariationinthecumulativedrugreleaseduringthelatertimeintervalsandisnotindicativeofhigherinstrumentvariation.SeeTable1.98方法轉(zhuǎn)移計劃書范例:AReleaseRateMetho方法轉(zhuǎn)移計劃書范例:AReleaseRateMethod99方法轉(zhuǎn)移計劃書范例:AReleaseRateMetho分析方法的建立與驗證上海浦融生物科技有限公司ChamQuest100分析方法的建立與驗證上海浦融生物科技有限公司1分析方法的建立與驗證0.引言1.分析方法在藥品開發(fā)中的應(yīng)用2.分析方法開發(fā)的基本問題3.分析方法的驗證與轉(zhuǎn)移101分析方法的建立與驗證0.引言20.引言上海浦融生物科技有限公司ChamQuest1020.引言上海浦融生物科技有限公司3藥物質(zhì)量體系InvestigationalProductsPharmaceuticalDevelopmentTechnologyTransferCommercialManufacturingProductDiscontinuationGMPManagementResponsibilityKnowledgeManagementQualityRiskManagementProcessPerformance&ProductQualityMonitoringSystemCorrectiveAction/PreventativeAction(CAPA)SystemChangeManagementSystemManagementReviewPQSelementsEnablers103藥物質(zhì)量體系InvestigationalProducts強生技術(shù)轉(zhuǎn)移模式PhaseIPhaseIIAClinicalTrialsPhaseIIIClinicalTrialsFilingandLaunchEarlyDevelopmentStartingPoint-(SourcingDecision)RegistrationBatches(PhaseIIIClinicalTrials)Pre-Validation(FinalScale-UpActivities)Validation*La