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生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏46、法律有權(quán)打破平靜。——馬·格林47、在一千磅法律里,沒有一盎司仁愛?!?8、法律一多,公正就少?!小じ焕?9、犯罪總是以懲罰相補(bǔ)償;只有處罰才能使犯罪得到償還。——達(dá)雷爾50、弱者比強(qiáng)者更能得到法律的保護(hù)?!ざ驙柹a(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏46、法律有權(quán)打破平靜。——馬·格林47、在一千磅法律里,沒有一盎司仁愛。——英國48、法律一多,公正就少?!小じ焕?9、犯罪總是以懲罰相補(bǔ)償;只有處罰才能使犯罪得到償還?!_(dá)雷爾50、弱者比強(qiáng)者更能得到法律的保護(hù)?!ざ驙柕诹律a(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏第一節(jié)生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)一、鋼琴伴奏在舞蹈基訓(xùn)教學(xué)中的作用(一)提高學(xué)生的韻律感舞蹈表演中節(jié)奏就是骨骼,但是在基礎(chǔ)訓(xùn)練中很多學(xué)生僅僅掌握了一定的節(jié)拍,對節(jié)奏感的把握不夠精準(zhǔn),對節(jié)拍和節(jié)奏感孰輕孰重不了解,在舞蹈表演中也無法更好的體現(xiàn)出韻律感。在舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中,鋼琴伴的每個音節(jié)、每個樂曲都有其內(nèi)在的節(jié)奏感,通過節(jié)奏緊密連貫,學(xué)生從中體會到更多的情感,再利用肢體語言表現(xiàn)出來[1]。增強(qiáng)舞蹈表演的韻律感,觀眾才能享受舞蹈帶來的美感。(二)提高學(xué)生舞蹈表現(xiàn)力在舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中采用鋼琴伴奏,不僅能夠讓學(xué)生提升美感體驗(yàn)、樂感、節(jié)奏感,在舞蹈動作的理解上也有幫助。鋼琴多變的旋律,清亮的音色,飽滿的和聲,帶給學(xué)生較強(qiáng)的感染力,豐富學(xué)生的藝術(shù)想象,從而樹立學(xué)生正確的音樂審美觀。在這樣的教學(xué)環(huán)境下,能夠更好的提升學(xué)生舞蹈技能,在舞蹈表演創(chuàng)作中更多的情感投入。所以說,在舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中鋼琴伴奏有很大的作用,在培養(yǎng)學(xué)生音樂修養(yǎng)的同時,還能讓學(xué)生的舞蹈表演能力提高。(三)有助于舞蹈情感培養(yǎng)通過鋼琴伴奏,?非?中的情感色彩能夠充分的表現(xiàn)出來,讓學(xué)生更快投入到舞蹈所表現(xiàn)的情感氛圍中,學(xué)生利用肢體語言把音樂情感更形象、更具體的表達(dá)出來,讓音樂與情感合二為一,舞蹈表演更有感染力。通過鋼琴音樂的旋律、節(jié)奏、和聲,在舞蹈情感基調(diào)的把握上有著很大的幫助,學(xué)生把音樂中的情感使用肢體、表情、眼神表達(dá)出來,觀眾通過視、聽相結(jié)合體會到藝術(shù)的魅力[2]。也可以說,通過鋼琴音樂的情感激發(fā),學(xué)生再把音樂中的內(nèi)在情感使用舞蹈語言表現(xiàn)出來,達(dá)到舞蹈和音樂的高度融合,情感能夠更好的傳遞給觀眾。所以,鋼琴伴奏在舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中并不是襯托,而是有助于學(xué)生舞蹈情感的培養(yǎng)與表達(dá),增添舞蹈表現(xiàn)的感染力。二、舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中鋼琴伴奏者的能力(一)了解舞蹈發(fā)展及教學(xué)特點(diǎn)鋼琴伴奏者對舞蹈的歷史發(fā)展、教學(xué)特點(diǎn)、舞蹈語言有足夠的了解,才能更熟悉不同舞蹈的音樂類型,為滿足舞蹈訓(xùn)練的曲目需求,而選擇適合的伴奏曲目。鋼琴伴奏所營造出來的音樂氣氛才會與舞蹈教學(xué)相符合,從而提高教學(xué)質(zhì)量。當(dāng)然,鋼琴曲目在彈奏中要旋律清晰,節(jié)奏準(zhǔn)確。(二)掌握教學(xué)任務(wù)和教學(xué)內(nèi)容因?yàn)樵谖璧富A(chǔ)訓(xùn)練中,每一個動作的編排都有一定的含義,所以在伴奏曲目的選擇上要用舞蹈動作相匹配的音樂。當(dāng)然為了保證教學(xué)質(zhì)量,伴奏者還可以提前與舞蹈教師溝通好相關(guān)的音樂情感、風(fēng)格、速度、變化等。比如上課之前可以選擇流暢度較強(qiáng)的分解和弦,讓學(xué)生平復(fù)心情,做好準(zhǔn)備動作;其次,進(jìn)入舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練就會變得較為緊湊,包括小彈腿、小踢腿,這部分動作是訓(xùn)練小腿的爆發(fā)力,這個時候就需要鋼琴伴奏音樂高亢激昂、節(jié)奏多變、輕快,氣息較短、速度較短快,讓動作與音樂的配合更加快速、輕盈;最后,在基礎(chǔ)訓(xùn)練課完成后是練習(xí)跳躍,小跳、中跳、大跳及相應(yīng)技巧,要循序漸進(jìn)的練習(xí)。跳躍的教學(xué)目的是訓(xùn)練學(xué)生的空中停留時間,要求有強(qiáng)勁的力度。在音樂曲目的選擇上可以是不完全小節(jié)弱拍起的314拍,讓學(xué)生聽到音樂后更有跳躍的動力,從而隨著節(jié)拍身體向上跳躍至最高點(diǎn)[3]。這個時候鋼琴彈奏時要增強(qiáng)琴鍵力度,讓身體在空中停留時間的前后,音樂落差更為明顯。(三)要有豐富的曲目儲備舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練的內(nèi)容比較多,包括體態(tài)站立訓(xùn)練,把上、把下訓(xùn)練,中間及技巧訓(xùn)練等。在每一節(jié)課中,都會訓(xùn)練到學(xué)生肌肉的張力、關(guān)節(jié)的控制力及技術(shù)能力等方面,而每一種動作都要有與之相匹配的音樂。這就要求鋼琴伴奏者有大量的曲目儲備,根據(jù)訓(xùn)練的需要選擇合適的音樂。另外,舞蹈種類比較多樣,在教學(xué)中針對這一特殊性,伴奏者要對不同類型的曲目進(jìn)行收集,比如國內(nèi)外經(jīng)典古典曲目、現(xiàn)代曲目,曲目儲備量越大即興伴奏能力越強(qiáng),在舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中與教師配合度更高。(四)具備音樂與舞蹈相融合的能力鋼琴伴奏和鋼琴獨(dú)奏有著本質(zhì)的區(qū)別,在獨(dú)奏中是以創(chuàng)新的編曲來表達(dá)演奏者的情感及思想,不會受到周圍環(huán)境的限制。但鋼琴伴奏是為了輔助教學(xué),在舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中只是教師與學(xué)生之間的紐帶。所以,鋼琴伴奏者要把演奏的曲目與教學(xué)過程相結(jié)合,在曲目的選擇上以舞蹈動作要表現(xiàn)的情感與場景為主,這樣能夠幫助學(xué)生更好的用肢體來表現(xiàn)情感,從而提高舞蹈能力。三、結(jié)束語舞蹈是最為古老的藝術(shù)形式,通過肢體、動作、眼神能夠把情感表達(dá)的淋漓盡致,從而給人美的享受。不過,在舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中要重視鋼琴伴奏的作用,根據(jù)舞蹈教學(xué)發(fā)展需求,不斷提升鋼琴伴奏能力,讓音樂與舞蹈更好的融合,不僅能夠豐富課堂形式,還能讓學(xué)生深刻體會到舞蹈的魅力,從而在訓(xùn)練中不斷提升自身舞蹈技能,發(fā)展成為一名優(yōu)秀的舞者。1引言初中數(shù)學(xué)課程比較單調(diào)乏味,并且抽象,其中的幾何圖形、函數(shù)知識更是存在比較大的難度,部分學(xué)生因?qū)W習(xí)有難度而畏懼學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)。若不對數(shù)學(xué)課堂進(jìn)行改變或是添加新的教學(xué)手段,難免會造成學(xué)生對數(shù)學(xué)課程失去興趣。幾何畫板的引入將“數(shù)”與“形”很好地結(jié)合在一起,對提升學(xué)生動手實(shí)踐能力、打破傳統(tǒng)教學(xué)模式起到關(guān)鍵性的作用,也使學(xué)生對數(shù)學(xué)課程的觀念發(fā)生轉(zhuǎn)變,提高了數(shù)學(xué)課程的趣味性,對提升學(xué)生的思維能力、空間能力都起到了積極作用。2幾何畫板概述幾何畫板是一款多功能綜合性比較強(qiáng)的操作軟件,它可以運(yùn)用于多個領(lǐng)域,如數(shù)學(xué)、物理、機(jī)械、建筑設(shè)計(jì)等在人們的日常生活、學(xué)習(xí)和工作中具有至關(guān)重要作用的領(lǐng)域。這個軟件最早應(yīng)用于美國的教學(xué)活動中,后來逐漸流傳到我國的初中數(shù)學(xué)教學(xué)中,并且進(jìn)一步得到發(fā)展。當(dāng)前,幾何畫板不僅可以操作點(diǎn)線面等平面幾何圖形,而且可以測量圖形參數(shù),并進(jìn)行相關(guān)計(jì)算、變換圖形,以及制作圖形表格和標(biāo)簽。它具有極強(qiáng)的實(shí)踐操作功能,能夠滿足不同專業(yè)的運(yùn)用需求,而且大部分又增加了許多操作功能,如在教學(xué)應(yīng)用上可以制作幾何圖形變化動畫,在初中數(shù)學(xué)教學(xué)中能夠起到很好的輔助作用。3幾何畫板的教學(xué)優(yōu)勢進(jìn)行動態(tài)畫面展示,能夠降低教學(xué)難度初中數(shù)學(xué)教學(xué)內(nèi)容由復(fù)雜的圖形和數(shù)據(jù)組成,學(xué)生經(jīng)常會因?yàn)闊o法構(gòu)建出圖形的具體樣式和變換規(guī)律,從而導(dǎo)致教學(xué)效果不佳,學(xué)生學(xué)習(xí)起來非?;逎y懂。由于幾何畫板具有非常顯著的作用,教師能夠通過利用幾何畫板展示其動態(tài)特性,有效降低數(shù)學(xué)教學(xué)難度,讓學(xué)生能夠直觀地理解數(shù)學(xué)知識,對動態(tài)變化中的復(fù)雜圖形更容易理解。更好地展示圖形細(xì)節(jié)初中數(shù)學(xué)教材中所展示的幾何圖形內(nèi)容一般用平面圖形的方式展現(xiàn),而這些平面圖形無法進(jìn)行縮放和多角度觀察,因此,理解幾何知識的難度就會相應(yīng)增大。對于數(shù)學(xué)幾何知識教學(xué)來說,在一些結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜、數(shù)據(jù)比較龐大時,教師通過幾何畫板的圖形展示功能,可以讓學(xué)生清晰地觀察圖形的各個角度和比例,爾后掌握圖形的變化規(guī)律,把抽象的圖形轉(zhuǎn)變?yōu)榫呦蟮睦碚撝R。幾何畫板使用起來方便、快捷由于幾何畫板是憑借現(xiàn)代網(wǎng)絡(luò)科技而設(shè)計(jì)的一種圖形軟件,因此,幾何畫板具有軟件的優(yōu)勢,使用起來非常方便、快捷,能夠滿足絕大部分教師的教學(xué)需求。近幾年來,幾何畫板軟件得到廣泛應(yīng)用,各種軟件功能越來越完善,教師和學(xué)生在使用時更加方便、快捷、實(shí)用,其中儲存的數(shù)學(xué)知識信息越來越豐富。教師可以通過菜單欄進(jìn)行簡單操作,設(shè)定一個程序就能完成整個教學(xué)過程,這對于數(shù)學(xué)教學(xué)很有幫助,能夠讓學(xué)生更好地尋找解決問題的方法,進(jìn)行自我探索,更容易進(jìn)行數(shù)學(xué)探究,增強(qiáng)數(shù)學(xué)教學(xué)效果。4幾何畫板在初中數(shù)學(xué)教學(xué)中的具體運(yùn)用運(yùn)用精確而動態(tài)的幾何圖形首先,在數(shù)學(xué)教學(xué)活動中,教師需要設(shè)計(jì)大量的幾何圖形,針對具體的問題向?qū)W生進(jìn)行詳細(xì)講解,從更加直觀的角度讓學(xué)生理解幾何問題的重點(diǎn)。根據(jù)數(shù)學(xué)問題的內(nèi)容繪制出貼合內(nèi)容的圖形是十分重要的,圖形的精確性可以讓學(xué)生認(rèn)識到數(shù)學(xué)學(xué)科的嚴(yán)謹(jǐn)性,提升學(xué)生的數(shù)學(xué)素養(yǎng)。幾何畫板可以繪制出任何幾何圖形,而且可以根據(jù)幾何圖形的動態(tài)變現(xiàn)做出相應(yīng)的變化,為教師設(shè)計(jì)學(xué)案過程節(jié)省大量的時間。其次,初中數(shù)學(xué)教學(xué)中的函數(shù)知識是一個比較抽象的感念,傳統(tǒng)的黑板繪制函數(shù)圖形很難讓學(xué)生很好地理解概念的內(nèi)容。通過幾何畫板與電腦相連,可以將函數(shù)知識以一個動態(tài)的方式展現(xiàn)在學(xué)生面前。如“二次函數(shù)”的圖形展示,通過幾何畫板畫出動態(tài)的函數(shù)圖形展示在多媒體設(shè)備上面,讓學(xué)生很好地了解函數(shù)之間的參數(shù)關(guān)系。這一方法十分直觀,容易讓學(xué)生理解相應(yīng)的圖形概念。設(shè)計(jì)數(shù)學(xué)模擬實(shí)踐傳統(tǒng)的數(shù)學(xué)教學(xué)中,課堂的大部分時間是教師的講解時間,給學(xué)生實(shí)踐的時間十分有限,使得學(xué)生對數(shù)學(xué)的興趣逐漸減弱。隨著幾何畫板運(yùn)用的普及,學(xué)生可以利用畫板工具,在教學(xué)中開展自主實(shí)踐,打破傳統(tǒng)的數(shù)學(xué)教學(xué)模式,提升動手實(shí)踐能力。學(xué)生在實(shí)踐動手過程中能夠更好地?w驗(yàn)學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)的樂趣,對于數(shù)學(xué)知識的理解更加容易,更好地鞏固所學(xué)知識。創(chuàng)設(shè)解決數(shù)學(xué)問題的情境為提升學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,教師常用的方式是將學(xué)生感興趣的問題轉(zhuǎn)化成為數(shù)學(xué)問題,這一過程需要創(chuàng)設(shè)教學(xué)情境,以引發(fā)學(xué)生的好奇心理,激起學(xué)生的求知欲望。把相關(guān)問題與生活中常遇到的問題聯(lián)系起來,其效果將會更加明顯。因此,教師要學(xué)會創(chuàng)建數(shù)學(xué)問題情境,引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行思考,形成自主思考發(fā)現(xiàn)的學(xué)習(xí)方式。提供豐富多彩的課堂內(nèi)容現(xiàn)在教師已經(jīng)充分認(rèn)識到初中數(shù)學(xué)教學(xué)方式的多樣性,要通過各種教學(xué)方式的應(yīng)用,讓學(xué)生自己動手,積極應(yīng)對問題、解決問題。將幾何畫板引入初中數(shù)學(xué)教學(xué)過程中,需要教師引導(dǎo)學(xué)生認(rèn)識幾何畫板所帶來的學(xué)習(xí)樂趣,讓學(xué)生更好地接受和應(yīng)用幾何畫板,通過幾何畫板解決學(xué)習(xí)中的問題。5初中課堂中運(yùn)用幾何畫板的策略要創(chuàng)建活躍的課堂氛圍創(chuàng)建良好的課堂氛圍對于提升課堂的教學(xué)效率起著十分重要的作用。因?yàn)閿?shù)學(xué)課程比較單調(diào)枯燥而抽象,傳統(tǒng)方式的幾何教學(xué)很容易造成課堂氣氛凝重、缺乏活力,學(xué)生不愿意聽課,教師也沒有很高的熱情,這就會造成學(xué)習(xí)和教學(xué)效果的弱化。因此,教師在應(yīng)用幾何畫板輔助數(shù)學(xué)教學(xué)時要注意教學(xué)環(huán)境的營造,在數(shù)學(xué)教學(xué)中要考慮是否有必要使用幾何畫板,什么時候使用適合,等等。梳理學(xué)生的解題思路幾何畫板輔助教學(xué),可以促使學(xué)生參與學(xué)習(xí),是促進(jìn)學(xué)生自主動手、自主學(xué)習(xí)的有效手段。這一過程需要教師通過幾何畫板構(gòu)建數(shù)學(xué)實(shí)踐題目,并引導(dǎo)學(xué)生掌握解題思路。體現(xiàn)以學(xué)生為主體的教學(xué),培養(yǎng)學(xué)生的自主學(xué)習(xí)能力在初中數(shù)學(xué)教學(xué)中應(yīng)用幾何畫板,主要體現(xiàn)以學(xué)生為主體,讓學(xué)生自主利用幾何畫板解答數(shù)學(xué)問題、理解數(shù)學(xué)知識,調(diào)動學(xué)生的積極性,激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,讓學(xué)生通過幾何圖形直觀地了解幾何知識,促進(jìn)學(xué)生自主學(xué)習(xí)幾何知識。幾何畫板軟件能夠把幾何圖形直觀地展現(xiàn)出來,運(yùn)用動畫形式把幾何圖形進(jìn)行變形和組合,使學(xué)生能夠清楚地知道復(fù)雜的幾何圖形是如何組合變形的,以此激發(fā)學(xué)生的自主探索興趣。同時,學(xué)生在操作幾何畫板的過程中培養(yǎng)了實(shí)踐動手能力。6結(jié)論在初中數(shù)學(xué)教學(xué)中應(yīng)用幾何畫板,可以提升教學(xué)質(zhì)量,增強(qiáng)學(xué)生對數(shù)學(xué)教學(xué)的學(xué)習(xí)熱情,加深對數(shù)學(xué)知識的理解。但是在幾何畫板的應(yīng)用中,仍需要教師把握“度”,依托課本教材,靈活運(yùn)用,以學(xué)生為主體,由教師主導(dǎo)學(xué)生的參與度,激發(fā)學(xué)生的探究興趣,只有這樣才能實(shí)現(xiàn)初中數(shù)學(xué)課堂教學(xué)相長的目標(biāo)。生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏46、法律有權(quán)打破平靜?!R·格林生產(chǎn)1生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件2生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件3生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件4生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件5二、種子制備工藝二、種子制備工藝6實(shí)驗(yàn)室種子制備階段:瓊脂斜面固體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)搖瓶液體培養(yǎng)生產(chǎn)種子制備階段:種子罐擴(kuò)大培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室種子制備階段:生產(chǎn)種子制備階段:7對接種物的一般要求:1)應(yīng)以高產(chǎn)菌株中分離獲得的純系作為出發(fā)菌株。菌株純度高,性狀穩(wěn)定,不易發(fā)生變異。2)生理活性強(qiáng)。若以菌體細(xì)胞為接種物,應(yīng)采取正在旺盛生長的繁殖期細(xì)胞,菌體細(xì)胞應(yīng)均勻,同步率高。以孢子為接種物,應(yīng)采用易于萌發(fā)的孢子。對接種物的一般要求:1)應(yīng)以高產(chǎn)菌株中分離獲得的純系作為出發(fā)8一)實(shí)驗(yàn)室種子制備
對于產(chǎn)孢子能力強(qiáng)的及孢子發(fā)芽、生長繁殖快的菌種可以采用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)孢子,孢子可直接作為種子罐的種子;這樣操作簡便,不易污染雜菌。
如:檸檬酸生產(chǎn)的制種,用麩皮培養(yǎng)基產(chǎn)生大量孢子直接用于種子罐接種。一)實(shí)驗(yàn)室種子制備對于產(chǎn)孢子能力強(qiáng)的及孢子發(fā)芽、生長9
對于產(chǎn)孢子能力不強(qiáng)或孢子發(fā)芽慢的菌種,可以用搖瓶液體培養(yǎng)法。孢子接入含液體培養(yǎng)基的搖瓶中,恒溫振蕩培養(yǎng),獲得菌絲體,作為種子。
如:用灰色鏈霉菌生產(chǎn)鏈霉素用卡那鏈霉菌生產(chǎn)卡那霉素對于產(chǎn)孢子能力不強(qiáng)或孢子發(fā)芽慢的菌種,可以用搖瓶10
對于不產(chǎn)孢子的細(xì)菌,生產(chǎn)上一般采用將試管斜面菌種接入茄瓶斜面或搖瓶培養(yǎng)如:谷氨酸棒桿菌生產(chǎn)谷氨酸對于不產(chǎn)孢子的細(xì)菌,生產(chǎn)上一般采用將試管斜面菌種接入111、孢子的制備1)細(xì)菌孢子的制備細(xì)菌的斜面培養(yǎng)基多采用碳源限量而氮源豐富的配方。培養(yǎng)溫度一般為37?C。細(xì)菌菌體培養(yǎng)時間一般為1-2天,產(chǎn)芽孢的細(xì)菌培養(yǎng)則需要5-10天。1、孢子的制備1)細(xì)菌孢子的制備122)霉菌孢子的制備霉菌孢子的培養(yǎng)一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。培養(yǎng)的溫度一般為25-28?C。培養(yǎng)時間一般為4-14天。2)霉菌孢子的制備133)放線菌孢子的制備放線菌的孢子培養(yǎng)一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。培養(yǎng)溫度一般為28?C。培養(yǎng)時間為5-14天。3)放線菌孢子的制備14二)生產(chǎn)種子制備種子罐級數(shù)的確定種子罐級數(shù)是指制備種子需逐級擴(kuò)大培養(yǎng)的次數(shù)。一般根據(jù)菌種生長特性、菌體繁殖速度以及所采用發(fā)酵罐的容積而定。二)生產(chǎn)種子制備種子罐級數(shù)的確定種子罐級數(shù)是指制備種子需逐級15對于生長快的細(xì)菌,種子用量比例小,故種子罐相應(yīng)也少。如:谷氨酸生產(chǎn)中,采用茄瓶斜面或搖瓶種子接入種子罐于32℃培養(yǎng)7~10h,菌體濃度達(dá)108~109個/ml,即可接入發(fā)酵罐作為種子。這稱為一級種子罐擴(kuò)大培養(yǎng),也稱二級發(fā)酵。對于生長快的細(xì)菌,種子用量比例小,故種子罐相應(yīng)也少。16
生長較慢的菌種,如青霉素生產(chǎn)菌種,其孢子懸浮液接入一級種子罐擴(kuò)大培養(yǎng)于27℃培養(yǎng)40h,此時孢子發(fā)芽,長出短菌絲,再移至含有新鮮培養(yǎng)基的第二級種子罐,于27℃培養(yǎng)10~24h,菌絲迅速繁殖,獲粗壯菌體,即可移至發(fā)酵罐作為種子。這稱為二級種子罐擴(kuò)大培養(yǎng),也稱三級發(fā)酵。一般50m3發(fā)酵罐都采用三級發(fā)酵生長較慢的菌種,如青霉素生產(chǎn)菌種,其孢子懸浮液接入一17
生長更慢的菌種,鏈霉素生產(chǎn)菌種灰色鏈霉菌,一般采用三級種子罐擴(kuò)大培養(yǎng)(四級發(fā)酵)
在小型罐(5~500L)中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時,通常采用直接將孢子或菌絲體接入罐中發(fā)酵,這可稱為一級發(fā)酵。生長更慢的菌種,鏈霉素生產(chǎn)菌種灰色鏈霉菌,一般采用三18
種子罐的級數(shù)越少,越有利于簡化工藝和控制,并可減少由于多次移種而帶來的染菌的機(jī)會。
但也必須考慮盡量延長發(fā)酵罐生產(chǎn)產(chǎn)物的時間,縮短由于種子發(fā)芽、生長而占用的非生產(chǎn)時間,以提高發(fā)酵罐的生產(chǎn)率。種子罐的級數(shù)越少,越有利于簡化工藝和控制,并可減少19
雖然種子罐級數(shù)隨產(chǎn)物的品種及生產(chǎn)規(guī)模而定,但也與所選用工藝條件有關(guān)。
如改變種子罐的培養(yǎng)條件,加速了孢子發(fā)芽及菌體的繁殖,也可相應(yīng)地減少種子罐的級數(shù)。雖然種子罐級數(shù)隨產(chǎn)物的品種及生產(chǎn)規(guī)模而定,但也與所20第二節(jié)種子質(zhì)量的控制一、影響孢子質(zhì)量的因素及控制培養(yǎng)基培養(yǎng)條件培養(yǎng)時間和冷藏時間第二節(jié)種子質(zhì)量的控制一、影響孢子質(zhì)量的因素及控制211)原材料質(zhì)量生產(chǎn)過程中經(jīng)常出現(xiàn)種子質(zhì)量不穩(wěn)定的現(xiàn)象,其主要原因是原材料質(zhì)量波動。如:四環(huán)素、土霉素生產(chǎn)中,配制產(chǎn)孢斜面培養(yǎng)基用的麩皮,因小麥產(chǎn)地、品種、加工方法及用量的不同對孢子質(zhì)量均有一定影響。制備霉菌用的大米,其產(chǎn)地、顆粒大小、均勻程度不同,孢子質(zhì)量也不同。蛋白胨加工原料不同(如魚胨或骨胨)對孢子影響也不同。原材料質(zhì)量的波動,起主要作用的是其中的無機(jī)離子含量不同1、培養(yǎng)基1)原材料質(zhì)量生產(chǎn)過程中經(jīng)常出現(xiàn)種子質(zhì)量不穩(wěn)222)水質(zhì)的影響地區(qū)不同、季節(jié)變化和水源污染,均可造成水質(zhì)波動,影響種子質(zhì)量。菌種在固體培養(yǎng)基上可呈現(xiàn)多種不同代謝類型的菌落,氮源品種越多,出現(xiàn)的菌落類型也越多,不利于生產(chǎn)的穩(wěn)定。2)水質(zhì)的影響地區(qū)不同、季節(jié)變化和水源污染,均232、培養(yǎng)條件1)溫度溫度對多數(shù)品種斜面孢子質(zhì)量有顯著影響。
如:土霉素生產(chǎn)種子,在高于37℃培養(yǎng)時,孢子接入發(fā)酵罐后表現(xiàn)出糖代謝變慢,氨基氮回升提前,菌絲過早自溶,效價降低等2)濕度制備斜面孢子培養(yǎng)基的濕度對孢子的數(shù)量和質(zhì)量有較大影響。
不同濕度對龜裂鏈霉菌(產(chǎn)土霉素)斜面生長的影響相對濕度斜面外觀活孢子數(shù)(×108/支)16.5~19上部稀薄,下部稠,略黃1.225~36上部薄,中部均勻,發(fā)白2.340~45一片白,孢子豐富,稍皺5.73)通氣量一般需保證充足的通氣2、培養(yǎng)條件1)溫度溫度對多數(shù)品種斜面孢子質(zhì)量有顯著影響。2243、培養(yǎng)時間和冷藏時間(1)培養(yǎng)時間一般來說,衰老的孢子不如年輕的孢子,因?yàn)樗ダ系逆咦右言谥鸩竭M(jìn)入發(fā)芽階段,核物質(zhì)趨于分化狀態(tài)。過于衰老的孢子會導(dǎo)致生產(chǎn)能力的下降。措施:孢子培養(yǎng)的時間應(yīng)該控制在孢子量多、孢子成熟、發(fā)酵產(chǎn)量正常的階段終止培養(yǎng)。(2)冷藏時間冷藏對孢子質(zhì)量的影響與孢子成熟程度有關(guān)。如土霉素生產(chǎn)菌種孢子斜面培養(yǎng)4天左右即于4?C冰箱保存,發(fā)現(xiàn)冷藏7-8天菌體細(xì)胞開始自溶。而培養(yǎng)5天以后冷藏,20天未發(fā)現(xiàn)自溶。冷藏時間對孢子的生產(chǎn)能力也有影響。例如在鏈霉素生產(chǎn)中,斜面孢子在6?C冷藏兩個月后的發(fā)酵單位比冷藏一個月降低18%,冷藏3個月后降低35%。3、培養(yǎng)時間和冷藏時間(1)培養(yǎng)時間一般來說,衰老的孢子不如254、接種量接種量大小影響到培養(yǎng)基中孢子的數(shù)量,進(jìn)而影響菌體的生理狀況。4、接種量接種量大小影響到培養(yǎng)基中孢子的數(shù)量26二、影響種子質(zhì)量的因素及控制孢子的質(zhì)量培養(yǎng)基培養(yǎng)條件種齡接種量二、影響種子質(zhì)量的因素及控制孢子的質(zhì)量27營養(yǎng)成分適合種子培養(yǎng)的需要選擇有利于孢子發(fā)芽和菌體生長的培養(yǎng)基;營養(yǎng)上要易于被菌體直接吸收和利用;營養(yǎng)成分要適當(dāng)豐富和完全,氮源和維生素含量要高營養(yǎng)成分要盡可能與發(fā)酵培養(yǎng)基相近。1、培養(yǎng)基營養(yǎng)成分適合種子培養(yǎng)的需要1、培養(yǎng)基28(1)溫度(2)通氣量有足夠的通氣量可以提高種子質(zhì)量。例如,青霉素的生產(chǎn)菌種在制備過程中將通氣充足和不足兩種情況下得到的種子分別接入發(fā)酵罐內(nèi),它們的發(fā)酵單位可相差1倍。但也有例外,例如土霉素生產(chǎn)菌,一級種子罐的通氣量小對發(fā)酵有利。2、培養(yǎng)條件(1)溫度2、培養(yǎng)條件293、種齡種齡——種子罐中培養(yǎng)的菌體開始移入下一級種子罐或發(fā)酵罐時的培養(yǎng)時間。選擇適當(dāng)種齡的菌種接種十分重要
通常,種齡以菌體處于生命力極為旺盛的對數(shù)期,且培養(yǎng)液中菌體量還未達(dá)到最高峰時,較為合適。3、種齡種齡——種子罐中培養(yǎng)的菌體開始移入下一級種子罐或發(fā)酵30
過于年輕的種子接入發(fā)酵罐后,往往會出現(xiàn)前期生長緩慢、發(fā)酵周期延長、產(chǎn)物開始形成的時間推遲,造成異常發(fā)酵的情況。
過老的種子會引起生產(chǎn)能力下降,菌體過早自溶。過于年輕的種子接入發(fā)酵罐后,往往會出現(xiàn)前期生長緩慢、31
不同品種或同一品種的工藝條件不同,其菌齡也不一樣,一般要經(jīng)過多次試驗(yàn),考察其發(fā)酵罐中產(chǎn)量的多少來確定最適種齡。嗜堿性芽孢桿菌種齡對產(chǎn)酶(堿性蛋白酶)的影響不同品種或同一品種的工藝條件不同,其菌齡也不一樣,一般324、接種量接種量——是指移入的種子液體積和接種后培養(yǎng)液體積的比例。大多數(shù)抗生素發(fā)酵的最適接種量為7~15%,有時可增加到20~25%而由棒狀桿菌生產(chǎn)谷氨酸接種量只需1%
除了始于斜面培養(yǎng)的初次接種外,發(fā)酵過程的整個階段接種量一般均需0.5~10%的接種量。
接種量的大小取決于生產(chǎn)菌種在發(fā)酵中生長繁殖的速度。4、接種量接種量——是指移入的種子液體積和接種后培養(yǎng)液體積的33
采用較大的接種量可以縮短發(fā)酵罐中菌體繁殖到達(dá)高峰的時間,使產(chǎn)物的形成提前到來
近年來,不少廠家以加大種子量及采用豐富培養(yǎng)基作為獲得高產(chǎn)的措施;有的產(chǎn)品采用兩個種子罐接一個發(fā)酵罐的雙種法。如卡那霉素生產(chǎn)中采用雙種比單種的發(fā)酵單位提高8%,且達(dá)到產(chǎn)量高峰的時間提前。采用較大的接種量可以縮短發(fā)酵罐中菌體繁殖到達(dá)高峰的34
但如果接種量過大,往往使菌體生長過快、培養(yǎng)液黏度增加,造成溶氧不足,從而影響產(chǎn)物的合成。
如由嗜堿芽孢桿菌生產(chǎn)堿性蛋白酶的發(fā)酵,1%接種量產(chǎn)酶活最高,在0.5~4%之間雖有差別,但影響不大;如超過4%則酶產(chǎn)量明顯下降。但如果接種量過大,往往使菌體生長過快、培養(yǎng)液黏度增加35三、種子質(zhì)量的控制措施1、菌種穩(wěn)定性的檢查單菌分離,搖瓶測定生產(chǎn)能力以不低于其原有的生產(chǎn)活力為原則2、無(雜)菌檢查鏡檢肉湯或瓊脂斜面培養(yǎng)進(jìn)行檢查生化分析
如測定營養(yǎng)消耗的速度、pH變化、溶氧利用情況等3、接種技術(shù)壓差法
接種瓶壓力差火焰封口法在種子罐接種口周圍設(shè)有溝槽,溝槽內(nèi)注入少量酒精,點(diǎn)燃酒精使接種口被圍在一圈火焰之中;在火焰圈中即可將菌懸液倒入種子罐中。三、種子質(zhì)量的控制措施1、菌種穩(wěn)定性的檢查單36生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件37生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件38生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件39生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件40生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件41
從種子罐到發(fā)酵罐的接種,是通過接種管道,在壓力作用下進(jìn)行的。從種子罐到發(fā)酵罐的接種,是通過接種管道,在壓力42四、種子質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)
為了保證各級種子移種前的質(zhì)量,除了保證規(guī)定的培養(yǎng)條件外,在過程中還要定期取樣測定一些參數(shù)以觀察基質(zhì)的代謝變化及菌體形態(tài)是否正常。四、種子質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)為了保證各級種子移種前的質(zhì)量43通常測定的參數(shù)有:1、生化指標(biāo)1)pH2)培養(yǎng)基滅菌后磷、糖、氨基氮的含量2、細(xì)胞或菌體菌體形態(tài)、菌體濃度和培養(yǎng)液外觀(色素、顆粒等)單細(xì)胞:菌體健壯、菌形一致、均勻整齊,有的還要求有一定的排列或形態(tài);霉菌、放線菌:菌絲粗壯、對某些染料著色力強(qiáng)、生長旺盛、菌絲分枝情況和內(nèi)含物情況好。3、產(chǎn)物生成量在抗生素發(fā)酵中,產(chǎn)物生成量是考察種子質(zhì)量的重要指標(biāo),因?yàn)榉N子液中產(chǎn)物生成量的多少間接反映種子的生產(chǎn)能力和成熟程度。4、酶活力種子液中某種酶的活力,與目的產(chǎn)物的產(chǎn)量有一定的關(guān)聯(lián)。通常測定的參數(shù)有:1、生化指標(biāo)1)pH2、細(xì)胞或菌體菌體形44五、種子異常的分析菌種生長發(fā)育緩慢或過快菌絲結(jié)團(tuán)菌絲粘壁五、種子異常的分析菌種生長發(fā)育緩慢或過快菌絲結(jié)團(tuán)菌絲粘壁45第三節(jié)菌種保藏與復(fù)壯第三節(jié)菌種保藏與復(fù)壯46一、菌種保藏原理
主要是根據(jù)菌種的生理生化特點(diǎn),人工創(chuàng)造條件,使孢子或菌體的生長代謝活動盡量降低,以減少其變異。一般可通過保持培養(yǎng)基營養(yǎng)成分在最低水平、缺氧狀態(tài)、干燥和低溫,使菌種處于“休眠”狀態(tài),抑制其繁殖能力。一、菌種保藏原理主要是根據(jù)菌種的生理生化特點(diǎn),人工47二、保藏方法1、斜面冰箱保藏法4C;3-6個月2、沙土管保藏法產(chǎn)孢子或芽孢微生物,1年3、菌絲速凍法甘油或二甲基亞砜作為保護(hù)劑,-20C4、石蠟油封存法1年左右5、真空冷凍干燥保藏法任何微生物;一般5年以上6、液氮超低溫保藏法-196C;保護(hù)劑;保存期長二、保藏方法1、斜面冰箱保藏法4C;3-48生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件49三、國內(nèi)外重要菌種保藏機(jī)構(gòu)1、ATCC(AmericanTypeCultureCollection)
美國標(biāo)準(zhǔn)菌種收藏所,馬里蘭州,羅克維爾市2、CSH(ColdSpringHarborLaboratory)
冷泉港研究室,美國3、IAM(InstituteofAppliedMicrobiology,UniversityofTokyo)
日本東京大學(xué)應(yīng)用微生物研究所,日本東京4、IFO(InstituteforFermentation,Osaka)
發(fā)酵研究所,日本大阪三、國內(nèi)外重要菌種保藏機(jī)構(gòu)1、ATCC(American505、普通微生物菌種保藏管理中心(CCGMC)
中科院微生物所,北京6、工業(yè)微生物菌種保藏管理中心(CICC)
輕工部食品發(fā)酵工業(yè)科學(xué)研究所,北京5、普通微生物菌種保藏管理中心(CCGMC)51不同菌種保藏方法比較保藏方法適用范圍保存有效時間斜面適溫各類微生物(除病毒外)細(xì)菌、酵母1個月;霉菌、放線菌2-3個月斜面冰箱(4度)各類微生物(除病毒外)細(xì)菌、酵母3個月;霉菌、放線菌6個月礦油酵母、霉菌、放線菌低溫1年以上砂土管芽孢桿菌、產(chǎn)孢子霉菌、放線菌低溫1-數(shù)年冷凍干燥各類微生物低溫1-20年固體曲產(chǎn)大量孢子的霉菌低溫1-數(shù)年不同菌種保藏方法比較保藏方法適用范圍保存有效時間斜面適溫各類52四、菌種的復(fù)壯(rejuvenation)狹義的復(fù)壯是指在菌種已發(fā)生衰退的情況下,通過純種分離和生產(chǎn)性能測定等方法,從衰退的群體中找出未衰退的個體,以達(dá)到恢復(fù)該菌原有典型性狀的措施。廣義的復(fù)壯是指在菌種的生產(chǎn)性能未衰退前就有意識的經(jīng)常進(jìn)行純種的分離和生產(chǎn)性能測定工作,以期菌種的生產(chǎn)性能逐步提高。四、菌種的復(fù)壯(rejuvenation)狹義的復(fù)壯是指在菌53措施:純種分離淘汰衰退的個體選擇合適的培養(yǎng)條件措施:純種分離54
1、種子制備的過程(次重點(diǎn))理解:孢子、種子制備工藝2、種子質(zhì)量的控制(重點(diǎn))識記:影響孢子、種子質(zhì)量的因素理解:種子質(zhì)量的控制;種子異常的原因。小結(jié)1、種子制備的過程(次重點(diǎn))小結(jié)553、菌種保藏與復(fù)壯(次重點(diǎn))理解:菌種保藏原理;主要保藏方法。應(yīng)用:對不同菌種選擇適宜的保藏方法及復(fù)壯方法。3、菌種保藏與復(fù)壯(次重點(diǎn))56思考題1、什么是種子的擴(kuò)大培養(yǎng)?2、在大規(guī)模發(fā)酵的種子制備過程中,實(shí)驗(yàn)室階段和生產(chǎn)車間階段在培養(yǎng)基和培養(yǎng)物選擇上各有何特點(diǎn)?3、什么是發(fā)酵級數(shù)?發(fā)酵級數(shù)對發(fā)酵有何影響,影響發(fā)酵級數(shù)的因素有哪些?4、簡述菌種保藏的基本原理和菌種保藏方法。思考題1、什么是種子的擴(kuò)大培養(yǎng)?576、最大的驕傲于最大的自卑都表示心靈的最軟弱無力?!官e諾莎
7、自知之明是最難得的知識。——西班牙
8、勇氣通往天堂,怯懦通往地獄?!麅?nèi)加
9、有時候讀書是一種巧妙地避開思考的方法?!諣柶账?/p>
10、閱讀一切好書如同和過去最杰出的人談話。——笛卡兒Thankyou拯畏怖汾關(guān)爐烹霉躲渠早膘岸緬蘭輛坐蔬光膊列板哮瞥疹傻俘源拯割宜跟三叉神經(jīng)痛-治療三叉神經(jīng)痛-治療6、最大的驕傲于最大的自卑都表示心靈的最軟弱無力?!官e諾58生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏46、法律有權(quán)打破平靜。——馬·格林47、在一千磅法律里,沒有一盎司仁愛。——英國48、法律一多,公正就少?!小じ焕?9、犯罪總是以懲罰相補(bǔ)償;只有處罰才能使犯罪得到償還?!_(dá)雷爾50、弱者比強(qiáng)者更能得到法律的保護(hù)?!ざ驙柹a(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏46、法律有權(quán)打破平靜。——馬·格林47、在一千磅法律里,沒有一盎司仁愛?!?8、法律一多,公正就少?!小じ焕?9、犯罪總是以懲罰相補(bǔ)償;只有處罰才能使犯罪得到償還?!_(dá)雷爾50、弱者比強(qiáng)者更能得到法律的保護(hù)?!ざ驙柕诹律a(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏第一節(jié)生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)一、鋼琴伴奏在舞蹈基訓(xùn)教學(xué)中的作用(一)提高學(xué)生的韻律感舞蹈表演中節(jié)奏就是骨骼,但是在基礎(chǔ)訓(xùn)練中很多學(xué)生僅僅掌握了一定的節(jié)拍,對節(jié)奏感的把握不夠精準(zhǔn),對節(jié)拍和節(jié)奏感孰輕孰重不了解,在舞蹈表演中也無法更好的體現(xiàn)出韻律感。在舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中,鋼琴伴的每個音節(jié)、每個樂曲都有其內(nèi)在的節(jié)奏感,通過節(jié)奏緊密連貫,學(xué)生從中體會到更多的情感,再利用肢體語言表現(xiàn)出來[1]。增強(qiáng)舞蹈表演的韻律感,觀眾才能享受舞蹈帶來的美感。(二)提高學(xué)生舞蹈表現(xiàn)力在舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中采用鋼琴伴奏,不僅能夠讓學(xué)生提升美感體驗(yàn)、樂感、節(jié)奏感,在舞蹈動作的理解上也有幫助。鋼琴多變的旋律,清亮的音色,飽滿的和聲,帶給學(xué)生較強(qiáng)的感染力,豐富學(xué)生的藝術(shù)想象,從而樹立學(xué)生正確的音樂審美觀。在這樣的教學(xué)環(huán)境下,能夠更好的提升學(xué)生舞蹈技能,在舞蹈表演創(chuàng)作中更多的情感投入。所以說,在舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中鋼琴伴奏有很大的作用,在培養(yǎng)學(xué)生音樂修養(yǎng)的同時,還能讓學(xué)生的舞蹈表演能力提高。(三)有助于舞蹈情感培養(yǎng)通過鋼琴伴奏,?非?中的情感色彩能夠充分的表現(xiàn)出來,讓學(xué)生更快投入到舞蹈所表現(xiàn)的情感氛圍中,學(xué)生利用肢體語言把音樂情感更形象、更具體的表達(dá)出來,讓音樂與情感合二為一,舞蹈表演更有感染力。通過鋼琴音樂的旋律、節(jié)奏、和聲,在舞蹈情感基調(diào)的把握上有著很大的幫助,學(xué)生把音樂中的情感使用肢體、表情、眼神表達(dá)出來,觀眾通過視、聽相結(jié)合體會到藝術(shù)的魅力[2]。也可以說,通過鋼琴音樂的情感激發(fā),學(xué)生再把音樂中的內(nèi)在情感使用舞蹈語言表現(xiàn)出來,達(dá)到舞蹈和音樂的高度融合,情感能夠更好的傳遞給觀眾。所以,鋼琴伴奏在舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中并不是襯托,而是有助于學(xué)生舞蹈情感的培養(yǎng)與表達(dá),增添舞蹈表現(xiàn)的感染力。二、舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中鋼琴伴奏者的能力(一)了解舞蹈發(fā)展及教學(xué)特點(diǎn)鋼琴伴奏者對舞蹈的歷史發(fā)展、教學(xué)特點(diǎn)、舞蹈語言有足夠的了解,才能更熟悉不同舞蹈的音樂類型,為滿足舞蹈訓(xùn)練的曲目需求,而選擇適合的伴奏曲目。鋼琴伴奏所營造出來的音樂氣氛才會與舞蹈教學(xué)相符合,從而提高教學(xué)質(zhì)量。當(dāng)然,鋼琴曲目在彈奏中要旋律清晰,節(jié)奏準(zhǔn)確。(二)掌握教學(xué)任務(wù)和教學(xué)內(nèi)容因?yàn)樵谖璧富A(chǔ)訓(xùn)練中,每一個動作的編排都有一定的含義,所以在伴奏曲目的選擇上要用舞蹈動作相匹配的音樂。當(dāng)然為了保證教學(xué)質(zhì)量,伴奏者還可以提前與舞蹈教師溝通好相關(guān)的音樂情感、風(fēng)格、速度、變化等。比如上課之前可以選擇流暢度較強(qiáng)的分解和弦,讓學(xué)生平復(fù)心情,做好準(zhǔn)備動作;其次,進(jìn)入舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練就會變得較為緊湊,包括小彈腿、小踢腿,這部分動作是訓(xùn)練小腿的爆發(fā)力,這個時候就需要鋼琴伴奏音樂高亢激昂、節(jié)奏多變、輕快,氣息較短、速度較短快,讓動作與音樂的配合更加快速、輕盈;最后,在基礎(chǔ)訓(xùn)練課完成后是練習(xí)跳躍,小跳、中跳、大跳及相應(yīng)技巧,要循序漸進(jìn)的練習(xí)。跳躍的教學(xué)目的是訓(xùn)練學(xué)生的空中停留時間,要求有強(qiáng)勁的力度。在音樂曲目的選擇上可以是不完全小節(jié)弱拍起的314拍,讓學(xué)生聽到音樂后更有跳躍的動力,從而隨著節(jié)拍身體向上跳躍至最高點(diǎn)[3]。這個時候鋼琴彈奏時要增強(qiáng)琴鍵力度,讓身體在空中停留時間的前后,音樂落差更為明顯。(三)要有豐富的曲目儲備舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練的內(nèi)容比較多,包括體態(tài)站立訓(xùn)練,把上、把下訓(xùn)練,中間及技巧訓(xùn)練等。在每一節(jié)課中,都會訓(xùn)練到學(xué)生肌肉的張力、關(guān)節(jié)的控制力及技術(shù)能力等方面,而每一種動作都要有與之相匹配的音樂。這就要求鋼琴伴奏者有大量的曲目儲備,根據(jù)訓(xùn)練的需要選擇合適的音樂。另外,舞蹈種類比較多樣,在教學(xué)中針對這一特殊性,伴奏者要對不同類型的曲目進(jìn)行收集,比如國內(nèi)外經(jīng)典古典曲目、現(xiàn)代曲目,曲目儲備量越大即興伴奏能力越強(qiáng),在舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中與教師配合度更高。(四)具備音樂與舞蹈相融合的能力鋼琴伴奏和鋼琴獨(dú)奏有著本質(zhì)的區(qū)別,在獨(dú)奏中是以創(chuàng)新的編曲來表達(dá)演奏者的情感及思想,不會受到周圍環(huán)境的限制。但鋼琴伴奏是為了輔助教學(xué),在舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中只是教師與學(xué)生之間的紐帶。所以,鋼琴伴奏者要把演奏的曲目與教學(xué)過程相結(jié)合,在曲目的選擇上以舞蹈動作要表現(xiàn)的情感與場景為主,這樣能夠幫助學(xué)生更好的用肢體來表現(xiàn)情感,從而提高舞蹈能力。三、結(jié)束語舞蹈是最為古老的藝術(shù)形式,通過肢體、動作、眼神能夠把情感表達(dá)的淋漓盡致,從而給人美的享受。不過,在舞蹈基礎(chǔ)訓(xùn)練中要重視鋼琴伴奏的作用,根據(jù)舞蹈教學(xué)發(fā)展需求,不斷提升鋼琴伴奏能力,讓音樂與舞蹈更好的融合,不僅能夠豐富課堂形式,還能讓學(xué)生深刻體會到舞蹈的魅力,從而在訓(xùn)練中不斷提升自身舞蹈技能,發(fā)展成為一名優(yōu)秀的舞者。1引言初中數(shù)學(xué)課程比較單調(diào)乏味,并且抽象,其中的幾何圖形、函數(shù)知識更是存在比較大的難度,部分學(xué)生因?qū)W習(xí)有難度而畏懼學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)。若不對數(shù)學(xué)課堂進(jìn)行改變或是添加新的教學(xué)手段,難免會造成學(xué)生對數(shù)學(xué)課程失去興趣。幾何畫板的引入將“數(shù)”與“形”很好地結(jié)合在一起,對提升學(xué)生動手實(shí)踐能力、打破傳統(tǒng)教學(xué)模式起到關(guān)鍵性的作用,也使學(xué)生對數(shù)學(xué)課程的觀念發(fā)生轉(zhuǎn)變,提高了數(shù)學(xué)課程的趣味性,對提升學(xué)生的思維能力、空間能力都起到了積極作用。2幾何畫板概述幾何畫板是一款多功能綜合性比較強(qiáng)的操作軟件,它可以運(yùn)用于多個領(lǐng)域,如數(shù)學(xué)、物理、機(jī)械、建筑設(shè)計(jì)等在人們的日常生活、學(xué)習(xí)和工作中具有至關(guān)重要作用的領(lǐng)域。這個軟件最早應(yīng)用于美國的教學(xué)活動中,后來逐漸流傳到我國的初中數(shù)學(xué)教學(xué)中,并且進(jìn)一步得到發(fā)展。當(dāng)前,幾何畫板不僅可以操作點(diǎn)線面等平面幾何圖形,而且可以測量圖形參數(shù),并進(jìn)行相關(guān)計(jì)算、變換圖形,以及制作圖形表格和標(biāo)簽。它具有極強(qiáng)的實(shí)踐操作功能,能夠滿足不同專業(yè)的運(yùn)用需求,而且大部分又增加了許多操作功能,如在教學(xué)應(yīng)用上可以制作幾何圖形變化動畫,在初中數(shù)學(xué)教學(xué)中能夠起到很好的輔助作用。3幾何畫板的教學(xué)優(yōu)勢進(jìn)行動態(tài)畫面展示,能夠降低教學(xué)難度初中數(shù)學(xué)教學(xué)內(nèi)容由復(fù)雜的圖形和數(shù)據(jù)組成,學(xué)生經(jīng)常會因?yàn)闊o法構(gòu)建出圖形的具體樣式和變換規(guī)律,從而導(dǎo)致教學(xué)效果不佳,學(xué)生學(xué)習(xí)起來非?;逎y懂。由于幾何畫板具有非常顯著的作用,教師能夠通過利用幾何畫板展示其動態(tài)特性,有效降低數(shù)學(xué)教學(xué)難度,讓學(xué)生能夠直觀地理解數(shù)學(xué)知識,對動態(tài)變化中的復(fù)雜圖形更容易理解。更好地展示圖形細(xì)節(jié)初中數(shù)學(xué)教材中所展示的幾何圖形內(nèi)容一般用平面圖形的方式展現(xiàn),而這些平面圖形無法進(jìn)行縮放和多角度觀察,因此,理解幾何知識的難度就會相應(yīng)增大。對于數(shù)學(xué)幾何知識教學(xué)來說,在一些結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜、數(shù)據(jù)比較龐大時,教師通過幾何畫板的圖形展示功能,可以讓學(xué)生清晰地觀察圖形的各個角度和比例,爾后掌握圖形的變化規(guī)律,把抽象的圖形轉(zhuǎn)變?yōu)榫呦蟮睦碚撝R。幾何畫板使用起來方便、快捷由于幾何畫板是憑借現(xiàn)代網(wǎng)絡(luò)科技而設(shè)計(jì)的一種圖形軟件,因此,幾何畫板具有軟件的優(yōu)勢,使用起來非常方便、快捷,能夠滿足絕大部分教師的教學(xué)需求。近幾年來,幾何畫板軟件得到廣泛應(yīng)用,各種軟件功能越來越完善,教師和學(xué)生在使用時更加方便、快捷、實(shí)用,其中儲存的數(shù)學(xué)知識信息越來越豐富。教師可以通過菜單欄進(jìn)行簡單操作,設(shè)定一個程序就能完成整個教學(xué)過程,這對于數(shù)學(xué)教學(xué)很有幫助,能夠讓學(xué)生更好地尋找解決問題的方法,進(jìn)行自我探索,更容易進(jìn)行數(shù)學(xué)探究,增強(qiáng)數(shù)學(xué)教學(xué)效果。4幾何畫板在初中數(shù)學(xué)教學(xué)中的具體運(yùn)用運(yùn)用精確而動態(tài)的幾何圖形首先,在數(shù)學(xué)教學(xué)活動中,教師需要設(shè)計(jì)大量的幾何圖形,針對具體的問題向?qū)W生進(jìn)行詳細(xì)講解,從更加直觀的角度讓學(xué)生理解幾何問題的重點(diǎn)。根據(jù)數(shù)學(xué)問題的內(nèi)容繪制出貼合內(nèi)容的圖形是十分重要的,圖形的精確性可以讓學(xué)生認(rèn)識到數(shù)學(xué)學(xué)科的嚴(yán)謹(jǐn)性,提升學(xué)生的數(shù)學(xué)素養(yǎng)。幾何畫板可以繪制出任何幾何圖形,而且可以根據(jù)幾何圖形的動態(tài)變現(xiàn)做出相應(yīng)的變化,為教師設(shè)計(jì)學(xué)案過程節(jié)省大量的時間。其次,初中數(shù)學(xué)教學(xué)中的函數(shù)知識是一個比較抽象的感念,傳統(tǒng)的黑板繪制函數(shù)圖形很難讓學(xué)生很好地理解概念的內(nèi)容。通過幾何畫板與電腦相連,可以將函數(shù)知識以一個動態(tài)的方式展現(xiàn)在學(xué)生面前。如“二次函數(shù)”的圖形展示,通過幾何畫板畫出動態(tài)的函數(shù)圖形展示在多媒體設(shè)備上面,讓學(xué)生很好地了解函數(shù)之間的參數(shù)關(guān)系。這一方法十分直觀,容易讓學(xué)生理解相應(yīng)的圖形概念。設(shè)計(jì)數(shù)學(xué)模擬實(shí)踐傳統(tǒng)的數(shù)學(xué)教學(xué)中,課堂的大部分時間是教師的講解時間,給學(xué)生實(shí)踐的時間十分有限,使得學(xué)生對數(shù)學(xué)的興趣逐漸減弱。隨著幾何畫板運(yùn)用的普及,學(xué)生可以利用畫板工具,在教學(xué)中開展自主實(shí)踐,打破傳統(tǒng)的數(shù)學(xué)教學(xué)模式,提升動手實(shí)踐能力。學(xué)生在實(shí)踐動手過程中能夠更好地?w驗(yàn)學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)的樂趣,對于數(shù)學(xué)知識的理解更加容易,更好地鞏固所學(xué)知識。創(chuàng)設(shè)解決數(shù)學(xué)問題的情境為提升學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,教師常用的方式是將學(xué)生感興趣的問題轉(zhuǎn)化成為數(shù)學(xué)問題,這一過程需要創(chuàng)設(shè)教學(xué)情境,以引發(fā)學(xué)生的好奇心理,激起學(xué)生的求知欲望。把相關(guān)問題與生活中常遇到的問題聯(lián)系起來,其效果將會更加明顯。因此,教師要學(xué)會創(chuàng)建數(shù)學(xué)問題情境,引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行思考,形成自主思考發(fā)現(xiàn)的學(xué)習(xí)方式。提供豐富多彩的課堂內(nèi)容現(xiàn)在教師已經(jīng)充分認(rèn)識到初中數(shù)學(xué)教學(xué)方式的多樣性,要通過各種教學(xué)方式的應(yīng)用,讓學(xué)生自己動手,積極應(yīng)對問題、解決問題。將幾何畫板引入初中數(shù)學(xué)教學(xué)過程中,需要教師引導(dǎo)學(xué)生認(rèn)識幾何畫板所帶來的學(xué)習(xí)樂趣,讓學(xué)生更好地接受和應(yīng)用幾何畫板,通過幾何畫板解決學(xué)習(xí)中的問題。5初中課堂中運(yùn)用幾何畫板的策略要創(chuàng)建活躍的課堂氛圍創(chuàng)建良好的課堂氛圍對于提升課堂的教學(xué)效率起著十分重要的作用。因?yàn)閿?shù)學(xué)課程比較單調(diào)枯燥而抽象,傳統(tǒng)方式的幾何教學(xué)很容易造成課堂氣氛凝重、缺乏活力,學(xué)生不愿意聽課,教師也沒有很高的熱情,這就會造成學(xué)習(xí)和教學(xué)效果的弱化。因此,教師在應(yīng)用幾何畫板輔助數(shù)學(xué)教學(xué)時要注意教學(xué)環(huán)境的營造,在數(shù)學(xué)教學(xué)中要考慮是否有必要使用幾何畫板,什么時候使用適合,等等。梳理學(xué)生的解題思路幾何畫板輔助教學(xué),可以促使學(xué)生參與學(xué)習(xí),是促進(jìn)學(xué)生自主動手、自主學(xué)習(xí)的有效手段。這一過程需要教師通過幾何畫板構(gòu)建數(shù)學(xué)實(shí)踐題目,并引導(dǎo)學(xué)生掌握解題思路。體現(xiàn)以學(xué)生為主體的教學(xué),培養(yǎng)學(xué)生的自主學(xué)習(xí)能力在初中數(shù)學(xué)教學(xué)中應(yīng)用幾何畫板,主要體現(xiàn)以學(xué)生為主體,讓學(xué)生自主利用幾何畫板解答數(shù)學(xué)問題、理解數(shù)學(xué)知識,調(diào)動學(xué)生的積極性,激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,讓學(xué)生通過幾何圖形直觀地了解幾何知識,促進(jìn)學(xué)生自主學(xué)習(xí)幾何知識。幾何畫板軟件能夠把幾何圖形直觀地展現(xiàn)出來,運(yùn)用動畫形式把幾何圖形進(jìn)行變形和組合,使學(xué)生能夠清楚地知道復(fù)雜的幾何圖形是如何組合變形的,以此激發(fā)學(xué)生的自主探索興趣。同時,學(xué)生在操作幾何畫板的過程中培養(yǎng)了實(shí)踐動手能力。6結(jié)論在初中數(shù)學(xué)教學(xué)中應(yīng)用幾何畫板,可以提升教學(xué)質(zhì)量,增強(qiáng)學(xué)生對數(shù)學(xué)教學(xué)的學(xué)習(xí)熱情,加深對數(shù)學(xué)知識的理解。但是在幾何畫板的應(yīng)用中,仍需要教師把握“度”,依托課本教材,靈活運(yùn)用,以學(xué)生為主體,由教師主導(dǎo)學(xué)生的參與度,激發(fā)學(xué)生的探究興趣,只有這樣才能實(shí)現(xiàn)初中數(shù)學(xué)課堂教學(xué)相長的目標(biāo)。生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏46、法律有權(quán)打破平靜。——馬·格林生產(chǎn)59生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件60生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件61生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件62生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件63二、種子制備工藝二、種子制備工藝64實(shí)驗(yàn)室種子制備階段:瓊脂斜面固體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)搖瓶液體培養(yǎng)生產(chǎn)種子制備階段:種子罐擴(kuò)大培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室種子制備階段:生產(chǎn)種子制備階段:65對接種物的一般要求:1)應(yīng)以高產(chǎn)菌株中分離獲得的純系作為出發(fā)菌株。菌株純度高,性狀穩(wěn)定,不易發(fā)生變異。2)生理活性強(qiáng)。若以菌體細(xì)胞為接種物,應(yīng)采取正在旺盛生長的繁殖期細(xì)胞,菌體細(xì)胞應(yīng)均勻,同步率高。以孢子為接種物,應(yīng)采用易于萌發(fā)的孢子。對接種物的一般要求:1)應(yīng)以高產(chǎn)菌株中分離獲得的純系作為出發(fā)66一)實(shí)驗(yàn)室種子制備
對于產(chǎn)孢子能力強(qiáng)的及孢子發(fā)芽、生長繁殖快的菌種可以采用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)孢子,孢子可直接作為種子罐的種子;這樣操作簡便,不易污染雜菌。
如:檸檬酸生產(chǎn)的制種,用麩皮培養(yǎng)基產(chǎn)生大量孢子直接用于種子罐接種。一)實(shí)驗(yàn)室種子制備對于產(chǎn)孢子能力強(qiáng)的及孢子發(fā)芽、生長67
對于產(chǎn)孢子能力不強(qiáng)或孢子發(fā)芽慢的菌種,可以用搖瓶液體培養(yǎng)法。孢子接入含液體培養(yǎng)基的搖瓶中,恒溫振蕩培養(yǎng),獲得菌絲體,作為種子。
如:用灰色鏈霉菌生產(chǎn)鏈霉素用卡那鏈霉菌生產(chǎn)卡那霉素對于產(chǎn)孢子能力不強(qiáng)或孢子發(fā)芽慢的菌種,可以用搖瓶68
對于不產(chǎn)孢子的細(xì)菌,生產(chǎn)上一般采用將試管斜面菌種接入茄瓶斜面或搖瓶培養(yǎng)如:谷氨酸棒桿菌生產(chǎn)谷氨酸對于不產(chǎn)孢子的細(xì)菌,生產(chǎn)上一般采用將試管斜面菌種接入691、孢子的制備1)細(xì)菌孢子的制備細(xì)菌的斜面培養(yǎng)基多采用碳源限量而氮源豐富的配方。培養(yǎng)溫度一般為37?C。細(xì)菌菌體培養(yǎng)時間一般為1-2天,產(chǎn)芽孢的細(xì)菌培養(yǎng)則需要5-10天。1、孢子的制備1)細(xì)菌孢子的制備702)霉菌孢子的制備霉菌孢子的培養(yǎng)一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。培養(yǎng)的溫度一般為25-28?C。培養(yǎng)時間一般為4-14天。2)霉菌孢子的制備713)放線菌孢子的制備放線菌的孢子培養(yǎng)一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。培養(yǎng)溫度一般為28?C。培養(yǎng)時間為5-14天。3)放線菌孢子的制備72二)生產(chǎn)種子制備種子罐級數(shù)的確定種子罐級數(shù)是指制備種子需逐級擴(kuò)大培養(yǎng)的次數(shù)。一般根據(jù)菌種生長特性、菌體繁殖速度以及所采用發(fā)酵罐的容積而定。二)生產(chǎn)種子制備種子罐級數(shù)的確定種子罐級數(shù)是指制備種子需逐級73對于生長快的細(xì)菌,種子用量比例小,故種子罐相應(yīng)也少。如:谷氨酸生產(chǎn)中,采用茄瓶斜面或搖瓶種子接入種子罐于32℃培養(yǎng)7~10h,菌體濃度達(dá)108~109個/ml,即可接入發(fā)酵罐作為種子。這稱為一級種子罐擴(kuò)大培養(yǎng),也稱二級發(fā)酵。對于生長快的細(xì)菌,種子用量比例小,故種子罐相應(yīng)也少。74
生長較慢的菌種,如青霉素生產(chǎn)菌種,其孢子懸浮液接入一級種子罐擴(kuò)大培養(yǎng)于27℃培養(yǎng)40h,此時孢子發(fā)芽,長出短菌絲,再移至含有新鮮培養(yǎng)基的第二級種子罐,于27℃培養(yǎng)10~24h,菌絲迅速繁殖,獲粗壯菌體,即可移至發(fā)酵罐作為種子。這稱為二級種子罐擴(kuò)大培養(yǎng),也稱三級發(fā)酵。一般50m3發(fā)酵罐都采用三級發(fā)酵生長較慢的菌種,如青霉素生產(chǎn)菌種,其孢子懸浮液接入一75
生長更慢的菌種,鏈霉素生產(chǎn)菌種灰色鏈霉菌,一般采用三級種子罐擴(kuò)大培養(yǎng)(四級發(fā)酵)
在小型罐(5~500L)中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時,通常采用直接將孢子或菌絲體接入罐中發(fā)酵,這可稱為一級發(fā)酵。生長更慢的菌種,鏈霉素生產(chǎn)菌種灰色鏈霉菌,一般采用三76
種子罐的級數(shù)越少,越有利于簡化工藝和控制,并可減少由于多次移種而帶來的染菌的機(jī)會。
但也必須考慮盡量延長發(fā)酵罐生產(chǎn)產(chǎn)物的時間,縮短由于種子發(fā)芽、生長而占用的非生產(chǎn)時間,以提高發(fā)酵罐的生產(chǎn)率。種子罐的級數(shù)越少,越有利于簡化工藝和控制,并可減少77
雖然種子罐級數(shù)隨產(chǎn)物的品種及生產(chǎn)規(guī)模而定,但也與所選用工藝條件有關(guān)。
如改變種子罐的培養(yǎng)條件,加速了孢子發(fā)芽及菌體的繁殖,也可相應(yīng)地減少種子罐的級數(shù)。雖然種子罐級數(shù)隨產(chǎn)物的品種及生產(chǎn)規(guī)模而定,但也與所78第二節(jié)種子質(zhì)量的控制一、影響孢子質(zhì)量的因素及控制培養(yǎng)基培養(yǎng)條件培養(yǎng)時間和冷藏時間第二節(jié)種子質(zhì)量的控制一、影響孢子質(zhì)量的因素及控制791)原材料質(zhì)量生產(chǎn)過程中經(jīng)常出現(xiàn)種子質(zhì)量不穩(wěn)定的現(xiàn)象,其主要原因是原材料質(zhì)量波動。如:四環(huán)素、土霉素生產(chǎn)中,配制產(chǎn)孢斜面培養(yǎng)基用的麩皮,因小麥產(chǎn)地、品種、加工方法及用量的不同對孢子質(zhì)量均有一定影響。制備霉菌用的大米,其產(chǎn)地、顆粒大小、均勻程度不同,孢子質(zhì)量也不同。蛋白胨加工原料不同(如魚胨或骨胨)對孢子影響也不同。原材料質(zhì)量的波動,起主要作用的是其中的無機(jī)離子含量不同1、培養(yǎng)基1)原材料質(zhì)量生產(chǎn)過程中經(jīng)常出現(xiàn)種子質(zhì)量不穩(wěn)802)水質(zhì)的影響地區(qū)不同、季節(jié)變化和水源污染,均可造成水質(zhì)波動,影響種子質(zhì)量。菌種在固體培養(yǎng)基上可呈現(xiàn)多種不同代謝類型的菌落,氮源品種越多,出現(xiàn)的菌落類型也越多,不利于生產(chǎn)的穩(wěn)定。2)水質(zhì)的影響地區(qū)不同、季節(jié)變化和水源污染,均812、培養(yǎng)條件1)溫度溫度對多數(shù)品種斜面孢子質(zhì)量有顯著影響。
如:土霉素生產(chǎn)種子,在高于37℃培養(yǎng)時,孢子接入發(fā)酵罐后表現(xiàn)出糖代謝變慢,氨基氮回升提前,菌絲過早自溶,效價降低等2)濕度制備斜面孢子培養(yǎng)基的濕度對孢子的數(shù)量和質(zhì)量有較大影響。
不同濕度對龜裂鏈霉菌(產(chǎn)土霉素)斜面生長的影響相對濕度斜面外觀活孢子數(shù)(×108/支)16.5~19上部稀薄,下部稠,略黃1.225~36上部薄,中部均勻,發(fā)白2.340~45一片白,孢子豐富,稍皺5.73)通氣量一般需保證充足的通氣2、培養(yǎng)條件1)溫度溫度對多數(shù)品種斜面孢子質(zhì)量有顯著影響。2823、培養(yǎng)時間和冷藏時間(1)培養(yǎng)時間一般來說,衰老的孢子不如年輕的孢子,因?yàn)樗ダ系逆咦右言谥鸩竭M(jìn)入發(fā)芽階段,核物質(zhì)趨于分化狀態(tài)。過于衰老的孢子會導(dǎo)致生產(chǎn)能力的下降。措施:孢子培養(yǎng)的時間應(yīng)該控制在孢子量多、孢子成熟、發(fā)酵產(chǎn)量正常的階段終止培養(yǎng)。(2)冷藏時間冷藏對孢子質(zhì)量的影響與孢子成熟程度有關(guān)。如土霉素生產(chǎn)菌種孢子斜面培養(yǎng)4天左右即于4?C冰箱保存,發(fā)現(xiàn)冷藏7-8天菌體細(xì)胞開始自溶。而培養(yǎng)5天以后冷藏,20天未發(fā)現(xiàn)自溶。冷藏時間對孢子的生產(chǎn)能力也有影響。例如在鏈霉素生產(chǎn)中,斜面孢子在6?C冷藏兩個月后的發(fā)酵單位比冷藏一個月降低18%,冷藏3個月后降低35%。3、培養(yǎng)時間和冷藏時間(1)培養(yǎng)時間一般來說,衰老的孢子不如834、接種量接種量大小影響到培養(yǎng)基中孢子的數(shù)量,進(jìn)而影響菌體的生理狀況。4、接種量接種量大小影響到培養(yǎng)基中孢子的數(shù)量84二、影響種子質(zhì)量的因素及控制孢子的質(zhì)量培養(yǎng)基培養(yǎng)條件種齡接種量二、影響種子質(zhì)量的因素及控制孢子的質(zhì)量85營養(yǎng)成分適合種子培養(yǎng)的需要選擇有利于孢子發(fā)芽和菌體生長的培養(yǎng)基;營養(yǎng)上要易于被菌體直接吸收和利用;營養(yǎng)成分要適當(dāng)豐富和完全,氮源和維生素含量要高營養(yǎng)成分要盡可能與發(fā)酵培養(yǎng)基相近。1、培養(yǎng)基營養(yǎng)成分適合種子培養(yǎng)的需要1、培養(yǎng)基86(1)溫度(2)通氣量有足夠的通氣量可以提高種子質(zhì)量。例如,青霉素的生產(chǎn)菌種在制備過程中將通氣充足和不足兩種情況下得到的種子分別接入發(fā)酵罐內(nèi),它們的發(fā)酵單位可相差1倍。但也有例外,例如土霉素生產(chǎn)菌,一級種子罐的通氣量小對發(fā)酵有利。2、培養(yǎng)條件(1)溫度2、培養(yǎng)條件873、種齡種齡——種子罐中培養(yǎng)的菌體開始移入下一級種子罐或發(fā)酵罐時的培養(yǎng)時間。選擇適當(dāng)種齡的菌種接種十分重要
通常,種齡以菌體處于生命力極為旺盛的對數(shù)期,且培養(yǎng)液中菌體量還未達(dá)到最高峰時,較為合適。3、種齡種齡——種子罐中培養(yǎng)的菌體開始移入下一級種子罐或發(fā)酵88
過于年輕的種子接入發(fā)酵罐后,往往會出現(xiàn)前期生長緩慢、發(fā)酵周期延長、產(chǎn)物開始形成的時間推遲,造成異常發(fā)酵的情況。
過老的種子會引起生產(chǎn)能力下降,菌體過早自溶。過于年輕的種子接入發(fā)酵罐后,往往會出現(xiàn)前期生長緩慢、89
不同品種或同一品種的工藝條件不同,其菌齡也不一樣,一般要經(jīng)過多次試驗(yàn),考察其發(fā)酵罐中產(chǎn)量的多少來確定最適種齡。嗜堿性芽孢桿菌種齡對產(chǎn)酶(堿性蛋白酶)的影響不同品種或同一品種的工藝條件不同,其菌齡也不一樣,一般904、接種量接種量——是指移入的種子液體積和接種后培養(yǎng)液體積的比例。大多數(shù)抗生素發(fā)酵的最適接種量為7~15%,有時可增加到20~25%而由棒狀桿菌生產(chǎn)谷氨酸接種量只需1%
除了始于斜面培養(yǎng)的初次接種外,發(fā)酵過程的整個階段接種量一般均需0.5~10%的接種量。
接種量的大小取決于生產(chǎn)菌種在發(fā)酵中生長繁殖的速度。4、接種量接種量——是指移入的種子液體積和接種后培養(yǎng)液體積的91
采用較大的接種量可以縮短發(fā)酵罐中菌體繁殖到達(dá)高峰的時間,使產(chǎn)物的形成提前到來
近年來,不少廠家以加大種子量及采用豐富培養(yǎng)基作為獲得高產(chǎn)的措施;有的產(chǎn)品采用兩個種子罐接一個發(fā)酵罐的雙種法。如卡那霉素生產(chǎn)中采用雙種比單種的發(fā)酵單位提高8%,且達(dá)到產(chǎn)量高峰的時間提前。采用較大的接種量可以縮短發(fā)酵罐中菌體繁殖到達(dá)高峰的92
但如果接種量過大,往往使菌體生長過快、培養(yǎng)液黏度增加,造成溶氧不足,從而影響產(chǎn)物的合成。
如由嗜堿芽孢桿菌生產(chǎn)堿性蛋白酶的發(fā)酵,1%接種量產(chǎn)酶活最高,在0.5~4%之間雖有差別,但影響不大;如超過4%則酶產(chǎn)量明顯下降。但如果接種量過大,往往使菌體生長過快、培養(yǎng)液黏度增加93三、種子質(zhì)量的控制措施1、菌種穩(wěn)定性的檢查單菌分離,搖瓶測定生產(chǎn)能力以不低于其原有的生產(chǎn)活力為原則2、無(雜)菌檢查鏡檢肉湯或瓊脂斜面培養(yǎng)進(jìn)行檢查生化分析
如測定營養(yǎng)消耗的速度、pH變化、溶氧利用情況等3、接種技術(shù)壓差法
接種瓶壓力差火焰封口法在種子罐接種口周圍設(shè)有溝槽,溝槽內(nèi)注入少量酒精,點(diǎn)燃酒精使接種口被圍在一圈火焰之中;在火焰圈中即可將菌懸液倒入種子罐中。三、種子質(zhì)量的控制措施1、菌種穩(wěn)定性的檢查單94生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件95生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件96生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件97生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件98生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和保藏課件99
從種子罐到發(fā)酵罐的接種,是通過接種管道,在壓力作用下進(jìn)行的。
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