第二章提取、分離與鑒定的方法與技術(shù)8課件

第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和1第一節(jié)提取方法與技術(shù)第二節(jié)分離精制和鑒定的方法與技術(shù)第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)第一節(jié)提取方法與技術(shù)第二節(jié)分離精制和鑒定的方法與技術(shù)2第二節(jié)分離精制和鑒定的方法與技術(shù)一、系統(tǒng)溶劑分離法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)二、兩相溶劑萃取法三、沉淀法四、結(jié)晶與重結(jié)晶法五、透析法六、分餾法七、色譜法第二節(jié)分離精制和鑒定的方法與技術(shù)一、系統(tǒng)溶劑分離法第二章3七、色譜法柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)薄層色譜法紙色譜法高效液相色譜法氣相色譜法七、色譜法柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的4柱色譜法吸附柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)分配柱色譜法離子交換柱色譜法凝膠柱色譜法柱色譜法吸附柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定5學(xué)習(xí)目標(biāo)：掌握分配色譜法分離的原理和常用支持劑的類型。2.掌握正相色譜法和反相色譜法選擇固定相和移動(dòng)相的原則

。3.熟悉分配柱色譜法的適用范圍。3.了解離子交換柱色譜法和凝膠色譜法分離原理、操作技術(shù)和適用范圍

。學(xué)習(xí)目標(biāo)：62分配柱色譜法分配色譜是在柱狀容器中，利用被分離成分在固定相和流動(dòng)相兩相間的分配系數(shù)不同進(jìn)行分離的色譜方法。(1)基本原理由于各成分在固定相(液)和流動(dòng)相(液)中的分配系數(shù)不同,當(dāng)流動(dòng)相流經(jīng)固定相時(shí)，各成分就在兩相之間連續(xù)不斷地發(fā)生“分配”，易溶于流動(dòng)相中的成分(在流動(dòng)相中分配的多)，移行快；易溶于固定相中的成分(在固定相中分配的多)，移行慢。

(2)支持劑支持劑又稱載體、擔(dān)體。作為分配色譜的支持劑應(yīng)為中性多孔的粉末，無(wú)吸附作用，不溶于兩相溶劑中，與被分離的物質(zhì)不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，并能吸著一定量的固定相，流動(dòng)相能自由通過(guò)而不改變其組成。2分配柱色譜法7常用的載體*有：①硅膠含水量17%以上的硅膠已失去吸附性，可作為載體。硅膠可吸收其本身重量的50%的水分，而不顯濕狀。②硅藻土是現(xiàn)在應(yīng)用最多且效果很好的一種載體。可吸收相當(dāng)于自身重量的100%的水分。③色譜濾紙或纖維素粉

是一種常用的支持劑，靠濾紙上的纖維素可吸收自身重量100%的水分。反相分配色譜多采用碳十八烷基(-C18H37)、辛基(-C8H17）或乙基（-C2H5）鍵合硅膠作固定相。

常用的載體*有：8（3）溶劑系統(tǒng)分配色譜中的固定相和移動(dòng)相一般由二元或三元甚至三元以上溶劑按一定比例組成復(fù)合的兩相溶劑系統(tǒng)。選擇適當(dāng)?shù)娜軇┫到y(tǒng)可提高分離效率。一般用紙色譜法選擇分離的條件，尋找合適的溶劑系統(tǒng)。

根據(jù)固定相與流動(dòng)相的相對(duì)極性大小，分配色譜可分為正相分配色譜和反相分配色譜。

（3）溶劑系統(tǒng)9（1）正相分配色譜固定相：常用的有水、各種水的酸、堿、鹽的緩沖溶液、甲醇、甲酰胺等；流動(dòng)相：用與水不相混溶（或很少混溶）的有機(jī)溶劑，如石油醚、苯、丁醇、戊醇等。適用范圍：分離親水性成分和弱親脂性成分。（2）反相分配色譜固定相：用與水不相混溶（或很少混溶）的有機(jī)溶劑，如石油醚、苯、丁醇、戊醇等；流動(dòng)相：常用的有水、各種水的酸、堿、鹽的緩沖溶液、甲醇、甲酰胺等。適用范圍：分離強(qiáng)親脂性成分時(shí),須采用反相分配色譜法。（1）正相分配色譜10（4）被分離成分一般在正相色譜中，因移動(dòng)相極性比固定相小，被分離成分中極性較小的的成分遷移速度較快；在反相色譜中則相反。（5）操作技術(shù)1）裝柱；2）加樣；3）洗脫（6）特點(diǎn)應(yīng)用廣泛，分離效果好。（7）適用范圍正相色譜法常用于分離極性較大的成分。反相色譜法主要用于親脂性成分的分離，但分離效果不如吸附色譜。（8）提示操作前，必須使固定相和移動(dòng)相預(yù)先飽和；使用過(guò)程中保持恒定溫度；合理控制上樣量。（4）被分離成分11柱色譜法吸附柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)分配柱色譜法離子交換柱色譜法凝膠柱色譜法柱色譜法吸附柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定123離子交換色譜法以離子交換樹脂為固定相，以水或含水溶劑為流動(dòng)相，由于各成分與樹脂的交換能力不同而分離。應(yīng)用：酸性、堿性及兩性基團(tuán)，在水中多呈解離狀的成分。（1）基本原理

離子交換樹脂本身含有解離的陽(yáng)離子或陰離子，可與水溶液中相同電荷的離子發(fā)生交換作用，而被吸附到柱上，再用適當(dāng)流動(dòng)相洗脫，即可分離混合物中離子型的化合物。陽(yáng)離子交換樹脂

陰離子交換樹脂

式中R-H+、R+OH-分別代表陽(yáng)離子和陰離子交換樹脂，可交換的基團(tuán)是H+

和OH-。

3離子交換色譜法13(2)離子交換樹脂的類型

性質(zhì)：離子交換樹脂外觀為球形顆粒，不溶于水，但可在水中膨脹。組成：離子交換樹脂由樹脂母核和離子交換基團(tuán)。母核部分是苯乙烯通過(guò)二乙烯苯交鏈而成的大分子網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。網(wǎng)孔大小用交聯(lián)度（即加入交聯(lián)劑的百分?jǐn)?shù)）表示。交聯(lián)度越大，則網(wǎng)孔越小，質(zhì)地越緊密，在水中不易膨脹；反之亦然。不同交聯(lián)度適于分離不同大小的分子。根據(jù)離子交換樹脂中交換離子的性質(zhì)不同，離子交換樹脂分兩大類。(2)離子交換樹脂的類型141）陽(yáng)離子（酸性）交換樹脂含有活潑的酸性基團(tuán)，能交換陽(yáng)離子。分為：強(qiáng)酸型：R-SO3H；中等酸型：R-COOH，R-PO3H2；弱酸型：R-SH。2）陰離子（堿性）交換樹脂含有活潑的堿性基團(tuán)，能交換陰離子。分為：強(qiáng)堿型：R-NR1R2R3OH；弱堿型：R-NH3OH，R-NH2R-OH，R-NHR1R2OH；中等堿性主體結(jié)構(gòu)上既結(jié)合有強(qiáng)堿型離子交換基團(tuán)，又含有弱堿性離子交換基團(tuán)。

1）陽(yáng)離子（酸性）交換樹脂15離子交換樹脂的交換能力（交換容量），取決于離子交換基團(tuán)數(shù)量，其單位是毫摩爾/克（mmol/g）。強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹脂如強(qiáng)酸1×7，表示交聯(lián)度為7%,其交換容量為4.5mmol/g，對(duì)分子量為166的麻黃堿來(lái)說(shuō)，1g上述陽(yáng)離子交換樹脂，理論上應(yīng)能交換166×4.5mg的麻黃堿。樣品與樹脂的用量比，需根據(jù)交換容量來(lái)計(jì)算，對(duì)陽(yáng)離子交換樹脂來(lái)說(shuō)，樣品的用量為總交換量的1/2；對(duì)陰離子交換樹脂來(lái)說(shuō)，樣品用量為交換容量的1/4～1/3。離子交換樹脂的交換能力（交換容量），取決于離子交換基團(tuán)數(shù)量，16(3)操作技術(shù)1）樹脂的預(yù)處理：①溶脹②洗除雜質(zhì)③樹脂的轉(zhuǎn)型2）上樣3）洗脫4）再生(4)特點(diǎn)：應(yīng)用范圍廣，樹脂可反復(fù)使用。(5)適用范圍：酸性、堿性或酸堿兩性化合物的分離。(6)提示：試樣的用量由所選擇的樹脂的交換容量決定，若用陽(yáng)離子交換樹脂，樣品量可加至全交換容量的1/2，若使用陰離子交換樹脂，樣品量可加全交換容量的1/4～1/3。(3)操作技術(shù)17柱色譜法吸附柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)分配柱色譜法離子交換柱色譜法凝膠柱色譜法柱色譜法吸附柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定184凝膠濾過(guò)柱色譜法凝膠色譜法也稱凝膠滲透色譜法、分子篩過(guò)濾色譜及排阻色譜法等。是以凝膠為固定相，選擇適當(dāng)溶劑進(jìn)行洗脫，使混合物中分子量大小不同的物質(zhì)分離的方法。（1）基本原理：分子篩原理***凝膠是一種多孔性球形顆粒，具網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，不溶于水，但可在水中膨脹的高分子化合物。當(dāng)凝膠用水膨脹裝柱后，加樣品入樣品，用同一溶劑洗脫時(shí)，由于各種化合物的分子量不同，受凝膠網(wǎng)孔半徑限制也不同，大分子不能滲入凝膠顆粒凝膠部，隨溶劑在顆粒間移動(dòng)先被洗脫；內(nèi)小分子因可自由滲入并擴(kuò)散到凝膠顆粒內(nèi)部中，受到的阻力增大，流速減慢，故后被洗脫。這樣混合物就按分子量由大到小先后流出而得到分離。4凝膠濾過(guò)柱色譜法19(2)凝膠的類型

常用葡聚糖凝膠，由葡聚糖和交聯(lián)劑（如環(huán)氧氯丙烷）交聯(lián)聚合而成。凝膠顆粒網(wǎng)孔大小，取決于制備凝膠時(shí)所加交聯(lián)劑的數(shù)量和反應(yīng)條件，交聯(lián)劑加入的越多，網(wǎng)孔越緊密，孔徑越小，吸水膨脹也越?。唤宦?lián)劑加入越少，網(wǎng)孔越大，吸水膨脹也越大。市售的凝膠型號(hào)是按交聯(lián)度大小分類，并以吸水量多少表示。如：G-25，G為凝膠，后附的數(shù)字表示吸水量乘以10，即G-25表示此葡聚糖凝膠的吸水量為2.5ml/g。(3)操作技術(shù)1）凝膠的選擇：根據(jù)實(shí)際工作需要選擇2）凝膠的浸泡溶脹3）裝柱4）上樣5）洗脫6）再生

(2)凝膠的類型20(4)特點(diǎn)設(shè)備簡(jiǎn)單，易于操作，分離效果好，但分離速度較慢。(5)適用范圍分子量大小不同的化合物的分離。(6)提示

(4)特點(diǎn)21大孔吸附樹脂(1)結(jié)構(gòu)與組成：大孔吸附樹脂為白色或淡黃色球形顆粒狀，粒度多為20～60目。組成為苯乙烯，二乙烯苯，或а-甲基丙烯酸酯型。其中苯乙烯,二乙烯苯型為非極性樹脂，2-甲基丙烯酸酯型為中極性樹脂。大孔吸附樹脂的結(jié)構(gòu)中包含了許多微觀小球組成的網(wǎng)狀孔穴結(jié)構(gòu)。(2)分離原理①吸附性：大孔吸附樹脂本身具有吸附性，是由范德華力或氫鍵吸附的結(jié)果。②篩選性原理：是由大孔吸附樹脂本身的多孔性所決定的。(3)特性①理化性質(zhì)穩(wěn)定，不溶于酸、堿及有機(jī)溶劑；②對(duì)有機(jī)物選擇性較好；③吸附速度快；④再生處理方便。大孔吸附樹脂22(4)影響大孔吸附樹脂分離效果的因素①化合物分子極性大?。阂话銇?lái)說(shuō)，大孔樹脂的色譜行為具有反相的性質(zhì)。被分離物質(zhì)的極性大先流出色譜柱。②分子體積大小：在一定條件下，化合物體積越大，吸附力越強(qiáng)。(5)洗脫劑對(duì)非極性大孔樹脂，洗脫劑極性越小，洗脫能力越強(qiáng)，對(duì)中極性大孔樹脂及極性較大化合物，則極性較大溶劑洗脫力強(qiáng)。一般上樣后先用水(或酸、堿水)洗去雜質(zhì)，然后用不同濃度的含水醇、甲醇、乙醇、丙酮等依次洗脫。(4)影響大孔吸附樹脂分離效果的因素23復(fù)習(xí)思考題1.分配色譜法常用的支持劑有哪些？2.什么是正相色譜？什么是反相色譜？怎樣選擇其固定相和移動(dòng)相？3.離子交換色譜法和凝膠色譜法分離的原理是什么？復(fù)習(xí)思考題1.分配色譜法常用的支持劑有哪些？24TheEndThankYou!TheEndThankYou!25第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和26第一節(jié)提取方法與技術(shù)第二節(jié)分離精制和鑒定的方法與技術(shù)第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)第一節(jié)提取方法與技術(shù)第二節(jié)分離精制和鑒定的方法與技術(shù)27第二節(jié)分離精制和鑒定的方法與技術(shù)一、系統(tǒng)溶劑分離法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)二、兩相溶劑萃取法三、沉淀法四、結(jié)晶與重結(jié)晶法五、透析法六、分餾法七、色譜法第二節(jié)分離精制和鑒定的方法與技術(shù)一、系統(tǒng)溶劑分離法第二章28七、色譜法柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)薄層色譜法紙色譜法高效液相色譜法氣相色譜法七、色譜法柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的29柱色譜法吸附柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)分配柱色譜法離子交換柱色譜法凝膠柱色譜法柱色譜法吸附柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定30學(xué)習(xí)目標(biāo)：掌握分配色譜法分離的原理和常用支持劑的類型。2.掌握正相色譜法和反相色譜法選擇固定相和移動(dòng)相的原則

。3.熟悉分配柱色譜法的適用范圍。3.了解離子交換柱色譜法和凝膠色譜法分離原理、操作技術(shù)和適用范圍

。學(xué)習(xí)目標(biāo)：312分配柱色譜法分配色譜是在柱狀容器中，利用被分離成分在固定相和流動(dòng)相兩相間的分配系數(shù)不同進(jìn)行分離的色譜方法。(1)基本原理由于各成分在固定相(液)和流動(dòng)相(液)中的分配系數(shù)不同,當(dāng)流動(dòng)相流經(jīng)固定相時(shí)，各成分就在兩相之間連續(xù)不斷地發(fā)生“分配”，易溶于流動(dòng)相中的成分(在流動(dòng)相中分配的多)，移行快；易溶于固定相中的成分(在固定相中分配的多)，移行慢。

(2)支持劑支持劑又稱載體、擔(dān)體。作為分配色譜的支持劑應(yīng)為中性多孔的粉末，無(wú)吸附作用，不溶于兩相溶劑中，與被分離的物質(zhì)不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，并能吸著一定量的固定相，流動(dòng)相能自由通過(guò)而不改變其組成。2分配柱色譜法32常用的載體*有：①硅膠含水量17%以上的硅膠已失去吸附性，可作為載體。硅膠可吸收其本身重量的50%的水分，而不顯濕狀。②硅藻土是現(xiàn)在應(yīng)用最多且效果很好的一種載體?？晌障喈?dāng)于自身重量的100%的水分。③色譜濾紙或纖維素粉

是一種常用的支持劑，靠濾紙上的纖維素可吸收自身重量100%的水分。反相分配色譜多采用碳十八烷基(-C18H37)、辛基(-C8H17）或乙基（-C2H5）鍵合硅膠作固定相。

常用的載體*有：33（3）溶劑系統(tǒng)分配色譜中的固定相和移動(dòng)相一般由二元或三元甚至三元以上溶劑按一定比例組成復(fù)合的兩相溶劑系統(tǒng)。選擇適當(dāng)?shù)娜軇┫到y(tǒng)可提高分離效率。一般用紙色譜法選擇分離的條件，尋找合適的溶劑系統(tǒng)。

根據(jù)固定相與流動(dòng)相的相對(duì)極性大小，分配色譜可分為正相分配色譜和反相分配色譜。

（3）溶劑系統(tǒng)34（1）正相分配色譜固定相：常用的有水、各種水的酸、堿、鹽的緩沖溶液、甲醇、甲酰胺等；流動(dòng)相：用與水不相混溶（或很少混溶）的有機(jī)溶劑，如石油醚、苯、丁醇、戊醇等。適用范圍：分離親水性成分和弱親脂性成分。（2）反相分配色譜固定相：用與水不相混溶（或很少混溶）的有機(jī)溶劑，如石油醚、苯、丁醇、戊醇等；流動(dòng)相：常用的有水、各種水的酸、堿、鹽的緩沖溶液、甲醇、甲酰胺等。適用范圍：分離強(qiáng)親脂性成分時(shí),須采用反相分配色譜法。（1）正相分配色譜35（4）被分離成分一般在正相色譜中，因移動(dòng)相極性比固定相小，被分離成分中極性較小的的成分遷移速度較快；在反相色譜中則相反。（5）操作技術(shù)1）裝柱；2）加樣；3）洗脫（6）特點(diǎn)應(yīng)用廣泛，分離效果好。（7）適用范圍正相色譜法常用于分離極性較大的成分。反相色譜法主要用于親脂性成分的分離，但分離效果不如吸附色譜。（8）提示操作前，必須使固定相和移動(dòng)相預(yù)先飽和；使用過(guò)程中保持恒定溫度；合理控制上樣量。（4）被分離成分36柱色譜法吸附柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)分配柱色譜法離子交換柱色譜法凝膠柱色譜法柱色譜法吸附柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定373離子交換色譜法以離子交換樹脂為固定相，以水或含水溶劑為流動(dòng)相，由于各成分與樹脂的交換能力不同而分離。應(yīng)用：酸性、堿性及兩性基團(tuán)，在水中多呈解離狀的成分。（1）基本原理

離子交換樹脂本身含有解離的陽(yáng)離子或陰離子，可與水溶液中相同電荷的離子發(fā)生交換作用，而被吸附到柱上，再用適當(dāng)流動(dòng)相洗脫，即可分離混合物中離子型的化合物。陽(yáng)離子交換樹脂

陰離子交換樹脂

式中R-H+、R+OH-分別代表陽(yáng)離子和陰離子交換樹脂，可交換的基團(tuán)是H+

和OH-。

3離子交換色譜法38(2)離子交換樹脂的類型

性質(zhì)：離子交換樹脂外觀為球形顆粒，不溶于水，但可在水中膨脹。組成：離子交換樹脂由樹脂母核和離子交換基團(tuán)。母核部分是苯乙烯通過(guò)二乙烯苯交鏈而成的大分子網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。網(wǎng)孔大小用交聯(lián)度（即加入交聯(lián)劑的百分?jǐn)?shù)）表示。交聯(lián)度越大，則網(wǎng)孔越小，質(zhì)地越緊密，在水中不易膨脹；反之亦然。不同交聯(lián)度適于分離不同大小的分子。根據(jù)離子交換樹脂中交換離子的性質(zhì)不同，離子交換樹脂分兩大類。(2)離子交換樹脂的類型391）陽(yáng)離子（酸性）交換樹脂含有活潑的酸性基團(tuán)，能交換陽(yáng)離子。分為：強(qiáng)酸型：R-SO3H；中等酸型：R-COOH，R-PO3H2；弱酸型：R-SH。2）陰離子（堿性）交換樹脂含有活潑的堿性基團(tuán)，能交換陰離子。分為：強(qiáng)堿型：R-NR1R2R3OH；弱堿型：R-NH3OH，R-NH2R-OH，R-NHR1R2OH；中等堿性主體結(jié)構(gòu)上既結(jié)合有強(qiáng)堿型離子交換基團(tuán)，又含有弱堿性離子交換基團(tuán)。

1）陽(yáng)離子（酸性）交換樹脂40離子交換樹脂的交換能力（交換容量），取決于離子交換基團(tuán)數(shù)量，其單位是毫摩爾/克（mmol/g）。強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹脂如強(qiáng)酸1×7，表示交聯(lián)度為7%,其交換容量為4.5mmol/g，對(duì)分子量為166的麻黃堿來(lái)說(shuō)，1g上述陽(yáng)離子交換樹脂，理論上應(yīng)能交換166×4.5mg的麻黃堿。樣品與樹脂的用量比，需根據(jù)交換容量來(lái)計(jì)算，對(duì)陽(yáng)離子交換樹脂來(lái)說(shuō)，樣品的用量為總交換量的1/2；對(duì)陰離子交換樹脂來(lái)說(shuō)，樣品用量為交換容量的1/4～1/3。離子交換樹脂的交換能力（交換容量），取決于離子交換基團(tuán)數(shù)量，41(3)操作技術(shù)1）樹脂的預(yù)處理：①溶脹②洗除雜質(zhì)③樹脂的轉(zhuǎn)型2）上樣3）洗脫4）再生(4)特點(diǎn)：應(yīng)用范圍廣，樹脂可反復(fù)使用。(5)適用范圍：酸性、堿性或酸堿兩性化合物的分離。(6)提示：試樣的用量由所選擇的樹脂的交換容量決定，若用陽(yáng)離子交換樹脂，樣品量可加至全交換容量的1/2，若使用陰離子交換樹脂，樣品量可加全交換容量的1/4～1/3。(3)操作技術(shù)42柱色譜法吸附柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定的方法與技術(shù)分配柱色譜法離子交換柱色譜法凝膠柱色譜法柱色譜法吸附柱色譜法第二章天然藥物化學(xué)成分提取分離和鑒定434凝膠濾過(guò)柱色譜法凝膠色譜法也稱凝膠滲透色譜法、分子篩過(guò)濾色譜及排阻色譜法等。是以凝膠為固定相，選擇適當(dāng)溶劑進(jìn)行洗脫，使混合物中分子量大小不同的物質(zhì)分離的方法。（1）基本原理：分子篩原理***凝膠是一種多孔性球形顆粒，具網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，不溶于水，但可在水中膨脹的高分子化合物。當(dāng)凝膠用水膨脹裝柱后，加樣品入樣品，用同一溶劑洗脫時(shí)，由于各種化合物的分子量不同，受凝膠網(wǎng)孔半徑限制也不同，大分子不能滲入凝膠顆粒凝膠部，隨溶劑在顆粒間移動(dòng)先被洗脫；內(nèi)小分子因可自由滲入并擴(kuò)散到凝膠顆粒內(nèi)部中，受到的阻力增大，流速減慢，故后被洗脫。這樣混合物就按分子量由大到小先后流出而得到分離。4凝膠濾過(guò)柱色譜法44(2)凝膠的類型

常用葡聚糖凝膠，由葡聚糖和交聯(lián)劑（如環(huán)氧氯丙烷）交聯(lián)聚合而成。凝膠顆粒網(wǎng)孔大小，取決于制備凝膠時(shí)所加交聯(lián)劑的數(shù)量和反應(yīng)條件，交聯(lián)劑加入的越多，網(wǎng)孔越緊密，孔徑越小，吸水膨脹也越??；交聯(lián)劑加入越少，網(wǎng)孔越大，吸水膨脹也越大。市售的凝膠型號(hào)