王昌富：2011血涂片復(fù)審規(guī)則的應(yīng)用和問題探討課件

血涂片復(fù)審規(guī)則

--應(yīng)用和問題探討

王昌富鄧明鳳肖秀林華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬荊州醫(yī)院434020

血涂片復(fù)審規(guī)則

--應(yīng)用和問1981年NCCLS制定H20P我國制定了相應(yīng)指南1981年NCCLS制定H20P人工血涂片復(fù)審率類別百分位數(shù)值（%）平均值1025507590涂片鏡檢11.10.83.29.116.023.6人工分類17.63.27.814.725.035.8血涂片復(fù)審28.79.918.526.739.150.0美國病理學(xué)家學(xué)會(huì)問卷調(diào)查計(jì)劃（ｎ＝263，2005）人工血涂片復(fù)審率類別百分位數(shù)值（%）平均值102550759研究方法BerendHouwen在2002年春天邀請了來自6個(gè)國家17個(gè)實(shí)驗(yàn)室的專家舉行了一次研討會(huì)。InternationalConsensusGroupforHematologyReview研究方法BerendHouwen在2002年成員：美國12澳大利亞2加拿大2英國1瑞士1西班牙1Mr.PatrickW.BarnesBarnesJewishHospitalUSAMs.RhondaBeckerDavisMedicalCenterUniversityofCaliforniaUSAMr.TerryFawcettBiospecifixAustraliaDr.BernardJ.FernandesDepartmentofPathology＆

LabMedicineMt.SinaiHospitalCanadaDr.BerendHouwentBeckmanCoulter,Inc.Ms.LindaKemererGrant/RiversideMethodistHospitalsUSA

Dr.ElkinSimsonMt.SinaiHospitalUSAMs.VickySoppaMayoFoundationUSAMr.MichaelR.SuterOMLLaboratoriesUSADr.JesusVillarubiaHospitalRamonyCajalSpainMs.DebbieWallDynacareLaboratoriesDynacareNorthwest,Inc.USAMs.JeriWaltersSinaiSamaritanMedicalCenterEastCampusUSAMs.BetteA.JamiesonDepartmentofPathologyTheChildren’sHospitalUSAMs.LynnJohnstoneHealthAllianceLaboratoriesUSAProfessorSamuelJ.MachinDepartmentofHaematologyUniversityCollegeHospitalUKMs.StefanieL.McFaddenLaboratoryConsultantUSADr.KirkW.ReadyChinookHealthRegion,Corp.OfficeCanadaDr.DavidRosenfeldLiverpoolHospitalAustraliaDr.RamonSimonBeckmanCoulterEurocenterS.A.Switzerland成員：美國12澳大利亞2加拿大2英國1CELL-DYN4000ADIVA120SE9000XE2100LH750GenS儀器CELL-DYN4000ADIVA120SE9000條例

對于血細(xì)胞分析的每一個(gè)參數(shù)進(jìn)行深入討論，共同商議提出83條規(guī)則，并在15個(gè)實(shí)驗(yàn)室初步驗(yàn)證。（100080：20）如果某條例被涉及而血涂片復(fù)審發(fā)現(xiàn)異常即為真陽性，未發(fā)現(xiàn)異常即為假陽性；如果條例未被涉及而血涂片復(fù)審發(fā)現(xiàn)異常即為假陰性，未發(fā)現(xiàn)異常即為真陰性。條例對于血細(xì)胞分析的每一個(gè)參數(shù)進(jìn)行深入討論，共同商議提出鏡檢陽性的標(biāo)準(zhǔn)1、紅細(xì)胞體積異常和/或不均一性、染色異常≥2+，發(fā)現(xiàn)瘧原蟲；2、大血小板≥2+3、見到血小板聚集4、Dohle小體≥2+5、中毒性顆?！?+6、空泡≥2+1、原始細(xì)胞≥1%2、晚幼粒＞2%。3、中幼/早幼≥1%4、異常淋巴細(xì)胞＞5%5、有核紅細(xì)胞≥1%6、漿細(xì)胞≥1%形態(tài)異常數(shù)量異常鏡檢陽性的標(biāo)準(zhǔn)1、紅細(xì)胞體積異常和/或不均一性、染色異常≥2術(shù)語①閱片(slidereview)指將血涂片進(jìn)行瑞氏染色后，用顯微鏡鏡檢觀察各種血細(xì)胞形態(tài),尤其是CBC自動(dòng)計(jì)數(shù)的報(bào)警陽性細(xì)胞，但無需分類計(jì)數(shù)；②人工分類(manualdifferential)指將血涂片進(jìn)行瑞氏染色后,用顯微鏡進(jìn)行人工分類100或200個(gè)有核細(xì)胞,并計(jì)算各類有核細(xì)胞所占百分率。

術(shù)語①閱片(slidereview)指將血涂片進(jìn)行瑞氏二、國際規(guī)則的產(chǎn)生樣本總數(shù)：13298研究時(shí)間：2002-2005發(fā)表論文：自動(dòng)化全血細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分群分析后行為的建議規(guī)則BarnesPW,McFaddenSL,MachinSJetal.Theinternationalconsensusgroupforhematologyreview:suggestedcriteriaforactionfollowingautomatedCBCandWBCdifferentialanalysis.LabHematol.2005,11:83.二、國際規(guī)則的產(chǎn)生樣本總數(shù)：13298國際血涂片復(fù)審41條規(guī)則15條與CBC參數(shù)7條與LDC參數(shù)（包含絕對值）2條與網(wǎng)織紅細(xì)胞10條與WBC報(bào)警7條與儀器報(bào)警（包含RBC、PLT）國際血涂片復(fù)審41條規(guī)則15條與CBC參數(shù)7條與LDC參數(shù)（國際血涂片復(fù)審41條規(guī)則規(guī)則序號參數(shù)發(fā)生條件1～4應(yīng)對動(dòng)作1～3Rule＃parameter

and/oraction1,2,3規(guī)則特點(diǎn)

應(yīng)對特點(diǎn)2條涉及人工分類（＃16，＃26）33條涉及涂片鏡檢22項(xiàng)按SOP規(guī)定國際血涂片復(fù)審41條規(guī)則規(guī)則特點(diǎn)應(yīng)對特點(diǎn)2條涉及人工分類（序號參數(shù)發(fā)生條件應(yīng)對動(dòng)作1新生兒首次檢測標(biāo)本閱片3WBC、PLT低于實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)的儀器線性范圍按實(shí)驗(yàn)室SOP進(jìn)行4WBC、RBC、HGB、PLT無結(jié)果A.檢查標(biāo)本是否有凝塊;B.重測標(biāo)本;C.如結(jié)果維持不變，用替代方法計(jì)數(shù)5WBC（109/L）首次結(jié)果<4.0或>30.0閱片6WBC（109/L）3天內(nèi)Delta值超限,并<4.0或>30.0閱片7PLT（109/L）首次結(jié)果<100或>1000閱片序號參數(shù)發(fā)生條件應(yīng)對動(dòng)作1新生兒首次檢測標(biāo)本閱片3WBC序號參數(shù)發(fā)生條件應(yīng)對動(dòng)作16

無DC結(jié)果或DC結(jié)果不全人工分類和閱片22NRBC#首次出現(xiàn)任何結(jié)果閱片26WBC結(jié)果不可靠報(bào)警陽性報(bào)警A.確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求并重測標(biāo)本;B如出現(xiàn)同樣報(bào)警提示，檢查儀器;C.如需要,進(jìn)行人工分類37原始細(xì)胞首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報(bào)警閱片38原始細(xì)胞3-7日內(nèi)WBC的Delta值通過,有以前確認(rèn)的陽性報(bào)警結(jié)果按實(shí)驗(yàn)室SOP進(jìn)行序號參數(shù)發(fā)生條件應(yīng)對動(dòng)作16無DC結(jié)果或DC結(jié)果不全人工真陽性11.20%假陽性18.60%真陰性67.30%假陰性2.90%，即血涂片復(fù)審率為29.80%（復(fù)審率=真陽性%+假陽性%），有2.90%的標(biāo)本漏檢。

真陽性11.20%三、國際規(guī)則的意義血涂片復(fù)審41條國際規(guī)則發(fā)布的同時(shí)，在該論文中闡明了規(guī)則產(chǎn)生的思路和原理，為各實(shí)驗(yàn)室制定血涂片復(fù)審規(guī)則提供了理論和和實(shí)踐依據(jù)，具有普遍的指導(dǎo)和推廣意義。三、國際規(guī)則的意義血涂片復(fù)審41條國際規(guī)則發(fā)布的同時(shí)，在該論自動(dòng)LDC出現(xiàn)示警/血片復(fù)審鏡檢所見細(xì)胞與機(jī)檢不一致鏡檢所見細(xì)胞與機(jī)檢一致沒有示警發(fā)出自動(dòng)LDC結(jié)果人工LDC發(fā)出自動(dòng)LDC結(jié)果自動(dòng)LDC出現(xiàn)示警/血片復(fù)審鏡檢所見細(xì)胞與機(jī)檢不一致鏡檢所見全國血液學(xué)復(fù)檢專家小組.

全國血液學(xué)復(fù)檢專家小組工作會(huì)議紀(jì)要暨血細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)釋義.

中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志.2007

,30(4):380-382

湖北省臨床檢驗(yàn)中心關(guān)于印發(fā)《湖北省臨床實(shí)驗(yàn)室血液學(xué)復(fù)檢規(guī)則》的通知鄂臨檢發(fā)[2010]6號

叢玉隆,王昌富,樂家新.血細(xì)胞自動(dòng)化分析后血涂片復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)制定的原則與步驟.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志.2008,31(7):729-731.全國血液學(xué)復(fù)檢專家小組.全國血液學(xué)復(fù)檢專家小組工作會(huì)議紀(jì)要1、血涂片復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)的制定原則1、儀器識別能力和實(shí)驗(yàn)室要求的差異，決定復(fù)審規(guī)則的不同3、在保證篩選質(zhì)量的基礎(chǔ)上，盡量使復(fù)審率降低。2、復(fù)審范圍要涵蓋儀器的所有參數(shù)以及形態(tài)學(xué)特征。1、血涂片復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)的制定原則1、儀器識別能力和實(shí)驗(yàn)室要求的差文書錯(cuò)誤核查結(jié)果重復(fù)明確調(diào)整規(guī)則再次測試4、假陰性5、假陽性率無意義的報(bào)警儀器的靈敏度文書錯(cuò)誤核查結(jié)果重復(fù)明確調(diào)整規(guī)則再次測試4、假陰性5、假陽性2、血涂片復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)的制定步驟①校準(zhǔn)血細(xì)胞分析儀②制定血涂片陽性發(fā)現(xiàn)的評定標(biāo)準(zhǔn)③確定血液標(biāo)本的數(shù)量及類型④以雙盲法檢測計(jì)算診斷學(xué)參數(shù)⑤調(diào)整儀器閾值或初篩標(biāo)準(zhǔn)條款⑥符合預(yù)期指標(biāo)

適應(yīng)工作需要。2、血涂片復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)的制定步驟①校準(zhǔn)血細(xì)胞分析儀②制定血涂片陽假陽性

24.94%

假陰性

3.84%

復(fù)審率

37.03%

02.WBC<4.0或>30.0占

5.50%；03.PLT<100或>1000占5.70%；16.Ret#首次結(jié)果>0.10占8.92%；20.任何計(jì)數(shù)結(jié)果伴PLT聚集報(bào)警占5.59%；21.除PLT聚集外的PLT和MPV報(bào)警占5.09%;22.出現(xiàn)IG陽性報(bào)警:5.59%;24.不典型和/或變異L報(bào)警:5.34%

鏡檢2.巨大血小板:0.50%鏡檢3.血小板聚集:1.33%鏡檢11.嗜堿細(xì)胞:1.67%；(1)某血細(xì)胞分析儀血涂片復(fù)審規(guī)則初次驗(yàn)證假陽性24.94%02.WBC<4.0或>30.假陽性

12.68%

假陰性

5.50%復(fù)審率

23.02%

02.WBC<3.0或>30.0:1.42%;03.PLT<70或>1000:2.92%22.出現(xiàn)IG陽性報(bào)警:5.59%;24.不典型和/或變異L報(bào)警:5.34%25.出現(xiàn)Blasts陽性報(bào)警:2.09%

鏡檢2.巨大血小板:1.33%;鏡檢3.血小板聚集:1.50%;鏡檢11.嗜堿細(xì)胞:2.00%;(1)某血細(xì)胞分析儀血涂片復(fù)審規(guī)則調(diào)整后驗(yàn)證假陽性12.68%02.WBC<3.0或>30.0假陽性

17.75%

假陰性

15.36%

復(fù)審率

30.97%未成熟粒細(xì)胞示警WBC<4.0PLT<100鏡檢嗜堿細(xì)胞：>1%鏡檢嗜酸細(xì)胞：>5%單核細(xì)胞：>8%(2)某血細(xì)胞分析儀血涂片復(fù)審規(guī)則初次驗(yàn)證假陽性17.75%

未成熟粒細(xì)胞示警(2)某血細(xì)胞假陽性

12.81%

假陰性

1.95%

復(fù)審率

29.35%未成熟粒細(xì)胞示警WBC<3.0PLT<80鏡檢嗜堿細(xì)胞：>2%鏡檢嗜酸細(xì)胞：>10%單核細(xì)胞：>12%(2)某血細(xì)胞分析儀血涂片復(fù)審規(guī)則調(diào)整后驗(yàn)證假陽性12.81%未成熟粒細(xì)胞示警(2)某血細(xì)胞1.不同儀器有不同規(guī)則(1)XE-2100血細(xì)胞分析復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)制定協(xié)作組.SysmexXE-2100自動(dòng)血細(xì)胞分析和白細(xì)胞分類的復(fù)檢規(guī)則探討.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志.2008,31(7):752四、血涂片復(fù)檢規(guī)則的應(yīng)用住院患者隨機(jī)血細(xì)胞隨機(jī)血細(xì)胞分析標(biāo)本的血涂片復(fù)審率46.69%XE-2100復(fù)檢協(xié)作組成員單位：解放軍總醫(yī)院臨床檢驗(yàn)科；四川大學(xué)華西醫(yī)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)科；復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院檢驗(yàn)科；日本Sysmex醫(yī)用電子（上海）有限公司1.不同儀器有不同規(guī)則四、血涂片復(fù)檢規(guī)則的應(yīng)用住院患者隨機(jī)血(2)王厚芳,孫芾,于貴杰等.國際血細(xì)胞復(fù)檢規(guī)則在貝克曼-庫爾特系列血細(xì)胞分析儀上的應(yīng)用及改進(jìn)方案.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2008,31(7):758-762.門診隨機(jī)血細(xì)胞分析標(biāo)本的血涂片復(fù)審率分別為29.1%北京和睦家醫(yī)院檢驗(yàn)科；北京大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科；浙江省溫州醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科(2)王厚芳,孫芾,于貴杰等.國際血細(xì)胞復(fù)檢規(guī)則在貝克曼-庫序號相關(guān)參數(shù)復(fù)檢條件復(fù)檢要求1新生兒首次檢測標(biāo)本涂片鏡檢2CBC+DC儀器出現(xiàn)提示信號（flag）；RBC、WBC散點(diǎn)圖或直方圖出現(xiàn)異常涂片鏡檢3無分類結(jié)果或分類結(jié)果不全、異常任何時(shí)候涂片鏡檢和人工分類4核左移、毒性改變、寄生蟲、不典型淋巴細(xì)胞等醫(yī)生指定要鏡檢涂片鏡檢5CBC+DC臨床初診或提示有白血病等血液病及特殊病種（各院自定）涂片鏡檢和人工分類6CBC與前次檢查結(jié)果比較，明顯變化。（如WBC相差5000，PLT相差5萬）涂片鏡檢7MCV＜70fl或＞105fl涂片鏡檢8RBC、HbRBC：＜2.0×1012/L,＞6.0×1012/L；Hb：70＜/L，＞參考范圍上限20g/L涂片鏡檢(3)使用其它檢測系統(tǒng)的復(fù)檢要求序號相關(guān)參數(shù)復(fù)檢條件復(fù)檢要求1新生兒首次檢測標(biāo)本涂片鏡檢2C11WBCWBC＜3.0×109/L或＞12×109/L；兒童WBC：＜4.0×109/L，＞15×109/L(疑似為病毒感染者復(fù)查率酌情提高)；新生兒WBC：＜4.0×109/L，或＞20×109/L12中性粒細(xì)胞比率首次結(jié)果＜0.4或＞0.85涂片鏡檢13淋巴細(xì)胞比率首次結(jié)果＞0.50（成人）或＞0.60（兒童）涂片鏡檢14單核細(xì)胞比率首次結(jié)果＞0.15涂片鏡檢15嗜酸粒細(xì)胞比率首次結(jié)果＞0.08涂片鏡檢16嗜堿粒細(xì)胞比率首次結(jié)果＞0.02涂片鏡檢9WBCWBC：＜4.0×109/L，＞10×109/L；兒童WBC：＜4.0×109/L，＞15×109/L；新生兒WBC：＞20×109/L；化、放療患者WBC：＜3.0×109/L(首次)，＜2.0×109/L(治療后)涂片鏡檢10細(xì)胞比率大細(xì)胞比率：＞0.85，或＜0.40；中細(xì)胞比率：＞0.12；小細(xì)胞比率：成人＞0.50，兒童＞0.60涂片鏡檢11WBCWBC＜3.0×109/L或＞12×109/L；兒二分群血液分析儀：100%顯微鏡WBC分類及血細(xì)胞形態(tài)檢查；三分群血液分析儀：為1-10條；五分類血液分析儀：為1-8和11-16條。6-16項(xiàng)為首次復(fù)查要求，第二次檢查如間隔時(shí)間短，結(jié)果變化較少，復(fù)查可根據(jù)情況決定。二分群血液分析儀：100%顯微鏡WBC分類及血細(xì)胞形態(tài)檢查；(1)不同檢測原理儀器和方案的比較研究儀器靈敏度特異度陽性預(yù)期值陰性預(yù)期值正確率A83.675.256.192.477.5S82.478.351.091.879.52.實(shí)驗(yàn)室建立和驗(yàn)證本室規(guī)則儀器真陽性假陽性真陰性假陰性復(fù)審率A23.018.054.54.541.0S23.515.556.05.038.0(1)不同檢測原理儀器和方案的比較研究儀器靈敏度特異度陽性預(yù)假陽性主要涉及條款其次涉及條款A(yù)型懷疑性報(bào)警條款24，20/36首次檢測白細(xì)胞數(shù)＜4×109/L者”條款5，14/36S型首次檢測白細(xì)胞數(shù)＜4×109/L者”條款5，12/31不典型淋巴細(xì)胞條款35，10/31真陽性：條款數(shù)≥2條者假陽性：條款數(shù)≥2條者A型34例（73.9%）18例（50.0%）S型30例（63.8%）3例（9.7%）假陽性主要涉及條款其次涉及條款A(yù)型懷疑性報(bào)警條款24，20/復(fù)檢方案真陽性假陽性真陰性假陰性復(fù)檢率例數(shù)%例數(shù)%例數(shù)%例數(shù)%例數(shù)%本方案3510.094312.3926676.6630.877822.48國際規(guī)則3710.6612836.8918152.1610.2916547.55(2)血涂片復(fù)審原始/幼稚血細(xì)胞的臨床診斷性試驗(yàn)研究復(fù)檢方案敏感性特異性準(zhǔn)確性陽性似然比陰性似然比陽性預(yù)期值陰性預(yù)期值本方案92.1186.0888.476.620.0944.8798.88國際規(guī)則97.3758.5862.822.350.0422.4299.45復(fù)檢方案真陽性假陽性真陰性假陰性復(fù)檢率例數(shù)%例數(shù)%例數(shù)%例數(shù)復(fù)審血涂片的百分比序號參數(shù)發(fā)生條件百分比1PLT（109/L）首次結(jié)果<85或>60041.58%2IG示警28.71%3NRBCLYM示警超限5.6%5.6%復(fù)審血涂片的百分比序號參數(shù)發(fā)生條件百分比1PLT（109/規(guī)則 參數(shù) 首要 和/或 次要 和/或 第三 和/或 第四1 … …11 MCV >105fl 和 成人 和 >24hour

…行動(dòng)一 行動(dòng)二 行動(dòng)三

復(fù)片…復(fù)片看大的細(xì)胞 如果沒有大細(xì)胞 如果沒有新鮮血，形態(tài)改變 要新鮮血 報(bào)告單注明

3.血細(xì)胞分析儀的新功能——與國際復(fù)審規(guī)則一致的界面規(guī)則 參數(shù) 首要 和/或 次要 和/或 第三 和/或 第四 王昌富：2011血涂片復(fù)審規(guī)則的應(yīng)用和問題探討課件王昌富：2011血涂片復(fù)審規(guī)則的應(yīng)用和問題探討課件王昌富：2011血涂片復(fù)審規(guī)則的應(yīng)用和問題探討課件王昌富：2011血涂片復(fù)審規(guī)則的應(yīng)用和問題探討課件王昌富：2011血涂片復(fù)審規(guī)則的應(yīng)用和問題探討課件五、值得注意的的問題臨床結(jié)合邏輯錯(cuò)誤方法局限資歷認(rèn)定五、值得注意的的問題臨床結(jié)合邏輯錯(cuò)誤方法局限資歷認(rèn)定1.臨床結(jié)合臨床醫(yī)生提出閱片必須鏡檢，白血病患者（不論初診還是復(fù)診）血細(xì)胞分析標(biāo)本必須鏡檢。一組4840病例臨床研究，平均每天進(jìn)行大約1000個(gè)CBC和LDC，大約14%的標(biāo)本，即140個(gè)標(biāo)本需要顯微鏡觀察，但其中有130個(gè)標(biāo)本是臨床醫(yī)生事先就提出需要人工分類計(jì)數(shù)。1.臨床結(jié)合臨床醫(yī)生提出閱片必須鏡檢，白血病患者（不論初診還2.邏輯錯(cuò)誤血涂片復(fù)審固然是自動(dòng)化血細(xì)胞分析后的質(zhì)量保證措施，但是顯微鏡檢查為定性或半定量分析方法，對于儀器法定量分析的項(xiàng)目是否適合以鏡檢“驗(yàn)證”，比如以“紅細(xì)胞明顯大小不等”驗(yàn)證“RDW增大”、“低色素紅細(xì)胞＞30%”驗(yàn)證“MCHC減低”科學(xué)與否？2.邏輯錯(cuò)誤血涂片復(fù)審固然是自動(dòng)化血細(xì)胞分析后的質(zhì)量保證措施MAPSS單一電阻核酸熒光VCS原理相差顯微鏡流式細(xì)胞術(shù)低水平血小板復(fù)審策略＜100×109/L＜30×109/L≥100×109/L3.方法局限MAPSS單一電阻VCS原理相差顯微鏡流式細(xì)胞術(shù)低水平血小板各種方法對于血小板減少癥的檢測結(jié)果（x±s，×109/L）各種方法對于血小板減少癥的檢測結(jié)果（x±s，×109/L）血小板減少時(shí)各種方法與流式細(xì)胞術(shù)的相關(guān)性（r）流式細(xì)胞術(shù)＜30×109/L，儀器法、顯微鏡法增高；＜100×109/L者，部分儀器法計(jì)數(shù)的有差別。＜30×109/L用流式細(xì)胞術(shù)驗(yàn)證；＜100×109/L者尚可用相差顯微鏡法或經(jīng)過驗(yàn)證的儀器復(fù)審。血小板減少時(shí)各種方法與流式細(xì)胞術(shù)的相關(guān)性（r）流式細(xì)胞術(shù)＜3選擇在血液學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作10年的中級技術(shù)人員1人（乙）；在基礎(chǔ)檢驗(yàn)室工作或在非基礎(chǔ)檢驗(yàn)及血液學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作10年的中級技術(shù)人員各1人（丙或丁）；在本院血液學(xué)實(shí)驗(yàn)室接受過1年訓(xùn)練或未接受血液學(xué)檢驗(yàn)訓(xùn)練、工作3年的基礎(chǔ)檢驗(yàn)室初級技術(shù)人員各1人（戊或庚，檢驗(yàn)專業(yè)學(xué)士學(xué)位）。以曾接受省部級醫(yī)院血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)室培訓(xùn)6月以上、在血液學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作20年以上的高級技術(shù)人員（甲）4.資歷認(rèn)定選擇在血液學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作10年的中級技術(shù)人員1人（乙）；以曾接高年資曾受訓(xùn)白血病高年資未受訓(xùn)嗜酸性粒細(xì)胞增多低年資未受訓(xùn)淋巴細(xì)胞增多低年資曾受訓(xùn)粒細(xì)胞核左移高年資曾受訓(xùn)白血病高年資未受訓(xùn)嗜酸性粒細(xì)胞增多低年資未受訓(xùn)淋王昌富：2011血涂片復(fù)審規(guī)則的應(yīng)用和問題探討課件王昌富：2011血涂片復(fù)審規(guī)則的應(yīng)用和問題探討課件王昌富：2011血涂片復(fù)審規(guī)則的應(yīng)用和問題探討課件王昌富：2011血涂片復(fù)審規(guī)則的應(yīng)用和問題探討課件王昌富：2011血涂片復(fù)審規(guī)則的應(yīng)用和問題探討課件【研究發(fā)現(xiàn)】各類人員對正常細(xì)胞的分類數(shù)據(jù)均無顯著性差異；未曾接受血液學(xué)檢驗(yàn)培訓(xùn)者對于異常細(xì)胞分辨能力較差【創(chuàng)新價(jià)值】只有血細(xì)胞形態(tài)學(xué)專業(yè)技術(shù)人員才能準(zhǔn)確完成白血病細(xì)胞類型的鑒定，觀察用時(shí)明顯少于其它人員。培訓(xùn)十分必要【研究發(fā)現(xiàn)】各類人員對正常細(xì)胞的分類數(shù)據(jù)均無顯著性差異；未曾謝謝大家！謝謝大家！

血涂片復(fù)審規(guī)則

--應(yīng)用和問題探討

王昌富鄧明鳳肖秀林華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬荊州醫(yī)院434020

血涂片復(fù)審規(guī)則

--應(yīng)用和問1981年NCCLS制定H20P我國制定了相應(yīng)指南1981年NCCLS制定H20P人工血涂片復(fù)審率類別百分位數(shù)值（%）平均值1025507590涂片鏡檢11.10.83.29.116.023.6人工分類17.63.27.814.725.035.8血涂片復(fù)審28.79.918.526.739.150.0美國病理學(xué)家學(xué)會(huì)問卷調(diào)查計(jì)劃（ｎ＝263，2005）人工血涂片復(fù)審率類別百分位數(shù)值（%）平均值102550759研究方法BerendHouwen在2002年春天邀請了來自6個(gè)國家17個(gè)實(shí)驗(yàn)室的專家舉行了一次研討會(huì)。InternationalConsensusGroupforHematologyReview研究方法BerendHouwen在2002年成員：美國12澳大利亞2加拿大2英國1瑞士1西班牙1Mr.PatrickW.BarnesBarnesJewishHospitalUSAMs.RhondaBeckerDavisMedicalCenterUniversityofCaliforniaUSAMr.TerryFawcettBiospecifixAustraliaDr.BernardJ.FernandesDepartmentofPathology＆

LabMedicineMt.SinaiHospitalCanadaDr.BerendHouwentBeckmanCoulter,Inc.Ms.LindaKemererGrant/RiversideMethodistHospitalsUSA

Dr.ElkinSimsonMt.SinaiHospitalUSAMs.VickySoppaMayoFoundationUSAMr.MichaelR.SuterOMLLaboratoriesUSADr.JesusVillarubiaHospitalRamonyCajalSpainMs.DebbieWallDynacareLaboratoriesDynacareNorthwest,Inc.USAMs.JeriWaltersSinaiSamaritanMedicalCenterEastCampusUSAMs.BetteA.JamiesonDepartmentofPathologyTheChildren’sHospitalUSAMs.LynnJohnstoneHealthAllianceLaboratoriesUSAProfessorSamuelJ.MachinDepartmentofHaematologyUniversityCollegeHospitalUKMs.StefanieL.McFaddenLaboratoryConsultantUSADr.KirkW.ReadyChinookHealthRegion,Corp.OfficeCanadaDr.DavidRosenfeldLiverpoolHospitalAustraliaDr.RamonSimonBeckmanCoulterEurocenterS.A.Switzerland成員：美國12澳大利亞2加拿大2英國1CELL-DYN4000ADIVA120SE9000XE2100LH750GenS儀器CELL-DYN4000ADIVA120SE9000條例

對于血細(xì)胞分析的每一個(gè)參數(shù)進(jìn)行深入討論，共同商議提出83條規(guī)則，并在15個(gè)實(shí)驗(yàn)室初步驗(yàn)證。（100080：20）如果某條例被涉及而血涂片復(fù)審發(fā)現(xiàn)異常即為真陽性，未發(fā)現(xiàn)異常即為假陽性；如果條例未被涉及而血涂片復(fù)審發(fā)現(xiàn)異常即為假陰性，未發(fā)現(xiàn)異常即為真陰性。條例對于血細(xì)胞分析的每一個(gè)參數(shù)進(jìn)行深入討論，共同商議提出鏡檢陽性的標(biāo)準(zhǔn)1、紅細(xì)胞體積異常和/或不均一性、染色異?！?+，發(fā)現(xiàn)瘧原蟲；2、大血小板≥2+3、見到血小板聚集4、Dohle小體≥2+5、中毒性顆?！?+6、空泡≥2+1、原始細(xì)胞≥1%2、晚幼粒＞2%。3、中幼/早幼≥1%4、異常淋巴細(xì)胞＞5%5、有核紅細(xì)胞≥1%6、漿細(xì)胞≥1%形態(tài)異常數(shù)量異常鏡檢陽性的標(biāo)準(zhǔn)1、紅細(xì)胞體積異常和/或不均一性、染色異?！?術(shù)語①閱片(slidereview)指將血涂片進(jìn)行瑞氏染色后，用顯微鏡鏡檢觀察各種血細(xì)胞形態(tài),尤其是CBC自動(dòng)計(jì)數(shù)的報(bào)警陽性細(xì)胞，但無需分類計(jì)數(shù)；②人工分類(manualdifferential)指將血涂片進(jìn)行瑞氏染色后,用顯微鏡進(jìn)行人工分類100或200個(gè)有核細(xì)胞,并計(jì)算各類有核細(xì)胞所占百分率。

術(shù)語①閱片(slidereview)指將血涂片進(jìn)行瑞氏二、國際規(guī)則的產(chǎn)生樣本總數(shù)：13298研究時(shí)間：2002-2005發(fā)表論文：自動(dòng)化全血細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分群分析后行為的建議規(guī)則BarnesPW,McFaddenSL,MachinSJetal.Theinternationalconsensusgroupforhematologyreview:suggestedcriteriaforactionfollowingautomatedCBCandWBCdifferentialanalysis.LabHematol.2005,11:83.二、國際規(guī)則的產(chǎn)生樣本總數(shù)：13298國際血涂片復(fù)審41條規(guī)則15條與CBC參數(shù)7條與LDC參數(shù)（包含絕對值）2條與網(wǎng)織紅細(xì)胞10條與WBC報(bào)警7條與儀器報(bào)警（包含RBC、PLT）國際血涂片復(fù)審41條規(guī)則15條與CBC參數(shù)7條與LDC參數(shù)（國際血涂片復(fù)審41條規(guī)則規(guī)則序號參數(shù)發(fā)生條件1～4應(yīng)對動(dòng)作1～3Rule＃parameter

and/oraction1,2,3規(guī)則特點(diǎn)

應(yīng)對特點(diǎn)2條涉及人工分類（＃16，＃26）33條涉及涂片鏡檢22項(xiàng)按SOP規(guī)定國際血涂片復(fù)審41條規(guī)則規(guī)則特點(diǎn)應(yīng)對特點(diǎn)2條涉及人工分類（序號參數(shù)發(fā)生條件應(yīng)對動(dòng)作1新生兒首次檢測標(biāo)本閱片3WBC、PLT低于實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)的儀器線性范圍按實(shí)驗(yàn)室SOP進(jìn)行4WBC、RBC、HGB、PLT無結(jié)果A.檢查標(biāo)本是否有凝塊;B.重測標(biāo)本;C.如結(jié)果維持不變，用替代方法計(jì)數(shù)5WBC（109/L）首次結(jié)果<4.0或>30.0閱片6WBC（109/L）3天內(nèi)Delta值超限,并<4.0或>30.0閱片7PLT（109/L）首次結(jié)果<100或>1000閱片序號參數(shù)發(fā)生條件應(yīng)對動(dòng)作1新生兒首次檢測標(biāo)本閱片3WBC序號參數(shù)發(fā)生條件應(yīng)對動(dòng)作16

無DC結(jié)果或DC結(jié)果不全人工分類和閱片22NRBC#首次出現(xiàn)任何結(jié)果閱片26WBC結(jié)果不可靠報(bào)警陽性報(bào)警A.確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求并重測標(biāo)本;B如出現(xiàn)同樣報(bào)警提示，檢查儀器;C.如需要,進(jìn)行人工分類37原始細(xì)胞首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報(bào)警閱片38原始細(xì)胞3-7日內(nèi)WBC的Delta值通過,有以前確認(rèn)的陽性報(bào)警結(jié)果按實(shí)驗(yàn)室SOP進(jìn)行序號參數(shù)發(fā)生條件應(yīng)對動(dòng)作16無DC結(jié)果或DC結(jié)果不全人工真陽性11.20%假陽性18.60%真陰性67.30%假陰性2.90%，即血涂片復(fù)審率為29.80%（復(fù)審率=真陽性%+假陽性%），有2.90%的標(biāo)本漏檢。

真陽性11.20%三、國際規(guī)則的意義血涂片復(fù)審41條國際規(guī)則發(fā)布的同時(shí)，在該論文中闡明了規(guī)則產(chǎn)生的思路和原理，為各實(shí)驗(yàn)室制定血涂片復(fù)審規(guī)則提供了理論和和實(shí)踐依據(jù)，具有普遍的指導(dǎo)和推廣意義。三、國際規(guī)則的意義血涂片復(fù)審41條國際規(guī)則發(fā)布的同時(shí)，在該論自動(dòng)LDC出現(xiàn)示警/血片復(fù)審鏡檢所見細(xì)胞與機(jī)檢不一致鏡檢所見細(xì)胞與機(jī)檢一致沒有示警發(fā)出自動(dòng)LDC結(jié)果人工LDC發(fā)出自動(dòng)LDC結(jié)果自動(dòng)LDC出現(xiàn)示警/血片復(fù)審鏡檢所見細(xì)胞與機(jī)檢不一致鏡檢所見全國血液學(xué)復(fù)檢專家小組.

全國血液學(xué)復(fù)檢專家小組工作會(huì)議紀(jì)要暨血細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)釋義.

中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志.2007

,30(4):380-382

湖北省臨床檢驗(yàn)中心關(guān)于印發(fā)《湖北省臨床實(shí)驗(yàn)室血液學(xué)復(fù)檢規(guī)則》的通知鄂臨檢發(fā)[2010]6號

叢玉隆,王昌富,樂家新.血細(xì)胞自動(dòng)化分析后血涂片復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)制定的原則與步驟.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志.2008,31(7):729-731.全國血液學(xué)復(fù)檢專家小組.全國血液學(xué)復(fù)檢專家小組工作會(huì)議紀(jì)要1、血涂片復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)的制定原則1、儀器識別能力和實(shí)驗(yàn)室要求的差異，決定復(fù)審規(guī)則的不同3、在保證篩選質(zhì)量的基礎(chǔ)上，盡量使復(fù)審率降低。2、復(fù)審范圍要涵蓋儀器的所有參數(shù)以及形態(tài)學(xué)特征。1、血涂片復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)的制定原則1、儀器識別能力和實(shí)驗(yàn)室要求的差文書錯(cuò)誤核查結(jié)果重復(fù)明確調(diào)整規(guī)則再次測試4、假陰性5、假陽性率無意義的報(bào)警儀器的靈敏度文書錯(cuò)誤核查結(jié)果重復(fù)明確調(diào)整規(guī)則再次測試4、假陰性5、假陽性2、血涂片復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)的制定步驟①校準(zhǔn)血細(xì)胞分析儀②制定血涂片陽性發(fā)現(xiàn)的評定標(biāo)準(zhǔn)③確定血液標(biāo)本的數(shù)量及類型④以雙盲法檢測計(jì)算診斷學(xué)參數(shù)⑤調(diào)整儀器閾值或初篩標(biāo)準(zhǔn)條款⑥符合預(yù)期指標(biāo)

適應(yīng)工作需要。2、血涂片復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)的制定步驟①校準(zhǔn)血細(xì)胞分析儀②制定血涂片陽假陽性

24.94%

假陰性

3.84%

復(fù)審率

37.03%

02.WBC<4.0或>30.0占

5.50%；03.PLT<100或>1000占5.70%；16.Ret#首次結(jié)果>0.10占8.92%；20.任何計(jì)數(shù)結(jié)果伴PLT聚集報(bào)警占5.59%；21.除PLT聚集外的PLT和MPV報(bào)警占5.09%;22.出現(xiàn)IG陽性報(bào)警:5.59%;24.不典型和/或變異L報(bào)警:5.34%

鏡檢2.巨大血小板:0.50%鏡檢3.血小板聚集:1.33%鏡檢11.嗜堿細(xì)胞:1.67%；(1)某血細(xì)胞分析儀血涂片復(fù)審規(guī)則初次驗(yàn)證假陽性24.94%02.WBC<4.0或>30.假陽性

12.68%

假陰性

5.50%復(fù)審率

23.02%

02.WBC<3.0或>30.0:1.42%;03.PLT<70或>1000:2.92%22.出現(xiàn)IG陽性報(bào)警:5.59%;24.不典型和/或變異L報(bào)警:5.34%25.出現(xiàn)Blasts陽性報(bào)警:2.09%

鏡檢2.巨大血小板:1.33%;鏡檢3.血小板聚集:1.50%;鏡檢11.嗜堿細(xì)胞:2.00%;(1)某血細(xì)胞分析儀血涂片復(fù)審規(guī)則調(diào)整后驗(yàn)證假陽性12.68%02.WBC<3.0或>30.0假陽性

17.75%

假陰性

15.36%

復(fù)審率

30.97%未成熟粒細(xì)胞示警WBC<4.0PLT<100鏡檢嗜堿細(xì)胞：>1%鏡檢嗜酸細(xì)胞：>5%單核細(xì)胞：>8%(2)某血細(xì)胞分析儀血涂片復(fù)審規(guī)則初次驗(yàn)證假陽性17.75%

未成熟粒細(xì)胞示警(2)某血細(xì)胞假陽性

12.81%

假陰性

1.95%

復(fù)審率

29.35%未成熟粒細(xì)胞示警WBC<3.0PLT<80鏡檢嗜堿細(xì)胞：>2%鏡檢嗜酸細(xì)胞：>10%單核細(xì)胞：>12%(2)某血細(xì)胞分析儀血涂片復(fù)審規(guī)則調(diào)整后驗(yàn)證假陽性12.81%未成熟粒細(xì)胞示警(2)某血細(xì)胞1.不同儀器有不同規(guī)則(1)XE-2100血細(xì)胞分析復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)制定協(xié)作組.SysmexXE-2100自動(dòng)血細(xì)胞分析和白細(xì)胞分類的復(fù)檢規(guī)則探討.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志.2008,31(7):752四、血涂片復(fù)檢規(guī)則的應(yīng)用住院患者隨機(jī)血細(xì)胞隨機(jī)血細(xì)胞分析標(biāo)本的血涂片復(fù)審率46.69%XE-2100復(fù)檢協(xié)作組成員單位：解放軍總醫(yī)院臨床檢驗(yàn)科；四川大學(xué)華西醫(yī)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)科；復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院檢驗(yàn)科；日本Sysmex醫(yī)用電子（上海）有限公司1.不同儀器有不同規(guī)則四、血涂片復(fù)檢規(guī)則的應(yīng)用住院患者隨機(jī)血(2)王厚芳,孫芾,于貴杰等.國際血細(xì)胞復(fù)檢規(guī)則在貝克曼-庫爾特系列血細(xì)胞分析儀上的應(yīng)用及改進(jìn)方案.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2008,31(7):758-762.門診隨機(jī)血細(xì)胞分析標(biāo)本的血涂片復(fù)審率分別為29.1%北京和睦家醫(yī)院檢驗(yàn)科；北京大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科；浙江省溫州醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科(2)王厚芳,孫芾,于貴杰等.國際血細(xì)胞復(fù)檢規(guī)則在貝克曼-庫序號相關(guān)參數(shù)復(fù)檢條件復(fù)檢要求1新生兒首次檢測標(biāo)本涂片鏡檢2CBC+DC儀器出現(xiàn)提示信號（flag）；RBC、WBC散點(diǎn)圖或直方圖出現(xiàn)異常涂片鏡檢3無分類結(jié)果或分類結(jié)果不全、異常任何時(shí)候涂片鏡檢和人工分類4核左移、毒性改變、寄生蟲、不典型淋巴細(xì)胞等醫(yī)生指定要鏡檢涂片鏡檢5CBC+DC臨床初診或提示有白血病等血液病及特殊病種（各院自定）涂片鏡檢和人工分類6CBC與前次檢查結(jié)果比較，明顯變化。（如WBC相差5000，PLT相差5萬）涂片鏡檢7MCV＜70fl或＞105fl涂片鏡檢8RBC、HbRBC：＜2.0×1012/L,＞6.0×1012/L；Hb：70＜/L，＞參考范圍上限20g/L涂片鏡檢(3)使用其它檢測系統(tǒng)的復(fù)檢要求序號相關(guān)參數(shù)復(fù)檢條件復(fù)檢要求1新生兒首次檢測標(biāo)本涂片鏡檢2C11WBCWBC＜3.0×109/L或＞12×109/L；兒童WBC：＜4.0×109/L，＞15×109/L(疑似為病毒感染者復(fù)查率酌情提高)；新生兒WBC：＜4.0×109/L，或＞20×109/L12中性粒細(xì)胞比率首次結(jié)果＜0.4或＞0.85涂片鏡檢13淋巴細(xì)胞比率首次結(jié)果＞0.50（成人）或＞0.60（兒童）涂片鏡檢14單核細(xì)胞比率首次結(jié)果＞0.15涂片鏡檢15嗜酸粒細(xì)胞比率首次結(jié)果＞0.08涂片鏡檢16嗜堿粒細(xì)胞比率首次結(jié)果＞0.02涂片鏡檢9WBCWBC：＜4.0×109/L，＞10×109/L；兒童WBC：＜4.0×109/L，＞15×109/L；新生兒WBC：＞20×109/L；化、放療患者WBC：＜3.0×109/L(首次)，＜2.0×109/L(治療后)涂片鏡檢10細(xì)胞比率大細(xì)胞比率：＞0.85，或＜0.40；中細(xì)胞比率：＞0.12；小細(xì)胞比率：成人＞0.50，兒童＞0.60涂片鏡檢11WBCWBC＜3.0×109/L或＞12×109/L；兒二分群血液分析儀：100%顯微鏡WBC分類及血細(xì)胞形態(tài)檢查；三分群血液分析儀：為1-10條；五分類血液分析儀：為1-8和11-16條。6-16項(xiàng)為首次復(fù)查要求，第二次檢查如間隔時(shí)間短，結(jié)果變化較少，復(fù)查可根據(jù)情況決定。二分群血液分析儀：100%顯微鏡WBC分類及血細(xì)胞形態(tài)檢查；(1)不同檢測原理儀器和方案的比較研究儀器靈敏度特異度陽性預(yù)期值陰性預(yù)期值正確率A83.675.256.192.477.5S82.478.351.091.879.52.實(shí)驗(yàn)室建立和驗(yàn)證本室規(guī)則儀器真陽性假陽性真陰性假陰性復(fù)審率A23.018.054.54.541.0S23.515.556.05.038.0(1)不同檢測原理儀器和方案的比較研究儀器靈敏度特異度陽性預(yù)假陽性主要涉及條款其次涉及條款A(yù)型懷疑性報(bào)警條款24，20/36首次檢測白細(xì)胞數(shù)＜4×109/L者”條款5，14/36S型首次檢測白細(xì)胞數(shù)＜4×109/L者”條款5，12/31不典型淋巴細(xì)胞條款35，10/31真陽性：條款數(shù)≥2條者假陽性：條款數(shù)≥2條者A型34例（73.9%）18例（50.0%）S型30例（63.8%）3例（9.7%）假陽性主要涉及條款其次涉及條款A(yù)型懷疑性報(bào)警條款24，20/復(fù)檢方案真陽性假陽性真陰性假陰性復(fù)檢率例數(shù)%例數(shù)%例數(shù)%例數(shù)%例數(shù)%本方案3510.094312.3926676.6630.877822.48國際規(guī)則3710.6612836.8918152.1610.2916547.55(2)血涂片復(fù)審原始/幼稚血細(xì)胞的臨床診斷性試驗(yàn)研究復(fù)檢方案敏感性特異性準(zhǔn)確性陽性似然比陰性似然比陽