模擬試卷五及參考答案

模擬試卷五及參考答案模擬試卷五及參考答案模擬試卷五及參考答案資料僅供參考文件編號(hào)：2022年4月模擬試卷五及參考答案版本號(hào)：A修改號(hào)：1頁(yè)次：1.0審核：批準(zhǔn):發(fā)布日期：模擬試卷五及參考答案一、名詞解釋(10分)同尾酶；2.基因文庫(kù);3.genetherapy；4.gelretardation；5.反義RNA技術(shù)二、填空(20分)1.質(zhì)粒是存在于細(xì)菌細(xì)胞中能獨(dú)立于染色體DNA而自主復(fù)制的、、的雙鏈DNA分子。2.1973年，Cohen等獲得了抗四環(huán)素和新霉素的重組菌落，標(biāo)志著基因工程的。3.基因工程的應(yīng)用主要在、、分離鑒定生物體的遺傳信息、研究基因的表達(dá)調(diào)控等方面。4.帶有兩種宿主復(fù)制子，因而能在兩種生物體內(nèi)復(fù)制的載體分子，稱為。5.λDNA兩端各有12個(gè)核苷酸的突起，而且可以通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)形成環(huán)狀分子，配對(duì)的區(qū)域稱為。6.EB-CsCl梯度離心法可以純化質(zhì)粒DNA，其中EB的作用有兩個(gè)：、。7.建立生物基因文庫(kù)所需克隆的數(shù)目，可通過(guò)公式進(jìn)行估算。8.將噬菌體DNA轉(zhuǎn)入細(xì)菌的方法主要有、兩種。9.利用lacZ’基因的插入失活鑒定需要在培養(yǎng)基中添加IPTG和兩種物質(zhì)，根據(jù)藍(lán)白斑選擇重組克隆。其中IPTG的作用是。10.PCR反應(yīng)的每一次循環(huán)都包括、、三個(gè)步驟，通過(guò)25-30cycles，可以擴(kuò)增大量的目的片段。11.植物基因直接轉(zhuǎn)移技術(shù)的原理是：。12.按照限制性內(nèi)切酶的命名原則，BamHI中，Bam表示，H表示，I表示。13.PCR反應(yīng)中的一個(gè)引物序列為AGTCATCAGAGAAACCCTTT，其Tm值大約是。14.常用的標(biāo)記探針的方法有、、，雜交后，可用放射性自顯影等方法顯示雜交帶。15.通過(guò)、兩種策略，可以達(dá)到改良植物性狀的目的。16.在動(dòng)物基因工程中，常用的載體主要有、、、__________。17.YAC載體的中文名稱是，包括著絲粒、、_________________等結(jié)構(gòu)，才能保證其正常的復(fù)制。18.在連接反應(yīng)中，平頭末端的連接效率要粘性末端的連接效率。19.農(nóng)桿菌侵染植物材料時(shí)，Ti質(zhì)粒上的識(shí)別植物創(chuàng)傷信號(hào)，啟動(dòng)基因表達(dá)，將切割下來(lái)，轉(zhuǎn)移到植物染色體DNA上。20.在大腸桿菌中，基因的表達(dá)調(diào)控主要有兩種方式和。三、選擇題(10分)1.下列哪種方法不能用于重組菌落的鑒定（）根據(jù)外源DNA的序列進(jìn)行PCR分析菌落原位雜交酶切鑒定提取重組DNA分子，電泳分析。2.oligonucletide-directedmutagensis中，需要DNA，因此一般用_______作為克隆載體。（）a.單鏈，pUC19b.單鏈，M13c.雙鏈，M13d.雙鏈，λ3.要建立人類的基因文庫(kù)，下列那種載體所需要的克隆數(shù)目最少（）a.plasmidb.λ載體c.Cosmidd.BAC4.在酵母載體中，的轉(zhuǎn)化率最高，最穩(wěn)定。（）a.YEps,YIpsb.YRps,YIpsc.YIps,YEpsd.YEps,YRps5.低等真核生物如酵母、絲狀真菌等的染色體可以通過(guò)下列哪種方法進(jìn)行分離。（）a.瓊脂糖凝膠b.聚丙烯酰胺凝膠c.OFAGEd.變性瓊脂糖凝膠6.為了提高質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量，在細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中，可加入（）增加質(zhì)粒的拷貝數(shù)。a.噬菌體b.氯霉素c.Kand.amp7.在植物遺傳轉(zhuǎn)化中，可以利用P1噬菌體，它含有基因，可以識(shí)別靶序列并將其切割下來(lái)。因此，我們可以將Kan抗性基因置于其靶序列中間，利用這一系統(tǒng)可將Kan抗性基因從轉(zhuǎn)基因植株中剔除。a.Creb.NPTIIc.trad.Cos下列那種酶可以降解RNA:DNA雜交分子中的RNA()a.Reversetranscriptaseb.RNaseHc.DNaseId.拓?fù)洚悩?gòu)酶9.大腸桿菌質(zhì)?？寺NA片段的大小是下列哪種情況（）a.<3kbc.<8kbd.40kb10.下列哪種人體蛋白不能通過(guò)大腸桿菌來(lái)表達(dá)（）a.胰島素b.生長(zhǎng)激素c.重組因子VIIId.生長(zhǎng)激素抑制素四、問(wèn)答題(30分)怎樣測(cè)定DNA的濃度和純度要求寫(xiě)出兩種測(cè)定濃度的方法。估算DNA分子量的方法有哪些？重組率指得是含有外源DNA片段的重組分子與加入的載體分子數(shù)之比，請(qǐng)問(wèn)如何提高重組率？克隆PCR片段的方法有哪些？怎樣鑒定DNA分子上的蛋白質(zhì)結(jié)合位點(diǎn)？目前已在E.coli中合成了大量的人體蛋白，但不可能利用E.coli合成所有的人體蛋白，為什么？

分子標(biāo)記有哪些類型在作物遺傳育種中有哪些應(yīng)用植物基因轉(zhuǎn)移的方法有哪些各自有哪些優(yōu)缺點(diǎn)五、方案設(shè)計(jì)(15分)從一雙鏈DNA病毒上克隆了一個(gè)基因，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)方案，對(duì)克隆的基因進(jìn)行定位分析。從人體中分離了一種重要酶，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)方案，利用大腸桿菌來(lái)生產(chǎn)這種人體蛋白。六、論述題(15分)結(jié)合GMO的生物安全性，談?wù)勀銓?duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)發(fā)展前景的看法？標(biāo)準(zhǔn)答案一、名詞解釋(10分)同尾酶：識(shí)別位點(diǎn)不同，但切出的DNA片段具有相同的末端序列?；蛭膸?kù)：某種特定的生物所含有的能夠包含所有基因的足夠數(shù)目的克隆的集合。genetherapy：基因治療，用正常基因取代病人細(xì)胞中的缺陷基因，以達(dá)到戰(zhàn)勝分子病的目的。包括基因診斷、基因分離、載體構(gòu)建、基因轉(zhuǎn)移等步驟。gelretardation：凝膠滯后。DNA結(jié)合蛋白后，分子量將會(huì)增加，電泳時(shí)的遷移率降低。反義RNA技術(shù)：與天然mRNA反向互補(bǔ)的RNA分子（1分），在基因工程中用來(lái)阻止內(nèi)源mRNA的表達(dá)，從而改變生物的性狀。二、填空(20分)1共價(jià)、閉和、環(huán)狀； 2誕生； 3生產(chǎn)生物大分子、購(gòu)建新物種；4穿梭質(zhì)粒； 5cos位點(diǎn)；6降低DNA浮力密度分離超螺旋DNA和線狀DNA，指示條帶位置；7N=ln(1-P)/ln(1-a/b) 8轉(zhuǎn)染、體外裝配 9X-GAL、誘導(dǎo)物10變性、退火、延伸 11超螺旋結(jié)構(gòu)質(zhì)粒DNA，可以隨機(jī)整合到植物基因組12發(fā)現(xiàn)酶的細(xì)菌，細(xì)菌的菌株或品系，第一種酶1356； 14末端填充（Endfilling）、隨機(jī)引物（RandomPriming）、缺刻平移（NickTranslation）15基因附加、基因扣除 16腺病毒、猿猴病毒、牛痘病毒、桿狀病毒17酵母人工染色體18低 19Vir、T－DNA 20誘導(dǎo)、抑制三、選擇題(10分)1.d 2.b 3.d 4.a 6.b 7.a 9.c 每題1分。四、問(wèn)答題(30分)怎樣測(cè)定DNA的濃度和純度要求寫(xiě)出兩種測(cè)定濃度的方法。濃度：1）測(cè)定260nm的吸光值，1OD相當(dāng)于50ug雙鏈DNA/ml。2）電泳檢測(cè)純度：A260/A280=，<表示含有酚或蛋白質(zhì)；>說(shuō)明含有RNA。估算DNA分子量的方法有哪些？a.根據(jù)DNA分子的遷移率，可以用公式計(jì)算出分子量D=a-b(logM)b.通過(guò)與已知分子量的比較，粗略的估算。重組率指得是含有外源DNA片段的重組分子與加入的載體分子數(shù)之比，請(qǐng)問(wèn)如何提高重組率？連接反應(yīng)條件外源片段：載體＝2:1-10:1（分子數(shù)），增加碰撞機(jī)會(huì)，減少自身環(huán)化。載體除磷（磷酸酯酶5’TdT在3’4.克隆PCR片段的方法有哪些？T-A克隆在PCR反應(yīng)時(shí)，引物的5’5.怎樣鑒定DNA分子上的蛋白質(zhì)結(jié)合位點(diǎn)？凝膠滯后DNaseI足跡法目前已在E.coli中合成了大量的人體蛋白，但不可能利用E.coli合成所有的人體蛋白，為什么？

A:外源基因序列導(dǎo)致的問(wèn)題 a)外源基因可能含有內(nèi)元。 b)外源基因可能含有在E.coli作為終止子的序列。 c)基因的密碼子可能不適合于E.coli中翻譯。B:E.coli合成重組蛋白的限制E.coli不能加工成正確的重組蛋白。b)E.coli不能正確的折疊蛋白，形成無(wú)活性蛋白。C)E.coli可能降解重組蛋白。分子標(biāo)記有哪些類型在作物遺傳育種中有哪些應(yīng)用類型：以Southern雜交為基礎(chǔ)；以PCR為基礎(chǔ)的應(yīng)用：分子圖譜的構(gòu)建；品種、品系鑒定和雜交種純度分析；親緣關(guān)系分析；基因標(biāo)記及標(biāo)記輔助育種（Marker-assistedSelection，MAS）；數(shù)量性狀因位點(diǎn)（QTL）的分子標(biāo)記輔助選擇。植物基因轉(zhuǎn)移的方法有哪些各自有哪些優(yōu)缺點(diǎn)直接基因轉(zhuǎn)移技術(shù)：基因槍法，適于單子葉植物 原生質(zhì)體法 PEG介導(dǎo)的方法生物為媒介的方法：農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法 病毒為媒介的轉(zhuǎn)化五、方案設(shè)計(jì)(15分)從一雙鏈DNA病毒上克隆了一個(gè)基因，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)方案，對(duì)克隆的基因進(jìn)行定位分析。（7分）首先通過(guò)兩種以上的酶進(jìn)行酶切，構(gòu)建限制性內(nèi)切酶圖譜。然后通過(guò)Southern雜交確定基因在DNA分子上的位置。從人體中分離了一種重要酶，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)方案，利用大腸桿菌來(lái)生產(chǎn)這種人體蛋白。首先對(duì)酶進(jìn)行測(cè)序，獲得氨基酸序列，根據(jù)三聯(lián)體密碼子原則，轉(zhuǎn)化成DNA序列，使用大腸桿菌偏愛(ài)密碼子，然后插入表達(dá)載體進(jìn)行生產(chǎn)。六、論述題(15分)結(jié)合GMO的生物安全性，談?wù)勀銓?duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)發(fā)展前景的看