雜質研究結構解析上傳課件

化學藥物雜質研究

結構解析化學藥物雜質研究

結構解析1化學藥物中雜質的研究1234化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)和貯存）化學藥物雜質概述（定義和分類）化學藥物雜質研究的重要性有關物質研究基本思路和分析方法5有關物質限度的制定（原料、制劑、遺傳毒性雜質）化學藥物中雜質的研究1234化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)和貯存）化學藥物雜質概述（定義）《化學藥物雜質研究技術指導原則》任何影響藥物純度的物質ICH（人用藥品注冊技術要求國際協(xié)調(diào)會）

化學結構與新藥不一樣的任何成分從雜質定義的本質看

在概念和范疇上一致化學藥物雜質概述（定義）化學藥物雜質概述雜質的研究是藥品研發(fā)的一項重要內(nèi)容，貫穿于藥品研發(fā)的整個過程

選擇合適的分析方法準確地分辨與測定雜質的含量綜合藥學、毒理及臨床研究的結果確定雜質的合理限度藥品在臨床使用中產(chǎn)生的不良反應

藥品本身的藥理活性

藥品中存在的雜質

規(guī)范地進行雜質研究，將其控制在一個安全、合理的限度范圍之內(nèi)

直接關系到上市藥品的質量及安全性化學藥物雜質概述雜質的研究是藥品研發(fā)的一項重要內(nèi)容，貫穿于藥化學藥物雜質概述（分類）按理化性質分為：

有機雜質、無機雜質、殘留溶劑按照其來源分為：工藝雜質（包括合成中未反應完全的反應物及試劑、中間體、副產(chǎn)物等）、降解產(chǎn)物、從反應物及試劑中混入的雜質等按照其毒性分為：毒性雜質和普通雜質等雜質還可按化學結構分為：

如其它甾體、其它生物堿、幾何異構體、光學異構體和聚合物等?；瘜W藥物雜質概述（分類）按理化性質分為：化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）合成藥物的生產(chǎn)過程中

原料不純或者原料反應未完全，以及反應的中間產(chǎn)物、反應的副產(chǎn)物等造成藥品原料中雜質的存在，如：原料不純阿帕替尼化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）合成藥物的生產(chǎn)過程中

化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）7056化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）7056化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）藥物在制成制劑的過程中，也能產(chǎn)生新的雜質。緩釋片口服液海藻酸鈉羥苯甲酯

羥苯丙酯

三氯蔗糖紫外吸收較小制成制劑及穩(wěn)定性放樣中該類雜質有所增加且紫外吸收大大增強質量標準中擬按加校正因子的自身對照法進行限度控制普瑞巴林化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）藥物在制成制劑的過程中，化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）原料生產(chǎn)過程中反應的溶媒、催化劑等溶劑的殘留也會造成藥物中雜質的存在。

有機溶劑殘留（有機溶媒因結合情況和干燥條件的不同，存在不同程度的殘留）另外，由于使用的金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具，都可能使產(chǎn)品中引入砷鹽，以及鉛、鐵、銅等金屬雜質。

化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）原料生產(chǎn)過程中反應的溶媒化學藥物雜質的來源（貯存過程中引入）藥物在貯存過程中由于受溫度、濕度、日光、空氣等外界條件的影響或者受微生物的作用發(fā)生水合、氧化、環(huán)開裂等降解反應而產(chǎn)生的降解產(chǎn)物。如前述7056酸藥物制劑中處方的輔料成分也可能帶來藥物的雜質。如前述普瑞巴林緩釋片和口服液此外也有一些其它原因引入的雜質

如放射性藥品中的衰減

生物制品中異常表達的蛋白質

手性化合物的光學異構體

中草藥制劑中的殘留農(nóng)藥化學藥物雜質的來源（貯存過程中引入）藥物在貯存過程中由于受溫化學藥物雜質研究的重要性（兩方面）雜質的研究是保證產(chǎn)品安全性的需要

藥物的整個研究階段，安全性是最重要的研究內(nèi)容雜質研究涉及藥學研究的全過程

藥物的雜質來源、檢測方法、限度以及可能存在潛在的安全性隱患，這些由雜質帶來的因素，對于劑型選擇、處方組成、工藝確定、分析方法的研究以及產(chǎn)品的儲存等均產(chǎn)生較大的影響。雜質應是藥物質量研究、質量控制和安全性研究的重點。雜質研究直接體現(xiàn)藥物的研究水平。化學藥物雜質研究的重要性（兩方面）雜質的研究是保證產(chǎn)品安全性殘留溶劑、無機雜質各國藥典都收載了經(jīng)典、簡便、有效的檢測方法，故可采用藥典的相關方法對其進行控制金屬雜質USP和ICH策略（明年）

ICH（Q3D）：GuidelineformetalimpurityUSP<232>：ElementalImpurity(Metals)Tests殘留溶劑、無機雜質EMEA：GuidelineonthespecificationlimitsforresiduesofmetalcatalystsormetalreagentsEMEA：Guidelineonthespecific有機雜質包括工藝中引入的雜質和降解產(chǎn)物等，可能是已知的或未知的、揮發(fā)性的或不揮發(fā)性的，由于這類雜質的化學結構一般與活性成分類似或具淵源關系，故通常又可稱之為有關物質與無機雜質及殘留溶劑比較，有關物質研究與控制要復雜在雜質的分離鑒定、雜質來源分析、雜質安全性研究、雜質限度確定等方面，都需要結合藥物的結構特點、制備工藝、貯藏穩(wěn)定性、臨床應用特點等進行大量深入細致的研究工作雖然關于有關物質研究的技術指導原則已于2005年頒布，但由于研究工作難度較大，且企業(yè)重視程度不夠

有關物質的研究與控制仍然是目前國內(nèi)

藥品研究工作中的主要薄弱環(huán)節(jié)之一有機雜質包括工藝中引入的雜質和降解產(chǎn)物等，可能是已知的或未知有關物質研究基本思路已頒布的雜質研究指導原則重點針對創(chuàng)新藥有關物質研究進行討論該指導原則涉及的一般性原則和要求同樣適用于仿制藥1.需要對原料藥合成工藝進行研究雜質的產(chǎn)生與工藝路線密切相關合成路線和合成工藝決定終產(chǎn)品中雜質種類和數(shù)量，

不同生產(chǎn)工藝可能形成不同的雜質原料藥工藝研究在雜質控制中意義重大有關物質研究基本思路已頒布的雜質研究指導原則2.雜質譜分析，即雜質來源分析

對工藝過程產(chǎn)生的雜質和儲存過程的降解產(chǎn)物進行分離對可能結構進行確證。分清楚哪些雜質是由工藝帶進，哪些雜質是由降解產(chǎn)生

對于降解產(chǎn)物的產(chǎn)生機理和降解途徑進行必要的了解

通過雜質譜的分析，了解雜質產(chǎn)生的原因以及雜質的基本結構，為雜質的定性、定量分析提供實驗準備雜質研究結構解析上傳課件

3.根據(jù)工藝、結構特征和降解途徑等雜質譜分析結果，研究建立可靠的檢測方法。

方法的靈敏度（檢測限）、專屬性、定量限、線性、耐用性等應符合要求。4.對雜質檢查結果進行綜合分析

結合指導原則對報告限度、鑒定限度、質控限度的要求，確定合理的雜質控制限度。3.根據(jù)工藝、結構特征和降解途徑等雜質譜分析結果，研究建有關物質的定性研究具有重要意義獲得有關物質的結構信息，分析了解其形成過程

合成時可設法避免該雜質的形成，或經(jīng)純化使之降至可接受的水平。通過該雜質的毒性實驗（包括遺傳毒性）或檢索毒性物質數(shù)據(jù)庫獲知該雜質的毒性數(shù)據(jù)

為其限度的確定提供有力的依據(jù)。定性研究也是分析方法確定的重要參考，對貯藏條件的確定也有指導意義。藥物的有關物質定性研究受到越來越多的重視，近年來很多文獻都做了相關的研究。如果不了解有關物質的結構，后續(xù)的研究將無法繼續(xù)進行。有關物質的定性研究具有重要意義獲得有關物質的結構信息，分析了有關物質的定性研究具有重要意義對藥物中的有關物質進行定性分析也是我國新藥研究與國際接軌的需要按照ICHQ3A/Q3B指導原則以及SFDA《化學藥物雜質研究技術指導原則的要求

對藥物中超過鑒定限度的有關物質皆應明確其來源

并推測可能的結構有關物質的定性研究具有重要意義對藥物中的有關物質進行定性分析有關物質研究分析方法分析方法的選擇直接關系到雜質測定結果的專屬性與準確性因此，在進行雜質研究時首要問題是選擇合適的雜質分析方法。隨著分離、檢測技術的發(fā)展與更新，高效、快速的分離技術與靈敏、穩(wěn)定、準確、適用的檢測手段相結合，幾乎所有的有機雜質均能在合適的條件下得到很好的分離與檢測應根據(jù)藥物及雜質的理化性質、化學結構、雜質的控制要求等確定適宜的檢測方法，由于各種分析方法均具有一定的局限性

應注意不同原理的分析方法間的相互補充與驗證

如HPLC與TLC及HPLC與CE的互相補充，反相HPLC系統(tǒng)與正相HPLC系統(tǒng)的相互補充，HPLC不同檢測器檢測結果的相互補充等有關物質研究分析方法分析方法的選擇直接關系到雜質測定結果的專有關物質定量方法不加校正因子的主成分自身對照法加校正因子的主成分自身對照法(f：0.2～5.0)外標法國內(nèi)新藥申報對雜質定量分析的基本要求有關物質定量方法不加校正因子的主成分自身對照法有關物質限度的制定雜質的存在對藥物的安全性和有效性有很大的影響，如何制定雜質的限度也是藥物研發(fā)過程中一個非常敏感的問題目前國內(nèi)在藥物雜質研究中存在的主要問題是“雜質限度制訂的依據(jù)不充分”研制單位通常是根據(jù)多批樣品的研究結果確定，或憑所謂的“經(jīng)驗”制訂。特別是方法學研究不全面，沒有對雜質進行有效地分析，并進行定性研究，導致雜質研究不完善，成品與國外產(chǎn)品的質量差別較大一般情況下參照ICH和化學藥物雜質研究的技術指導原則的相關要求制訂雜質限度

有關物質限度的制定雜質的存在對藥物的安全性和有效性有很大的影關于原料藥（Activepharmaceuticalingredients，APIs）的雜質限度要求：ICHQ3A(R)雜質限度僅與藥物的每日攝入量相關

當藥物的每日攝入量加大，表明雜質的攝入量也加大，因此每日攝入量≥2g時，雜質限度也相應降低。當雜質量達到質控限度（Qualificationthreshold）時，藥物研究者就有義務對這些雜質做安全性評價。關于原料藥（ActivepharmaceuticalinICHQ3A(R)規(guī)定，在創(chuàng)新藥物的研究過程中，需通過一系列的藥理毒理及臨床研究來驗證該藥品的安全有效性，而研究所用的樣品本身包含有超出質控限度的該雜質，所以如果在這些研究中并未反映出與雜質有關的毒副作用，即使這些雜質的含量超出了上表的質控限度，仍可認為這些雜質的含量已經(jīng)通過了安全性的驗證，此時根據(jù)試驗樣品中雜質的含量所確定的限度可認為是合理的如果超出質控限度的雜質同時也是藥物在動物或人體中的主要代謝產(chǎn)物，則對該雜質可不考慮其安全性，但需制訂合理的限度。上述情況也表明，如果用于臨床前和臨床研究的藥物雜質含量符合要求，則當已上市產(chǎn)品中的雜質含量小于或等于臨床前和臨床研究用藥物中的雜質含量時，認為上市產(chǎn)品的雜質含量也符合要求。指導原則還表示，當一系列的藥理毒理及臨床研究證明安全時所用藥物中雜質的絕對量大于使用上市藥物時該雜質的攝入量時，即使上市藥物中的雜質含量高于研發(fā)時所用藥物中該雜質的含量，則仍可認為該上市藥物雜質含量符合要求。ICHQ3A(R)規(guī)定，在創(chuàng)新藥物的研究過程中，需通過一系ICHQ3A(R)也表示，當可以實現(xiàn)將雜質的含量降至質控限度以下，或是公開發(fā)表的科學文獻上能提供雜質的安全性數(shù)據(jù)時，不需進行該雜質的安全性研究。如果上述兩種情況都不能實現(xiàn)，那么必須進行該雜質的安全性試驗。這一系列試驗一般包括基因突變試驗（通常為細菌回復突變試驗，即“Ames試驗”），染色體損傷試驗（細胞分裂中期分析或小鼠淋巴瘤TK+/-測定）和對單一種屬動物14到90天的重復劑量全身毒性試驗（大鼠常為28天）。由于雜質本身的特征，可能會要求進行一些其他試驗。指導原則表示，某些情況下，當?shù)弥s質具有特殊毒性，則需將該雜質的限量降低；或當?shù)弥s質無毒性時，可以適當將該雜質的限量提高。ICHQ3A(R)也表示，當可以實現(xiàn)將雜質的含量降至質控限ICHQ3A(R)也表示，當可以實現(xiàn)將雜質的含量降至質控限度以下，或是公開發(fā)表的科學文獻上能提供雜質的安全性數(shù)據(jù)時，不需進行該雜質的安全性研究。如果上述兩種情況都不能實現(xiàn)，那么必須進行該雜質的安全性試驗。這一系列試驗一般包括基因突變試驗（通常為細菌回復突變試驗，即“Ames試驗”），染色體損傷試驗（細胞分裂中期分析或小鼠淋巴瘤TK+/-測定）和對單一種屬動物14到90天的重復劑量全身毒性試驗（大鼠常為28天）。由于雜質本身的特征，可能會要求進行一些其他試驗。指導原則表示，某些情況下，當?shù)弥s質具有特殊毒性，則需將該雜質的限量降低；或當?shù)弥s質無毒性時，可以適當將該雜質的限量提高。ICHQ3A(R)也表示，當可以實現(xiàn)將雜質的含量降至質控限ICHQ3A(R)指導原則中最具爭議的部分可能為允許使用含有雜質的藥物進行安全性評價以確定雜質質控限度。經(jīng)過一些粗略的分析認為該法不夠靈敏，甚至是對一些高毒性雜質來說，比如在Ames基因突變試驗中，當含有雜質的藥物只表現(xiàn)出一些伴隨的毒性時，可能還是會認為含有該雜質的藥物無致突變作用，最終就導致整個試驗檢測遺傳毒性的靈敏度降低。

很多毒理學家還是優(yōu)先選擇雜質純品進行相關實驗ICHQ3A(R)指導原則中最具爭議的部分可能為ICHQ3B(R)ICHQ3B(R)規(guī)定藥物（化學藥物）制劑中的雜質為主藥的降解產(chǎn)物，或主藥與輔料和/或一次性包裝材料的反應產(chǎn)物制劑中雜質的限度標準決策與原料藥雜質限度標準決策一致ICHQ3B(R)ICHQ3B(R)規(guī)定藥物（化學藥物）當在一系列的藥理毒理及臨床研究中已驗證該制劑并未反映出與某一降解產(chǎn)物有關的毒副作用，此時即使制劑中該降解產(chǎn)物的量大于質控限度，仍可認為該制劑中所含降解產(chǎn)物的量已經(jīng)通過了安全性的驗證，根據(jù)試驗樣品中雜質的含量所確定的限度可認為是合理的。同樣，當一系列的藥理毒理及臨床研究證明安全時所用產(chǎn)品中含有某降解產(chǎn)物雜質的絕對量大于使用上市產(chǎn)品時該雜質的攝入量時，這時盡管上市產(chǎn)品中該雜質的含量高于研發(fā)時所用產(chǎn)品中該雜質的含量，仍可認為該上市產(chǎn)品雜質含量符合要求。其余情況下，當制劑中某雜質超出質控限度時，須將超出指控限度的雜質降至指控限度以下，或者通過公開發(fā)表的科學文獻上的安全性數(shù)據(jù)或安全性試驗證明該雜質限度是合理的。Q3B(R)與Q3A(R)中的毒理學研究過程一致。當在一系列的藥理毒理及臨床研究中已驗證該制劑并未反映出與某一遺傳毒性雜質的限度要求盡管ICHQ3A(R)和Q3B(R)就藥物和制劑中有關物質的限度控制已達成了一致意見，但并沒有能包含所有的重要方面

ICH中沒有對藥物中遺傳毒性雜質（Genotoxicimpurities，GTIs）的限度進行規(guī)定。藥物中遺傳毒性雜質指藥物中可能引起基因突變，染色體斷裂或染色體重排，以及具有致癌潛力的雜質因此，即使藥物中含有極少量的遺傳毒性雜質可能也會引起較大的毒理學擔憂，如果不妥善處理，可能在藥物臨床研究中遇到瓶頸，或是管理機構不予認證。遺傳毒性雜質的限度要求盡管ICHQ3A(R)和Q3B(R)潛在遺傳毒性雜質的代表性結構其中有一類叫做烷基化試劑，如鹵代烴、磺酸烷基等相關結構化合物最為常見。這類物質可能在藥物合成過程中用作反應試劑或者是反應產(chǎn)物。潛在遺傳毒性雜質的代表性結構其中有一類叫做烷基化試劑，如鹵代作為藥物研發(fā)人員必須盡量避免這些遺傳毒性雜質的生成；然而，一般情況下不可能做到完全不用這類化合物或者是完全避免這類DNA反應活性雜質的生成。因此，也應對這些遺傳毒性雜質存在的限度進行控制，以使臨床受試者或病人在藥物使用過程中不會承擔明顯的風險。作為藥物研發(fā)人員必須盡量避免這些遺傳毒性雜質的生成；然而，一EMEA：歐洲藥事管理委員會提出了遺傳毒性雜質的“毒理學擔憂閾值”（Thresholdoftoxicologicalconcern，TTC）TTC為化合物不引起明顯致癌風險（相當于10-5的終生患癌風險）的一個暴露量。EMEA和美國FDA將每個雜質的這個暴露量設為1.5μg/人/日，作為藥物批準上市的一個可被接受的質控限度。在臨床研究階段，采用階段性TTC（StagedTTC）給藥期縮短，則雜質的每日攝入量可相應增加EMEA：歐洲藥事管理委員會提出了遺傳毒性雜質的結構確證1234測試樣品的要求結構確證研究方案的制訂一般藥物的結構確證參考文獻和結構確證用對照品對結構確證的意義及要求5藥物的名稱、結構式及理化常數(shù)結構確證1234測試樣品的要求結構確證研究方案的制訂一般藥物結構確證申報資料中涉及結構確證有兩塊1.9#資料：主藥的結構確證《化學藥物原料藥制備和結構確證研究的技術指導原則》常用測試方法：元素分析、UV、IR、NMR、MS、DSC-TGA，

X-射線粉末衍射，X-射線單晶衍射2.8#資料附件2：雜質的制備及結構解析IR、NMR、MS結構確證申報資料中涉及結構確證有兩塊結構確證研究的技術指導原則

原料藥結構確證研究的基本內(nèi)容1、研究方案的制訂藥物結構千差萬別，制備（獲得）方法也各不相同，應根據(jù)藥物的自身結構特征和制備（獲得）方法制訂出合理、可行的結構確證方案，才能有效地進行藥物的結構研究。結構確證的方案應根據(jù)藥物自身的結構特點制訂，以下對不同類型藥物的測試方案作一簡要概述。一般藥物采用常規(guī)方法，如元素分析（必要時采用高分辨質譜）、UV、IR、NMR、MS、熱分析（差熱或熱重）、粉末X-衍射（XRPD）等即可確證藥物的結構。對于結構比較特殊的藥物，也可采用制備衍生物的方法間接證明藥物的結構。對于存在順反異構的藥物，在一般結構確證的基礎上，應增加順反結構的研究。結構確證研究的技術指導原則

原料藥結構確證研究的基本內(nèi)容1、手性藥物：

除進行上述各項化學結構確證和比旋度測定外，還應采用其它有效的方法進行研究。

單一對映體比旋度測定、手性柱色譜、核磁共振（NMR）、單晶X-衍射（XRSD）以及旋光色散（ORD）、圓二色譜（CD）等藥物分子中含有多個不對稱因素

應對其絕對構型、對映體純度（非對映體純度）進行相關的研究，并盡可能提供更多的構型確證信息。立體異構混合物外消旋體或富集對映體手性藥物：不含金屬元素的有機鹽類或復合物根據(jù)結構確證的需要，可提供成鹽前后的兩套波譜和試驗數(shù)據(jù)。對于某些波譜測定有困難或不易說明藥物結構的鹽或復合物，測定藥物的酸根或堿基的波譜，并結合其它試驗項目亦可對其結構確證提供有效的信息。金屬鹽類和絡合物在進行一般要求的各項測試基礎上，考慮以適當手段反映藥物中金屬元素的種類、存在形式和含量的確證試驗。不適于或不能測試金屬鹽本身的項目，可考慮以成鹽前的酸分子或配位體的相應測試結果進行佐證。半合成藥物

分子中母核的結構為已知并在可提供明確證據(jù)證明原分子母核結構在半合成全過程中未發(fā)生改變的前提下，適當簡化對母核部分結構的確證工作，僅對新引入的基團結構進行確證。不含金屬元素的有機鹽類或復合物多晶型藥物藥物晶型測定常用方法為粉末X-衍射（XRPD）、紅外吸收光譜、熔點、熱分析、光學顯微鏡等。新化學實體的藥物是否存在多種晶型的研究。已有文獻報道存在多晶型的藥物

應明確藥物晶型的類型和純度含有結晶水或結晶溶劑的藥物

熱分析結合干燥失重、水分或單晶X-衍射（XRSD）等，基本上可以達到對藥物中結晶水/溶劑以及吸附水/溶劑進行定性、定量的目的多晶型藥物合成多肽藥物

通過氨基酸分析、質譜測定、序列分析以及肽圖測繪（含有20個以上的氨基酸殘基藥物）等實驗可基本獲得合成多肽藥物的結構信息。藥物結構中如有半胱氨酸，應明確其狀態(tài)（氧化態(tài)或還原態(tài)），對含有多個半胱氨酸的多肽藥物，應明確二硫鍵的正確連接位點。如各步中間體均進行了質譜測定，可根據(jù)相關中間體的結構信息，推測出進行反應的氨基酸的種類。

質譜是多肽藥物結構確證的重要手段，紫外、紅外、核磁共振、多種流動相HPLC、比旋度測定等方法亦可對肽的結構確證提供幫助。對于多肽藥物，應對目標物的化學純度和對映體或非對映體純度進行研究。合成多肽藥物多糖類藥物通過對單糖組成、分子量、糖苷鍵連接方法和連接位置等的分析，可獲得多糖類藥物的基本結構信息。多組份藥物

應明確各組份的組成比例，對其主要成分應進行結構確證，具體方法可參照本指導原則的相關要求。其它

上述未提及的具有特殊結構，需特殊方法進行說明、確證的藥物，可根據(jù)其結構特征，制訂能反映藥物自身結構特征的方法進行結構研究。多糖類藥物測試樣品的要求在結構確證的研究中，測試樣品的純度需要進行一定的控制，只有使用符合要求的測試品進行結構研究，才能獲得藥物正確的結構信息。一般情況下，應采用原料藥制備工藝中產(chǎn)品的精制方法對樣品進行精制，并采用質量標準中的方法測其純度和雜質，供試樣品的純度應大于99.0%，雜質含量應小于0.5%。測試樣品的要求在結構確證的研究中，測試樣品的純度需要進行一定一般藥物的結構確證（藥物元素組成）通常采用元素分析法。這種方法可獲得組成藥物的元素種類及含量，經(jīng)比較測試結果與理論結果差值的大?。ㄒ话阋笳`差不超過0.3％），即可初步判定供試品與目標物的分子組成是否一致。對于因藥物自身結構特征而難于進行元素分析時，在保證高純度情況下可采用高分辨質譜方法獲得藥物元素組成的相關信息。一般藥物的結構確證（藥物元素組成）通常采用元素分析法。紫外吸收光譜（UV）通過對藥物溶液在可見-紫外區(qū)域內(nèi)在不同波長處吸收度的測定和吸收系數(shù)（尤其是摩爾吸收系數(shù)）的計算，以及對主要吸收譜帶進行歸屬（如K帶、R帶、E帶、B帶），可獲得藥物結構中可能含有的發(fā)色團、助色團種類以及初步的連接方式等信息，同時對藥物的鑒別亦有指導意義。對于發(fā)色團上存在酸性或堿性基團的藥物，通過在酸或堿溶液中（常用0.1mol/LHCl或0.1mol/LNaOH）最大吸收波長的測試，觀察其紫移或紅移現(xiàn)象，可為上述酸性或堿性基團的存在提供進一步的支持。紫外吸收光譜（UV）通過對藥物溶液在可見-紫外區(qū)域內(nèi)在不同紅外吸收光譜（IR）通過對藥物進行紅外吸收光譜測試，可推測出藥物中可能存在的化學鍵、所含的官能團及其初步的連接方式，亦可給出藥物的幾何構型、晶型、立體構象等信息。固態(tài)藥物紅外測試可分為壓片法、糊法、薄膜法，液態(tài)藥物可采用液膜法測試，氣態(tài)藥物則可采用氣體池測定。部分含多晶型藥物在研磨和壓片過程中，其晶型可能發(fā)生變化，可改用糊法測定，同時應根據(jù)藥物的結構特點對糊劑的種類進行選擇。鹽酸鹽藥物在采用KBr壓片時可能會發(fā)生離子交換現(xiàn)象，應分別對氯化鉀壓片和溴化鉀壓片法測得的結果進行比較，并根據(jù)結果選擇適宜的壓片基質。紅外吸收光譜（IR）通過對藥物進行紅外吸收光譜測試，可推測核磁共振（NMR）本項測試可獲得藥物組成的某些元素在分子中的類型、數(shù)目、相互連接方式、周圍化學環(huán)境、甚至空間排列等信息，進而推測出化合物相應官能團的連接狀況及其初步的結構。常用的有氫核磁共振譜（1H-NMR）和碳核磁共振譜（13C-NMR）等。核磁共振測試的重要參數(shù)有化學位移（δ）、偶合常數(shù)（J值）、峰形、積分面積等。溶劑峰或部分溶劑中的溶劑化水峰可能會對藥物結構中部分信號有干擾，因此測試時應選擇適宜的溶劑和方法，以使藥物所有信號得到充分顯示。核磁共振（NMR）本項測試可獲得藥物組成的某些元素在分子中

氫核磁共振譜（1H-NMR）該項測試可提供供試品結構中氫原子的數(shù)目、周圍化學環(huán)境、相互間關系、空間排列等信息。此外，屬于1H-NMR測試的NOE（NuclearOverhausereffect）或NOESY試驗，還可給出某些官能團在分子中位置、優(yōu)勢構象及構型。對含有活潑氫的藥物必需進行氘代實驗，以提供活潑氫的存在以及位置的信息。碳核磁共振譜（13C-NMR）該項測試可提供供試品結構中不同碳原子的類型以及所處的不同化學環(huán)境信息。DEPT譜可進一步明確區(qū)分碳原子的類型，對于結構復雜的藥物，DEPT譜對結構解析可給予更加有力的支持。氫核磁共振譜（1H-NMR）二維核磁共振譜

常用的二維核磁共振測試包括H-H-cosy（H-HCorrelatedspectroscopy）、HMBC（1H-detectedmultiple-bondheteronuclearmultiple-quantumcoherence）、HMQC（1H-detectedheteronuclearmultiple-quantumcoherence）等，對于結構復雜或用一般NMR方法難以進行結構確證的化合物，進行二維譜測試可更有效地確證藥物的結構。其它核磁共振譜

分子式中含F(xiàn)、P等元素的藥物，進行相應的F、P譜測試，除可提供相應元素的種類、在分子中所處的化學環(huán)境等信息外，對藥物元素組成測試亦有佐證作用.二維核磁共振譜質譜（MS）用于原子量和分子量的測定、同位素的分析、定性或定量的分析，重要參數(shù)有分子離子峰、碎片峰、豐度等。分子離子峰是確證藥物分子式的有力證據(jù)，應根據(jù)藥物自身結構特性選擇適宜的離子源和強度，同時盡可能地獲得分子離子峰和較多的、可反映出藥物結構特征的碎片峰。對含有同位素元素（如Cl、Br等）的藥物，利用分子離子峰及其相關峰豐度間的關系，可以判斷藥物中部分組成元素的種類、數(shù)量。高分辨質譜是通過精確測定分子量確定藥物分子式，但它不能反映藥物的純度和結晶水、結晶溶劑、殘留溶劑等情況。隨著科學的發(fā)展，在藥物研究中也采用了GC－MS、MS－MS、LC-MS等方法，研發(fā)者應根據(jù)藥物的組成和結構特征選擇適宜的方法。質譜（MS）用于原子量和分子量的測定、同位素的分析、定性或粉末X-衍射（XRPD）可用于固態(tài)單一化合物的鑒別與晶型確定，晶態(tài)與非晶態(tài)物質的判斷，多種化合物組成的多相（組分）體系中的組分（物相）分析（定性或定量），原料藥（晶型）的穩(wěn)定性研究等。粉末X-衍射（XRPD）可用于固態(tài)單一化合物的鑒別與晶型確手性藥物的結構確證應在上述一般研究的基礎上，對其絕對構型進行確證。常用方法有單晶X-衍射（XRSD）、核磁共振譜（NMR）、圓二色譜（CD）、旋光光譜（ORD）以及前述的NOESY或NOE譜（主要適用于具有剛性結構的藥物）等。其中單晶X－衍射（XRSD）為直接方法，后三種為間接方法。手性藥物的結構確證應在上述一般研究的基礎上，對其絕對構型進行藥物晶型的研究在藥物研發(fā)過程中，多晶型現(xiàn)象是普遍存在的，其中有部分藥物因晶型不同具有不同的生物利用度和/或生物活性，特別是水溶性差的口服固體藥物。對于新化學實體的藥物，應對其在不同結晶條件下（溶劑、溫度、結晶速率等）的晶型進行研究；通過不同晶型對藥物活性和毒性等影響的研究可為其臨床應用晶型的選擇提供依據(jù)。對于仿制已上市的藥物，應進行自制藥物的晶型與已上市藥物晶型比較的研究，以保證自制品晶型的正確性。進行連續(xù)多批樣品晶型一致性的研究，是判斷藥物制備工藝是否穩(wěn)定的依據(jù)之一。藥物晶型測定方法通常有粉末X-衍射、紅外光譜、熱分析、熔點、光學顯微鏡法等。藥物晶型的研究在藥物研發(fā)過程中，多晶型現(xiàn)象是普遍存在的，其藥物結晶水或結晶溶劑的分析對于含有結晶水或結晶溶劑的藥物，應對藥物中的水分/溶劑進行分析。常用分析方法為熱重、差熱分析、干燥失重、水分測定、核磁共振以及單晶X-衍射（XRSD）等。以上分析方法均有各自的優(yōu)、缺點，在藥物的結構確證研究中應根據(jù)藥物的結構特征，選擇適宜的方法，同時也可利用不同方法所得結果進行相互補充、佐證，以確定存在藥物中水或溶劑的種類、數(shù)量和形式。藥物結晶水或結晶溶劑的分析對于含有結晶水或結晶溶劑的藥物，應其他具有特殊結構藥物的結構確證結構中含有金屬離子以及F、P等元素的藥物，可進行相應金屬原子吸收以及F、P等元素的測定。原子發(fā)射光譜法和原子吸收分光光度法（AES、AAS）可用于含有多種金屬離子的藥物中無機微量元素的含量分析。絡合金屬離子存在方式的檢測對于分子中含有順磁性金屬離子的藥物，常用的核磁共振（NMR）方法不能得到金屬離子在藥物中存在方式的確切信息，可采用單晶X-衍射等方法進行檢測。其他具有特殊結構藥物的結構確證結構中含有金屬離子以及F、P參考文獻和結構確證用對照品

對結構確證的意義及要求參考文獻和結構確證用對照品對結構確證具有重要的佐證意義，但不是藥物結構確證研究的必要條件。所用的參考文獻應引自國內(nèi)外權威雜志或專利，但應注意的是不同的測試條件所得到的測試結果亦可能有所差異。藥物不同研發(fā)階段的參考文獻對藥物結構確證所起到的佐證作用可能不同。參考文獻和結構確證用對照品

對結構確證的意義及要求參考文獻和結構確證用對照品

對結構確證的意義及要求構確證用對照品的結構信息對藥物的結構確證亦具有重要的佐證作用不同來源的結構確證用對照品對藥物結構確證的佐證程度不同對于從制劑中提取、精制所得的結構確證用對照品，如未能驗證在提取過程中晶型是否變化，此結構確證用對照品不能作為晶型測定和與晶型有關的其它圖譜（如IR、粉末X—射線衍射）以及理化性質（如熔點、差熱分析、熱重分析）檢測的對照依據(jù)。結構確證用對照品和測試樣品應在同一儀器上采用相同的測試條件進行測試，其純度應不低于精制品純度，以保證結構確證用對照品對藥物結構確證的支持。結構確證用對照品

對結構確證的意義及要求構確證用對照品的結構綜合解析以上每一種方法僅對藥物的結構研究提供相對分散的部分信息，需要通過綜合解析對這些信息進行綜合并全面分析，才能得到目的物完整的結構情況，綜合解析不應是對各項試驗結果的羅列。對于新化學實體的藥物，由于沒有相關的文獻和對照品，單一的信息往往不能證明藥物的結構，需要對各種方法所得結果進行綜合分析，才能準確的解析藥物結構，包括絕對構型以及晶型、結晶水或結晶溶劑的情況。對于已有文獻報道的藥物，結構確證工作可相對簡單，特別是文獻數(shù)據(jù)或對照品的數(shù)據(jù)對結構確證具有一定的參考價值。綜合解析以上每一種方法僅對藥物的結構研究提供相對分散的部分信綜合解析對原料藥制備工藝的分析可為藥物的結構確證提供間接的依據(jù)。綜合解析應遵循簡明扼要、有機、合理、深入的原則。簡明扼要即是以簡潔的語言給出不同方法對藥物結構確證的結果，應避免過多的基本理論解說和繁雜的推導；有機是對不同方法所得的同一藥物結構不同方面信息的綜合歸納，以求獲得藥物較完整的結構信息；合理即是對數(shù)據(jù)進行合理的歸屬、解析，不牽強附會；深入即是在現(xiàn)有解析結果的基礎上，根據(jù)相互間的關系，獲得與藥物結構有關的更深層次的信息，以求得對藥物結構的完整認識。綜合解析對原料藥制備工藝的分析可為藥物的結構確證提供間接的依藥物基本信息

名稱、結構式及理化常數(shù)藥物的名稱是藥物結構的正確反映，提供正確的、符合要求的藥物名稱有利于對藥物結構的認識和信息交流，藥物研發(fā)者在藥物研發(fā)的起始階段必須對所研制藥物的名稱有正確的認識，這里所述的藥物的名稱包括化學名稱和通用名稱。藥物的化學名稱

藥物的化學名稱分為英文名稱和中文名稱，其名稱的制訂建議遵循IUPAC規(guī)則。藥物的通用名稱

藥物的英文通用名稱應盡可能地參照國際非專利藥名（INN）確定；對INN未報道的藥品，可采用其他合適的英文名稱，但對結構與已報道或已上市的藥品結構屬同類藥物，通用名稱（后綴）應基本一致。中文通用名稱應與國家制訂并頒布的名稱一致。藥物基本信息

名稱、結構式及理化常數(shù)藥物的名稱是藥物結構的正分子式和分子量分子式分子式可提供藥物元素組成信息，為制訂適宜的元素分析方法提供依據(jù)，如藥物分子中含有結晶水或結晶溶劑，應以適宜的形式注明。分子量分子量既可對分子式進行驗證并作為元素分析的基礎，也有助于質譜的解析，其精確程度應根據(jù)所測試質譜的類型而定。分子式和分子量分子式結構式結構式是藥物結構的具體存在形式，提供正確的結構式是結構確證研究的目的，有助于深入理解藥物的結構、性質和測試方案的制訂。對于存在異構體、含有結晶水或溶劑、手性中心、絡合離子、酸根和堿基的藥物，應在結構式中注明其異構的形式、手性中心的絕對構型、絡合位置/方式、酸根/堿基和結晶水或溶劑的位置。結構式結構式是藥物結構的具體存在形式，提供正確的結構式是結構綜上所述為結構確證基本的技術要求，隨著科學技術的發(fā)展，必然會出現(xiàn)新方法和新手段，因此，在藥物結構確證研究中，不應機械地照搬指導原則的方法，應結合藥物的結構特征，采用有效的手段與方法，以達到對藥物結構準確確證的目的。綜上所述為結構確證基本的技術要求，隨著科學技術的發(fā)展，必然會ThankYou!Moresuggestions!ThankYou!Moresuggestions!63化學藥物雜質研究

結構解析化學藥物雜質研究

結構解析64化學藥物中雜質的研究1234化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)和貯存）化學藥物雜質概述（定義和分類）化學藥物雜質研究的重要性有關物質研究基本思路和分析方法5有關物質限度的制定（原料、制劑、遺傳毒性雜質）化學藥物中雜質的研究1234化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)和貯存）化學藥物雜質概述（定義）《化學藥物雜質研究技術指導原則》任何影響藥物純度的物質ICH（人用藥品注冊技術要求國際協(xié)調(diào)會）

化學結構與新藥不一樣的任何成分從雜質定義的本質看

在概念和范疇上一致化學藥物雜質概述（定義）化學藥物雜質概述雜質的研究是藥品研發(fā)的一項重要內(nèi)容，貫穿于藥品研發(fā)的整個過程

選擇合適的分析方法準確地分辨與測定雜質的含量綜合藥學、毒理及臨床研究的結果確定雜質的合理限度藥品在臨床使用中產(chǎn)生的不良反應

藥品本身的藥理活性

藥品中存在的雜質

規(guī)范地進行雜質研究，將其控制在一個安全、合理的限度范圍之內(nèi)

直接關系到上市藥品的質量及安全性化學藥物雜質概述雜質的研究是藥品研發(fā)的一項重要內(nèi)容，貫穿于藥化學藥物雜質概述（分類）按理化性質分為：

有機雜質、無機雜質、殘留溶劑按照其來源分為：工藝雜質（包括合成中未反應完全的反應物及試劑、中間體、副產(chǎn)物等）、降解產(chǎn)物、從反應物及試劑中混入的雜質等按照其毒性分為：毒性雜質和普通雜質等雜質還可按化學結構分為：

如其它甾體、其它生物堿、幾何異構體、光學異構體和聚合物等?；瘜W藥物雜質概述（分類）按理化性質分為：化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）合成藥物的生產(chǎn)過程中

原料不純或者原料反應未完全，以及反應的中間產(chǎn)物、反應的副產(chǎn)物等造成藥品原料中雜質的存在，如：原料不純阿帕替尼化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）合成藥物的生產(chǎn)過程中

化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）7056化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）7056化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）藥物在制成制劑的過程中，也能產(chǎn)生新的雜質。緩釋片口服液海藻酸鈉羥苯甲酯

羥苯丙酯

三氯蔗糖紫外吸收較小制成制劑及穩(wěn)定性放樣中該類雜質有所增加且紫外吸收大大增強質量標準中擬按加校正因子的自身對照法進行限度控制普瑞巴林化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）藥物在制成制劑的過程中，化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）原料生產(chǎn)過程中反應的溶媒、催化劑等溶劑的殘留也會造成藥物中雜質的存在。

有機溶劑殘留（有機溶媒因結合情況和干燥條件的不同，存在不同程度的殘留）另外，由于使用的金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具，都可能使產(chǎn)品中引入砷鹽，以及鉛、鐵、銅等金屬雜質。

化學藥物雜質的來源（生產(chǎn)過程中引入）原料生產(chǎn)過程中反應的溶媒化學藥物雜質的來源（貯存過程中引入）藥物在貯存過程中由于受溫度、濕度、日光、空氣等外界條件的影響或者受微生物的作用發(fā)生水合、氧化、環(huán)開裂等降解反應而產(chǎn)生的降解產(chǎn)物。如前述7056酸藥物制劑中處方的輔料成分也可能帶來藥物的雜質。如前述普瑞巴林緩釋片和口服液此外也有一些其它原因引入的雜質

如放射性藥品中的衰減

生物制品中異常表達的蛋白質

手性化合物的光學異構體

中草藥制劑中的殘留農(nóng)藥化學藥物雜質的來源（貯存過程中引入）藥物在貯存過程中由于受溫化學藥物雜質研究的重要性（兩方面）雜質的研究是保證產(chǎn)品安全性的需要

藥物的整個研究階段，安全性是最重要的研究內(nèi)容雜質研究涉及藥學研究的全過程

藥物的雜質來源、檢測方法、限度以及可能存在潛在的安全性隱患，這些由雜質帶來的因素，對于劑型選擇、處方組成、工藝確定、分析方法的研究以及產(chǎn)品的儲存等均產(chǎn)生較大的影響。雜質應是藥物質量研究、質量控制和安全性研究的重點。雜質研究直接體現(xiàn)藥物的研究水平。化學藥物雜質研究的重要性（兩方面）雜質的研究是保證產(chǎn)品安全性殘留溶劑、無機雜質各國藥典都收載了經(jīng)典、簡便、有效的檢測方法，故可采用藥典的相關方法對其進行控制金屬雜質USP和ICH策略（明年）

ICH（Q3D）：GuidelineformetalimpurityUSP<232>：ElementalImpurity(Metals)Tests殘留溶劑、無機雜質EMEA：GuidelineonthespecificationlimitsforresiduesofmetalcatalystsormetalreagentsEMEA：Guidelineonthespecific有機雜質包括工藝中引入的雜質和降解產(chǎn)物等，可能是已知的或未知的、揮發(fā)性的或不揮發(fā)性的，由于這類雜質的化學結構一般與活性成分類似或具淵源關系，故通常又可稱之為有關物質與無機雜質及殘留溶劑比較，有關物質研究與控制要復雜在雜質的分離鑒定、雜質來源分析、雜質安全性研究、雜質限度確定等方面，都需要結合藥物的結構特點、制備工藝、貯藏穩(wěn)定性、臨床應用特點等進行大量深入細致的研究工作雖然關于有關物質研究的技術指導原則已于2005年頒布，但由于研究工作難度較大，且企業(yè)重視程度不夠

有關物質的研究與控制仍然是目前國內(nèi)

藥品研究工作中的主要薄弱環(huán)節(jié)之一有機雜質包括工藝中引入的雜質和降解產(chǎn)物等，可能是已知的或未知有關物質研究基本思路已頒布的雜質研究指導原則重點針對創(chuàng)新藥有關物質研究進行討論該指導原則涉及的一般性原則和要求同樣適用于仿制藥1.需要對原料藥合成工藝進行研究雜質的產(chǎn)生與工藝路線密切相關合成路線和合成工藝決定終產(chǎn)品中雜質種類和數(shù)量，

不同生產(chǎn)工藝可能形成不同的雜質原料藥工藝研究在雜質控制中意義重大有關物質研究基本思路已頒布的雜質研究指導原則2.雜質譜分析，即雜質來源分析

對工藝過程產(chǎn)生的雜質和儲存過程的降解產(chǎn)物進行分離對可能結構進行確證。分清楚哪些雜質是由工藝帶進，哪些雜質是由降解產(chǎn)生

對于降解產(chǎn)物的產(chǎn)生機理和降解途徑進行必要的了解

通過雜質譜的分析，了解雜質產(chǎn)生的原因以及雜質的基本結構，為雜質的定性、定量分析提供實驗準備雜質研究結構解析上傳課件

3.根據(jù)工藝、結構特征和降解途徑等雜質譜分析結果，研究建立可靠的檢測方法。

方法的靈敏度（檢測限）、專屬性、定量限、線性、耐用性等應符合要求。4.對雜質檢查結果進行綜合分析

結合指導原則對報告限度、鑒定限度、質控限度的要求，確定合理的雜質控制限度。3.根據(jù)工藝、結構特征和降解途徑等雜質譜分析結果，研究建有關物質的定性研究具有重要意義獲得有關物質的結構信息，分析了解其形成過程

合成時可設法避免該雜質的形成，或經(jīng)純化使之降至可接受的水平。通過該雜質的毒性實驗（包括遺傳毒性）或檢索毒性物質數(shù)據(jù)庫獲知該雜質的毒性數(shù)據(jù)

為其限度的確定提供有力的依據(jù)。定性研究也是分析方法確定的重要參考，對貯藏條件的確定也有指導意義。藥物的有關物質定性研究受到越來越多的重視，近年來很多文獻都做了相關的研究。如果不了解有關物質的結構，后續(xù)的研究將無法繼續(xù)進行。有關物質的定性研究具有重要意義獲得有關物質的結構信息，分析了有關物質的定性研究具有重要意義對藥物中的有關物質進行定性分析也是我國新藥研究與國際接軌的需要按照ICHQ3A/Q3B指導原則以及SFDA《化學藥物雜質研究技術指導原則的要求

對藥物中超過鑒定限度的有關物質皆應明確其來源

并推測可能的結構有關物質的定性研究具有重要意義對藥物中的有關物質進行定性分析有關物質研究分析方法分析方法的選擇直接關系到雜質測定結果的專屬性與準確性因此，在進行雜質研究時首要問題是選擇合適的雜質分析方法。隨著分離、檢測技術的發(fā)展與更新，高效、快速的分離技術與靈敏、穩(wěn)定、準確、適用的檢測手段相結合，幾乎所有的有機雜質均能在合適的條件下得到很好的分離與檢測應根據(jù)藥物及雜質的理化性質、化學結構、雜質的控制要求等確定適宜的檢測方法，由于各種分析方法均具有一定的局限性

應注意不同原理的分析方法間的相互補充與驗證

如HPLC與TLC及HPLC與CE的互相補充，反相HPLC系統(tǒng)與正相HPLC系統(tǒng)的相互補充，HPLC不同檢測器檢測結果的相互補充等有關物質研究分析方法分析方法的選擇直接關系到雜質測定結果的專有關物質定量方法不加校正因子的主成分自身對照法加校正因子的主成分自身對照法(f：0.2～5.0)外標法國內(nèi)新藥申報對雜質定量分析的基本要求有關物質定量方法不加校正因子的主成分自身對照法有關物質限度的制定雜質的存在對藥物的安全性和有效性有很大的影響，如何制定雜質的限度也是藥物研發(fā)過程中一個非常敏感的問題目前國內(nèi)在藥物雜質研究中存在的主要問題是“雜質限度制訂的依據(jù)不充分”研制單位通常是根據(jù)多批樣品的研究結果確定，或憑所謂的“經(jīng)驗”制訂。特別是方法學研究不全面，沒有對雜質進行有效地分析，并進行定性研究，導致雜質研究不完善，成品與國外產(chǎn)品的質量差別較大一般情況下參照ICH和化學藥物雜質研究的技術指導原則的相關要求制訂雜質限度

有關物質限度的制定雜質的存在對藥物的安全性和有效性有很大的影關于原料藥（Activepharmaceuticalingredients，APIs）的雜質限度要求：ICHQ3A(R)雜質限度僅與藥物的每日攝入量相關

當藥物的每日攝入量加大，表明雜質的攝入量也加大，因此每日攝入量≥2g時，雜質限度也相應降低。當雜質量達到質控限度（Qualificationthreshold）時，藥物研究者就有義務對這些雜質做安全性評價。關于原料藥（ActivepharmaceuticalinICHQ3A(R)規(guī)定，在創(chuàng)新藥物的研究過程中，需通過一系列的藥理毒理及臨床研究來驗證該藥品的安全有效性，而研究所用的樣品本身包含有超出質控限度的該雜質，所以如果在這些研究中并未反映出與雜質有關的毒副作用，即使這些雜質的含量超出了上表的質控限度，仍可認為這些雜質的含量已經(jīng)通過了安全性的驗證，此時根據(jù)試驗樣品中雜質的含量所確定的限度可認為是合理的如果超出質控限度的雜質同時也是藥物在動物或人體中的主要代謝產(chǎn)物，則對該雜質可不考慮其安全性，但需制訂合理的限度。上述情況也表明，如果用于臨床前和臨床研究的藥物雜質含量符合要求，則當已上市產(chǎn)品中的雜質含量小于或等于臨床前和臨床研究用藥物中的雜質含量時，認為上市產(chǎn)品的雜質含量也符合要求。指導原則還表示，當一系列的藥理毒理及臨床研究證明安全時所用藥物中雜質的絕對量大于使用上市藥物時該雜質的攝入量時，即使上市藥物中的雜質含量高于研發(fā)時所用藥物中該雜質的含量，則仍可認為該上市藥物雜質含量符合要求。ICHQ3A(R)規(guī)定，在創(chuàng)新藥物的研究過程中，需通過一系ICHQ3A(R)也表示，當可以實現(xiàn)將雜質的含量降至質控限度以下，或是公開發(fā)表的科學文獻上能提供雜質的安全性數(shù)據(jù)時，不需進行該雜質的安全性研究。如果上述兩種情況都不能實現(xiàn)，那么必須進行該雜質的安全性試驗。這一系列試驗一般包括基因突變試驗（通常為細菌回復突變試驗，即“Ames試驗”），染色體損傷試驗（細胞分裂中期分析或小鼠淋巴瘤TK+/-測定）和對單一種屬動物14到90天的重復劑量全身毒性試驗（大鼠常為28天）。由于雜質本身的特征，可能會要求進行一些其他試驗。指導原則表示，某些情況下，當?shù)弥s質具有特殊毒性，則需將該雜質的限量降低；或當?shù)弥s質無毒性時，可以適當將該雜質的限量提高。ICHQ3A(R)也表示，當可以實現(xiàn)將雜質的含量降至質控限ICHQ3A(R)也表示，當可以實現(xiàn)將雜質的含量降至質控限度以下，或是公開發(fā)表的科學文獻上能提供雜質的安全性數(shù)據(jù)時，不需進行該雜質的安全性研究。如果上述兩種情況都不能實現(xiàn)，那么必須進行該雜質的安全性試驗。這一系列試驗一般包括基因突變試驗（通常為細菌回復突變試驗，即“Ames試驗”），染色體損傷試驗（細胞分裂中期分析或小鼠淋巴瘤TK+/-測定）和對單一種屬動物14到90天的重復劑量全身毒性試驗（大鼠常為28天）。由于雜質本身的特征，可能會要求進行一些其他試驗。指導原則表示，某些情況下，當?shù)弥s質具有特殊毒性，則需將該雜質的限量降低；或當?shù)弥s質無毒性時，可以適當將該雜質的限量提高。ICHQ3A(R)也表示，當可以實現(xiàn)將雜質的含量降至質控限ICHQ3A(R)指導原則中最具爭議的部分可能為允許使用含有雜質的藥物進行安全性評價以確定雜質質控限度。經(jīng)過一些粗略的分析認為該法不夠靈敏，甚至是對一些高毒性雜質來說，比如在Ames基因突變試驗中，當含有雜質的藥物只表現(xiàn)出一些伴隨的毒性時，可能還是會認為含有該雜質的藥物無致突變作用，最終就導致整個試驗檢測遺傳毒性的靈敏度降低。

很多毒理學家還是優(yōu)先選擇雜質純品進行相關實驗ICHQ3A(R)指導原則中最具爭議的部分可能為ICHQ3B(R)ICHQ3B(R)規(guī)定藥物（化學藥物）制劑中的雜質為主藥的降解產(chǎn)物，或主藥與輔料和/或一次性包裝材料的反應產(chǎn)物制劑中雜質的限度標準決策與原料藥雜質限度標準決策一致ICHQ3B(R)ICHQ3B(R)規(guī)定藥物（化學藥物）當在一系列的藥理毒理及臨床研究中已驗證該制劑并未反映出與某一降解產(chǎn)物有關的毒副作用，此時即使制劑中該降解產(chǎn)物的量大于質控限度，仍可認為該制劑中所含降解產(chǎn)物的量已經(jīng)通過了安全性的驗證，根據(jù)試驗樣品中雜質的含量所確定的限度可認為是合理的。同樣，當一系列的藥理毒理及臨床研究證明安全時所用產(chǎn)品中含有某降解產(chǎn)物雜質的絕對量大于使用上市產(chǎn)品時該雜質的攝入量時，這時盡管上市產(chǎn)品中該雜質的含量高于研發(fā)時所用產(chǎn)品中該雜質的含量，仍可認為該上市產(chǎn)品雜質含量符合要求。其余情況下，當制劑中某雜質超出質控限度時，須將超出指控限度的雜質降至指控限度以下，或者通過公開發(fā)表的科學文獻上的安全性數(shù)據(jù)或安全性試驗證明該雜質限度是合理的。Q3B(R)與Q3A(R)中的毒理學研究過程一致。當在一系列的藥理毒理及臨床研究中已驗證該制劑并未反映出與某一遺傳毒性雜質的限度要求盡管ICHQ3A(R)和Q3B(R)就藥物和制劑中有關物質的限度控制已達成了一致意見，但并沒有能包含所有的重要方面

ICH中沒有對藥物中遺傳毒性雜質（Genotoxicimpurities，GTIs）的限度進行規(guī)定。藥物中遺傳毒性雜質指藥物中可能引起基因突變，染色體斷裂或染色體重排，以及具有致癌潛力的雜質因此，即使藥物中含有極少量的遺傳毒性雜質可能也會引起較大的毒理學擔憂，如果不妥善處理，可能在藥物臨床研究中遇到瓶頸，或是管理機構不予認證。遺傳毒性雜質的限度要求盡管ICHQ3A(R)和Q3B(R)潛在遺傳毒性雜質的代表性結構其中有一類叫做烷基化試劑，如鹵代烴、磺酸烷基等相關結構化合物最為常見。這類物質可能在藥物合成過程中用作反應試劑或者是反應產(chǎn)物。潛在遺傳毒性雜質的代表性結構其中有一類叫做烷基化試劑，如鹵代作為藥物研發(fā)人員必須盡量避免這些遺傳毒性雜質的生成；然而，一般情況下不可能做到完全不用這類化合物或者是完全避免這類DNA反應活性雜質的生成。因此，也應對這些遺傳毒性雜質存在的限度進行控制，以使臨床受試者或病人在藥物使用過程中不會承擔明顯的風險。作為藥物研發(fā)人員必須盡量避免這些遺傳毒性雜質的生成；然而，一EMEA：歐洲藥事管理委員會提出了遺傳毒性雜質的“毒理學擔憂閾值”（Thresholdoftoxicologicalconcern，TTC）TTC為化合物不引起明顯致癌風險（相當于10-5的終生患癌風險）的一個暴露量。EMEA和美國FDA將每個雜質的這個暴露量設為1.5μg/人/日，作為藥物批準上市的一個可被接受的質控限度。在臨床研究階段，采用階段性TTC（StagedTTC）給藥期縮短，則雜質的每日攝入量可相應增加EMEA：歐洲藥事管理委員會提出了遺傳毒性雜質的結構確證1234測試樣品的要求結構確證研究方案的制訂一般藥物的結構確證參考文獻和結構確證用對照品對結構確證的意義及要求5藥物的名稱、結構式及理化常數(shù)結構確證1234測試樣品的要求結構確證研究方案的制訂一般藥物結構確證申報資料中涉及結構確證有兩塊1.9#資料：主藥的結構確證《化學藥物原料藥制備和結構確證研究的技術指導原則》常用測試方法：元素分析、UV、IR、NMR、MS、DSC-TGA，

X-射線粉末衍射，X-射線單晶衍射2.8#資料附件2：雜質的制備及結構解析IR、NMR、MS結構確證申報資料中涉及結構確證有兩塊結構確證研究的技術指導原則

原料藥結構確證研究的基本內(nèi)容1、研究方案的制訂藥物結構千差萬別，制備（獲得）方法也各不相同，應根據(jù)藥物的自身結構特征和制備（獲得）方法制訂出合理、可行的結構確證方案，才能有效地進行藥物的結構研究。結構確證的方案應根據(jù)藥物自身的結構特點制訂，以下對不同類型藥物的測試方案作一簡要概述。一般藥物采用常規(guī)方法，如元素分析（必要時采用高分辨質譜）、UV、IR、NMR、MS、熱分析（差熱或熱重）、粉末X-衍射（XRPD）等即可確證藥物的結構。對于結構比較特殊的藥物，也可采用制備衍生物的方法間接證明藥物的結構。對于存在順反異構的藥物，在一般結構確證的基礎上，應增加順反結構的研究。結構確證研究的技術指導原則

原料藥結構確證研究的基本內(nèi)容1、手性藥物：

除進行上述各項化學結構確證和比旋度測定外，還應采用其它有效的方法進行研究。

單一對映體比旋度測定、手性柱色譜、核磁共振（NMR）、單晶X-衍射（XRSD）以及旋光色散（ORD）、圓二色譜（CD）等藥物分子中含有多個不對稱因素

應對其絕對構型、對映體純度（非對映體純度）進行相關的研究，并盡可能提供更多的構型確證信息。立體異構混合物外消旋體或富集對映體手性藥物：不含金屬元素的有機鹽類或復合物根據(jù)結構確證的需要，可提供成鹽前后的兩套波譜和試驗數(shù)據(jù)。對于某些波譜測定有困難或不易說明藥物結構的鹽或復合物，測定藥物的酸根或堿基的波譜，并結合其它試驗項目亦可對其結構確證提供有效的信息。金屬鹽類和絡合物在進行一般要求的各項測試基礎上，考慮以適當手段反映藥物中金屬元素的種類、存在形式和含量的確證試驗。不適于或不能測試金屬鹽本身的項目，可考慮以成鹽前的酸分子或配位體的相應測試結果進行佐證。半合成藥物

分子中母核的結構為已知并在可提供明確證據(jù)證明原分子母核結構在半合成全過程中未發(fā)生改變的前提下，適當簡化對母核部分結構的確證工作，僅對新引入的基團結構進行確證。不含金屬元素的有機鹽類或復合物多晶型藥物藥物晶型測定常用方法為粉末X-衍射（XRPD）、紅外吸收光譜、熔點、熱分析、光學顯微鏡等。新化學實體的藥物是否存在多種晶型的研究。已有文獻報道存在多晶型的藥物

應明確藥物晶型的類型和純度含有結晶水或結晶溶劑的藥物

熱分析結合干燥失重、水分或單晶X-衍射（XRSD）等，基本上可以達到對藥物中結晶水/溶劑以及吸附水/溶劑進行定性、定量的目的多晶型藥物合成多肽藥物

通過氨基酸分析、質譜測定、序列分析以及肽圖測繪（含有20個以上的氨基酸殘基藥物）等實驗可基本獲得合成多肽藥物的結構信息。藥物結構中如有半胱氨酸，應明確其狀態(tài)（氧化態(tài)或還原態(tài)），對含有多個半胱氨酸的多肽藥物，應明確二硫鍵的正確連接位點。如各步中間體均進行了質譜測定，可根據(jù)相關中間體的結構信息，推測出進行反應的氨基酸的種類。

質譜是多肽藥物結構確證的重要手段，紫外、紅外、核磁共振、多種流動相HPLC、比旋度測定等方法亦可對肽的結構確證提供幫助。對于多肽藥物，應對目標物的化學純度和對映體或非對映體純度進行研究。合成多肽藥物多糖類藥物通過對單糖組成、分子量、糖苷鍵連接方法和連接位置等的分析，可獲得多糖類藥物的基本結構信息。多組份藥物

應明確各組份的組成比例，對其主要成分應進行結構確證，具體方法可參照本指導原則的相關要求。其它

上述未提及的具有特殊結構，需特殊方法進行說明、確證的藥物，可根據(jù)其結構特征，制訂能反映藥物自身結構特征的方法進行結構研究。多糖類藥物測試樣品的要求在結構確證的研究中，測試樣品的純度需要進行一定的控制，只有使用符合要求的測試品進行結構研究，才能獲得藥物正確的結構信息。一般情況下，應采用原料藥制備工藝中產(chǎn)品的精制方法對樣品進行精制，并采用質量標準中的方法測其純度和雜質，供試樣品的純度應大于99.0%，雜質含量應小于0.5%。測試樣品的要求在結構確證的研究中，測試樣品的純度需要進行一定一般藥物的結構確證（藥物元素組成）通常采用元素分析法。這種方法可獲得組成藥物的元素種類及含量，經(jīng)比較測試結果與理論結果差值的大?。ㄒ话阋笳`差不超過0.3％），即可初步判定供試品與目標物的分子組成是否一致。對于因藥物自身結構特征而難于進行元素分析時，在保證高純度情況下可采用高分辨質譜方法獲得藥物元素組成的相關信息。一般藥物的結構確證（藥物元素組成）通常采用元素分析法。紫外吸收光譜（UV）通過對藥物溶液在可見-紫外區(qū)域內(nèi)在不同波長處吸收度的測定和吸收系數(shù)（尤其是摩爾吸收系數(shù)）的計算，以及對主要吸收譜帶進行歸屬（如K帶、R帶、E帶、B帶），可獲得藥物結構中可能含有的發(fā)色團、助色團種類以及初步的連接方式等信息，同時對藥物的鑒別亦有指導意義。對于發(fā)色團上存在酸性或堿性基團的藥物，通過在酸或堿溶液中（常用0.1mol/LHCl或0.1mol/LNaOH）最大吸收波長的測試，觀察其紫移或紅移現(xiàn)象，可為上述酸性或堿性基團的存在提供進一步的支持。紫外吸收光譜（UV）通過對藥物溶液在可見-紫外區(qū)域內(nèi)在不同紅外吸收光譜（IR）通過對藥物進行紅外吸收光譜測試，可推測出藥物中可能存在的化學鍵、所含的官能團及其初步的連接方式，亦可給出藥物的幾何構型、晶型、立體構象等信息。固態(tài)藥物紅外測試可分為壓片法、糊法、薄膜法，液態(tài)藥物可采用液膜法測試，氣態(tài)藥物則可采用氣體池測定。部分含多晶型藥物在研磨和壓片過程中，其晶型可能發(fā)生變化，可改用糊法測定，同時應根據(jù)藥物的結構特點對糊劑的種類進行選擇。鹽酸鹽藥物在采用KBr壓片時可能會發(fā)生離子交換現(xiàn)象，應分別對氯化鉀壓片和溴化鉀壓片法測得的結果進行比較，并根據(jù)結果選擇適宜的壓片基質。紅外吸收光譜（IR）通過對藥物進行紅外吸收光譜測試，可推測核磁共振（NMR）本項測試可獲得藥物組成的某些元素在分子中的類型、數(shù)目、相互連接方式、周圍化學環(huán)境、甚至空間排列等信息，進而推測出化合物相應官能團的連接狀況及其初步的結構。常用的有氫核磁共振譜（1H-NMR）和碳核磁共振譜（13C-NMR）等。核磁共振測試的重要參數(shù)有化學位移（δ）、偶合常數(shù)（J值）、峰形、積分面積等。溶劑峰或部分溶劑中的溶劑化水峰可能會對藥物結構中部分信號有干擾，因此測試時應選擇適宜的溶劑和方法，以使藥物所有信號得到充分顯示。核磁共振（NMR）本項測試可獲得藥物組成的某些元素在分子中

氫核磁共振譜（1H-NMR）該項測試可提供供試品結構中氫原子的數(shù)目、周圍化學環(huán)境、相互間關系、空間排列等信息。此外，屬于1H-NMR測試的NOE（NuclearOverhausereffect）或NOESY試驗，還可給出某些官能團在分子中位置、優(yōu)勢構象及構型。對含有活潑氫的藥物必需進行氘代實驗，以提供活潑氫的存在以及位置的信息。碳核磁共振譜（13C-NMR）該項測試可提供供試品結構中不同碳原子的類型以及所處的不同化學環(huán)境信息。DEPT譜可進一步明確區(qū)分碳原子的類型，對于結構復雜的藥物，DEPT譜對結構解析可給予更加有力的支持。氫核磁共振譜（1H-NMR）二維核磁共振譜

常用的二維核磁共振測試包括H-H-cosy（H-HCorrelatedspectroscopy）、HMBC（1H-detectedmultiple-bondheteronuclearmultiple-quantumcoherence）、HMQC（1H-detectedheteronuclearmultiple-quantumcoherence）等，對于結構復雜或用一般NMR方法難以進行結構確證的化合物，進行二維譜測試可更有效地確證藥物的結構。其它核磁共振譜

分子式中含F(xiàn)、P等元素的藥物，進行相應的F、P譜測試，除可提供相應元素的種類、在分子中所處的化學環(huán)境等信息外，對藥物元素組成測試亦有佐證作用.二維核磁共振譜質譜（MS）用于原子量和分子量的測定、同位素的分析、定性或定量的分析，重要參數(shù)有分子離子峰、碎片峰、豐度等。分子離子峰是確證藥物分子式的有力證據(jù)，應根據(jù)藥物自身結構特性選擇適宜的離子源和強度，同時盡可能地獲得分子離子峰和較多的、可反映出藥物結構特征的碎片峰。對含有同位素元素（如Cl、Br等）的藥物，利用分子離子峰及其相關峰豐度間的關系，可以判斷藥物中部分組成元素的種類、數(shù)量。高分辨質譜是通過精確測定分子量確定藥物分子式，但它不能反映藥物的純度和結晶水、結晶溶劑、殘留溶劑等情況。隨著科學的發(fā)展，在藥物研究中也采用了GC－MS、MS－MS、LC-MS等方法，研發(fā)者應根據(jù)藥物的組成和結構特征選擇適宜的方法。質譜（MS）用于原子量和分子量的測定、同位素的分析、定性或粉末X-衍射（XRPD）可用于固態(tài)單一化合物的鑒別與晶型確定，晶態(tài)與非晶態(tài)物質的判斷，多種化合物組成的多相（組分）體系中的組分（物相）分析（