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第3節(jié)DNA的復制
學習目標運用假說—演繹法探究DNA的復制方式。理解DNA的準確復制是遺傳信息穩(wěn)定傳遞的基礎(chǔ)。概述DNA通過半保留的方式進行復制。無論細胞有絲分裂還是減數(shù)分裂,都要經(jīng)歷一個較長的細胞分裂間期。細胞在分裂間期主要有什么變化?DNA分子是怎樣進行復制的呢?沃森和克里克在發(fā)表DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的那篇著作短文的結(jié)尾處寫道:“值得注意的是,我們提出的這種堿基特異性配對方式,暗示著遺傳物質(zhì)進行復制的一種可能的機制”1.堿基互補配對原則暗示DNA的復制機制可能是怎樣的?inthefollowingcommunications.Wewerenota
ware
ofthedetailsoftheresultspresontedtherewhenwe
devisedourstructure,whichrestsmainlythoughnotentirelyon
publishedexperimentaldataandstereo-chenicalarguments.
Ithasnotescopedournoticethatthespscific
pairingwehavepostulatedimmedintelysuggestsapossible
copyingmechanismforthegenetismaterial.Fulldetailsofthestructure,includingthecon-ditionsassumedinbuildingit,togetherwithaset
ofco-ordinatesfortheatoms,willbepublishedelsewhere.《核酸的分子結(jié)構(gòu)》論文節(jié)選提出問題一、問題探討----提出問題1、半保留復制(1)提出者:沃森和克里克(2)假說內(nèi)容:DNA復制時,DNA雙螺旋解開,互補的堿基之間的氫鍵斷裂,解開的兩條單鏈分別作為復制的模板,游離的脫氧核苷酸根據(jù)堿基互補配對原則,通過形成氫鍵,結(jié)合到作為模板的單鏈上。二、對DNA復制的推測----作出假說(3)特點:新合成的每個DNA分子中,都保留了原來DNA分子中一條鏈。2、全保留復制DNA復制以DNA雙鏈為模板,子代DNA的雙鏈都是新合成的。1、半保留復制新合成的每個DNA分子中,都保留了原來DNA分子中一條鏈。?一模一樣,一新一舊一全新,一全舊二、對DNA復制的推測----作出假說要通過實驗“探究DNA復制是哪種方式?”,關(guān)鍵思路是什么?如何做區(qū)分
?又如何進行實驗觀察呢
?關(guān)鍵思路:區(qū)分親代和子代的DNA,標記親代DNA鏈,然后觀察它們在子代DNA中如何分布。三、DNA半保留復制的實驗證據(jù)閱讀課本內(nèi)容53—54頁,思考下列問題(2min):1.實驗材料選用了什么?2.運用了什么技術(shù)方法?同位素標記技術(shù)3.使用了什么同位素去標記DNA?原理是?4.使用了哪種技術(shù)把不一樣的DNA分開?密度梯度離心技術(shù)1958年,美國生物學家梅塞爾森和斯塔爾,設(shè)計了一個巧妙的實驗。三、DNA半保留復制的實驗證據(jù)大腸桿菌15N和14N是氮元素的兩種穩(wěn)定同位素,這兩種同位素的相對原子質(zhì)量不同,含15N的DNA比含14N的DNA密度大。不具有放射性重帶中帶輕帶15N14N15N15N14N14N同位素標記技術(shù)(N)、密度梯度離心技術(shù)含15N的DNA比含14N的DNA密度大親代子一代子二代細胞再分裂一次轉(zhuǎn)移到含14NH4Cl的培養(yǎng)液中細胞分裂一次提取DNA離心提取DNA離心提取DNA離心大腸桿菌在含15NH4Cl的培養(yǎng)液中生長若干代???實驗過程:思考.討論:如果親代DNA含15N,放在含14N的環(huán)境中培養(yǎng),復制后得到的子一代DNA和子二代DNA分別含15N、14N的情況是怎樣的?(請同學們繪圖表示)(一)實驗預期—演繹推理:假說1:半保留復制:新合成的每個DNA分子中,都保留了
原來DNA分子中一條鏈。假說2:全保留復制:DNA復制以DNA雙鏈為模板,子代
DNA的雙鏈都是新合成的。親代第一代第二代15N15N15N15N14N14N14N14N14N14N1.假如DNA復制是半保留復制,實驗的預期會是怎樣的?重帶中帶輕帶中帶(一)實驗預期—演繹推理:親代第一代第二代15N15N15N14N15N14N14N14N14N14N2.假如DNA復制是全保留復制,實驗的預期會是怎樣的?重帶重帶輕帶1/4重帶3/4輕帶(一)實驗預期—演繹推理:排除DNA的全保留復制方式!DNA復制方式是半保留復制!15N/15N-DNA15N/14N-DNA14N/14N-DNA15N/14N-DNA(二)實驗驗證,得出結(jié)論:親
代子一代子二代細胞再分裂一次轉(zhuǎn)移到含14NH4Cl的培養(yǎng)液中細胞分裂一次提取DNA離心提取DNA離心提取DNA離心含15NH4Cl的培養(yǎng)液中結(jié)論:親代大腸桿菌的DNA經(jīng)離心處理后,試管中只出現(xiàn)了一條DNA帶,位置靠近試管的底部,說明其密度最大,是15N標記的親代雙鏈DNA(
15N/15N-DNA)。將轉(zhuǎn)移培養(yǎng)后第一代細菌DNA離心后,試管中也只有一條帶,但位置居中,說明其密度居中,是只有一條單鏈被15N標記的子代雙鏈DNA(
15N/14N-DNA)。將第二代細菌的DNA離心后,試管中出現(xiàn)兩條帶,一條帶位置居中,為15N/14N-DNA,另一條帶的位置更靠上,說明其密度最小,是兩條單鏈都沒有被15N標記的子代雙鏈DNA(14N/14N-DNA)。實驗結(jié)果與半保留復制的預期結(jié)果相符作出假說演繹推理實驗驗證2、推測可能的復制方式3、推理、探究幾種復制模式下得到子代DNA的可能情況,預測可能實驗結(jié)果5、結(jié)論:DNA復制是半保留復制1、DNA是如何復制的?提出問題半保留復制全保留復制假說—演繹法DNA復制方式的探究歷程4、證明DNA半保留復制的實驗得出結(jié)論1.如圖所示是研究DNA復制方式的實驗,根據(jù)這些實驗結(jié)果進行的推論,正確的是菌種:大腸桿菌培養(yǎng)條件與方法:(1)在含15NH4Cl的培養(yǎng)基中培養(yǎng)若干代,使DNA均被15N標記(甲圖);(2)轉(zhuǎn)至含14NH4Cl的培養(yǎng)基中培養(yǎng),每30分鐘繁殖一代;(3)取出每代DNA樣本,并離心。典題應用①丙是轉(zhuǎn)入含14NH4Cl培養(yǎng)基中復制一代的結(jié)果②乙是轉(zhuǎn)入含14NH4Cl培養(yǎng)基中復制二代的結(jié)果③出現(xiàn)丁的結(jié)果至少需要60分鐘④戊圖表示復制三代后不再具有15N標記的DNAA.①④
B.①③
C.②③
D.①②③√2.將在含15NH4Cl的培養(yǎng)液中培養(yǎng)若干代的某真核細胞轉(zhuǎn)移到含14NH4Cl的培養(yǎng)液中培養(yǎng),讓細胞連續(xù)進行有絲分裂,并進行密度梯度離
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